检测冻肉中大肠杆菌O157：H7的两种方法比较

大肠杆菌O157：H7属于肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhagic E．coli，EHEC），是EHEC的主要血清型。感染大肠杆菌0157：H7可使人息腹泻、出血性结肠炎，也可引发溶血性尿毒综合征及血栓形成性血小板减少性紫癜等严重并发征。笔者运用胶体金免疫（Colloidal gold immunoassay，GIA）检测卡和荧光PCR技术，对东莞市108份冻肉中的大肠杆菌O157：H7进行了检测，并对2种方法的检测效果进行了分析比较。     

大肠杆菌O157:H7 rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析

根据已发表的E．coli O157：H7 EDL933株的rfbE基因和fliC基因，设计了两对引物，分别对两个O157：H7，菌株的rfbE基因和一个菌株的fliC基因进行PCR，并将PCR产物克隆于pMD18-T栽体质粒。测序结果表明，获得到了与理论相符的582bp rfbE基因片段和802bp fliC基因片段。一株菌的rfbE基因存在无意义突变（两个）。而另一株菌fliC基因有一个有意义突变（aac→gac）     

控制大肠杆菌O157：H7对食品、水源等的污染

大肠埃希菌O157：H7感染性腹泻是人类新发生的传染病，已成为世界关注的公共卫生问题。大量研究证实，家禽、家畜是大肠埃希菌O157：H7的重要宿主。近年来，由肠出血性大肠杆菌O157：H7引起的食源性疾病的暴发、流行呈逐年上升的趋势。它能引起出血性肠炎、溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癫等临床症状，致病性强、死亡率高，对人体的健康造成很大的威胁。     

大肠杆菌O_(157)多重PCR快速检测方法的建立

E. coli O157∶H7是肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)最有代表性的血清型,感染后能够导致人的出血性结肠炎(HC)、溶血性尿毒综合征(HUS)和血小板减少性紫癜(TTP)[1].     

动物及动物产品中大肠埃希氏菌O157带菌情况的调查

大肠埃希氏菌O157（Escherichia coli O157）是一种出血性致病性大肠杆菌,能引起人类出血性腹泻和溶血性尿毒综合征,其感染已成为世界性公共卫生问题。1982年美国首次报道了大肠埃希氏菌O157：H7引起的出血性肠炎暴发,此后世界各地相继有由该菌所致疫情的报道,尤其在1996年5～8月日本发生了迄今为止最大的一起O157：H7大肠埃希氏菌的流行,累积患者近万人。     

进口冻肉大肠杆菌O157：H7的污染状况调查及鉴定

肠道出血性大肠杆菌 ( enterohemorrhagic E.coli,EHEC)是出血性肠炎 ( haemorrhagic colitis,HC)的病原体 ,其主要血清型为 O157∶H7。自 1 982年被首次确认为一种重要的人类肠道致病菌以来 ,该菌在美国、加拿大、英国、日本及南美某些国家出现严重的公共卫生问题 ,发生多次暴发流行及散发大量腹泻、出血性肠炎及溶血性尿毒综合征 ( HUS)等病例 ,成为新的凶险传染病之一。据 Reily报道 ,大肠杆菌 O157∶ H7基本上是一种食源性疾病 ,5 2 %是动物性食品引起 ,1 6%是人与人接触引起 ,1 4%是水果与蔬菜引起 ,1 2 %是水引起 ,因此加强进出…     

牛源大肠杆菌O157:H7的分离鉴定

为调查新疆部分地区E.coli O157：H7的感染情况和菌株致病性,从新疆阿克苏、伊犁、塔城3个地区的牛场采集新鲜粪样564份,对E.coli O157：H7进行分离与鉴定。利用E.coli营养肉汤（EC肉汤）对样品进行增菌后,用山梨醇麦康凯培养基（SMAC）平板选择性培养,再经过4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷培养基（MUG）的筛选,对疑似菌株进行生化和PCR鉴定,并将分离鉴定到的菌株进行小鼠攻毒试验。结果显示,从伊犁地区采集的样品中共分离出2株E.coli O157：H7（Y166和Y226）,其检出率为0.88%;小鼠攻毒试验中,Y166和Y226试验组小鼠在48 h内全部死亡,具有一定致病性;从阿克苏、塔城所采样品中未分离到E.coli O157：H7。     

大肠杆菌O_(157)SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立及初步应用

肠出血性大肠埃希菌O157:H7 (E.coli O157:H7)是一种强致病的病原性细菌,可引起出血性结肠炎(HC)、溶血性尿毒综合征( HUS) 和血栓性血小板减少性紫癜( TTP)等[1].E.coli O157:H7对人的致病力较强,感染剂量较低,每克感染载体含菌10个以上即可能引起感染.感染此病菌的人会出现严重腹泻、发烧等症状,病情严重者更会引起肾脏衰竭并发症,甚至导致死亡 [2],我国部分地区在食品和动物中有此类检测方面的报道 [3,4].     

家兔出血性大肠杆菌O157：H7的感染试验研究

以出血性大肠杆菌O157：H7对家兔进行试验感染,观察了大肠杆菌O157：H7对家兔的影响,通过玻片凝集试验分析了粪中大肠杆菌O157：H7的变化,结果表明,大肠杆菌O157：H7可导致兔的肠道反应和腹泻,在腹泻期排出的菌体最高,并可维护较长时间的带菌,说明家兔依然是志贺样毒素大肠杆菌的易感性动物、应引起高度重视。     

上海地区猪场饲养环境中大肠杆菌O157∶H7的监测

大肠杆菌O157：H7出血性肠炎是近年引起世界广泛关注的肠道传染病。自1983年美国Riley等首次报道大肠杆菌O157：H7出血性肠炎以来,相继在英国、加拿大、日本等国出现暴发性流行病例。大肠杆菌O157：H7是肠出血性大肠杆菌（EHEC）的一个主要血清型,牛、羊、     

动物性食品中O157：H7大肠杆菌污染及防止措施

O_(157):H_7大肠杆菌(Eschericha coli O_(157):H_7)是肠出血性大肠杆菌的最主要的一种血清型。对人的致病性很强。该菌污染动物性食品后随食物进入人体,引起出血性肠炎,导致出血性肠炎。 1.国内外流行情况 近年来由于O_(157):H_7大肠杆菌污染食品导致食用者感染的情况较为多见。在1982年美国发生了两起该菌食物中毒事件,有19人死亡,该事件是由当地一家快餐店售出的汉堡包中牛肉饼受O_(157):H_7大肠杆菌污染所致。在1983年美国西部地区也发     

饲料中肠出血性大肠杆菌O157∶H7双重PCR检测方法的建立

根据肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157∶H7的O抗原编码基因rfb E和H抗原编码基因fli C分别设计引物,建立双重PCR方法。饲料样品人工污染EHEC O157∶H7后进行增菌培养,利用双重PCR进行检测EHEC O157∶H7。结果表明:建立的PCR方法能够特异性扩增出目的条带,敏感性可达到100 cfu细菌。双重PCR方法可以有效地检测出饲料中人工污染的EHEC O157∶H7,人工污染饲料样品经4 h预增菌处理后,该方法的检测下限为20 cfu细菌。本研究建立的双重PCR方法可快速、特异地检测出饲料中污染的EHEC O157∶H7,可用于饲料中EHEC O157∶H7的检测及流行病学调查。     

一株产志贺毒素Ⅱ且山梨醇阳性的大肠杆菌O157：H7的分离与鉴定

在上海某猪场采集6份腹泻猪粪便样品和2份病死猪小肠内容物样品,增菌后经麦康凯培养基和伊红美兰培养基分离得到32株疑似大肠杆菌,通过PCR方法分析O157特异基因rfbE和血清学鉴定,分离获得一株肠出血性大肠杆菌O157：H7。PCR检测该菌株的毒力因子携带情况,结果表明其只携带志贺毒素Ⅱ,而不携带志贺毒素I、紧密素和溶血素等毒力因子;生化试验发现该菌株与大多数O157：H7特性不同,可分解山梨醇;毒力试验和耐药性试验表明该菌株毒性较强,且耐药性很强,对大多数抗生素不敏感。     

中药抗大肠杆菌O157:H7的筛选及其在体外瘤胃发酵中的应用

为了研究中药对肠出血性大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7的抑制活性,为中药替代抗生素作为反刍动物饲料添加剂来抑制E.coli O157:H7等病原菌提供参考。采用水提法和醇提法从11种中药中提取抑菌活性成分,应用牛津杯法抑菌试验检测其抑菌能力,通过体外瘤胃发酵试验和RT-PCR评估其抑制E.coli O157:H7的应用效果以及半数致死量(LD_(50))来检验其毒性。结果显示,肉桂醇提液、丁香水提液、厚扑醇提液和黄芩醇提液对E.coli O157:H7抑制效果好、无毒(大鼠急性经口LD_(50)>15 000 mg/kg体重),但其抑菌具有广谱性。表明肉桂醇提液和丁香水提液具有代替抗生素作为反刍动物料添加剂抑制的应用前景。     

0157:H7型大肠杆菌感染与乳业生产的关系及调控措施

随着乳业生产规模的扩大和乳品消费人群的增加．由乳业生产和乳品消费而引发的人兽共患病引起了人们的高度重视。其中,因摄入被O157：H7型大肠杆菌污染的乳制品而引起的人消化道疾病是较常见且较严重的一种。奶牛是O157：H7型大肠杆菌的主要宿主之一,可在无症状的情况下向环境中排出致病菌,因此,国外乳业发达国家的牛场都特别重视O157：H7型大肠杆菌在牛群中的感染状况。而国内目前在此方面的研究还相对较薄弱,有待进一步深入研究。本文对O157：H7型大肠杆菌的传播特点、调控措施等作了简要综述,为我国开展此方面研究提供参考。     

大肠肝菌O157:H7紧密素研究进展

WHO不久前指出在过去的20年里,世界上出现了约30种新的传染病,1982年美国首次报告的由大肠埃希菌O157:H7引起的出血性肠炎就是其中之一。大肠肝菌O157:H7属于肠出血性大肠埃希氏菌(EnterohemorrhagicE.coliEHEC),尽管大肠杆菌O157:H7高致病力的机制尚未明了,但已确定紧密素(int     

大肠杆菌O157:H7的疫病生态学研究进展及其控制对策

大肠杆菌O157：H7是一种感染剂量低，致病性强，临床上无特效治疗药物的新型肠道致病菌，在世界范围内多次爆发流行，已构成严重的公共卫生问题。对大肠杆菌O157：H7的基本生物学特征，从非生物因素（包括传染源、气候等因素）和生物因素两个方面综述了影响大肠杆菌O157：H7传播的环境因子，最后从病原菌的监测诊断技术、废弃物堆肥处理、加强食品以及饮水安全管理等方面提出了控制大肠杆菌O157：H7的对策，最终为大肠杆菌O157：H7的疫病生态学研究提供了理论基础和参考依据。     

大肠杆菌O157：H7的生物学特性

O157:H7大肠埃希氏菌是一种新发现病原微生物,感染大肠杆菌O157:H7主要引起婴幼儿腹泻,出血性结肠炎(haemorrhagic colitis,HC)、溶血性尿毒综合症(Haemolytic Uraemic Syndrome,HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(thrombocytopenlc purpura,rrP)及死亡等[1-4].     

闽西地区猪源大肠杆菌O157：H7的分离与鉴定

大肠杆菌(E.coli O157)是一种新型的致病性大肠杆菌，能引起人类出血性腹泻和溶血性尿毒综合征，该菌无侵袭力，也不产生肠毒素，但能产生一种毒力甚强的细胞毒素，引起盲肠、阑尾和升结肠黏膜上皮细胞坏死、黏膜充血、水肿和出血，还可进入血液。并通过血脑屏障，损伤血管内皮细胞而引起血栓     

牛源大肠杆菌O157：H7的分离及毒力基因鉴定

从2个牛场采集新鲜粪便,增菌后,免疫磁珠富集,涂布筛选性培养基,挑取可疑菌落用rfbE/fliC二重PCR和血清学方法鉴定。设计毒力基因stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相应引物,针对O157：H7对分离株进行PCR鉴定。口服攻毒链霉素处理的BALB/c小鼠明确分离株致病性。结果显示,成功分离到7株出血性大肠杆菌O157：H7,并且有1株迟缓性发酵山梨醇麦康凯培养基。毒力基因检测显示,其中6株毒力因子表型为stx1-stx2＋eae＋hlyA＋tccp＋,另有1株表现型为stx1＋stx2＋eae＋hlyA＋tccp＋,各分离株tccp基因均为阳性,但携带的重复片段数量有差异。所采集样品中肠出血性大肠杆菌O157：H7的检出率高达12%。1×1010 CFU同剂量口服接种经PBS洗涤的5株O157：H7分离株全菌,小鼠存活率有差异分别为40%,50%,60%,20%,50%,各分离株在小鼠体内排菌时间也有差异分别为攻毒后7,9,13,13,15d。