一例鸡传染性喉气管炎的诊治

2006年9月,登封市某鸡场发生了一种以呼吸困难、咳出血性渗出物为特征的疾病,用针对鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gX基因的特异引物,经PCR检测鸡传染性喉气管炎病毒阳性,结合病史和临床症状及病毒分离,诊断为鸡传染性喉气管炎。对该鸡场采取了综合防制措施,取得了较好的效果。     

肉鸡传染性喉气管炎的诊治

鸡传染性喉气管炎是肉鸡常见传染病,病原主要是鸡传染性喉气管炎病毒,传染范围广、速度快,死亡率也非常高,及时诊治可以有效避免肉鸡大量感染。本文对鸡传染性喉气管炎进行了分析,探讨鸡传染性喉气管炎的具体诊断和治疗技术,以期能为该病的诊断和治疗提供参考。     

鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测方式的建立和应用

根据GenBank传染性喉气管炎病毒(ILTV)基因序列,设计合成了1对特异性引物。以ILTV DNA为模板,建立了检测ILTV的PCR检测方法。通过优化PCR反应条件,成功扩增出一条约690 bp的目的基因片段。而鸡传染性法氏囊病病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、禽流感病毒基因组均未扩增为出相应的片段。敏感性试验检测出其DNA最小检出量为10-2μg。重复性试验中对3份检测为传染性喉气管炎病毒阳性病料进行检测,发现3次重复检测的结果完全一致。临床应用中运用上述优化的PCR反应条件进行PCR检测临床送检的16份疑似鸡传染性喉气管炎病毒感染病料,结果显示检出阳性样品6份,将阳性样品的PCR扩增产物克隆后序列分析显示均为鸡传染性喉气管炎病毒。结果表明,建立的PCR方法具有良好的特异性,敏感性和稳定性,可应用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。     

鸡传染性喉气管炎的综合防治措施

鸡传染性喉气管炎是鸡的一种急性上呼吸道疾病,其病原为传染性喉气管炎病毒,患病鸡表现为呼吸困难、咳嗽,最终气管糜烂、坏死.本病对养鸡业的危害仅次于新城疫、传染性法氏囊炎、马立克氏病以及传染性支气管炎.本文介绍了鸡传染性喉气管炎病毒的病原学、流行病学、临床症状、诊断方法及综合防治措施,希望能减少鸡传染性喉气管炎的发生与传播.     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离和鉴定

鸡传染性喉气管炎是鸡易感的呼吸道病毒传染病,病原为鸡传染性喉气管炎病毒,属于疱疹病毒科鸡传染性喉气管炎病毒属。该病对养禽业具有巨大威胁,鸡感染后会造成蛋鸡产蛋量下降,有很高的发病率和死亡率,本文通过对一例鸡传染性喉气管炎病毒的分离和鉴定,为相关疾病的诊断提供参考。     

蛋鸡传染性喉气管炎的病理学诊断

近期,笔者观察到有疑似传染性喉气管炎病鸡就诊频率增多的现象,将疑似病例经实验室诊断结合病理组织学变化等,确诊为鸡传染性喉气管炎。本文通过阐述鸡传染性喉气管炎的临床症状、剖检变化、流行病学以及组织病理变化,为该病的诊治提供一定的研究资料。     

鸡瘟症散对鸡传染性喉气管炎的治疗效果观察

目的:观察鸡瘟症散对鸡传染性喉气管炎的治疗效果.方法:于某养鸡场随机选取100只传染性喉气管炎病鸡作为研究样本,将其分为对照组和观察组,对照组病鸡采用常规的治疗方法,观察组病鸡采用鸡瘟症散进行治疗.结果:对照组病鸡治疗总有效率为74%,观察组病鸡治疗的总有效率为96%.结论:应采用鸡瘟症散对传染性喉气管炎病鸡进行治疗,在此基础上,应加强养鸡场的消毒工作,对感染鸡传染性喉气管炎病毒的鸡进行隔离饲养,适当为鸡注射鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗,降低鸡传染性喉气管炎的发病率,防止鸡传染性喉气管炎的蔓延,提升养鸡场的整体经济效益.     

鸡传染性喉气管炎的诊断与防治

本文综述了鸡传染性喉气管炎的病原学、临床症状、流行病学、病理变化,总结了鸡传染性喉气管炎的诊断方法,并结合目前蛋鸡生产实际提出了本病的防治对策。     

鸡传染性喉气管炎临床诊断与治疗研究

传染性喉气管炎是鸡群的常见疾病之一,这种疾病具有急性、高度传染的特点,主要病变在鸡的喉头和气管部位,容易造成鸡群大批死亡。本文对于鸡传染性喉气管炎临床诊断防范进行综述,并且就喉气管炎的治疗方式进行研究。     

鸡传染性喉气管炎的防治

鸡传染性喉气管炎对于鸡养殖者而言会产生较为不利的影响,一旦鸡感染了传染性喉气管炎,就会出现大批量死亡的现象,影响着鸡养殖者的经济效益。基于此,笔者对传染性喉气管炎的病鸡进行诊断分析,提出几点预防与治疗措施,以供相关人员参考。     

Development and Preliminary Application of a Semi-nested PCR Assay for Detection of Chicken Parvovirus

In order to set up and optimize a semi-nested PCR for rapid detection of chicken parvovirus (ChPV), three specific primers were designed according to conserved sequences of NS 1 gene of ChPV. The specificity and sensitivity of ChPV semi-nested PCR were tested, and the assay was applied to detect 48 clinical samples. The specificity and sensitivity tests showed that this semi-nested PCR was only sensitive to ChPV for amplifying specific band of 186 bp and it could detect 5.62 fg/μL of ChPV DNA, without any sensitivity to other viruses, such as Newcastle disease virus, H9 subtype avian influenza virus, Marek's disease virus, infectious laryngotracheitis virus and infectious bronchitis virus. 48 chicken samples were detected and the positive rate was 16.67% (8/48). The results of our study demonstrated that the optimized semi-nested PCR could be a method that was suitable for clinical detection of ChPV.     

鸡细小病毒半巢式PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种快速、特异、灵敏的检测鸡细小病毒（chicken parvovirus,ChPV）的方法,根据ChPV的保守基因NS1设计了3条特异性引物,建立并优化了能快速检测ChPV的半巢式PCR方法,对其进行特异性和敏感性试验,并用所建立的方法对48份临床样品进行了检测。特异性和敏感性试验结果显示,建立的半巢式PCR只对ChPV敏感,扩增产物为186 bp的特异性条带;其最低能检测到5.62 fg/μL的ChPV DNA;而对鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、马立克氏病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒不敏感。临床检测结果显示,同时对48份临床样品进行检测,检出率为16.67%（8/48）,提示广西区内鸡群存在ChPV感染。本研究建立的ChPV半巢式PCR方法适用于ChPV的临床检测。     

Analysis of infectious laryngotracheitis virus isolates from Ontario and New Brunswick by the polymerase chain reaction.

The polymerase chain reaction (PCR) was used to amplify DNA of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) isolates obtained from field specimens. The examined 47 samples included 37 isolates representing 35 cases of infectious laryngotracheitis from Ontario and 10 isolates originating from 10 field cases in New Brunswick. The viruses were grown in either embryonated chicken eggs or cell culture, the DNA extracted and amplified using primers designed from the sequence information of a 1.1 kb BamHI fragment of the Ontario 1598 ILTV strain. Thirty-four of the Ontario isolates and all of the New Brunswick isolates were amplified successfully. This suggests that the selected primers would be useful for the majority of the isolates encountered in outbreaks of ILTV.     

The use of embryonic chicken liver cell culture for the diagnosis of virus infections in hens

Embryonic chicken liver cell culture has proved to be an appropriate and sensitive substrate for propagation of virus of infectious laryngotracheitis, infectious bronchitis, infectious bursitis, egg-drop syndrome, and CELO virus of fowl. Microtest plates, too, were suitable for preparation of embryonic chicken liver cell culture as primary culture.     

Characterization of infectious laryngotracheitis viruses, antigenic comparison by kinetics of neutralization and immunization studies.

Five isolates of infectious laryngotracheitis virus were compared by pock formation on the chorioallantoic membrane of embryonated eggs, plaque size in chicken embryo kidney tissue culture, and antigenic relationship using reciprocal kinetics of neutralization. The A4557-5 strain of infectious laryngotracheitis virus, which causes mild respiratory disease, produced pocks with a zone of edema on the chorioallantoic membrane. A virulent virus (Virus 1), isolated from an outbreak of severe disease characterized by a diphtheritic laryngotracheitis, produced the largest plaques in chicken embryo kidney cell culture. Other virulent viruses (Viruses 2, 3 and V154) did not have unique growth characteristics when grown on the chorioallantoic membrane or in chicken embryo kidney cell culture. All viruses were closely related antigenically as shown by kinetics of neutralization but viruses 2 and 3 were not homogeneous with the other three viruses when neutralized by anti-V154 chicken serum. Following aerosol infection, chickens infected with the A4557-5 virus were immune to challenge with virulent V154 virus. However, in comparison to SA-2 virus, this virus was a less effective immunizing agent when administered by the vent or drinking water methods.     

RT-PCR快速诊断禽流感

根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果,设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物,不经病毒分离,直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸, ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出 ３２６ｂｐ的 ＮＰ基因片段。采用该技术对１４个亚型禽流感病毒标准参考株,４个亚型１２株国内分离野毒株,ＲＴ－ＰＣＲ检测的结果都呈阳性;对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒以及减蛋综合症病毒,ＲＴ－ＰＣＲ扩增结果都呈阴性。禽流感病毒 Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ（Ｈ５Ｎ１）和 Ａ／Ａｆｒｉｃａｎ　Ｓｔａｒｌｉｎｇ／Ｅｎｇｌａｎｄ（Ｈ７Ｎ１）实验感染鸡样品 ＲＴ－ＰＣＲ检测与鸡胚病毒分离阳性率分别为３４／４２、３２／４２; ２４／５５、２４／５５, 二者符合率大于９５％。 ＲＴ－ＰＣＲ最少可检测到１０ｐｇ的病毒核酸。对山东某地发病鸡场样品进行ＲＴ－ＰＣＲ检测,只用６个小时就可得出准确的诊断结果,证明ＲＴ－ＰＣＲ检测方法敏感特异,可用于禽流感的快速诊断。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离和TK基因鉴定

从临床表现以呼吸困难、喉头出血为主要特征的某蛋鸡场患鸡喉头和气管等组织分离到一株病毒。该分离毒无血凝特性,应用检测ILTVTK基因的PCR能从分离毒中扩增出大小为427bp的特异性目的片段。测序结果与GenBank收录的ILTV不同毒株序列的同源性为100%。结果初步表明该分离毒为鸡传染性喉气管炎病毒(命名为ILTV-FJ)。     

传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB在重组鸡痘病毒中的表达

本试验首先用ＰＣＲ方法扩增出ＩＬＴＶ ｇＢ基因,将其克隆到质粒ｐＵＣ１１９中,并进行了序列分析。将克隆的ｇＢ基因再亚克隆到禽痘病毒转移载体质粒中,然后,通过质脂体方法转染由禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）中,筛选蓝色的重组病毒,并对其进行了６轮蚀斑纯化。该重组病毒通过ＰＣＲ方法鉴定证明其基因组中含有完整的鸡传染性喉气管炎ｇＢ基因,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ实验证明了该重组鸡痘病毒表达了鸡传染性喉气管炎ｇＢ糖蛋白。     

应用PCR检测鸡传染性喉气管炎病毒

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)TK基因序列，设计、合成1对引物，应用PCR技术对ILTV以色列疫苗株、河南分离株（ILTV-CG和ILTV-XY）进行PCR扩增，均能扩增出预期大小的目的片段，测序分析和酶切分析证实了PCR产物的特异性，而对其它禽病原体的扩增均为阴性。PCR检测ILTV DNA的最小检测量为21 pg。应用PCR检测人工接种后不同〖JP2〗天数采集的鸡的结膜拭子，接种后第2~5 d均能检测到ILTV。该方法可用于鸡传染性喉气管炎病的诊断和临诊样品检测。     

鸡细小病毒与禽呼肠病毒二重PCR检测方法的建立

建立可同时检测鸡细小病毒(Chicken parvovirus,ChPV)与禽呼肠病毒(Avian reovirus,ARV)的二重PCR方法,为防控ChPV与ARV提供技术支撑。根据鸡细小病毒NS1基因和禽呼肠病毒σC基因的保守序列,设计合成两对引物用于检测ChPV和ARV,通过优化二重PCR的反应体系,特异性、敏感性试验评价建立的ChPV与ARV二重PCR。优化后的二重PCR反应体系为:2×PCR Mix 12.5μL,其中ChPV与ARV的上、下游引物各1.0μL,混合模板2.0μL,ddH2O补足25μL;最佳的反应程序为:95℃5min;95℃1min,56.1℃1min,72℃1min,35个循环;最后72℃延伸10min。结果显示,建立的二重PCR能够同时扩增出204bp ChPV和405bp ARV片段;该方法对ChPV与ARV的检测敏感性分别达到58fg和53fg,但对鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、马立克病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒等病原体均无特异性扩增,对ChPV与ARV混合感染的临床阳性病料的检测结果与各病毒单项PCR检测结果符合率为94%以上。建立的二重PCR可用于ChPV与ARV感染的快速鉴别诊断。