鸡马立克氏病病毒的分离和初步鉴定

红花继木扦插苗白绢病是一种插床内扦插苗上普遍而严重的病害。该病寄主范围很广，在扦插的２０多个花木品种中，几乎都要受害，发病率在２１．７％－９６．７％，该病不仅危害寄主茎基部和根部，也危害苗木的其他部位，引起湿腐和干腐。经病原物分离、培养及接种试验证明，该病由齐整小核菌所引起。病害从６月上中旬开始发生，７－８月是病害盛发期，一般１０月后停止发生，有些年份可延迟到１１月中旬。病害流行与扦插床扦插时间长     

马立克氏病毒Z4株培养特性和免疫原性的研究

将鸡马立克氏病毒（ＭＤＶ）血清２型Ｚ４毒株第１０代（Ｚ４－１０），在对鸡马立克氏病（ＭＤ）高度易感的Ｐ系ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）单层上连续传代至第３０代（Ｚ４－３０），Ｚ４毒株空斑形成速度和空斑形态均未发生显著变化，分别以Ｚ４－１１，Ｚ４－２５和Ｚ４－３０细胞结合毒作单介疫苗，将Ｚ４－１１，Ｚ４－２０和Ｚ４－３０细胞结合毒分别与ＦＣ１２６细胞结合毒组成二价疫苗，免疫Ｐ系ＳＰＦ鸡，用ＭＤＶ强毒     

鸡马立克氏病毒I型毒株的分离和鉴定

从鸡马立克氏病（ＭＤ）疫苗免疫的发病鸡群中采集肝，脾，血液等病科，经鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）培育盲传数代，分离到１株（ＭＤＶ）暂定名为沪Ｘ株，该病毒在ＤＥＦ培养上出现典型的ＭＤＶ细胞病变，电镜下病毒大小为１００ｎｍ左右，呈椭圆半开圆形，位于细胞核内。细胞培养物经饱和硫酸铵浓缩后，与标准的马立克氏阳性血清出现琼扩沉淀线，病毒按种ＳＰＦ鸡后，鸡群主要表现内脏肿瘤，并回收到ＭＤＶ，表明分离的沪Ｘ株具有致     

鸡马立克氏病毒疫苗的种类和应用

鸡马立克氏病毒（ＭＤＶ）疫苗目前分为如下５类：血清Ｉ型马立克氏病毒疫苗,血清Ⅱ型马立克氏病毒疫苗,血清Ⅲ型马立克氏病毒疫苗,马立克氏病毒多价苗,马立克氏病毒基因工程苗。马立克氏病毒疫苗的应用,应结合鸡马立克氏病（ＭＤ）的流行病学特点和马立克氏病毒疫苗的特性进行合理选择应用。     

马立克氏病毒强毒株攻击免疫鸡群的诊断

为准确诊断发病鸡群的发病情况.对检测样本进行流行病学和血清学调查、病理组织学观察以及基于马立克氏病毒1型(MDV-1)长独特区内部重复序列132bpr基因合成特异性引物,扩增MDV-1的该重复序列.结果表明:该免疫鸡群受到了MDV强毒攻击,发生了马立克氏病.     

鸡马立克氏病的免疫防治

鸡马立克氏病的免疫防治金维江张世栋（山东省农业科学院家禽研究所济南２５００２３）随着养禽业的发展，禽病对养禽业的危害也越来越突出，从近年的资料来看，危害最严重的仍然是传染性病毒病。其中主要有马立克氏病（ＭＤ）、新城疫、传染性法氏囊病、传染性支气管炎等...     

单抗夹心ELISA检测免疫鸡群新城疫病毒

用SPF鸡胚将送检的免疫鸡群泄殖腔棉拭样品盲传一代，再用新城疫单抗夹心ELISA对F1代尿囊液进行新城疫病毒(NDV)快速检测，同时用世界动物卫生组织(OIE)推荐的NDV分离及鉴定的方法加以验证。通过对3423份样品的检测，检出阳性样品453份，阴性样品2959份，可疑样品11份，两种方法的阳性符合率为99．3％，阴性符合率为99．7％。对全部阳性样品进行病毒分离，经血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验证明均含有新城疫病毒(NDV)，再将全部阳性样品分离物进一步作毒力鉴定，结果有强毒力株、中等毒力株及弱毒力株，因此用新城疫单抗夹心ELISA检测免疫鸡群泄殖腔棉拭样品F1代尿囊液新城疫病毒快速、准确率高，呈阳性者不全是NDV强毒力株感染，还有NDV中等毒力株或弱毒力株感染。     

HA基因侧翼重组痘苗病毒的生物学特性研究

以痘苗病毒ＨＡ基因为侧翼，在多种类型痘病毒）启动子的下游，插入ＨＩＶ－１的ｇａｇ基因及其上游序列、或ＨＩＶ－１ｇａｇ－ｅｎｖ嵌合基因、或狂犬病病毒的糖蛋白基因，从而构建了１２株重组痘苗病毒。统计发现，以ＨＡ基因为侧翼构建重组病毒的重组率约为０．１％，与ＴＫ基因为侧翼的重组率差别不大，但阳性重组率有很大差别，从２．７％到１００％。试验观察发现，ＨＡ基因为侧翼的重组病毒具有以下生物学特性：（１）感染性稍低于野生型病毒；（２）能够稳定地表达外源蛋白；（３）可引起细胞融合。根据重组病毒能引起细胞融合的特性，改进了重组病毒的筛选方法。     

纳豆菌生物学特性研究

研究了不同温度、pH值、培养时间、通气量、接种量、盐浓度因素对纳豆菌生长的影响,试验结果表明,该菌种生长适宜条件为：温度30-45℃;通风,转速140r／min,500mL三角瓶装液量100mL;pH值7．0;培养时间24h;接种量2％-5％。纳豆菌耐盐性较强,在含盐量8％的条件下仍能较好生长。     

生物复合病毒杀虫剂光保护剂的筛选

生物复合病毒杀虫剂经紫外线照射及田间日光曝晒表明,加保护剂处理的对紫外线及日光的阻挡作用较为显著,其中保护剂维生素B2、活性炭、淀粉阻挡作用最为显著。因此,为了延长残效期和提高防治效果,在新型生物杀虫剂中加入一定的保护剂是必要的。同时指出,晴天使用生物复合病毒杀虫剂拟在下午4时后喷施为好。     

猪瘟病毒生物学特性研究概述

阐述了猪瘟病毒与机体免疫系统的相互作用、在哺乳动物细胞中的增殖特点、与毒力相关基因的预测。概括了世界猪瘟病毒的基因分型、不同基因型毒株的分布情况和流行病学,分析了病毒的遗传变异特点与疫苗免疫前景,讨论了消灭猪瘟要面临的问题。     

一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析

【目的】分离并纯化出一株裂解性青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)噬菌体,并测定其各项生物学特性,为开发新的抗烟草青枯病制剂提供依据。【方法】取烟草青枯病重病田中健康烟株的根际土壤制成土壤悬浮液,并通过在青枯雷尔氏菌菌液中加入过滤后的土壤悬浮液富集噬菌体,用双层平板法验证噬菌体的存在后挑取单个最大噬菌斑进行反复纯化,直到得到单一清晰的噬菌斑。纯化后的单个噬菌斑加入对数早期的青枯雷尔氏菌菌液中进行增殖培养,将增殖液按常规方法进行噬菌体颗粒浓缩后,取20 μL浓缩液用磷钨酸染色并通过电子显微镜观察噬菌体的形态特征;同时将浓缩液进行SDS-PAGE电泳,观察蛋白条带大小和数量;用λ噬菌体DNA提取试剂盒提取噬菌体增殖液中的噬菌体核酸进行琼脂糖凝胶电泳,确定其基因组片段大小;最后用常规方法测定噬菌体的滴度、最佳感染复数、一步生长曲线,并通过比较加入噬菌体液前后青枯雷尔氏菌菌液的OD₆₀₀值变化测定其对温度、pH、紫外线、氯仿的敏感性。【结果】分离并纯化出了一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体,命名为∈RS-1, 噬菌斑为圆形,清晰透明,边缘光滑,直径1-2 mm,经电镜观察其形态为蝌蚪状,头部为二十面体的立体对称,直径约为94 nm,并有一带伸缩尾鞘的长尾大约为27 nm×100 nm,按照国际病毒分类委员会分类标准,其属于有尾噬菌体目（Caudovirales）,肌尾噬菌体科(Myoviridae)的裂解性噬菌体,核酸性质为dsDNA;噬菌体浓缩液经SDS-PAGE分析至少可以观察到25条蛋白条带,相对分子质量在10-100 kD,说明其蛋白外壳至少含有25个结构蛋白;将提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳显示其条带大于48 kb,符合肌尾噬菌体科基因组大小范围（31-317 kb）;生物学特性的测定显示该噬菌体对青枯雷尔氏菌的最佳感染复数为0.01;其吸附和感染青枯雷尔氏菌时的潜伏期约为30 min,爆发期约为80 min,裂解量约为156;该噬菌体的裂解活性在28℃时最高,在28-50℃均较强,但在温度超过60℃后活性基本丧失;其对酸碱的耐受力较强,在pH 3-8的范围内均有较强的裂解活性,当pH值超过9后活性开始降低;其对紫外线有一定的耐受能力,经紫外线照射0-9 min后裂解活性依然较强,12 min后活性开始下降,21 min后活性基本丧失;其对氯仿不敏感,5%浓度的氯仿对其活性基本没有影响。【结论】分离到了裂解性的青枯雷尔氏菌噬菌体,属于有尾噬菌体目,肌尾噬菌体科,经过测定其各项生物学特性可知其潜伏期较短,裂解能力较强,具有很好的杀菌效果,且其裂解活性持续时间长,并能在不同温度、不同酸碱性的环境内有较强的适应能力,具有开发为抗青枯雷尔氏菌菌剂的潜力。     

内蒙古部分牧区乳及乳制品中乳链球菌的分离及鉴定

本实验从内蒙古半荒漠草原带达茂联合旗和苏尼特右旗的牧民家庭中采集乳样，进行乳酸菌的分离和生物学特性的研究。从乳样中共分出４４株乳酸菌，其中乳链球菌２株，占分离总数的４．４％，乳脂链球菌１株，占分离总数的２．３％。所测试的菌株符合相应菌属和种的形态、染色特性和生化反应标准，同一种的不同菌株间的糖发酵试验有一定的差异。     

Dynamic Pathology and Antigen Location Study on Broiler Breeders with Coinfection of Marek's Disease Virus and Reticuloendotheliosis Virus

To further understand the generation and development of coinfection of Marek's disease virus (MDV) and reticuloendotheliosis virus (REV) in broiler breeders, and then find the method and optimal time of differential diagnosis for complex clinic multiple infection, the authors studied the pathohistological changes, apoptosis, immunohistochemistry (immunofluorescence), and ultrastrueture of tumor tissues of broiler breeders inoculated with MDV and REV. The study showed that proliferation of small lymphocytes was seen in the main organs at the age of 1 week, then immature lymphocytes, all kinds of lymphocytes, primitive reticulum cells, and Marek's disease cells (MDCs) were observed at 2-9 weeks. Apoptosis of lymphocytes could not be seen until the age of 10 weeks in the immune system. Immunohistochemistry detection showed that the positive signs of MDV and REV antigen were observed in the main organs at 2 weeks of age. Multi-morphology lymphocytes, MDV, and REV, mitotic figures and apoptosis of lymphocytes were observed with the help of transmission electron microscopy. MDV cooperating with REV promotes the course of disease of coinfection. Differential diagnosis can be done by immunohistochemistry in the early stage (before 2 weeks), and histopathology in the late stage (post 4 weeks). MDCs, primitive reticulum cells, immature lymphocytes, and two kinds of virions can serve as a basis for histopathology differential diagnosis.     

猪流行性腹泻病毒湖北株的分离鉴定及其s1基因进化分析

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是猪的肠道传染病病原,主要引起仔猪呕吐、腹泻和脱水,对一周龄内的哺乳仔猪危害最为严重,死亡率可达50%~100%。利用Vero86细胞从湖北某猪场腹泻仔猪小肠病料中分离到一株病毒,经RT-PCR检测、序列比对后确定其为PEDV,命名为HB201503株。设计PEDV s1基因的全长扩增引物,获得该株病毒的s1基因全长序列并进行了进化分析,结果表明该毒株与近年来在Gen Bank登陆的PEDV s1基因核苷酸序列相似性在91.4%~99.2%,与疫苗株CV777相似性较低,仅为91.8%。通过s1基因进化树分析表明HB201503以及近几年国内分离毒株主要集中在第I个亚群,且HB201503株与KM406183(2014,四川)和KM609206(2015,江苏)同源性较高。此外,s1蛋白氨基酸序列比对显示,HB201503与近几年分离毒株及疫苗株CV777均在55-74、157-163位氨基酸出现了连续4个以上氨基酸的缺失或替换,而且HB201503株与CV777及近几年分离毒株相比,还在270-283位氨基酸上出现了1个氨基酸的缺失和10个氨基酸的替换。     

百合灰霉病病菌生物学特性研究

百合灰霉病菌［Ｂｏｔｒｙｔｉｓｅｌｉｐｔｉｃａ（Ｂｅｒｋ．）Ｃｏｏｋｅ．］能危害百合叶、茎和花。病菌孢子萌发温度范围５～３０℃,最适温度１５～２０℃。致病最适温度为１５～２０℃,还需水湿条件。发病潜育期在１５～２０℃、ＲＨ９０％～１００％时为２０～２４ｈ,８℃、ＲＨ９０％以下时长达７ｄ。