急性冷暴露对仔猪PBMC中HSP70和血浆抗炎性细胞因子IL-4、IL-10的影响

为了探讨急性冷应激对仔猪免疫系统的影响,将18头45日龄"约克夏"仔猪随机分成常温对照组、冷暴露组和冷暴露并糖皮质激素受体阻断组.常温组在18～20℃下、冷暴露各组在4～8℃环境下分栏饲养.冷暴露时间持续12 h,在冷暴露开始后分6个时间点采血并分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),分别使用Western-blotting法测定淋巴细胞中HSP70的表达量;双抗体夹心ELISA法检测血浆中IL-4和IL-10水平.结果显示:冷暴露组IL-4和IL-10水平在冷暴露6、9 h时比开始前有显著升高(P<0.01),且IL-4与IL-10呈强相关(r=0.990 1);糖皮质激素受体阻断组IL-4水平在冷暴露1h时显著升高(P<0.01),IL-10在6 h时有显著升高(P<0.01),IL-4与IL-10呈强相关(r=0.873 1);冷暴露各组HSP70在冷暴露1、3、6、9、12 h时均显著升高(P<0.01),HSP70与IL-4/IL-10呈弱相关.本试验显示,急性冷暴露能使IL-4、IL-10和HSP70的表达增强,且阻断糖皮质激素对它们之间的相关性有一定影响.     

急性冷暴露对仔猪多器官miR-383表达的影响

试验旨在探讨急性冷暴露对仔猪体内miR-383表达量的影响。试验选取16头30日龄断奶仔猪,分为对照组和冷暴露组,冷暴露条件为(4±2)℃。冷暴露组又分为3个处理,分别进行2、6、12 h冷暴露,每组4头仔猪。采用ELISA法检测血清中皮质醇(CORT)含量;次用qRT-PCR法检测肺、小肠、肌肉、肾、脾和肝中miR-383的表达水平。结果显示,冷暴露6 h后,仔猪血清CORT含量显著升高(P0.01);各器官miR-383表达水平均出现显著变化(P0.05),但变化出现的时间点和表现出的趋势不同。研究表明,4℃冷暴露6 h可使仔猪处于急性冷应激状态;从miR-383表达量角度分析,肺、肌肉、肝和脾对冷刺激响应迅速,小肠和肾的响应时间较长;急性冷暴露可使仔猪肝脏中miR-383表达量持续显著上升(P0.05)。     

不同程度奶牛乳腺炎IL-8、TNF-α的研究

为了研究不同程度乳腺炎患牛血液和乳汁中IL-8、TNF-α的活性变化,试验采用放射免疫分析法对不同程度乳腺炎患牛血清和乳清中IL-8、TNF-α的含量进行了测定。结果表明:不同程度乳腺炎患牛血液中IL-8活性随着乳腺炎严重程度的增加而呈递增趋势,均高于对照组奶牛(P<0.05或P<0.01);但体细胞数(SCC)为≥150～≤500万个/mL和SCC>500万个/mL的患牛乳汁中IL-8活性与对照组相比无显著变化,不具备乳腺炎的评价。不同程度乳腺炎血液和乳汁中TNF-α活性随着乳腺炎严重程度的增加而呈递增趋势,均高于对照组奶牛(P<0.05或P<0.01)。说明血液中IL-8及血液和乳汁中TNF-α均可作为奶牛乳腺炎的诊断指标。     

母体铅暴露对仔鼠大脑皮层组织中IL-1β和TNF-α表达的影响

探讨母体铅染毒对其仔鼠大脑皮层组织中IL-1β和TNF-α表达量的影响,揭示铅神经毒性的潜在机制。母鼠采用自由饮水的方式自妊娠1d开始经饮水染铅(0.1%,0.5%和1.0%的浓度溶解在去离子水中,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d断乳为止,每组10只。于出生后21d,用石墨炉原子吸收光谱仪测定仔鼠血液和大脑皮层组织中铅含量。用免疫组织化学染色法和Western blot方法测定大脑皮层组织中IL-1β和TNF-α蛋白表达情况。结果表明,各剂量染铅组血铅和脑铅含量与对照组比较明显升高(P<0.05);与对照组相比,随着试验组染铅浓度的升高,IL-1β和TNF-α的表达量显著增加(P<0.05)。铅可能通过诱导大脑皮层中IL-1β和TNF-α的高表达,影响学习记忆从而造成神经系统损害。     

不同时长冷暴露下C2C12细胞中O-GlcNAc和IL-6表达的变化

冷暴露下骨骼肌中O-GlcNAc(O-linked β-N-acetylglucosamine)糖基化修饰水平显著升高,作为"应激感受器"调控细胞信号转导及基因转录等;而骨骼肌作为分泌器官通过收缩产生的肌源性IL-6具有免疫作用,更能够调节骨骼肌中糖、脂代谢.本试验旨在检测不同时长冷暴露下小鼠成肌细胞系C2C12中O-...     

不同时长冷暴露下C2C12细胞中O-GlcNAc和IL-6表达的变化

冷暴露下骨骼肌中O-GlcNAc（O-linked β-N-acetylglucosamine）糖基化修饰水平显著升高,作为应激感受器调控细胞信号转导及基因转录等;而骨骼肌作为分泌器官通过收缩产生的肌源性IL-6具有免疫作用,更能够调节骨骼肌中糖、脂代谢。本试验旨在检测不同时长冷暴露下小鼠成肌细胞系C2C12中O-GlcNAc相关蛋白和IL-6表达变化,初步探究冷暴露下O-GlcNAc与IL-6之间的潜在联系。本试验通过体外培养小鼠成肌细胞系C2C12,并随机分为不做冷暴露处理的对照组（cold 0 h组,也称为control组,37℃±0.5℃）和冷暴露（32℃±0.5℃）3、6、9、12 h处理组,采用Western blot方法检测不同时长冷暴露下O-GlcNAc糖基化水平和OGT、OGA及IL-6表达水平。结果显示,与对照组相比,冷暴露3 h,OGT表达水平显著升高（P<0.05）,冷暴露6 h,OGA表达水平显著升高（P<0.05）;冷暴露3 h,O-GlcNAc糖基化修饰水平和IL-6表达水平极显著升高（P<0.01）。不同时长冷暴露下,C2C12细胞中O-GlcNAc糖基化修饰水平及IL-6表达水平显著升高,并且,不同时长冷暴露下,O-GlcNAc糖基化修饰和IL-6表达变化趋势高度相似,提示冷暴露下O-GlcNAc糖基化修饰可能参与IL-6表达的调控。     

冬、夏季室内外饲养对鸡IL-1、TNF-α含量的影响

为探讨不同季节室内外饲养对鸡IL-1、TNF-α含量的影响,在夏、冬季对35日龄黑脚麻鸡进行室内平养和室外放养,49、63、77、91日龄时用ELISA法测定鸡血清中IL-1、TNF-α含量。结果:(1)夏季49、77、91日龄,室内平养组IL-1、TNF-α含量均低于室外放养组;冬季试验除49日龄外,室内平养组IL-1含量均显著高于室外放养组(P0.05)。(2)两季节比较,49、63、77日龄时冬季室外放养组IL-1含量高于夏季放养组(P0.05);冬季室内平养组除49日龄外,IL-1含量均显著高于夏季平养组(P0.05)。TNF-α含量上,冬季室外放养组除91日龄外,均显著高于夏季放养组(P0.05);冬季室内平养组TNF-α含量也均显著高于夏季平养组(P0.05)。结论:夏季室外放养可提高鸡IL-1、TNF-α含量;冬季室内平养可提高鸡IL-1、TNF-α的含量。贵州冬季产生的冷应激可提高鸡血清IL-1、TNF-α的含量。     

高致病性猪蓝耳病自然病例血清致炎因子IL-1、IL-6和TNF-α含量的测定与分析

本试验旨在探究高致病性蓝耳病(HP-PRRS)自然病例中致炎因子IL-1、IL-6和TNF-α含量,进而阐述HP-PRRS的致病机理,为养殖生产中的HP-PRRS防控提供理论基础。在成都地区4个发病猪场采集具有临床症状的猪血清(含5头濒死猪)35份与无临床症状猪血清23份,利用RT-PCR分别检测出HP-PRRSV阳性血清25份和11份。将检测出阳性表现症状的25份血清、检测阳性无临床症状的11份血清及检测阴性的12份血清分成3组,分别标注为病猪组、隐性感染组和健康对照组,运用ELISA方法进行IL-1、IL-6和TNF-α含量测定。结果显示,IL-1含量在三组中差异极显著(P0.01),病猪组极显著高于隐性感染组与健康组(P0.01),隐性感染组与健康对照组差异不显著(P0.05);IL-6含量在三组中差异显著(P0.05),病猪组显著高于隐性感染组与健康对照组(P0.05),隐性感染组与健康对照组差异不显著(P0.05);TNF-α含量在三组之间无显著差异(P0.05)。该结果表明IL-1与IL-6在HP-PRRS感染致病中具有重要作用。     

四君子散与益母生化散对围产期奶牛血浆IL-2IFN-γ和TNF-α的影响

为探讨中药对围产期奶牛血浆IL-2,IFN-γ和TNF-α的影响,本试验选择年龄、胎次和预产期相近,经临床检查健康的围产期荷斯坦奶牛90头,随机分成Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组,每组30头.Ⅰ组,于预产期15 d时喂服中药加味四君子散(400 g/头),每天1次,连用5d,分娩后喂服益母生化散一剂(400 g/头);Ⅱ组,产前不添加中药,分娩后喂服益母生化散一剂(400 g/头);Ⅲ组为对照组,产前、产后均不喂服中药.在预产期15 d,7 d,产后0 d(分娩后喂服益母生化散前计为0 d)、产后7d和15d时,在各组随机抽取10头奶牛颈静脉采血,测定血浆IL-2,IFN-γ和TNF-α的含量.试验结果显示,Ⅰ组奶牛血浆IL-2含量、IFN-γ含量和TNF-α含量明显高于对照Ⅲ组(P<0.05).研究说明,中药能增强围产期奶牛的免疫水平,为中药防治奶牛围产期疾病提供一定的理论依据.     

臭氧与药物治疗对兔骨性关节炎血清中IL-1β、TNF-α含量的影响

目的通过观察比较臭氧与药物治疗兔骨性关节炎血清中IL-1β、TNF-α水平的变化,探讨比较臭氧及药物治疗骨性关节炎的作用效果。方法新西兰兔80只,采用II型胶原蛋白酶关节腔内注射法诱导骨性关节炎模型。随机分为正常组、模型对照组、10ug/ml臭氧关节腔内注射组;20ug/ml臭氧关节腔内注射组;40ug/ml臭氧关节腔内注射组;低剂量药物灌胃组;中剂量药物灌胃组;高剂量药物灌胃组;每组10只。造模4周后进行臭氧干预,同时进行药物灌胃治疗,每周2次,共4周。末次注射及药物灌胃后4周抽取血液样本检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β含量。结果各治疗组及模型组的血清中TNF-α和IL-1β含量均高于正常组(p0.05);臭氧治疗组与模型组间的血清TNF-α和IL-1β含量无显著性差异(p0.05);药物灌胃治疗组与模型组间的血清TNF-α和IL-1β含量显著性差异(p0.05)。结论(1)骨性关节炎动物模型出现血清TNF-α和IL-1β含量升高,说明造模成功;(2)臭氧无抑制已升高的血清TNF-α和IL-1β含量的作用;(3)药物灌胃治疗均能抑制已升高的血清TNF-α和IL-1β含量的作用。     

黄芪多糖对细菌脂多糖诱导仔猪腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、NO及IL-1的影响

目的:研究黄芪多糖(APS)对细菌脂多糖(LPS)诱导仔猪腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)基因表达、白细胞介素-1(IL-1)及一氧化氮(NO)的影响。方法:取仔猪腹腔巨噬细胞进行体外培养,用APS和LPS处理,分完全培养液组、APS组、APS LPS组和LPS组四个处理。采用实时定量PCR方法检测TNF-α基因表达,TNF-α和IL-1蛋白含量采用放免法,NO含量采用Griess法测定。结果:完全培养液组、APS组、APS LPS组TNF-α mRNA的表达显著或极显著低于LPS组(P<0.05或P<0.01)。完全培养液组、APS组、APS LPS组上清液中TNF-α、IL-1和NO的含量显著或极显著低于LPS组(P<0.05或P<0.01)。结论:APS抑制仔猪巨噬细胞TNF-α表达及分泌炎性因子,这可能是APS维持仔猪健康的重要机制之一。     

冷应激仔猪血浆中抗炎性细胞因子IL-4、IL-10水平变化的研究

近十年来,应激对免疫系统的影响倍受人们重视[1]。动物试验及人体观察证实,应激对免疫的影响主要是抑制性的,包括淋巴细胞活性降低,干扰素产生减少,吞噬作用降低,NK细胞     

隆朋单一麻醉对犬IL-1β IL-2 IL-8及TNF-α等4种细胞因子的影响

研究隆朋麻醉对犬4种促炎因子(IL-1β、IL-2、IL-8及TNF-α)的影响。12只健康犬分别于麻醉前(0 h)、麻醉后0.5、2、8、24、48、72 h及120 h共8个时间点,空腹采5 mL血离心取血清,动态检测IL-1β、IL-2、IL-8及TNF-α水平。结果为:IL-1β组只有麻醉后2 h的血清中IL-1β浓度显著低于0 h对照值(P0.05),其他各组的IL-1β浓度虽低于与0 h对照值,但比较差异不显著(P0.05)。IL-2在麻醉后出现下降趋势,在麻醉后48 h显著低于0 h对照值(P0.05),之后开始上升并于120 h基本恢复正常。IL-8组各时间点与0 h对照值比较皆差异不显著(P0.05)。TNF-α在麻醉后出现下降趋势,其中24、48 h与0 h对照值比较差异显著(P0.05),48 h后出现上升趋势,72 h与0 h对照值比较已差异不显著(P0.05),120 h基本回复正常。隆朋单一麻醉对犬4种细胞因子存在一定影响,各细胞因子在120 h后基本恢复正常。     

PDGF-B基因沉默对LPS介导小鼠乳腺上皮细胞分泌IL-6和TNF-α的影响

旨在观察PDGF-B基因沉默对LPS诱导小鼠乳腺上皮细胞分泌IL-6和TNF-α的影响,为揭示乳腺上皮细胞的免疫机制提供参考数据。采用siRNA转染技术对PDGF-B基因进行沉默,用实时荧光定量RT-PCR方法筛选最佳转染条件,并检测沉默后LPS介导其下游信号PI3K mRNA的表达量,用ELISA法检测其下游信号PI3K蛋白含量和LPS介导细胞分泌前炎症细胞因子IL-6和TNF-α的含量。结果显示,选用PDGF-B-mus-886片段的50nmol/L浓度转染组能极显著抑制PDGF-B的mRNA表达(P0.01);PDGF-B沉默后,LPS刺激下其下游PI3K的mRNA和蛋白表达量与对照组相比均呈显著性降低(P0.05);细胞分泌IL-6的量与对照组相比呈显著性降低(P0.05),而分泌TNF-α的量各组无显著性变化(P0.05)。结果表明,PDGF-B可引起LPS介导乳腺上皮细胞IL-6分泌量的改变,因此,PDGF-B可作为靶基因深入研究乳腺上皮细胞的免疫功能,为乳腺炎症、肿瘤等相关乳腺疾病的治疗提供新的思路及试验数据,为新药的开发和应用提供理论依据。     

广西沼泽型水牛IL-18和TNF-α基因的克隆与序列分析

从健康沼泽型水牛静脉无菌采血,分离外周血单核细胞(PBMCs),用刀豆素A(ConA)诱导培养3,8和12 h后,提取细胞总RNA,以Oligo(dT)18为引物合成第一链cDNA,根据牛的白细胞介素18(IL-18)和绵羊的肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因序列设计2对特异性引物,通过PCR方法扩增出水牛IL-18和TNF-α基因,将其克隆到pMD18-T载体,测序后进行序列分析。结果试验中所克隆到的IL-18和TNF-α基因序列的开放阅读框(ORF)分别为602 bp和715 bp,与GenBank所登录的水牛IL-18和TNF-α核苷酸序列同源性为99.1%和99.7%,其推导的氨基酸序列同源性分别是99.0%和98.7%。表明成功从水牛外周血中克隆到了水牛IL-18和TNF-α基因。     

TNF-α的生物活性及其在肝脏损伤中的作用

早期发现TNF-α具有杀死肿瘤或抑制肿瘤增殖的作用.后来发现TNF-α具有广泛的生物活性,既可参与机体的免疫功能的调节,又在感染、组织损伤、炎症、休克等方面起重要介导作用;近年来还发现TNF-α在中枢神经系统以及许多生物因子诱导的肝损伤过程中也起重要作用.     

犬穿透性角膜移植术后血清TNF-α、IL-2和β-EP的动态变化

为了解犬穿透性角膜移植术后的免疫排斥反应、炎症反应与疼痛反应,在选择11只6-12月龄、体重为4.0-6.5 kg的西施犬、北京犬和小型杂交犬进行穿透性角膜移植后,每天观察受体犬的全身及眼部表现,并于术后30 d内每5 d和30 d后每10 d采集1次受体犬外周静脉血,应用放射免疫法检测血清中的TNF-α、IL-2与β-EP含量,研究其动态变化。试验结果显示,术后第5-10天各受体犬血清TNF-α、IL-2、β-EP含量均表现不同程度的升高;从术后第15天开始,受体犬血清TNF-α、IL-2、β-EP含量则受多种因素影响而发生不同变化。研究结果表明,犬同种异体穿透性角膜移植和术后局部使用地塞米松,基本不出现亚急性免疫排斥反应或排斥反应程度很轻,术后血清TNF-α含量的动态变化不宜用于免疫排斥反应的早期预测及诊断;犬同种异体穿透性角膜移植后,血清IL-2含量可随眼部炎症程度的改变而发生相应变化,术后监测其变化可作为判断角膜移植术后炎症程度及其转归的重要指标;角膜创伤及其表面线结可引起犬的疼痛反应和血清β-EP含量显著升高,术后监测血清β-EP含量的动态变化能够准确反映角膜移植后犬对角膜疼痛的应激程度。     

慢性冷暴露对小鼠结肠紧密连接的影响

为研究慢性冷暴露条件下小鼠结肠紧密连接的变化,试验将小鼠随机分为对照组和冷暴露组,对照组始终置于25℃环境中,冷暴露组置于4℃环境中每天暴露3 h,持续刺激3周,其余时间置于25℃环境中。冷暴露周期结束后将小鼠麻醉处死。利用HE染色观察小鼠结肠的形态学变化,免疫荧光染色观察ZO-1的表达,蛋白免疫印迹技术检测紧密连接相关蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1和炎症因子TNF-α、IL-1β、iNOS的表达。结果显示,与对照组相比,冷暴露组小鼠结肠皱襞消失,紧密连接蛋白的表达量显著降低,炎症因子表达量上调。上述结果表明,慢性冷暴露会导致小鼠结肠紧密连接受损,同时促进炎症反应的发生。     

氨基多糖纳米微粒对RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-1β影响的试验

为了研究氨基多糖纳米微粒(CNP)对巨噬细胞株RAW264.7分泌细胞因子TNF-α、IL-1β的影响,以巨噬细胞株RAW264.7为腹腔巨噬细胞模型,分别用CNP作用RAW264.7细胞12 h、18 h及24 h后,运用酶联免疫法(ELISA),测定细胞培养液中细胞因子TNF-α、IL-1β的变化。结果:CNP有明显的提高巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β的作用。表明CNP对巨噬细胞的免疫功能具有促进作用。