精浆外泌体的转运机制及生物学功能研究进展

精浆外泌体是由雄性性腺及副性腺上皮细胞分泌至雄性生殖道中,直径为30～100 nm的膜性小囊泡,其构成精子发育的主要环境,是精子成熟过程中不可或缺的一部分.精浆外泌体中富含蛋白质、脂质、核酸等物质,这些物质通过独特的转运机制被运送至精子表面以促进精子形态与功能的完善,精浆外泌体在提高精子活力、抑制精子提前获能、抗精子氧...     

外泌体的生成及其在畜禽繁殖中的作用

细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是一种由细胞分泌的膜性囊泡结构。外泌体是最小的细胞外囊泡，通过激活细胞特异性受体和信号通路来控制其生物发生，由转运所需的内体分选复合物(endosomal sorting complexes required for transport, ESCRT)依赖性或非依赖性途径调节。外泌体在免疫、中枢神经系统的发育、组织再生、妊娠、精子发育成熟等过程中发挥重要作用。哺乳动物的精浆中大量存在外泌体，参与调节精子活力、抗氧化、精子获能、精卵结合等生理学过程。在妊娠过程中，外泌体促进胚胎着床、母胎双向交流、血管生成，提高妊娠成功率。家禽的繁殖过程也受到外泌体的调控。目前研究表明，鸡的精液中已被证实外泌体的存在，与维持精子活力相关。进入母鸡生殖道的精子储存在母鸡的贮精囊中，贮精囊细胞会分泌外泌体样细胞外囊泡，并作用于精子，增加贮精囊中精子的存活率，保证精子活力，促进精卵结合。文章主要阐述了外泌体的生成机制及其在哺乳动物和禽类繁殖过程中的作用，为进一步推动畜禽繁殖工作的发展提供参考。     

水牛高低活力精子的差异蛋白质鉴定和分析

本研究开展了水牛的高低活力精子差异蛋白质组分析,利用Percoll法分离水牛高、低活力精子后分别提取总蛋白质,通过双向电泳技术获得了高活力精子和低活力精子的双向电泳图谱,图像分析表明,高、低活力精子中存在差异蛋白质18个,以高活力精子为对照组,其中6个蛋白质在低活力精子中表达量下调或缺失,12个蛋白质表达量上调。使用串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)对差异蛋白质进行鉴定,成功鉴定了3种蛋白质:精子尾部结构蛋白2、α-ATP合成酶、α-琥珀酰辅酶A合成酶。这些蛋白质与精子结构形成和线粒体能量代谢有关。该研究发现了水牛高、低活力精子的蛋白质变化,为解释精子活力低下的分子机制提供的新的线索。     

水牛犊牛血浆外泌体的分离与鉴定

研究旨在从水牛犊牛血浆中分离外泌体,并对分离的外泌体进行分子生物学特征分析和鉴定。采用差速离心法分离3头水牛犊牛的血浆外泌体,并在透射电子显微镜下观察其形态,使用纳米粒度及Zeta电位仪对提取的外泌体进行粒径大小分析,应用Western blotting方法检测外泌体标记蛋白钙联蛋白（Calnexin）、肿瘤易感基因101（TSG101）、CD9、CD81在3头水牛犊牛血浆外泌体中的表达情况。结果显示,从水牛犊牛血浆中分离的外泌体形态多为圆形和椭圆形,直径在30~150 nm;Western blotting检测结果表明,在水牛血浆外泌体表面,特异性蛋白Calnexin、TSG101和CD81阳性表达,CD9不表达。本研究从形态学和分子生物学特征等方面证实研究获得的提取物为外泌体,由此说明,差速离心法可以成功分离提取水牛犊牛血浆中的外泌体,为水牛外泌体的后续研究提供了重要技术基础和参考。     

乳源外泌体研究进展

外泌体(exosomes)是一种纳米级别的细胞外囊泡,广泛存在于多种动物的组织和体液中,在各种类型的细胞外囊泡中,外泌体作为一个载体可以携带多种具有生物活性的内含物,而这些内含物的分拣是一个受调控的、非随机的过程.近年来,有研究发现,哺乳动物的乳源外泌体通过消化道被吸收后,可以促进幼畜肠道和免疫系统的发育,同时还参与一...     

外泌体对卵泡卵母细胞及胚胎发育影响的研究进展

外泌体是一种由多种细胞分泌的直径为40～100 nm的细胞外囊泡,参与细胞间的信息传递,在卵母细胞生长发育以及胚胎发育等方面起到非常重要的作用.本文介绍了外泌体组成、提取、鉴定和功能,并对外泌体在调控卵母细胞发育与胚胎发育中的作用进行阐述,以期为外泌体的进一步研究提供参考依据.     

动物卵泡液外泌体分离方法及主要生殖功能研究进展

外泌体(exosome)是一种广泛存在于各种体液环境和部分组织中的纳米级、均一性膜性囊泡,主要由蛋白质、脂质、mRNA、miRNA和lncRNA等多种生物成分构成。近年来,研究学者已从不同动物的卵泡液中分离出外泌体,并证实卵泡液外泌体参与卵泡颗粒细胞的增殖、卵子的形成及发育、动物受精、胚胎发育、以及雄性动物生殖功能等一系列生殖过程,为进一步研究卵泡液外泌体对哺乳动物生殖功能的调控提供新思路。作者重点阐述了卵泡液外泌体分离鉴定的方法、主要成分以及调控哺乳动物生殖功能的分子机制的最新进展,为全面了解外泌体结构功能、生发凋亡和作用机制提供参考,为利用外泌体探索动物生殖理论和提高动物繁殖技术并将其应用于生产实际提供相关基础信息。     

精浆胞外囊泡对精子功能的作用研究进展

近年来,体液中的胞外囊泡受到特别关注,许多物种精浆中均含有胞外囊泡,这些精浆胞外囊泡可以影响精子功能,还可作为雄性动物繁殖力或人类不孕不育相关疾病的标志.本文综述了精浆胞外囊泡对精子功能作用的研究进展,以期更好地理解精子受精能力的调控机制,同时为畜牧生产中提高雄性动物繁殖力和男性生育相关疾病治疗提供一定的思路和参考.     

外泌体的生物学功能及牛乳源性外泌体资源开发进展

外泌体是一种天然存在于动物体液中的纳米颗粒,能够包裹丰富的核酸、蛋白质和脂质等生物活性物质,是介导细胞间通讯的有力载体.牛乳源性外泌体可抵御摄入者或犊牛胃肠道消化酶的降解,将其包裹的活性内容物传递至靶器官发挥信号传递作用.近期研究表明,牛乳源性外泌体含有大量免疫相关RNA和蛋白质,可调控犊牛的生长发育,尤其是免疫系统的...     

精子功能相关精浆蛋白质的蛋白组学研究进展

精浆蛋白质对生殖过程中的精子功能有显著影响,包括顶体反应、精子获能、精子贮存、精子竞争和受精。精浆蛋白质的研究已有很长的历史,而且牛精浆蛋白、热休克蛋白、富含半胱氨酸分泌蛋白等几种主要的精浆蛋白质已被成功分离鉴定。蛋白质组学研究方法和技术的迅速发展,为全面解析精浆蛋白质组提供了新的研究策略,提高了研究者探索精浆蛋白质未知领域的效率。作者综述了精子功能相关精浆蛋白质研究的相关信息及近年来精浆蛋白质组的研究进展,从蛋白质水平上阐述了精浆蛋白质与精子获能、贮存及受精等功能的关系。     

寄生虫来源的外泌体研究进展

外泌体是体内多种细胞分泌的一种囊泡,包含蛋白质、脂质和核酸等物质,发挥信号传导、免疫调控、代谢物清除及凝血等功能。外泌体可能是细胞间信息传递的重要纽带,寄生虫与宿主间存在复杂的信息交流,寄生虫可以通过分泌外泌体将生物活性物质转移到宿主细胞中,调控宿主免疫,介导寄生虫的免疫逃逸。以外泌体作为药物载体,可以阻断寄生虫在宿主细胞内的转移或增强宿主的免疫能力,为寄生虫病的预防和治疗提供新的契机,进而打破目前化学合成药物在畜禽生产中滥用的现状,减少药物残留,提高畜产品质量安全。笔者综述了外泌体的形成、组分以及不同寄生虫来源外泌体的生物学作用,以期为畜禽养殖业中以外泌体作为研究切入点的寄生虫病的诊断和治疗奠定基础。     

外泌体对动物肠道健康的影响及其研究方法

在无抗养殖的大背景下,动物的肠道健康问题愈加引起关注。肠道是机体消化吸收营养物质的主要器官,也是防止肠道微生物侵袭的先天屏障,肠道屏障功能的完整性对机体的正常生长发育起着至关重要的作用。外泌体是一种内源性调节物质,可作为解决肠道健康问题的切入点。外泌体是由多种类型细胞分泌的纳米级细胞外囊泡,其广泛分布于各种体液中,可携带蛋白质、核酸、脂质等生物活性物质,它们参与细胞之间的传递、细胞的迁移和增殖等进程,在机体的生理和病理过程中发挥作用。近期研究表明,外泌体可通过调节肠道菌群的组成、诱导小肠干细胞的增殖,修复动物的肠道屏障功能。作者梳理了近年来外泌体对畜禽肠道健康影响及外泌体的研究方法,为后续相关研究提供参考。     

外泌体在肿瘤及寄生虫病中的应用研究进展

外泌体(EVs)也称作胞外囊泡,是细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外基质中的磷脂双分子层小囊泡。1983年,研究人员在绵羊网织红细胞中首次发现外泌体,最初认为外泌体只是细胞代谢废物,但随着对其生物来源、物质构成、运输、细胞间信号传导及在体液中分布等方面深入研究,发现外泌体具有多种功能。近年来研究发现,外泌体在肿瘤早期诊断、肿瘤转移和扩散等方面都扮演重要角色,并且有可能成为新型药物载体应用在肿瘤治疗方面。随着外泌体功能和生物学特点的深入研究,这种新型药物载体技术也有可能应用到抗寄生虫病,为寄生虫病的治疗提供新思路。     

外泌体与病原互作的研究进展

外泌体是由细胞产生并胞吐到胞外的纳米级颗粒，能够传递蛋白质、脂质和核酸等生物活性大分子，在细胞间信息传递中起着重要作用。近年来越来越多研究表明，外泌体在各感染性疾病中有传播感染物质的作用，也有诱导免疫反应和治疗作用。本文就外泌体在病原感染疾病中的作用进行综述，为后续进一步研究提供依据。     

获能前后绵羊精子的差异蛋白质组学分析

为了探索获能前后绵羊精子蛋白质的动态变化，通过串联质谱标签结合液质联用分析技术，对获能前后绵羊精子的总蛋白进行定量分析。结果显示：获能前后绵羊精子的差异表达蛋白共有203个，获能后表达上调蛋白质27个，表达下调蛋白质176个。差异表达参与解剖结构发育、生殖等生物学进程；从细胞组分看，差异表达蛋白定位在细胞溶质、质膜中；从分子功能看，主要参与氧化还原等过程。差异表达蛋白也参与蛋白酶体、Hedgehog和cAMP等信号通路。通过差异蛋白表达结合文献分析，筛选出乳铁蛋白。Western blot结果表明，乳铁蛋白在绵羊精子中存在，且在获能后表达量极显著降低(P<0.000 1);RT-qPCR结果表明，乳铁蛋白在获能前后绵羊精子中均存在，且差异极显著(P<0.001),说明乳铁蛋白对绵羊精子获能有一定的影响。     

番鸭肝细胞外泌体miRNA表达谱的研究

为探究育雏阶段番鸭肝脏中外泌体携带miRNA的种类及其涉及的功能，试验采集3周龄雏番鸭肝脏制备原代肝细胞，培养3 d，离心取上清，试剂盒法分离肝细胞外泌体，电子显微镜观察外泌体形态和粒径，免疫印迹法检测外泌体CD81蛋白表达丰度。提取外泌体总RNA,miRNA测序后进行注释、GO和KEGG功能富集分析。结果显示：雏番鸭肝细胞外泌体为直径30～100 nm的囊泡小体，呈“杯托”状；标志性蛋白CD81免疫印迹结果呈阳性表达；miRNA测序共获得了59个新注释miRNA,GO功能富集结果主要涉及单有机体过程、刺激应答、多细胞有机体过程、定位、细胞器、胞外区绑定分子功能等；KGEE功能富集结果显示主要涉及淀粉和蔗糖代谢、MAPK信号通路、氨基糖和核苷酸糖代谢、肌醇磷酸代谢和磷脂酰肌醇信号传导系统等通路。研究表明番鸭肝脏外泌中的miRNA种类丰富，涉及多种生理功能。     

外泌体在动物病毒感染中作用研究进展

外泌体是最小的细胞外囊泡,作为一种重要的细胞间通讯载体,广泛存在于体液中。外泌体本身可以携带复杂的核酸和蛋白质,越来越多的研究表明其在病毒感染中起着重要作用。因此,病毒利用外泌体产生感染的作用机制受到了国内外学者的广泛关注。作者通过对近年来外泌体在病毒感染中相关作用的研究进行总结,以期为外泌体在抗病毒方面的研究提供参考。     

外泌体在寄生原虫中的研究进展

外泌体(exosomes)是由多种细胞分泌的囊状小体,内含大量的蛋白质、RNA和脂类等重要物质,在细胞间物质与信息的传递中起着重要作用。目前,对于外泌体的研究主要集中在肿瘤诊断和治疗等方面,而对于寄生虫领域外泌体的研究则刚刚起步。已有研究证明,寄生虫可利用外泌体作为细胞间通讯和与宿主联系的工具,通过多种机制产生外泌体,广泛传递其自身分子,调节宿主的免疫系统;还会利用外泌体相互转移传递毒力因子、药物抗性基因和分化因子,对疾病的发生发展具有重要作用。论文主要对外泌体在感染人类的多种寄生性原虫中的研究进展做一综述,为外泌体在寄生虫领域的研究提供新的思路。     

外泌体对哺乳动物妊娠的调控作用

外泌体（exosome）广泛存在于各种体液中，其内部包含蛋白质、脂质、mRNA和miRNA等在细胞间进行物质和信息传递的多种生物活性成分，参与调节机体多种生理过程。近年来，研究学者相继发现子宫液、输卵管液、胎盘中也存在外泌体，且证明其可能参与配子发生、受精、胎盘发生、胚胎着床及胎儿发育等生殖过程，进一步加深了人们对哺乳动物妊娠过程的认识，为一些重要的生殖调控机理研究提供了新的思路。因此，本文主要阐述了外泌体的发现、外泌体在哺乳动物妊娠中的作用以及与妊娠疾病关系的最新进展，为进一步揭示外泌体在哺乳动物妊娠中的调控作用提供参考。     

鸡胚外泌体miRNAs功能分析

旨在基于鸡胚外泌体及所含有的miRNAs解析其产生生理功效的活性物质基础及作用机制。本研究收集13胚龄惠阳胡须鸡胚蛋18枚（3组,每组6枚）,采用酶消化、蔗糖密度梯度和差速超速离心等方法分离鸡胚组织来源的外泌体,经透射电镜、纳米流式和标志蛋白流式检测等方法鉴定其特征。利用高通量测序方法研究外泌体样本中miRNAs表达谱,对各样本top 10且共表达的miRNAs进行靶基因预测与功能分析。结果表明,分别获得了3个浮力密度范围（S1：1.13 g·mL^-1、S2：1.21 g·mL^-1和S3：1.32 g·mL^-1）具有外泌体典型特征的胞外囊泡;与miRBase V21进行比对发现,S1、S2和S3样品中分别含有675、661和845个已知的miRNAs,这些miRNAs中有488个（52.6%）三者共有,包括了广泛参与细胞增殖、分化和免疫应答等过程的功能性miRNAs。TargetScan 7.2和miRDB预测得到3个样本中top 10且共表达的56个miRNAs的靶基因,获得的3 650个靶基因经DAVID分析,显著富集了24个与机体生长、发育、免疫等有关的生物学通路（P<0.05）,包括MAPK信号通路、mTOR信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路和GnRH信号通路等。本研究建立了鸡胚组织中有效分离外泌体的方法,发现鸡胚组织来源的外泌体miRNAs会影响机体生长发育和免疫调节有关的生物学通路。