降温平衡对辽宁绒山羊冻精质量的影响

降温平衡是辽宁绒山羊冻精制作过程中必不可少的技术环节之一。通过降温平衡过程．添加抗冻成分可以扩大精液量，改变精子的内外环境条件，增强精子的抗冷冻能力。其中，降温平衡的时间和速率对于冻精制作效果具有明显的影响作用。本试验的目的就是通过试验．比较不同的降温时间、降温速率对精子解冻后的活率、存活时间、顶体完整率3项指标进行比较，从中摸索出最佳的降温平衡方法。     

绵羊精液平衡过程中降温速率对精子品质的影响

本试验研究了河南大尾寒羊精液冷冻颗粒制作过程中,100、150、200和250 mL 4种不同体积水浴平衡降温速率对冻精精子品质的影响。结果表明：①4种水浴平衡处理的降温时间在2.2～3.9 h,以100 mL水浴降温速率最大,250 mL水浴降温速率最小,200和250 mL水浴处理降温速率较为接近。②精液冷冻水浴平衡降温速率前30 min,降温速率应控制在0.73～0.74 ℃/min之间;30～90 min降温速率应控制在0.11～0.12 ℃/min之间。③水浴平衡时的降温时间3 h较为适宜,250 mL水浴平衡降温的处理对精子造成的冷打击最小,制作的冻精解冻后的精子品质最高。④精子活率：250 和200 mL处理间差异不显著(P＞0.05);250、200 mL处理与150、100 mL处理间差异显著(P＜0.05)。⑤畸形率：250 mL水浴平衡条件下最低,100 mL水浴平衡条件下最高。250与200 mL处理间精子畸形率差异不显著(P＞0.05);250与150、100 mL处理间精子畸形率差异显著(P＜0.05)。⑥顶体完整率：250和200 mL较高,两处理间差异不显著(P＞0.05);250和200 mL处理与150及100 mL处理间精子顶体完整率差异显著(P＜0.05)。     

波尔山羊除精浆冷冻精液的试验研究

以波尔山羊精液为试验材料,通过二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000 r/min离心处理,制作细管冻精,并进行活力、顶体完整率、存活时间以及超微结构的观察分析.结果表明,经离心处理的冻精精子活率显著优于对照组(P<0.05),精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),精子存活时间处理间差异不显著,除精浆可使精子所受冷冻损伤大为减轻,显著提高冻后精子品质.     

在4℃降温平衡过程中0.2g/L咖啡因与精子共孵育时间对猪颗粒冻精质量的影响

实验旨在探讨在猪精液于4℃平衡2 h过程中0.2 g/L咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h,对颗粒冻精解冻后精子活率、活力、质膜完整性和顶体完整性以及解冻后精子体外存活时间等指标的影响,以期进一步提高猪颗粒冻精质量。实验结果表明,在精液冷冻之前,咖啡因不同平衡时间组的精子活率和活力都呈现出升高趋势,但与对照组差异不显著;咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组的精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组,前3组之间差异均不显著。而颗粒冻精解冻后,咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组精子活率和活力均显著高于对照组,其中共孵育1 h组显著高于其他3组(P0.05),共孵育2 h组和0.5 h组间差异不显著(P0.05);共孵育2 h组精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组和共孵育0.5 h、1 h组(P0.05),但后3组之间差异不显著;共孵育2 h组精子存活时间显著低于对照组、共孵育1 h和0.5 h组(P0.05),其中共孵育1 h组精子存活时间最长,达7 d以上。总之,在精液4℃降温平衡过程中咖啡因与精液共孵育1 h对冷冻后精子质量最有利,解冻后精子活率和活力显著高于其他各组,且解冻后精子体外存活时间最长。     

不同稀释液对陶赛特肉羊细管冻精品质的影响

利用五种稀释液制作的细管冻精,通过精子项体完整率、畸形率和存活时间等指标的对比观察,筛选出最佳细管冻精稀释液。     

浅谈制作牛细管冷冻精液的无菌操作方法

本文阐述了制作牛细管冷冻精液过程中,从采精前准备、精液采集、精液稀释、降温平衡到精液分装、制冻等各个工作环节的无菌操作方法。     

冷冻温度对牛精子复苏率及降温速率变化规律的研究

[目的]为了探讨温度变化对牛精子复苏率的影响,找到降温度变化规律。[方法]利用电脑程控冷冻仪、自动数字测温仪,测定精液在不同温度冷冻精子复苏率变化。[结果]表明,精液在-98℃冷冻精子复苏率最高;在-86- -118℃冷冻精子复苏率较高,精液相变适宜降温速率为35℃/min。[结论]控制精液发生相变阶段的降温速率是冻精制作成败的关键。     

不同稀释液生理参数对关中奶山羊精液 保存及冷冻效果的研究

[目的]探讨了不同pH值、渗透压的稀释液对关中奶山羊冻精品质的影响,以确定关中奶山羊精液最佳保存与冷冻效果。[方法]通过显微检测在不同pH值、渗透压的稀释液处理对降温前、平衡后与解冻后的精子的活率、复苏率、精子顶体完整率、精子畸形率及精子冻后存活时间等指标进行评估。[结果],关中奶山羊精液稀释液pH值为7.3时,降温前、平衡后与解冻后的精子活率最高,分别达到0.742±0.011%、0.645±0.011%、0.489±0.012%;冻后活率、复苏率及解冻后顶体完整率分别达到0.431±0.009%、63.1±0.427%、65.7±2.018%;精子存活时间在降温前、平衡后及解冻后分别达到12.50±0.141h、11.96±0.186h、11.61±0.753h,冻后 8 h 活率0.52±0.014%;当渗透压为Δ0.754℃时,其精子的保护效果最佳,降温前、平衡后与解冻后的精子活率分别达到0.752±0.045%、0.671±0.024%、0.649±0.036%;冻后活率、复苏率及解冻后顶体完整率分别达到0.481±0.019%、63.6±0.377%、69.9±1.068%;精子存活时间在降温前、平衡后及解冻后分别达到11.82±0.165h、11.94±0.145h、11.70±0.753h,冻后 8 h 活率达到0.43±0.033%。[结论]关中奶山羊精液稀释液最合适的pH值是7.3,最佳渗透压为Δ0.754℃,这一结果对奶山羊稀释液配方优化提供了一定的理论指导。     

提高茸鹿冻精质量关键技术

为进一步提高茸鹿冻精质量,对影响精液冷冻效果的关键因素进行了试验。结果评估得出:精液冷冻宜采用两步冷冻法,细管距液氮面2~3cm,冷冻时间5~7min;冷冻稀释液优先顺序为TriladyTrisBTrisA,Trilady稀释液从经济适用和冷冻效果上看最优;鲜精质量与冷冻效果密切相关,鲜精活力与冻存复苏率、解冻后精子活力呈正相关,R2分别为0.630 6和0.990 2;平衡时间在4℃宜平衡2~3h;平衡方法宜采用水浴中逐渐降温的方法。结果表明:通过进一步优化精液冷冻关键影响因素,可明显提高茸鹿冻精质量。     

犬冷冻精液技术的试验研究初报

介绍了犬微型细管(0.25 mL)冻精制作方法,优选出冷冻稀释液及稀释操作程序。制作结果:冷冻精液解冻活力达0.405±0.058,精子顶体完整率为(43.58±6.73)%,复苏率达54.6%。精子畸形率为(13.80±4.26)%;不同品种公犬鲜精和冻精品质差异不大,但个体差异显著,有的耐冻性很差;不同初始冷冻温度下,解冻效果各异,以-111~-130℃冷冻效果较好;冷冻时间10~15 min为好;稀释方法还待进一步探讨。     

不同冷冻温度对陶赛特肉羊冻后精子活力的影响

采集2只陶赛特肉羊的精液在不同冷冻温度下制作冻精,研究不同冷冻温度对其精子的冻后活力的影响。结果表明：在-105&#177;5℃--135&#177;5℃的温度下制作的冻精,解冻后的精子活力和精子复苏率非常显著地高于在-75&#177;5℃～-105&#177;5℃的温度下制作的冻精（P〈0．01）;比在其他2种区间的温度冷冻下、解冻后的精子活力也好,差异显著（P〈0．05）。     

奶牛性控冻精人工授精技术要点

<正>奶牛性控冻精生产技术原理是利用XY精子分离技术,通过流式细胞精子分离仪,将奶牛公牛的X精子和Y精子进行有效分离,将所分离收集到的X精子,通过平衡、稀释、精子分装机装管,冷冻制成奶牛性控冻精细管。利用性控冻精细管对奶牛实施人     

不同剂型及稀释精液平衡时间对藏獒冻精品质的影响研究

为了探讨每剂含不同前进运动精子数(≥1 000万个和≥2 000万个)和稀释精液不同平衡时间(1 h、2 h、3.5 h)对藏獒冻精品质的影响,试验比较了0.25 m L细管剂型藏獒冻精解冻后精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率、精子37℃存活时间。结果表明:每剂含前进精子数≥2 000万个与≥1 000万个相比,藏獒冻精解冻精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率差异不显著(P0.05);而每剂含前进运动精子≥2 000万个组的藏獒冻精解冻后37℃存活时间优于每剂含前进运动精子数≥1 000万个组,且差异显著(P0.05)。藏獒稀释精液平衡2 h组的冻精活力显著高于平衡1 h组和3.5 h组(P0.05),而平衡1 h组和3.5 h组间差异不显著(P0.05)。冻精顶体完整率以平衡2 h组最高,为(41.00±1.47)%,与平衡3.5 h组间存在显著差异(P0.05)。平衡2 h组的冻精畸形率低于平衡1 h组和3.5 h组。说明藏獒0.25 m L细管剂型以每剂含前进运动精子数≥2 000万个,稀释精液平衡时间以2 h为宜,可获得较好的冷冻效果。     

近交五指山小型猪精液冷冻保存技术的研究

用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。     

氟板法制作家兔冻精颗粒试验初报

本试验将大家畜氟板制作经验移用到家兔上,探索出用氟板法制作家兔冻精颗粒的新路子;同时,为观测其冷冻效果,又作了与铜纱网法的对比试验.由于氟板导温性能差,升降温度较慢,恰好与家兔精子需要慢速降温的性能相一致.试验结果表明,氟板法制作冻精颗粒工艺简便,取用方便;以56～60℃的快速干解冻为好,受胎率平均为53.06%.     

提高牛冷冻精液质量的技术研究

冻精生产的过程实质上是一个精液降温的过程,利用在稀释液中加入抗冻剂、营养物质,调整渗透压、pH值等方法,为精子提供一个适宜的生存环境,保证精子细胞膜完整、不被损害[1-2].     

不同冷冻程序对萨能奶山羊精液质量的影响

为了探究萨能奶山羊细管冻精最适冷冻程序,本试验设置5个不同的冷冻程序[在5～-10℃温区内,各组降温速率相同（6℃/min）,在-10～-140℃危险温区内设置5个不同梯度的降温速率（25℃/min,35℃/min,40℃/min,55℃/min,65℃/min）]用于程序化冷冻中。试验利用全自动细管精液程控冷冻仪编制冷冻程序,通过casa系统测定精液在不同冷冻程序下精子活力变化,同时利用特异性荧光探针（异硫氰酸镧-花生凝集素,FITC-PNA)检测解冻后精子顶体完整率,用低渗精子肿胀法（HOST)检测解冻后精子质膜完整率。结果表明,冷冻程序C组（5～-10℃,降温速率6℃/min;-10～-140℃,降温速率40℃/min）解冻后精子活力、质膜完整率和顶体完整率最高,分别达到60.75%、38.10%和71.01%,均显著高于其他组（P<0.05）。在危险温区内,降温速率为40℃/min可以较好地保证冷冻萨能奶山羊精子的活力和质膜功能,同时利用程序化冷冻程序C组可显著提高精子的受精能力,C组的降温速率可以提高冷冻萨能奶山羊解冻后精液质量。     

野生梅花鹿附睾尾精子冷冻保存的初步试验

以北海道野生梅花鹿(Cervus nippon yesoensis)的附睾为材料,初步探讨不同降温处理方法,即急速降温处理法(降温速度为4.20℃/min)与缓慢降温处理法(降温速度为0.21℃/min)对附睾尾部精子冷冻保存的影响。结果表明:两种降温处理方法对附睾尾精子降温、平衡及冷冻解冻后的精子活率、畸形率和顶体完整率等指标的影响无明显的差异(P>0.05)。     

平衡时间对牛冷冻精液活力影响

从正常采精的公牛群中，随时选择２～６周岁的种公牛２８头，测试公牛的精液经不同的平稳时间后冷冻，精子活力的变化。结果表明：平衡时间不同，精子的冻后活力表现出不同的差异，以平衡时间４～５小时冷冻为宜     

除去精浆对波尔山羊冷冻精液品质的影响

以波尔山羊精液为实验材料,采用二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000r/min离心处理,制作细管冻精,并进行超微结构分析.结果表明:经离心处理的冻精精子活率极显著优于对照组(P<0.01),精子顶体完整率极显著高于对照组(P<0.01) ,精子存活时间不同处理间未见显著差异(P>0.05).精浆中包含有多种物质,充当精子载体的作用,并可稀释精子,为精子提供代谢物质.试验中除去精浆后精子活率、 顶体完整率均优于对照组,表明除去精浆对冷冻后的精子品质有提高作用.