猪的微卫星DNA的克隆与分析

本研究应用多种DNA限制性内切酶切割基因组DNA从而浓缩微卫星DNA的方法克隆测定了8个不同位点的猪的微卫星序列,统计分析结果表明（1）猪的基因组中大于或等于40bp的微卫星序列约占基因组全部微卫星序列的10％,（2）GTG）n和（GAG）n类型的微卫星序列,在猪的基因组中分别约每250－500kb的片段中就有一个。     

应用猪的微卫星DNA作探针制作牛、鸭和鹌鹑的DNA指纹图

我们曾经得到了猪的8个不同位点的微卫星序列克隆,本以猪的基因组中克隆得到的微卫星序列制作了牛,鸭和鹌鹑的DNA指纹图,结果证明来源于某一物种的微卫星序列可以应用于其他物种的DNA指纹图的制作。     

微卫星DNA的研究进展

微卫星DNA技术是现有分子标记中最有价值的一种,同时也提供了家禽遗传育种研究一种新的手段.综述了微卫星DNA研究的现状,并对该技术在以后的运用与发展进行了探讨.     

猪数量性状位点定位研究进展

数量性状位点（ＱＴＬ）是在基因组中占据一定染色体区域,控制某一数量性状的一组微效多基因的集合（或基因簇）。目前对猪数量性状的研究已发展为直接将研究目标指向各个数量性状位点,借助各种遗传标记,构建遗传连锁图谱。通过一定的统计分析方法,从而将影响数量性状的多个基因剖分开来,将其定位于特定的染色体区域。本文对猪的生长,胴体,肉质,繁殖及抗病性状的ＱＴＬ的定位现状及应用前景试作综述,同时也涉及到ＱＴＬ的概     

猪pBluescript KS+文库构建、微卫星DNA克隆及序列测定

利用ＡｌｕⅠ和ＨａｅⅢ识别４个碱基的限制性内切酶消化猪基因组ＤＮＡ,以ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＫＳ＾＋噬菌粒为载体,构建了猪的小插入片段（２５０￣６００ｂｐ）基因组文库。以（ＴＧ）１０为探针筛选得到１４个阳性克隆,对２个阳性克隆测序发现其中均含有（ＴＧ）ｎ微卫星。     

微卫星DNA对外源基因遗传的影响

试验通过转绵羊金属硫蛋白启动子-猪生长激素(oMT-pGH)基因和转绵羊金属硫蛋白启动子-猪生长激素-微卫星DNA(oMT-pGH-microsatellite DNA)基因猪的连续传代.分析了后代中转基因阳性猪的比例,并比较了两种转基因猪的遗传效果.结果发现,外源基因的传代不稳定.世代中转基因个体的比例在逐代降低;Microsatellite DNA片段在转基因猪的传代中没能显现出提高整合率的作用.     

精液中猪细小病毒DNA三种提取方法效果比较

猪精液中含有高浓度的蛋白质,因此提取高纯度DNA较为困难;试验分别用水煮法、异硫氰酸胍法和Trizol法三种方法对连续稀释梯度猪精液提取猪细小病毒DNA,应用Taqman荧光定量PCR技术评价提取效果并加以对比。结果发现Trizol法可以提取出高纯度的DNA,但因Trizol试剂价格昂贵,不适用临床检测;比较另外两种方法,水煮法较异硫氰酸胍抽提法更为有效,是一种迅速、简便、经济、高效的DNA提取方法,适合于临床大量样品的检测。     

现场裂解猪全血提取DNA

为了解决常规现场裂解猪全血时出现的血液凝结问题，提高了裂解液中抗凝剂EDTA的浓度，并对血液消化的蛋白酶K的用量作了梯度处理。结果经方差分析表明：不同裂解液间DNA产量有极显著差异（P＜0．001）。用我们改进的抗凝剂配方，DNA产量高于常规裂解波，且所提DNA质量没有下降；不同蛋白酶K用量间无显著差异（P＞0．05）。     

从猪毛囊中快速提取基因组DNA的有效方法

采用酚仿抽提法提取猪毛囊中的基因组DNA,并以此为模板进行猪骨形态发生蛋白7基因(BMP7)片段的扩增鉴定,优化建立一种快速、简单提取动物基因组DNA的方法。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,从猪毛囊中提取的基因组DNA纯度、质量浓度较高,能满足PCR扩增需要。提取DNA所用猪毛囊数量以10根为好。用毛囊提取动物基因组DNA简便、经济,能够在短期内获得群体基因组DNA,且不会对动物造成损伤。     

RAPD法分析猪肺炎支原体DNA多态性

应用RAPD技术,用7条随机引物对7株猪肺炎支原体和2株猪鼻支原体基因组DNA进行了多态性分析,结果表明,7条引物共产生244个扩增片段,其中有92个是多态性片段.相似系数分析结果显示,国际标准株J株和国内分离株之间相似性系数为0.139～0.333,猪肺炎支原体和猪鼻支原体之间相似性系数为0.203-0.400.     

蓖麻基因组DNA提取方法研究进展

目前,基因组DNA的提取已有多种方法,但是不同的方法具有各自的优缺点。本文介绍了蓖麻基因组DNA提取原理,并叙述了近年来提取蓖麻基因组DNA的主要方法,如CTAB法、SDS法、试剂盒法、磁性微球法,通过比较这些不同提取方法的优缺点,分析了影响DNA纯度的因素,如样本的采集与保存、提取缓冲液成分的作用、DNA提取纯化方法等,以期为蓖麻相关研究提供理论基础。     

用微卫星探针的DNA指纹技术分析9个家猪群体的遗传结构

本研究用微卫星探针（GT）10得到了9个家猪品种的DNA指纹图。1-9品种依次为：13/17罗伯逊易位纯合子猪群体、13/17罗伯逊易位杂合子猪群体、13/17罗伯逊易位杂合子猪互交所得到的正常核型猪群体（杂交0号）、丹系长白猪群体、加系双肌臀杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体、丹系长白猪与13/17易位杂合子猪产生的杂交后备猪群体（杂交1号）、杜洛克猪与13/17易位杂合子猪产生的杂交后备猪群体（杂交2号）。根据指纹带型计算了每个群体的相似系数（F）、平均等位基因频率（Q）、最低平均杂合率（H）和遗传距离指数（D）。9个品种的相似系数介于0.582-0.911，根据各品种之间的遗传距离指数作出矩阵图，并据此绘制出品种间亲缘关系树状聚类图。     

小梅山猪IGF2基因连锁的微卫星DNA标记与生长性状的关联分析

以IGF2基因作为控制猪生长性状主基因的候选基因,选用小梅山猪及其杂种作为试验猪群体,采用微卫星DNA标记技术,检测猪IGF2基因紧密连锁的3个微卫星DNA标记的多态性,同时对这3个微卫星DNA标记与生长性状进行关联分析。结果表明:SW 256等位基因D对180日龄体重性状有正效应,等位基因B有负效应;SWC9等位基因E对30日龄体重性状有正效应,等位基因F对180日龄体重性状有正效应。     

水稻基因组DNA提取方法的研究进展

水稻基因组DNA的提取方法主要有SDS法和CTAB法。在此基础上又提出了快速制备法、简易提取法、无需液氮研磨提取法、微量提取法等多种方法。从试验提取材料、方法等方面对以上各种方法的优缺点及应用范围进行了综述。     

猪圆环病毒检测方法的研究进展

综述了国内外检测猪圆环病毒的各种方法,包括病毒检测、病毒抗体检测等,便于全面了解猪圆环病毒的研究进展.     

荣昌猪基因组DNA甲基化水平分析

【目的】探讨荣昌猪基因组DNA甲基化水平随生长发育阶段和组织类型不同而变异的规律。【方法】采用HPLC法分别检测了荣昌猪阉公猪心脏、肝脏、半膜肌3种组织在10,20,35,50,80和100 kg体质量阶段基因组DNA的甲基化水平,分别以体质量和组织类型为影响因素进行单因素方差分析。【结果】与10 kg体质量阶段的基因组DNA甲基化水平相比,3种组织基因组DNA甲基化水平均随个体体质量的增加而呈下降趋势,但不同组织下降的幅度不同:心脏基因组DNA甲基化水平在35 kg时开始明显下降(P0.01),到100 kg时下降了44.00%;肝脏基因组DNA甲基化水平在80 kg时开始明显下降(P0.05),到100 kg时下降了26.06%;半膜肌基因组DNA甲基化水平在20 kg时开始明显下降(P0.01),到100 kg时下降了60.78%。半膜肌的基因组DNA甲基化水平在10 kg体质量阶段显著高于心脏(P0.05),极显著高于肝脏(P0.01),在20 kg体质量阶段极显著低于心脏和肝脏(P0.01);肝脏的基因组DNA甲基化水平在35 kg体质量阶段显著高于半膜肌(P0.05),在50和80 kg体质量阶段极显著高于心脏和半膜肌(P0.01),在100 kg体质量阶段显著高于心脏(P0.05),极显著高于半膜肌(P0.01)。【结论】体质量阶段是猪基因组DNA甲基化水平的重要影响因素之一。DNA甲基化水平在肝脏与半膜肌间具有组织特异性,而在心脏与肝脏间、心脏与半膜肌间是否具有组织特异性与体质量阶段明显相关。     

金华猪PYY基因的克隆与定位

肽YY（PYY）是胃肠道分泌的一种激素,具有抑制食欲的作用。本研究应用PCR技术扩增得到金华猪PYY基因序列为532bp,并应用IMpRH辐射杂种板将其定位在猪15号染色体88．5-89．3cM的位置。     

猪MHCⅠ类基因区基因组DNA的RFLP初步分析

用４种限制性内切酶ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ，ＨｉｂｄⅢ和ＲｓｔＩ对纯种二花脸猪和梅山猪白细胞基因组ＤＮＡ进行内急酶消化和电泳，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ将ＤＮＡ转移到ＮＣ膜上，将来源于猪ＭＨＣ的Ⅰ类基因猪移植抗原基因片段克隆ＰＤ１－ＡＤＮＡ（４．３ｋｄ）用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记作为ＤＮＡ探针，进行分子杂交反应，比较了不同品系和个体间的限制性酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ），结果表明：（１）经各种