牛瑟氏泰勒焦虫病的调查与防治

牛瑟氏泰勒焦虫病是一种危害严重、流行较广、死亡率较高的血液寄生虫病。该病以患牛发病急、体温升高、高度贫血和黄疸为主要特征,有明显的季节性。该病在河南省伏牛山地区发病频繁,给养殖场（户）造成很大的经济损失。近两年,笔者在调查瑟氏泰勒焦虫病的病原和传播媒介的基础上,开展了灭蜱和病牛治疗的工作,有效控制了牛瑟氏泰勒焦虫病的流行与传播,促进了辖区内养牛业的健康发展。     

牛瑟氏泰勒虫HSP70 cDNA片段的克隆与系统发育分析

从血液涂片检查为牛瑟氏泰勒虫阳性的病牛血液中提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增出牛瑟氏泰勒虫HSP70基因,将其重组到pMD-18TSimple载体后进行克隆、序列测定及分析。结果表明该片段长1 966 bp,编码620个氨基酸残基,将该基因片段序列与GenBank中13种已知梨形虫的相应序列进行比较分析,牛瑟氏泰勒虫吉林分离株与已报道的牛瑟氏泰勒虫亲缘关系最近,其次是环形泰勒虫,与马巴贝斯虫亲缘关系较远。     

吉林省牛瑟氏泰勒虫病流行情况与综合防控对策

牛瑟氏泰勒虫病是牛重要的寄生性蜱传原虫病,能引起牛贫血、流产和死亡,对牛的健康威胁严重。笔者对牛瑟氏泰勒虫病在吉林省的流行概况、流行特点和防治措施进行论述,旨在为防止牛瑟氏泰勒虫病在流行地区的发生提供对策。     

磷酸伯氨喹治疗牛瑟氏泰勒焦虫病的临床效果观察

牛瑟氏泰勒焦虫病是由泰勒属(Theileria)的瑟氏泰勒焦虫(T．sergenti)寄生于牛体内引起的一种血液寄生原虫病，由长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)传播。以贫血、粘膜和皮肤黄染及高热嵇留等为主要特征，具有明显的地区性和季节性。该病在河北省的玉田、丰润、遵化等县的山区广为流行。     

牛瑟氏泰勒虫热休克蛋白70的克隆与原核表达重组质粒的构建

为了构建牛瑟氏泰勒虫热休克蛋白70(HSP70)基因片段原核重组表达质粒,本试验根据Gen-Bank上登录的牛瑟氏泰勒虫热休克蛋白70基因序列(D12692.1),应用Primer Premier 5.0软件设计合成一对特异性引物,以牛瑟氏泰勒虫DNA为模板,扩增片段大小为1 692bp,与参考序列的同源性为99%。将该基因与pET-28a(+)载体进行连接,成功构建了重组表达载体pET-28a-HSP70,本试验为进一步研究牛瑟氏泰勒虫HSP70基因佐剂作用、研制基因工程疫苗奠定了基础。     

牛瑟氏泰勒虫ITS基因PCR诊断方法的建立

本试验根据GenBank上登录的牛瑟氏泰勒虫ITS基因序列(AY661522.1),应用Primer Premier 5.0和Oligo 6.31软件设计合成1对特异性引物,以牛瑟氏泰勒虫DNA为模板,建立了牛瑟氏泰勒虫ITS基因PCR诊断方法。该方法扩增片段大小为1020 bp,与参考序列的同源性为98%;建立的PCR方法与猪附红细胞体、犬新孢子虫和弓形虫均无交叉反应,最低DNA检出量为1.5 pg/μL;通过对60份临床样品的检测,并与血涂片方法进行比较,结果显示PCR方法具有特异、敏感等特点,适用于牛瑟氏泰勒虫的检测。     

用药物帮助引进易感牛群建立对焦虫病的免疫力

小哨牧场位于昆明东郊,属于牛蜱的高度污染区。全年均能在牛体上找到寄生的微小牛蜱,在6～9月份还有二棘血蜱的出现。据我们1992年对小哨示范牧场进行的蜱传染性血液原虫病的调查,发现有4种病原即:牛双芽巴贝斯焦虫(B.bigemina)、牛巴贝斯焦虫(B.bovis)、牛瑟氏泰勒焦虫(T.serg     

磷酸伯氨喳治疗牛瑟氏泰勒焦虫病效果观察

牛瑟氏泰勒焦虫病是由泰勒属(T.heileria)的瑟氏泰勒焦虫(T.sergenti)寄生于体内引起的一种血液寄生原虫病,是由具有侵袭能力的长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)在吸牛血时,将病原传给牛。该病以贫血、粘膜和皮肤黄染以及高热稽留等为主要特征,具有明显地区性和季节性。近年来该病在河北玉田、丰润、遵化等县山区广为流行。仅玉田县1986—1988年共发病百余头,死亡26头,极大地危     

牛瑟氏泰勒虫表面蛋白p33基因的真核表达

目的构建牛瑟氏泰勒虫表面蛋白p33基因的真核表达载体。方法根据已发表的牛瑟氏泰勒虫（Thei-leria sergenti）表面蛋白p33基因的核苷酸序列设计引物,应用PCR技术从牛瑟氏泰勒虫基因组DNA中扩增p33基因片段并克隆入pMD18-Tsimple载体。进一步将该基因插入到真核表达载体pVAXⅠ,转染Hela细胞后进行RT-PCR检测和IFA检测。结果牛瑟氏泰勒虫表面蛋白p3基因成连接到pVAXⅠ载体中,并在真核细胞中有效表达。结论本研究试验为今后该基因的进一步动物试验奠定了基础。     

牛瑟氏泰勒虫病致病机理的研究进展

牛瑟氏泰勒虫病是由蜱传染的一种血液原虫病。近年来,随着养牛业的发展,牛瑟氏泰勒虫病的发生呈上升趋势,尤其是引进牛和改良牛的发病率和致死率均较高,给养牛业带来了巨大的经济损失。本文对近年来牛瑟氏泰勒虫病的病原体、流行病学、病理学和致病作用等与此病的致病机理相关的方面的研究进展作一总结,以便广大兽医工作者对此病有更加深入的认识。     

牛瑟氏泰勒虫p23-IL-18融合基因的原核表达

为了研发牛瑟氏泰勒虫病基因工程亚单位疫苗,本实验将p23-IL-18融合基因克隆到pET-28a原核表达载体,构建pET-28a-p23-IL-18重组原核表达质粒,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定后在37 ℃用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果表明,成功构建牛瑟氏泰勒虫pET-28a-p23-IL-18原核表达质粒,目的基因在大肠杆菌中成功获得表达,融合蛋白的分子量约为48ku,并被牛瑟氏泰勒虫阳性血清所识别,具有良好的反应原性。本研究结果为牛瑟氏泰勒虫病基因工程亚单位疫苗的制备奠定了基础。     

牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因的克隆与原核表达

构建牛瑟氏泰勒虫P23基因片段原核重组表达质粒,表达重组蛋白。采用PCR方法扩增牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因,将扩增产物与pMD18-T-Simple载体连接,测序,验证扩增产物。将P23基因片段克隆到载体pGEX-4T-3上,经酶切分析、PCR鉴定后,IPTG诱导表达,最后用SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定表达产物。结果表明克隆的P23基因片段为684 bp,重组质粒pGEX-4T-3/P23构建成功;SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量约为58 ku;Western blotting分析结果显示,与牛瑟氏泰勒虫阳性血清发生反应,而与牛瑟氏泰勒虫阴性血清无反应,表明牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白具有良好的抗原性和特异性,提示可以利用融合蛋白来建立检测抗体的间接ELISA诊断方法。     

牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因的真核表达

为构建牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因真核表达质粒,以牛瑟氏秦勒虫基因组DNA为模板,应用SOE—PCR技术得到牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因,将其先克隆到pMD18T—Simple载体,再亚克隆到真核表达载体pVAX1中,得到重组质粒pVAX1—2p33。对该重组质粒进行PCR、酶切鉴定及测序后,采用脂质体法将其转染到BHK-21细胞,用RTPCR和IFA进行鉴定。结果表明,牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因真核表达质粒pVAX12p33构建成功并可以在BHK-21细胞中表达。本试验结果为p33双拷贝基因的免疫学研究奠定了基础。     

牛瑟氏泰勒虫吉林株ITS基因的克隆与系统进化分析

本研究根据GenBank上的牛瑟氏泰勒虫内转录间隔区基因(ITS基因)设计合成1对特异性引物,以采自吉林省珲春市某养牛场的血液样本为试验材料,PCR扩增牛瑟氏泰勒虫ITS基因,克隆至pMD-18T Simple载体,进行序列测定,将该基因序列与GenBank上9种已知的泰勒虫相应序列进行比较分析,建立系统进化树。结果表明:牛瑟氏泰勒虫吉林株与美国株亲缘关系较近,其次是水牛泰勒虫,与其他泰勒虫亲缘关系较远。     

以p33重组蛋白为抗原建立牛瑟氏泰勒虫病间接ELISA诊断方法

牛瑟氏泰勒虫病是由瑟氏泰勒虫(T.sergenti)寄生于牛红细胞、淋巴细胞内引起的一种蜱传播性血液原虫病[1]。该病发病具有明显的季节性,在本地牛中多呈带虫现象,而在引进牛和改良牛中的发病率和死亡率均较高。随着牛瑟氏泰勒虫病流行区域的不断扩大,发病率也在不断上升,严重制约     

牛瑟氏泰勒虫二温式PCR快速检测技术的建立及初步应用

为建立一种牛瑟氏泰勒虫快速检测技术,根据GenBank上已发表的牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因序列(D84447)设计1对特异性引物,扩增出大小为244 bp的基因片段,经克隆、测序分析,与已知基因序列同源性为100%。用该对引物建立的牛瑟氏泰勒虫二温式PCR能检测出的最高敏感度为171 fg/μL,与牛新孢子虫、弓形虫和卵形巴贝斯虫不产生交叉反应,对48份临床血液样本进行检测,阳性检出率为66.67%。用同一对引物对28份临床血液样本分别进行二温式PCR和三温式PCR检测,阳性符合率为95%,总符合率为96.43%。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异等优点,可用于牛瑟氏泰勒虫病的快速临床诊断及流行病学调查。     

牛瑟氏泰勒虫吉林株18S rRNA基因的扩增及系统发育研究

本研究根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫18S rRNA基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,对寄生于牛体内的瑟氏泰勒虫基因组DNA进行扩增,得到1 356 bp的18S rRNA基因片段,测序后blast分析表明该虫种属牛瑟氏泰勒虫。将该基因片段序列与GenBank中8种已知泰勒虫的相应序列进行比较分析,建立系统发育树。结果表明,牛瑟氏泰勒虫吉林分离株与水牛泰勒虫亲缘关系最近,与小泰勒虫亲缘关系较远。这一结果说明宿主因素对泰勒虫的基因型影响较大。     

沈阳市郊爆发一起牛瑟氏泰勒虫病

本文报道了沈阳市郊爆发的一起牛瑟氏泰勒虫病的流行病学调查和诊断情况及应用贝尼尔（５～７ｍｇ／ｋｇ）、焦虫片（磷酸伯氨喹啉,３ｍｇ／ｋｇ）治疗,连用３天,效果明显。文中还对虫体的各种形态及所占的比例作了描述。     

牛瑟氏泰勒虫病的诊断与防治

牛瑟氏泰勒虫病(T．sergenti)是由长角血蜱(Haemaphysalis loniconis)。传播的牛血液原虫病。临床上表现为体温升高，精神不振，食欲减退，贫血和体表淋巴结肿胀等症状。近年来牛的瑟氏泰勒虫病亦呈上升趋势，尤其是对改良的新品种、外地引进的牛危害更为严重。国内对治疗牛巴贝斯虫病一。和环形泰勒虫病的药物研究较多，然而却忽视了防治牛瑟氏泰勒虫病药物的研究。目前．尚无特效药物。咪唑苯脲是目前治疗牛巴贝斯虫病的特效药物，而对牛瑟氏泰勒虫病的疗效尚无报道，     

骆驼蓬总生物碱抗人工感染牛瑟氏泰勒焦虫双芽焦虫病试验研究

本研究应用骆驼蓬总生物碱对人工感染牛瑟氏泰勒焦虫、双芽焦虫病进行了抗病性试验。试验牛共5头,对照组2头,试验组3头。攻毒后,对照组牛经18—21天的潜伏期后全部发病,试验牛治疗前染虫率为2%,最高达32.3%,经辅助治疗无效全部死亡;试验组潜伏期为21—26天,用该总生物碱治疗痊愈2例,死亡1例,疗前血液染虫率为5%,治愈后为0.28—0.8%,达带虫水平。