大豆自花授粉后外源DNA导入技术

以花生为DNA供体,以大豆为DNA受体。在大豆白花授粉后,采用液滴法和注射法导入花生DNA。在受体大豆植株后代中获得了大豆多种变异类型.本文较详细地介绍了大豆自花授粉后外源DNA的导入技术,并提出液滴法和注射法的具体操作细则。     

花粉管通道介导玉米总DNA导入小麦D1代的农艺性状研究

采用花粉管通道法介导玉米总DNA导入4个小麦品种(系)"9411"、"955159"、"96266"和鲁麦21中,并对转基因D1代的农艺性状进行了分析.研究发现,与对照相比,鲁麦21和"96266"的转基因D1代株高、穗长的差异达极显著水平;"9411"、"955159"、"96266"的转基因D1代的旗叶叶长和叶面积均达极显著水平;在"9411"的转基因D1代中,出现无芒变异的植株占20%左右;在"9411"的转基因D1代中,也发现了穗型与抗病性同时发生变异的植株.     

利用外源DNA导入技术培育向日葵育种新材料

采用氯仿－异戊醇－RNA酶法，从菊芋、罗马尼亚向日葵幼叶中提取总DNA，利用花粉管通道法和子房注射法导入向日葵品种“吉农92－1”、“吉农92－5”中，发现D1代及D2代在植株形态、种皮色、百粒重、好粒大小等性状上出现了新的变异类型。     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟D1代遗传性状变异的研究

针对严重威胁烤烟大田生产的赤星病病害，培育抗病品种，以烤烟品种NC89为受体，具有选择标记性状的CV87为供体，采用浸种法将供总DNA导入受体，获得具有目的性状的D0代变异株收种并种植后得到D1代，对其D1代进行实验检测结果表明浸种法直接导入外源DNA在D1代，仍可有效转移株高，株型，叶色，叶面积，生育期及抗病性等性状，并获得较高化率D1代为15％，导入后D1代成熟烟叶总糖与蛋白质含量变异株与对照基本一致，说明变异株基本保持了受体原有的优良品种，蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，表明导入D1代变异株出现了受体没有的耐供体所特有的两条谱带，Rf0．19和Rf0.63，具有供体特有的两条谱带的D1代变异株有A14B6．C5．C10．D3等5个优良株系。经过D1代一系列检测和筛选，选出5株早熟，优势，抗病变异株有A14．B6．C5．C10．D3。为今后进行D2代筛选，通过分子验证，为烟草育种创造新种质，开创新途径。     

野生稻等外源DNA导入宁夏水稻品种的初步研究

试验采用分子育种技术，将野生稻等外源DNA导入宁夏水稻品种，比较了不同方法的导入效果，结果表明：茎注射法导入的D0代结实率高，且种子饱满：花粉管通道法和复合导入法导入的结实率低，且种子发育较差而不饱满。在D1代复合导入法的群体中出现了3．7％的穗型变异，茎注射法导入的群体中出现了19．2％的高度不育穗。说明外源DNA导入在D1代就可发生变异。     

应用浸种法导入CV85DNA转化烤烟遗传性状变异D2代研究

提取抗赤星病烤烟CV85的总DNA，采用浸种法导入感赤星病烤烟NC89。D1代筛选出的优良变异株收种并种植后得到D2代植株，对其活动体接种赤星病菌，检测其抗病性，并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性，田间生长性状调查，对其成熟烟叶总糖，蛋白质及总氮含量进行分析，并进行蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果表明：浸种法直接导入外源DNA，在变异株D2代仍可有效转移株高，株型，叶型，叶面积及抗病性等性状；赤星病菌人工接种检抗病性和过氧化物酶活性测定，筛选出高抗赤星病株系Jz9802；经蛋白质SDS－PAGE谱带分析表明，变异株D2代Jz9802出现了受体没有的而供体特有的4条谱带，RfA1 0.07,A2 0.015,B5 0.59,C4 0.87，变异株Jz9802的总糖，蛋白质和总氮与受体基本一致，保持了受体原的优良品质。     

甘蔗DNA导入玉米自交系性状变异的研究

采用花粉管通道法将甘蔗DNA导入普通玉米自交系,获得了变异植株,从中选出优良变异株,经3代自交观察,在D3代各农艺性状趋于稳定.对其主要农艺性状进行方差分析和D3代植株的叶绿素含量等生理生化分析,从中选出优良株系20-5000①和20-500②,其叶绿素、可溶性糖、蛋白质含量均比对照提高,可为今后玉米杂交育种提供中间材料.     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟遗传性状变异株D_2代研究(Ⅱ)

采用浸种法导入外源 DNA后变异株 D2 代 ,对其进行盆栽生长性状调查 ,活体接种赤星病菌 ,检测其抗病性及同工酶电泳酶谱分析。结果表明 ,浸种法直接导入外源 DNA,在变异株 D2 代仍可有效转移供体表型性状如株高、株型、叶型、叶面积、生育期、抗病性及同工酶酶谱等性状 ,并获得较高的转化率 D2 代为 12 .5 0 % ,其中具有多种优良性状抗病株系有 C1 0 ,B6 ;具有供体株高、株型、抗病性及同工酶酶谱的优良株系有 A9,D3     

人参DNA导入水稻引起变异研究

采用花粉管通道技将人参DNA导入水稻"补血黑糯"获得D2代变异植株,利用12条染色体上的400多对SSR引物对供体、受体及变异后代进行了DNA检测,证实其中代材料出现补血黑糯不具有的带型,表明人参基因已经导入补血黑糯中.     

花粉管通道法导入外源DNA创造燕麦新种质

采用花粉管通道途径将人工提取的不同倍性燕麦以及花生、大豆、小麦等作物DNA导入裸燕麦早熟品种“品二号”，中晚熟品种“冀张莜四号”和晚熟品种“冀张莜五号”，获得了较为广泛的变异，经过逐代选择鉴定，育成了一批裸燕麦新种质，组织化学分析表明，应用同样方法导入的GUS标民基因已在D1代植株中表达。