猪肌肉生长抑制素基因的研究进展

肌肉生长抑制素(MSTN)是骨骼肌生长发育的负调控因子。其活性的丧失或降低，会引起动物肌肉的过度发育，表现为双肌征状。最早在小鼠中发现该基因，随后通过荧光原位杂交法将猪MSTN基因定位于15q2.3上，进而分析了MSTN以及其分子结构，比较。MSTN基因在不同物种间的同源性。     

miR-181a和miR-181d-5p对猪前体脂肪细胞成脂分化调控的研究

【目的】 探究miR-181a和miR-181d-5p在荣昌猪原代前体脂肪细胞分化中的作用及机制。【方法】 通过比对种子序列差异分析miR-181a和miR-181d-5p在猪、人、大鼠和小鼠不同物种间的序列保守性;实时荧光定量PCR检测miR-181a和miR-181d-5p在猪肌肉和背部皮下脂肪组织中表达;利用miRandn和TargetScan在线软件预测miR-181a和miR-181d-5p的靶基因,并进行GO和KEGG富集分析;使用RNAhybrid在线软件预测miR-181a和miR-181d-5p与其靶基因的结合自由能。取7日龄雄性荣昌猪背部皮下脂肪组织分离原代前体脂肪细胞。分别设计miR-181a和miR-181d-5p的靶基因野生型和突变型载体,并与对应的miRNA共转染前体脂肪细胞,进行双荧光素酶报告基因试验验证miRNA与靶基因的靶标关系,测定miR-181a和miR-181d-5p与其靶基因的结合情况。构建miR-181a和miR-181d-5p的模拟物（miR-181a mimics、miR-181d-5p mimics）、抑制物（miR-181a inhibitor、miR-181d-5p inhibitor）、阴性对照（NC）及其靶基因的干扰siRNA （Gene-siRNA）,转染细胞6 h后进行诱导分化。6 d后,分别对不同处理的细胞通过实时荧光定量PCR检测基因表达情况,油红O染色鉴定甘油三酯生成情况。【结果】 保守性分析结果表明,miR-181a和miR-181d-5p在猪、人、大鼠和小鼠间具有高度序列保守性;miR-181a与miR-181d-5p在猪不同组织中定量结果显示,miR-181a与miR-181d-5p在猪脂肪组织中特异性高表达;靶基因预测结果表明,miR-181a与miR-181d-5p的靶基因分别为线粒体甘油3-磷酸脱氢酶（GPD2）和环腺苷酸反应元件（CREB1）;GO和KEGG功能富集分析发现,miR-181a和miR-181d-5p的靶基因可以抑制甘油三酯生成,调节脂肪细胞分化,且miR-181a和miR-181d-5p与其靶基因的自由结合能均<－87.8 kJ/mol;双荧光素酶报告基因试验结果表明,转染miR-181a与miR-181d-5p的mimics可以极显著抑制靶基因3'-UTR野生型双荧光素酶报告载体中的荧光素酶活性（P<0.01）,但不影响靶基因突变型双荧光素酶报告载体中的荧光素酶活性。诱导分化结果表明,与未分化脂肪细胞（0 d）相比,miR-181a表达量在分化的第4天显著升高（P<0.05）,到第6天达到极显著差异（P<0.01）;miR-181d-5p及GPD2和CREB1基因表达量在分化的第4、6天均极显著升高（P<0.01）。miR-181a和miR-181d-5p的细胞转染试验均得到相似结果,与NC组相比,mimics组miR-181a与miR-181d-5p的表达量均极显著上升（P<0.01）,inhibitor组miR-181a与miR-181d-5p表达量均极显著下降（P<0.01）;mimics和siRNA组的GPD2与CREB1基因表达量均极显著下降（P<0.01）,inhibitor组GPD2与CREB1基因表达量均极显著上升（P<0.01）;mimics和siRNA组PPARγ和C/EBPα基因的相对表达量均显著或极显著上升（P<0.05;P<0.01）,inhibitor组PPARγ和C/EBPα基因的表达量均显著下降（P<0.05）;油红O染色结果表明,与NC组相比,mimics和siRNA组细胞脂滴数目增加,inhibitor组细胞脂滴数目减少。【结论】 miR-181a和miR-181d-5p可以分别靶向结合GPD2和CREB1基因3'-UTR区域序列,降低GPD2和CREB1基因的表达,促进猪前体脂肪细胞成脂分化。     

猪肌肉生长抑制素基因启动子的克隆与鉴定

利用PCR方法从猪基因组DNA中扩增了1.2 kb的肌肉生长抑制素(myostatin)基因启动子序列。并进一步以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,构建了真核表达载体MSTNPro-EGFP;通过转染C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞和猪成纤维细胞,对猪myostatin基因启动子的转录调控活性进行鉴定。结果表明:猪myostatin基因启动子可以启动GFP在C2C12细胞中的转录和表达,而将猪MSTNPro-EGFP载体转染猪胎儿成纤维细胞后并未观察到GFP的表达,说明myostatin基因表达的肌肉特异性源于启动子的转录特异性。     

猪肌肉生长抑制素基因和肌细胞生成素基因多态性对早期生长性状的影响

为了分析肌肉生长抑制素(MSTN)和肌细胞生成素(MyoG)2个基因对猪生长性状的影响,采用PCR-RFLP方法检测沈阳地区3个引进猪种(长白、大白和杜洛克)MSTN和MyoG基因的多态性。结果显示:在3个种群内MSTN和MyoG基因都存在AA、AB和BB 3种基因型,各基因均处于遗传平衡状态,3个种群处于中度多态,具有较丰富的遗传多态性;单基因分析表明:MSTN基因长白猪、大白猪BB基因型的初生重显著高于AB型(P<0.05);而对杜洛克猪初生重无显著影响(P>0.05);MyoG基因大白猪BB基因型的初生重显著高于AA型(P<0.05);而对长白猪、杜洛克猪初生重无显著影响(P>0.05),2个基因初生重的优良基因型是BB型。2个基因合并分析表明:合并基因型对长白猪、杜洛克猪的初生重有显著影响(P<0.05),对大白猪的初生重有极显著影响(P<0.01),合并后BBBB为猪初生重的有利基因型,合并基因型的遗传效应显著高于单基因型效应。单基因及合并基因分析均表明2个基因对3个种群的断奶重无显著影响(P>0.05)。综上所述,2个基因的多态性对猪的初生重有着显著的影响,合并效应高于单基因效应之和。     

中草药添加剂对生长猪内脏器官与肌肉成分影响的研究

选取12头杜大长三元杂生长猪进行消化试验后继续进行屠宰试验,随机分成3组.组Ⅰ为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ组为试验组,在基础日粮中分别添加0.1%复合饲用抗生素和1%中草药添加剂复方B,以研究中草药添加剂对生长猪内脏器官与肌肉化学成分的影响,并与饲用抗生素的效果进行横向比较.结果表明:中草药组试验猪的主要内脏器官相对重量有所降低,避免了内脏器官的功能性增生.肝脏与脾脏相对重量为抗生素组最大(P＞0.05);组Ⅲ的试验猪背最长肌DM、CP、和ASH含量最高(P＞0.05),对半膜肌的化学成分无改变作用.     

ESM1基因对崇仁麻鸡生长性状的影响

本研究利用崇仁麻鸡差异性状的重测序结果,筛选与其生长性状相关的SNP、SV和InDel等位点或结构信息并进行大群验证。结果发现:内皮细胞特异性分子-1(ESM1)基因在崇仁麻鸡群体中检测到3个多态位点,对崇仁麻鸡的生长性状有着显著或极显著影响。ESM1基因在崇仁麻鸡的多个组织中均能检测到表达,经软件预测发现,ES-3位点变异可能会引起ESM1蛋白结构或功能的变化。研究结果表明,ESM1基因对崇仁麻鸡的生长性状有一定影响,但能否作为崇仁麻鸡生长性状的分子标记还需要进一步的确认。     

猪细环病毒1a型ORF1基因的克隆与序列分析

为明确猪细环病毒(porcine Torque teno sus virus,PTTSuV)1a型福建株ORF1基因的特征,本研究采用分段扩增的办法从PTTSuV 1a型感染阳性粪便中扩增PTTSuV 1a型福建株ORF1基因,对PCR扩增产物胶回收克隆测序后利用SeqMan软件拼接出完整的PTTSuV 1a型福建株ORF1基因,通过分子生物学软件对其编码蛋白进行生物信息学分析。结果表明,PTTSuV 1a型福建株ORF1基因全长为1 947 bp,编码648个氨基酸,其理论等电点为10.06。核苷酸同源性比对结果表明,本试验PTTSuV 1a型福建株ORF1基因和PTTSuV 1a型TTV1 Bj2-1株(GenBank登录号:HM633243)同源性最高,达99.7%。利用Mega 6.06绘制其遗传进化树,可见PTTSuV 1a型ORF1基因在遗传进化上呈两个大的遗传进化分支(分支Ⅰ和分支Ⅱ),分支Ⅰ又可分为两个小的分支(Ⅰa和Ⅰb),本研究为丰富福建源PTTSuV 1a型分子流行病学数据库奠定基础。     

荣昌猪和长荣猪肌肉生长抑制素基因表达规律的研究

为了研究荣昌猪和长荣猪胴体瘦肉率和骨骼肌肌肉生长抑制素( MSTN)基因表达量的变化规律,试验采用2×2因子试验设计,荣昌猪和长荣猪(两种基因型猪)分别饲喂按中国瘦肉型猪饲养标准和荣昌猪饲养标准配制的日粮,共4个处理,每个处理6个重复,在20 kg、35 kg、50 kg、80 kg和110 kg时每个重复屠宰1头.结...     

猪肌浆中某些元素含量与肌肉和骨骼生长的关系

研究了定远猪及其杂交F1代猪肌浆中Ca、P、Zn、Mn、Mg等元素含量与肌肉生长和后肢发育之间的相关性。结果表明，杂交使得猪肌浆中的Ca含量显著降低(P＜0.01)，导致肌浆Ca、P比例改变并升高；肌浆Mg、Mn、Zn含量变化不明显。杂交F1代猪肌浆中Ca、Zn与肌肉蛋白质含量间呈较高的正相关，r=0.84～0.91，(定远猪r=0.40)，肌浆Ca、Zn水平可能是肌肉生长的指示剂。肌浆Mn、Zn含量与后躯及后肢骨骼发育状况间的关系尚未能肯定。     

中草药添加剂对生长猪内脏器官与肌肉成分影响的研究

选取12头杜大长三元杂生长猪进行消化试验后继续进行屠宰试验,随机分成3组。组Ⅰ为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ组为试验组,在基础日粮中分别添加0.1%复合饲用抗生素和1%中草药添加剂复方B,以研究中草药添加剂对生长猪内脏器官与肌肉化学成分的影响,并与饲用抗生素的效果进行横向比较。结果表明:中草药组试验猪的主要内脏器官相对重量有所降低,避免了内脏器官的功能性增生。肝脏与脾脏相对重量为抗生素组最大(P>0.05);组Ⅲ的试验猪背最长肌DM、CP、和ASH含量最高(P>0.05),对半膜肌的化学成分无改变作用。     

荣昌猪和长荣猪肌肉生长抑制素基因表达规律的研究

为了研究荣昌猪和长荣猪胴体瘦肉率和骨骼肌肌肉生长抑制素(MSTN)基因表达量的变化规律,试验采用2×2因子试验设计,荣昌猪和长荣猪(两种基因型猪)分别饲喂按中国瘦肉型猪饲养标准和荣昌猪饲养标准配制的日粮,共4个处理,每个处理6个重复,在20 kg、35 kg、50 kg、80 kg和110 kg时每个重复屠宰1头。结果表明:荣昌猪和长荣猪的瘦肉率随体重的增加呈降低的趋势,背最长肌中MSTN基因的表达量呈上升的趋势;在相同体重条件下,荣昌猪的胴体瘦肉率显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地低于长荣猪,其背最长肌中MSTN基因表达均明显高于长荣猪,而日粮营养水平及品种×营养水平交互作用对猪胴体品质和MSTN基因的表达量没有明显影响(P>0.05)。     

肌肉生长抑制素基因的研究进展

肌肉生长抑制素(MSTN)基因是畜禽生产力的重要候选基因,并成为提高畜禽肉产量的研究的焦点.近年来,有关牛、猪、斑马鱼MSTN基因的研究不断增加,该领域的深入探讨可能对畜牧生产和医学上产生深远影响.本文较全面地介绍了MSTN基因的发现、基因的结构、基因的表达、作用机理及发现的突变点和多态性,评价了研究MSTN基因的意义.     

肌肉生长抑制素基因的研究进展

肌肉生长抑制素(MSTN)基因是畜禽生产力的重要候选基因,并成为提高畜禽肉产量的研究的焦点。近年来,有关牛、猪、斑马鱼MSTN基因的研究不断增加,该领域的深入探讨可能对畜牧生产和医学上产生深远影响。本文较全面地介绍了MSTN基因的发现、基因的结构、基因的表达、作用机理及发现的突变点和多态性,评价了研究MSTN基因的意义。     

肌肉生长抑制素基因的研究进展

肌肉生长抑制素（Myostatin）是骨骼肌生长发育的负调节因子，属于TGF－β超家族成员。Myostatin基因的结构与功能的深入研究对畜牧业、医疗医药业具有重要意义和应用前景。本文主要对肌肉生长抑制素基因（Myostatin）的结构、同源性、组织特异性及生物学的功能的研究现状进行了综述，并讨论其应用前景。     

猪RYR_1基因的PCR-RFLP分析和氟烷基因利用的研究

采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析技术，以血液或猪毛提取ＤＮＡ为模板，建立了快速和简便的从分子水平上鉴别ＲＹＲ１基因型的方法，其准确率为１００％。不同品种（系）初步配套杂交结果显示：皮特兰×抗应激猪的胴体品质优于杜洛克×抗应激猪（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），而肉质优于皮特兰×应激群猪（Ｐ＜０．０１），并提出了氟烷基因的利用策略     

莱芜猪肌肉肌纤维类型的组成与肉质关系的研究

采用2因子多水平有重复试验的方法,对14头纯种育肥莱芜猪不同屠宰体重(A因子)及不同解剖部位(B因子)的新鲜肌肉直接冰冻切片,并进行琥珀酸脱氢酶(SDH)的组织化学处理,结果表明:莱芜猪肌肉的结构单位肌纤维是异质的,即肌纤维类型有3种,红肌纤维(RF)、白肌纤维(WF)和中间型肌纤维(IF)。随屠宰体重的提高,肌肉中RF含量显著增大(P相似文献   

品种和体重对猪肌肉生长抑制素表达的影响

本文旨在研究猪的体重和品种对其背最长肌的肌肉生长抑制素基因表达的影响,并对猪100kg时的胴体性状与肌肉肌肉生长抑制素基因表达量的相关性进行分析。试验采用荧光定量PCR方法,以β-actin基因为内标,研究不同体重(20、50和100kg)和品种(汉普夏猪和长白×撒坝猪)对猪背最长肌的肌肉生长抑制素基因表达的影响,同时考察试验猪在100kg时的胴体肉质指标。结果表明:①猪背最长肌中肌肉生长抑制素的表达随体重的增加呈上升的趋势(P>0.05);②相同体重条件下长撒猪背最长肌中肌肉生长抑制素表达均显著高于汉普夏猪(P<0.05),其中20kg时达到极显著水平(P<0.01);③肌肉生长抑制素的表达与瘦肉率呈极显著的负相关(P<0.01),与背膘厚则呈极显著的正相关(P<0.01),与滴水损失和肌内脂肪的相关性不显著(P>0.05)。本研究结果表明猪背最长肌的肌肉生长抑制素基因的表达量随体重增加而提高,品种间差异显著,并且肌肉生长抑制素基因的表达与瘦肉率、背膘厚存在显著的相关性。     

IGF-1基因5′调控区DNA序列多态性与新扬州鸡肌肉产量关系的研究

以150只非同胞新扬州鸡为材料,采用PCR-RFLP法检测了该基因5′调控区DNA序列多态性,并运用线性模型统计方法分析了多态性与肌肉生长相关性状的关系。结果表明:新扬州鸡IGF-1基因5′调控区存在两种不同DNA序列,经Pst1酶切后出现3种基因型(“-/-”、“+/-”、“+/+”),-/-基因型频率为16%,+/-基因型频率为45.33%,+/+基因型频率为38.67%,基因型分布符合“哈代-温格伯定律”(P>0.05)。各基因型鸡的12周龄体重、屠体重、全净膛重、胸肌肉重和腿肌肉重的最小二乘均数存在“-/-”>“+/-”>“+/+”的趋势,且-/-基因型显著高于“+/+”型(P<0.05),-/-基因型胸腿肌肉总产量比+/+型高8.76%。基因型效应分性别考察与合并考察有相似的趋势。而胸肌率、腿肌率和全净膛率各基因型间差异均不显著(P>0.05)。     

植酸酶对生长肥育猪生长性能、营养素利用、胴体和肌肉品质影响的研究

选用60头平均体重28．3kg的杜长大杂种猪，随机分成2组，每组30头。在生长期（28～58kg）每组分成3圈（重复），每圈10头；在肥育期（58～95kg）每组分成6圈（重复），每圈5头。试验组饲粮中添加植酸酶750FTU／kg（FTU为植酸酶的活性单位），对照组饲粮中不添加植酸酶。生长期和肥育期饲粮钙磷比分别为1．15：1和1．18：1。试验结果显示，（1）饲粮中添加植酸酶使生长期、肥育期和生长肥育全期的平均日增重显著提高（P〈0．05），对平均日采食量和料重比无显著影响（P〉0．05）；（2）添加植酸酶对胴体和肌肉品质的影响不明显（P〉0．05）；（3）添加植酸酶对生长期养分（干物质、有机物、粗蛋白质、粗灰分、钙、磷）的消化率无显著影响（P〉0．05），但显著提高肥育期养分的消化率（P〈0．01）；（4）添加植酸酶未能提高生长期养分的吸收量（P〉0．05），但显著提高肥育期粗灰分（P〈0．01）和磷（P〈0．05）的吸收量；（5）添加植酸酶使生长期粪中铜的含量显著降低（P〈0．05），但对其他养分含量无显著影响（P〉0．05），添加植酸酶对肥育期粪中养分含量无显著影响（P〉0．05）；（6）添加植酸酶对生长期粪中养分的排泄量均无显著影响（P〉0．05），但有减少铜排泄量的趋势（P〉0．05），添加植酸酶使肥育期磷的排泄量显著降低（P〈0．05），并有降低氮和金属微量元素（铜、锌、铁、锰）排泄量的趋势（P〉0．05）。试验结果表明，饲粮中添加植酸酶可促进猪生长肥育期的增重，提高肥育期对养分的消化利用，降低生长期粪中铜的含量，减少肥育期粪中磷的排泄量；添加植酸酶对胴体和肌肉品质无不良影响。     

胰岛素样生长因子-1基因多态性与猪部分生产性能的关系

采用PCR－RFLP对南昌白猪（92头）和大约克夏猪（170头）的IGF－1基因的179bp片段进行了扩增，并用HhaI酶切，产生两个等位基因A（151＋28bp)和等位基因B（116＋35＋28bp)。分析了不同基因型对个体初生重、2月龄重、4月龄重、6月龄重、料重比、背膘厚和瘦肉率等生产性能的影响。结果表明，在南昌白猪中，AA型猪比AB型猪初生重大，差异显著（P＜0.05)；在大约克夏猪中，BB型猪比AB型猪的6月龄体重大，差异显著（P＜0.05)；AA型猪比AB型和BB型猪瘦肉率低，差异极差著（P＜0.01)。