不同毛色獭兔皮肤中黑色素沉积及毛囊发育规律

旨在研究不同毛色成年獭兔在毛囊再生过程中皮肤黑色素沉积以及毛囊发育规律。选用2月龄黑色、白色、青紫蓝色、海狸色、蛋白青色和蛋白黄色獭兔各3只,分成6组,定期采集不同生长时期(拔毛后第7天、14天、21天、28天和35天)的皮肤组织,制作石蜡切片。利用光学显微镜观察不同时期皮肤中黑色素含量及毛囊生长情况,并利用Simple western全自动蛋白表达分析技术检测黑色素合成的限速酶-酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)在拔毛后不同时期獭兔皮肤组织中的蛋白表达水平。结果发现,拔毛后7～21 d,毛囊处于生长期;21～28 d,毛囊由生长期进入退化期;在35 d左右时,毛干脱落,毛囊处于休止期。不同毛色獭兔的毛囊均分布在皮肤真皮层中,且不同时期毛囊在真皮层中的深浅不同;不同毛色獭兔皮肤组织在不同时期黑色素含量不同,均在14～21 d黑色素沉积量达到最高,28～35 d时,沉积量逐渐减少;TYR蛋白在不同时期的不同毛色皮肤组织中均表达,且均在21 d时表达水平最高。由此表明,毛囊再发育过程中,经历生长期、退化期和休止期。在不同时期不同毛色獭兔皮肤组织中黑色素含量变化趋势一致,黑色素合成的限速酶TYR在不同毛色獭兔皮肤中蛋白表达水平均最高,与黑色素沉积情况一致。     

日粮NDF水平对断奶獭兔肠MUC1与MUC2表达的影响

研究日粮中性洗涤纤维(NDF)水平对断奶獭兔肠粘蛋白基因MUC1与MUC2表达的影响,用以粘蛋白反映的肠黏膜免疫状况来确定最佳的日粮NDF添加水平。试验选用56只体质量相近的35日龄断奶幼兔,随机均分4组,分别饲喂含NDF 29%、33%、37%、41%的日粮,饲喂28d后,分别采集十二指肠、空肠、回肠、盲肠样品,-80℃保存,对MUC1及MUC2进行RT-PCR实时荧光定量。结果表明,十二指肠、空肠、盲肠中的MUC1各自表达受NDF水平影响不显著(P0.05),回肠中NDF 37%组MUC1表达量较NDF 29%组表达量上调4.95倍(P0.05),其余组无差异(P0.05);空肠、回肠、盲肠中的MUC2各自表达受NDF水平影响不显著(P0.05),十二指肠中NDF 33%组、NDF 37%组MUC2表达量较NDF 29%组依次上调2.65倍(P0.05)、3.13倍(P0.05),其余组无差异(P0.05);十二指肠与回肠有较高的MUC1及MUC2异常表达概率,空肠MUC1及MUC2异常表达概率较低,盲肠MUC1及MUC2异常表达概率均为0.00;NDF 37%组MUC1及MUC2异常表达概率在4组中最高,分别为0.30、0.23;NDF 33%组MUC1及MUC2异常表达概率在4组中最低分别为0.10、0.08。该研究显示,MUC1与MUC2肠表达量可反映肠道健康状态,獭兔十二指肠与回肠是病变感染易发区;日粮纤维可以影响十二指肠及回肠MUC1与MUC2表达,日粮添加33%的NDF有助于塑造较好的肠道内环境。     

草鱼MKLN1基因可变剪接和微卫星序列的多态性

MKLN1基因编码的muskelin蛋白主要通过其羧基端的kelch重复结构域与其它蛋白形成复合物行使功能。通过分析草鱼鳃组织的基因转录谱,发现其中的MKLN1基因存在（CT）₁₅的微卫星序列,通过检测3个不同的草鱼种群,又发现(CT)₉、(CT)₁₀、(CT)₁₁和(CT)₁₃ 4种多态性序列。通过克隆该段MKLN1基因组序列并与斑马鱼和红鳍东方鲀的MKLN1基因组序列比较,发现克隆得到的草鱼基因序列是由一个内含子和两个外显子组成,共编码144个氨基酸。通过进一步调查不同组织该基因的转录本,发现存在内含子剪接和内含子未被剪接的两个转录本。由于内含子序列未被剪接的转录本在内含子中存在“TGA”终止密码子,导致MKLN1基因翻译提前终止,翻译产物为失去部分kelch结构域的muskelin蛋白。相对于内含子正常剪接的转录本,没有被剪接内含子的转录本在各种组织中的表达量要明显低得多。简而言之,本研究发现了草鱼MKLN1转录本中的微卫星序列是来自未被剪切的内含子,而未被剪切的内含子导致该转录本编码部分kelch结构域缺失的muskelin蛋白。     

促黑激素皮质素对能量代谢以及黑色素沉积的影响

促黑激素皮质素（MC）是一类激素的总称。均由共同的前体阿片促黑激素皮质素原（POMC）裂解而来。近年来越来越多的研究表明，中枢黑皮质素系统（CMS）中POMC翻译后的加工产物α-促黑素细胞激素（α-MSH）及其脑内相应受体MCRs是leptin介导能量代谢途径下游的重要中介物。主要就α-MSH及其相应受体MCRs对能量代谢以及黑色素沉积的影响作一综述。     

獭兔Slc7a11基因过表达对黑色素相关基因的影响及SNP检测

【目的】为了深入探究Slc7a11基因对獭兔毛色生成的影响。【方法】运用直接测序结合PCR-SSCP分子标记技术检测163只獭兔Slc7a11基因12个外显子的多态性,同时通过构建pEGFP-N1-Slc7a11过表达载体,转染RAB-9细胞,分析Slc7a11过表达对黑色素生成基因的影响。【结果】兔Slc7a11基因CDS区序列1 509 bp,经预测为碱性不稳定疏水性蛋白;多态性分析发现,Slc7a11基因在4种毛色的獭兔群体中不存在SNP位点,说明Slc7a11在獭兔群体中非常保守;进一步功能研究发现Slc7a11过表达后,黑色素生成相关基因MC1R、SLC24A5相对于阴性对照组,试验组表达量显著增加(P0.05)。【结论】Slc7a11基因可影响黑色素生成相关基因的表达进而影响黑色素形成。     

春性甘蓝型油菜FCA同源基因可变剪接体的克隆及表达研究

【目的】克隆特早熟春性甘蓝型油菜的FCA同源基因(sBnFCA)及其可变剪接体,并分析该基因的表达模式。【方法】根据拟南芥和芸薹属植物FCA基因的DNA序列和cDNA序列设计引物,用PCR和RT-PCR技术克隆特早熟春性甘蓝型油菜"86号"的FCA同源基因(sBnFCA)及其可变剪接体,对克隆基因及编码蛋白序列进行生物信息学分析,构建系统进化树,并用qRT-PCR技术检测sBnFCA基因在不同发育时期根、茎、叶、茎尖中的表达量。【结果】克隆出了sBnFCA基因的全长序列(8 827bp),得到了sBnFCA-γ可变剪接体及一个新的可变剪接体(sBnFCA-5),新的可变剪接体在GenBank中的登录号为KJ701579.1。sBnFCA-5剪接体的CDS全长1 986bp,编码662个氨基酸残基,其推导的氨基酸序列具有2个保守的RRM结构域和1个WW结构域。生物信息学分析显示,sBnFCA-5与已报道甘蓝型油菜BnFCA-γ(AF414188.1)的相似性达99%,与拟南芥FCA-γ的相似性达87%。sBnFCA-5比sBnFCA-γ少了172个碱基序列,是一个跨外显子剪接体。sBnFCA蛋白相对分子质量和理论等电点分别为72.5ku和9.2。基因表达模式分析显示,sBnFCA-γ和sBnFCA-5在苗期、蕾期、花期的根、茎、叶和茎尖组织中都有表达,sBnFCA-γ在蕾期茎尖和花期叶片中表达量较高,sBnFCA-5在蕾期茎尖和花期叶片中表达量极高。【结论】克隆的sBnFCA-5为甘蓝型油菜sBnFCA基因的一个新的可变剪接体,该基因在春性特早熟甘蓝型油菜开花调控中可能有着重要的调节作用。     

中草药提取物对凌云乌鸡公鸡黑色素沉积和体脂含量的影响

为研究复方中草药提取物对凌云乌鸡公鸡药用价值的影响,试验随机选取刚出生的凌云乌鸡公鸡1 800只进行为期120 d的饲养试验,试验鸡群随机分为2组,每组3个重复。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮+中草药提取物300 mg·kg~(-1)。结果表明,试验组凌云乌鸡公鸡肝脏、肾脏、鸡胸肉、皮肤黑色素检测出的含量明显高于对照组,脂肪含量明显低于对照组,肌肉组织中磷脂含量明显高于对照组(P<0.05)。说明饲粮中添加中草药提取物能够改善凌云乌鸡公鸡的黑色素沉积和体脂含量。     

饲喂硬脂酸和癸酸对工蜂合成10-HDA的影响

为探讨硬脂酸和癸酸对工蜂合成10-HDA及其生物合成相关酶基因表达的影响,在工蜂基础日粮中添加不同质量分数的硬脂酸和癸酸,采用高效液相色谱法和半定量RT-PCR技术测定不同日龄段工蜂上颚腺10-HDA的合成量和相关酶基因的表达量。结果显示,工蜂日粮中添加不同质量分数的硬脂酸和癸酸可在一定程度上提高工蜂上颚腺10-HDA的产量,在工蜂5、10、15日龄时,w=5%硬脂酸组和w=1%癸酸组10-HDA的合成量均显著高于空白组(P0.05),且全期10-HDA产量的平均值分别较空白组提高11.82%和13.37%。另外,w=5%硬脂酸组和w=1%癸酸组能使工蜂上颚腺10-HDA的分泌高峰提前,由原来的20日龄分别提前至15日龄和10日龄。同时,添加硬脂酸和癸酸后,工蜂在15日龄前的ETF-β和KAT基因表达量均增加。表明,硬脂酸和癸酸可影响工蜂10-HDA生物合成相关酶基因的表达,促进工蜂上颚腺合成10-HDA,在短时间内提高10-HDA的产量。     

摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响

利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除眼柄后,精巢和卵巢中DMC1表达量均显著性降低(P0.05),而注射眼柄粗提物后精巢和卵巢中DMC1表达显著增高(P0.05);相反,摘除眼柄后,精巢和卵巢中VASA以及卵巢中VTG基因表达量显著增高,但注射眼柄粗提物后性腺中的VASA和卵巢中的VTG表达量显著降低。结果表明眼柄粗提物通过影响生殖相关基因的表达影响凡纳滨对虾的性腺发育。     

日粮能量水平对1.5～3.5月龄獭兔免疫性能及肝脏IFN-γ表达的影响

【目的】研究日粮不同能量水平对獭兔免疫性能及IFN-γ表达量的影响,为獭兔饲养能量标准的制定提供科学依据。【方法】将160只1.5月龄獭兔随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4组,每组40只,分别饲喂消化能为9.7,10.5,11.3和12.1MJ/kg的4种日粮(各日粮其他营养成分一致);预试期7d,正试期2个月;每个月采样1次,进行相关免疫指标的测定。【结果】在日粮能量水平为9.7~11.3 MJ/kg时,獭兔的免疫器官指数、免疫球蛋白含量以及肝脏IFN-γ表达量均随日粮能量水平的升高呈现出一定的规律性。2.5月龄时,Ⅰ组与Ⅳ组肝脏指数、脾脏指数、IgG含量以及肝脏IFN-γ表达量的差异均达到了显著水平(P0.05)。3.5月龄时,Ⅰ组与Ⅲ组的脾脏指数、IgG和SIgA含量及Ⅰ组与Ⅳ组的肝脏IFN-γ表达量均差异显著(P0.05)。【结论】在日粮能量水平为9.7~11.3MJ/kg时,日粮能量水平的升高能够增大獭兔的免疫器官指数,促进獭兔免疫球蛋白的分泌以及肝脏IFN-γ的表达,獭兔日粮较适宜的消化能水平为11.3MJ/kg。     

氟中毒对獭兔血液生理指标的影响

[目的]分析氟中毒对獭兔机体生理功能的影响,为獭兔氟中毒提供血液生理诊断依据。[方法]以9只体重2．O-2．5kg的健康成年獭兔为试验对象,采用氟化钠溶液灌胃建立獭兔氟中毒模型,对试验兔采血测定血液生理指标,比较獭兔氟中毒前后血液相关生理指标、体重、精神状态等变化,分析氟对獭兔机体血液生理功能的影响。[结果]獭兔氟中毒后,獭兔红、白细胞、血小板、中性白细胞、淋巴细胞、单核细胞数与对照组相比明显降低（P〈0．01）;嗜酸性、嗜碱性白细胞数明显增多（P〈0．01）;血红蛋白含量、红细胞比容明显降低。血细胞沉降率明显升高（P〈0．05）;大部分红细胞膜形态出现不规则的星芒状突起。[结论]氟中毒对獭兔血液生理功能有明显的影响。     

三聚氰胺对獭兔的急性毒性试验研究

以獭兔为试验动物测定三聚氰胺对獭兔的半数致死量(LD50),并研究三聚氰胺对其心、肝、脾、肺、肾等重要脏器的损害情况.将獭兔分为5组,每组6只.采用灌胃法,每组按一定剂量灌喂,组间剂量之比为10:8.观察并记录给药后獭兔在48 h内的死亡时间、死亡数及中毒表现等毒性反应,最后根据改进寇氏法计算LD50.解剖死亡的獭兔并...     

中草药饲料添加剂对獭兔肉品质的影响

1材料与方法 1．1供试动物分组设计将108只40日龄断奶獭兔（体重差异不显著）随机分成3组,每组6个重复,每重复6只。3组分别饲喂基础日粮、添加0．3％中草药添加剂的基础日粮和添加0．4％中草药添加剂的基础日粮,分别记作A、B、C。     

彩色獭兔肺炎克雷伯氏菌病诊治报告

对以食欲不振、呼吸困难、打喷嚏为主要临床症状的青年獭兔进行剖检,肺部分实变,颜色变深,切面有白色脓汁样液体流出。采集病料进行病原菌培养、生化试验和动物接种试验表明,该菌为克雷伯氏菌。药敏试验结果表明,庆大霉素、左氧沙星、阿米卡星、环丙沙星和诺氟沙星都可以用作预防和治疗该病的药物。该诊治报告表明,克雷伯氏菌也是引起家兔呼吸道疾病的病原菌之一,应引起养兔生产者的重视。     

獭兔MITF基因部分外显子多态性研究

M ITF是色素细胞发育成熟中的重要因子,参与黑素生成的调控,从而影响动物毛色。采用PCR测序技术,检测了白色獭兔、海狸色獭兔样本中MITF基因5个外显子区域的多态性。结果表明,外显子2,4未表现出多态,外显子1,5,7中存在一些多态位点,这些多态位点存在于白色个体之间或白色和海狸色个体之间。表明MITF中部分多态与獭兔毛色有显著关联,说明MITF是影响毛色的关键基因。     

中草药饲料添加剂对獭兔生长性能的影响

选取断奶獭兔32只,随机分成4组,分别采用添加中草药0g／kg（Ⅰ,对照）、6g／kg（Ⅱ）、9g／kg（Ⅲ）和12g／kg（Ⅳ）的饲料饲喂60d,测定各组初始体重、期末体重以及饲料消耗量,以了解中草药饲料添加剂对獭兔增重和料肉比的影响,并对各组经济效益进行了比较。结果表明,试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ平均日增重分别比对照组Ⅰ提高13．67％、18．28％、20．92％,且差异显著（P〈0．05）;对照组Ⅰ、试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的料肉比分别为3．82：1、3．59：1、3．51：1和3．46：1,试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的料肉比分别比对照组Ⅰ降低了6．02％、8．11％和9．42％,且差异显著（P〈0．05）;试验组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ经济效益分别比对照组提高19．8％、25．8％和29．1％,经济效益显著高于对照组（P〈0．05）。     

影响獭兔离体肠道平滑肌收缩的因素

[目的]探讨影响獭兔离体肠道平滑肌收缩的因素。[方法]以獭兔十二指肠平滑肌为试验材料,以平滑肌收缩波的振幅和周期为评价指标,考察影响试验的各主要因素。[结果]在(36.5±0.5)℃台氏液中,獭兔离体肠管的存活时间和保质期最长,振幅最稳定,肾上腺素使离体肠管平滑肌收缩幅度减弱,乙酰胆碱、氢氧化钠及氯化钙均导致平滑肌收缩频率及幅度升高,收缩力增强。[结论]獭兔离体肠道平滑肌易受到温度、pH、其他化学因素及药物的影响。     

日粮粗纤维水平对断乳力克斯兔腹泻率、消化道pH和盲肠菌群的影响

为了探讨日粮中粗纤维水平对断乳仔免腹泻率的影响及其低纤维型腹泻的发生机制，选择30～35日龄健康力克斯免40只，随机分成4组，每组10只。在其他营养相近的基础上，分别饲喂粗纤维含量为7％、9％、12％和14％的日粮。观察不同纤维日粮对试兔腹泻率、肠道pH、盲肠挥发性脂肪酸（VFA）和微生物菌群的影响。研究表明：粗纤维含量对腹泻率有重大影响，中高纤维日粮（12％和14％）没有发生腹泻，而低纤维日粮组（7％和9％）的腹泻率分别为59．33％和20．67％，组间差异极显著（p〈0．01）；低纤维水平日粮组（7％、9％）的试验兔，胃、空肠、结肠、盲肠的pH值均高于中高纤维组（12％、14％），差异达显著或极显著水平（P〈0．05或P〈0．01）；盲肠总挥发性脂肪酸随粗纤维含量的增加而上升，但差异不显著（P〉0．05）。乙酸随粗纤维含量的增加而上升，CF14％组极显著的高于7％组（P〈0．01）。丙酸和丁酸的变化不显著（P〉0．05）；纤维含量对盲肠主要微生物菌群有较大影响。从整体来说，有益菌（双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌和消化球菌）以CF12％组占优，CF14％次之，CF7％组最低。其中双歧杆菌各组间差异均达极显著水平（p〈0．01）。而大肠杆菌与之相反，CF7％组检测出沙门氏菌。其他各组没有发现沙门氏菌，也未检出魏氏梭菌。该研究揭示了低纤维日粮使家免消化道内环境（如pH、VFA等）发生变化，从而导致肠道菌群失调。是发生腹泻的主要机制。