渤海黑牛超数排卵与胚胎玻璃化冷冻保存研究

渤海黑牛目前存栏量急剧下降,亟需对这一宝贵种质资源进行抢救性保护。本试验选用青年牛作为供体进行超数排卵处理,研究季节、促卵泡素(FSH)来源、饲粮成分对其超数排卵效果的影响,并将获得的可用胚胎利用冷冻载杆进行玻璃化冷冻保存。结果表明：(1)春季头均可用胚数、胚胎可用率显著高于冬季(P<0.05);(2)使用国产FSH渤海黑牛的超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率显著低于进口FSH(P<0.05);(3)含胚芽玉米组超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率均显著高于不含胚芽玉米组(P<0.05);(4)玻璃化冷冻保存85枚胚胎,胚胎冷冻可用率为82.52%,杆均胚胎数为2.30枚。本试验为渤海黑牛体内胚胎生产及种质资源保存提供了一定的参考。     

影响荷斯坦青年奶牛超数排卵效果因素的研究

本试验对48头、12~14月龄的荷斯坦青年奶牛进行超数排卵处理,试验结果表明:以320 mg剂量的进口FSH处理青年母牛后,可用胚胎数(5.25±1.50枚)较其他3组多(300 mg:4.25±2.63枚;340 mg:3.25±3.40枚;360 mg:5.00±2.94枚),但差异不显著。而对于不同剂量的国产FSH超排试验,以9.0 mg的剂量进行超排处理可以取得良好的超排效果,头均可用胚达到7.67±1.12枚,但与其他两组试验结果相比较(8 mg:6.20±1.19枚;10 mg:7.10±1.66枚)差异不显著。通过比较,国产FSH超排处理青年奶牛后头均可用胚数(7.03±0.75枚)明显高于进口FSH的超排效果(4.43±3.52枚),差异显著。同时,通过比较不同月龄供体牛的超排结果得出,12、13、14月龄的青年牛都可取得满意的胚胎生产效果,头均可用胚分别为4.73±1.32枚(n=11)、6.32±0.85枚(n=19)、6.89±0.90枚(n=18),差异不显著;并且随着年龄的增加,超排效果也随之增加。     

3种超排方案生产奶牛体内性控胚胎效果比较

采用3种不同方案对16头经产奶牛实施超数排卵,然后用X性控冻精进行人工授精。结果显示,3种方案超排头均排卵数分别为10.75、6.00、7.00枚,头均回收胚胎数分别为8.38、4.25、7.00枚,3组均无显著差异(P>0.05);方案Ⅰ超排供体头均获可用胚7.88枚,可用枚率为95.5%,显著高于方案Ⅱ(2.20枚,55.7%)和方案Ⅲ(0.33枚,15.7%)(P<0.05)。方案Ⅱ和方案Ⅲ在头均可用胚数方面无显著差异(P>0.05),但在可用胚率方面,方案Ⅱ显著高于方案Ⅲ(P<0.05)。     

Experiment on super-ovulation in Xinjiang fine-wool sheep

[目的]提高并稳定新疆细毛羊超数排卵效率,为以生产2～8-细胞期胚胎的转基因研究提供素材.[方法]分别从激素生产厂家、供体年龄、激素处理方案等3个方面探讨新疆细毛羊的超数排卵效果,确定新疆细毛羊超数排卵供体羊的最佳年龄及其有效处理方案.[结果]不同生产厂家的激素对新疆细毛羊黄体数和可用胚胎数均存在极显著影响(P＜0.01):1.5周岁以内的新疆细毛羊超排后,其黄体数(6.17个/只)和可用胚胎数(1.50枚/只)均极显著低于2.0周岁以上的新疆细毛羊(黄体数12.24个/只,可用胚胎数8.30枚/只)(P＜0.01);FSH剂量在150～200 U/只范围内不影响超排效果和胚胎质量( P＞0.05):FSH+PMSG超排处理的新疆细毛羊黄体数(6.05个/只)和可用胚胎数(1.76枚/只)则显著低于FSH+PG超排处理(黄体数17.11个/只,可用胚胎数10.38枚/只)(P＜0.01).[结论]新疆细毛羊超数排卵时宜选用2.0周岁以上的供体羊,FSH剂量控制在150～200 U/只,若能与PG联合使用其超排效果更好,但不宜与PMSG联合使用.     

饲养水平对供体奶牛超数排卵的影响

不同饲养水平的供体奶牛超数排卵结果表明 ,高饲养水平组头均获胚数、可用胚数分别为 1 0 5枚和 6 9枚 ,低饲养水平组头均获胚数、可用胚数分别为 5 2枚和 3 3枚 ,经t检验 ,两组差异极显著 (P <0 0 1 ) ;超排反应率两组差异显著 (P <0 0 5) ;胚胎可利用率两组差异不显著 (P >0 0 5)。     

新疆细毛羊超数排卵效果研究

[目的]提高并稳定新疆细毛羊超数排卵效率,为以生产2~8-细胞期胚胎的转基因研究提供素材.[方法]分别从激素生产厂家、供体年龄、激素处理方案等3个方面探讨新疆细毛羊的超数排卵效果,确定新疆细毛羊超数排卵供体羊的最佳年龄及其有效处理方案.[结果]不同生产厂家的激素对新疆细毛羊黄体数和可用胚胎数均存在极显著影响(P<0.01):1.5周岁以内的新疆细毛羊超排后,其黄体数(6.17个/只)和可用胚胎数(1.50枚/只)均极显著低于2.0周岁以上的新疆细毛羊(黄体数12.24个/只,可用胚胎数8.30枚/只)(P<0.01);FSH剂量在150~200 U/只范围内不影响超排效果和胚胎质量( P>0.05):FSH+PMSG超排处理的新疆细毛羊黄体数(6.05个/只)和可用胚胎数(1.76枚/只)则显著低于FSH+PG超排处理(黄体数17.11个/只,可用胚胎数10.38枚/只)(P<0.01).[结论]新疆细毛羊超数排卵时宜选用2.0周岁以上的供体羊,FSH剂量控制在150~200 U/只,若能与PG联合使用其超排效果更好,但不宜与PMSG联合使用.     

河南大尾寒羊超数排卵研究

对30只河南大尾寒羊进行超数排卵处理,研究不同激素、不同季节、不同输精方式以及重复超数排卵对其超数排卵效果的影响。结果表明:采用加拿大产FSH处理,河南大尾寒羊的只均黄体数(15.76)和只均获胚数(12.76)显著高于采用新西兰产FSH组(11.78、8.78);冬季处理的河南大尾寒羊的只均黄体数(18.11)、只均获胚数(14.84)和只均可用胚数(5.21)显著高于春季(13.44、9.44、3.78)和秋季处理组(11.61、9.56、2.72);采用350 mg/只剂量FSH处理,河南大尾寒羊只均黄体数(18.27)和只均胚胎数(14.53)显著高于300 mg/只剂量组(12.23、10.23),且优于400mg/只剂量组;腹腔内子宫角输精,河南大尾寒羊只均可用胚数(4.68)显著高于阴道输精处理(1.89);重复超数排卵各次之间的只均黄体数、只均胚胎数和只均可用胚数差异不显著。     

奶牛体内性控胚胎生产的研究

为探讨奶牛合理的超排方法,采用分离的X冻精对17头超数排卵的荷斯坦奶牛进行人工授精,生产体内性控胚胎。结果表明,处理Ⅰ组在头均获卵数、可用胚及退化胚几个方面都低于处理Ⅱ组,但差异不显著(P>0.05);头均黄体数和未受精数,Ⅰ组高于Ⅱ组(P>0.05);青年牛头均获卵数、可用胚和退化胚方面都高于经产牛组,但差异不显著(P>0.05);青年牛头均未受精卵数显著高于经产牛(P<0.05),头均黄体数低于经产牛,但差异不显著(P>0.05)。     

南阳牛超数排卵研究

采用FSH共超排南阳牛60头次,共采卵258枚(头均4.87±3.69),其中可用胚153枚(头均2.89±2.58),育成牛超排反应有效率高于经产牛(86.2%︰71.0%),经产牛采卵数多于育成牛(头均5.22±4.53︰头均4.5±2.58),可用胚数也多于育成牛(头均3.07±3.06︰头均2.69±2.02),FSH的适宜剂量经产牛为340mg/头,育成牛为300mg/头。季节对南阳牛超排没有明显影响。     

不同FSH种类、剂量对不同品种肉牛超排效果的试验

本试验使用不同FSH种类和剂量对三个肉牛品种进行超排处理，结果表明：使用国产的FSH超排后有效采卵率为94.4％、头均可用胚胎数为6．1、可用胚胎率64．5％;进口的FSH超排后有效采卵率为94.8％、头均可用胚胎数为7．0、可用胚胎率65.7％，两者差异不显著。（P〉0．05）．但进口FSH的较高.使用国产和进口的FSH在不同年龄的供体牛超排效果比较，经产牛的比青年牛的较好，并且头均可用胚胎数差异显著（P〈0．05）.国产的头均可用胚胎数8.1枚，进口的头均可用胚胎数7.4枚。     

冷冻奶牛胚胎移植黄牛研究

采用国产试剂、器械超数排卵22头黑白花奶牛,超排成功率72.7％(16/22)。采集胚胎143枚,其中可用胚占70％(100/143),超排母牛采集胚数和可用胚数头均6.5枚和4.5枚,按采得胚母牛计算采集胚数和可用胚数头均8.9枚和6.3枚。胚胎移植经冷冻—解冻后68.2％(30/44)可用,胚胎移植18头同期发情黄牛受体,3头妊娠。其中两头受体双胎6个月时流产,1头受体黄牛产下1头黑白花公犊。     

黔北麻羊超数排卵效果分析

[目的]探索适宜的地方山羊品种超数排卵方案。[方法]以黔北麻羊为试验动物,比较不同品牌促卵泡素(FSH)、相同品牌不同剂量FSH的超数排卵效果。[结果]41只黔北麻羊的平均黄体数14.59个,平均有效胚数8.39枚。日本产FSH 20.0 AU/只剂量组平均黄体数13.90个,平均有效胚数10.21枚;加拿大产FSH 160 mg/只剂量组平均黄体数14.00个,平均有效胚数7.33枚。[结论]日本产FSH的适宜剂量为20.0 AU/只,加拿大产FSH的适宜剂量为160 mg/只,日本产FSH的超数排卵效果优于加拿大产FSH,但差异不显著。     

不同处理方法对家兔超数排卵的影响

[目的]确定家兔稳定高效的超数排卵方法。[方法]PMSG试验组母兔颈部皮下注射PMSG 406、0、80 IU/只,FSH试验组母兔颈部下注射FSH 6次,每次间隔12 h,注射量递减,总用量分别为80、604、0 IU/只,注射PMSG、FSH后耳缘静脉注射HCG 100 IU/只,计算卵子回收率,比较2种处理方法的超数排卵效果。[结果]应用PMSG超排时,60 IU/只试验组的卵子回收率显著高于其他2组(P<0.05)。应用FSH递减法超排时,总用量为60 IU/只的试验组的卵子回收率显著高于其他2组(P<0.05)。FSH递减法试验组和PMSG试验组的卵子回收率无显著差异(P>0.05)。[结论]以60 IU/只的PMSG联合100 IU/只的HCG对家兔进行处理的超排效果最好,卵子回收率达70%。     

2种FSH产品对奶牛超排效果的比较

将60头奶牛随机分成2组(每组30头),分别用国产促卵泡素(FSH)和加拿大生产的FSH(Folltropin v)对奶牛进行超排处理,研究其对奶牛超排效果的影响。结果表明:用Folltropin v超排处理所获的可用胚数量(7 84±5 61)多于用国产的FSH(5 12±3 24),且两者差异显著(P<0 05)。     

小鼠超数排卵效果分析

本试验通过对 80只昆明白小鼠超数排卵效果的观察分析表明,超排月份、小鼠日龄及注射PMSG剂量均对超排效果有显著或极显著的影响.每只小鼠获平均可用胚数,以 4月份、35和 36日龄小鼠、注射PMSG剂量 11 2iu时最多     

非繁殖季节太行山羊胚胎移植方案研究

对48只太行山羊(供体羊)、40只布尔山羊和120只唐山奶山羊(受体羊)进行了同期发情、超数排卵和胚胎移植试验.试验结果表明:CIDR+PMSG组对布尔山羊同期发情,有效发情率为75%;CIDR+FSH组对唐山奶山羊同期发情,有效发情率为73%;CIDR+FSH+LH组平均可用胚胎数与CIDR+PMSG组和CIDR+PMSG+LH组差异均达到极显著水平(P<0.01),与CIDR+FSH组差异显著(P<0.05).用CIDR+FSH+LH法超数排卵时,CIDR+FSH组对唐山奶山羊进行同步发情,受体妊娠率为56%;CIDR+PMSG组对布尔山羊同步发情,受体妊娠率为60%水平.因此,在非繁殖季节对太行山羊采用CIDR+FSH+LH法超数排卵和以布尔山羊及唐山奶山羊为受体分别用CIDR+PMSG和CIDR+FSH同步发情来进行胚胎移植的技术方案是可行的.     

全放牧婆罗门牛和BMY牛的超数排卵效果及激素水平比较

为了比较婆罗门牛和BMY牛的雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平及胚胎生产潜力,并探讨MOET技术在BMY牛扩繁中的应用前景,采用进口激素(日本产FSH 24~36 mg+美国产PG 35 mg)和国产激素(国产FSH 10~12 mg+国产PG 0.8 mg)对全放牧婆罗门牛和BMY牛进行超排,并于超排前(同期发情第7天)、超排开始、超排第3天、超排发情当天和胚胎回收当天采集血液,采用RIA法分析血浆中的E2和P4水平。结果表明,BMY牛的黄体数和获胚(卵)数、可用胚数分别较婆罗门牛高2.09个和0.95、0.36枚,但差异不显著(P>0.05);BMY牛的排卵率较婆罗门牛高18.46%(P<0.01),而可用胚率则较婆罗门牛低2.55%(P<0.01)。BMY牛在5个处理时段的E2和P4平均值分别较婆罗门牛高0.58 pg/mL(P<0.01)和1.44 ng/mL(P>0.05),在各处理时段的P4水平变化规律几乎与婆罗门牛一致,E2/P4值为婆罗门牛的5.16倍。结果提示,BMY母牛的E2和P4水平高于婆罗门牛,在激素水平和繁殖性能方面表现出一定的杂种优势;E2水平低是婆罗门牛发情微弱和排卵率低的主要原因之一;在同等放牧管理和超排处理条件下,婆罗门牛及其杂种BMY牛对外源激素的敏感性基本一致,具有同等的胚胎生产潜力。     

激素的不同剂量对小鼠超数排卵的影响

[目的]通过对小鼠超数排卵激素剂量和对其后代进行控制的研究,逐渐将这些技术运用到其它动物上,以加快其品种的改良,提高优良品种及个体的利用率.[方法]以昆明系小白鼠为实验动物,取性成熟个体,先进行发情鉴定,确定其发情周期及不同的阶段,然后按发情阶段分组,分别用5和10 IU剂量的孕马血清促性腺激素和人绒毛膜促性腺激素进行超排处理并与公鼠合笼,在见栓后的第3.5 d冲胚,对所得胚胎进行鉴定.[结果]对157只小鼠进行了发情鉴定.对40只小鼠在其发情周期的不同阶段进行了超排处理,发现10 IU剂量时,胚胎的质量和数量都优于5 IU.[结论]在小鼠发情周期中的间情后期和发情初期这两个阶段用5和10 IU的剂量进行超排,都能得到良好的效果,以发情初期的10 IU剂量效果最好.     

延边奶山羊羔羊超数排卵及体外成熟的研究

[目的]对延边奶山羊羔羊超数排卵及体外成熟进行研究.[方法]以延边奶山羊为试验对象,研究不同超排方案对羔羊卵泡发育的影响,比较了羔羊超排处理后与成年母羊卵巢内的卵母细胞体外成熟的差异.[结果]延边奶山羊的最佳超排方案为CIDR＋PMSG 800 IU注射1次＋FSH（加拿大）20 IU/次,间隔12 h注射6次;宁波产FSH超排效果不稳定,卵泡回收率低.成年母羊卵母细胞的体外成熟率显著高于母羔羊超排卵母细胞.[结论]该研究为建立延边奶山羊JIVET技术体系提供依据.