不同稀释液对绵羊精液4℃保存效果的影响

本实验旨在比较研究3种不同组成成分的绵羊精液低温稀释液对绵羊精子4℃保存效果的影响,3种稀释液分别是以三羟甲基氨基甲烷（Tris）-卵黄-柠檬酸-葡萄糖为基础配方的稀释液1、以脱脂奶粉-大豆卵磷脂-果糖为基础配方的稀释液2和以Tris-卵黄–柠檬酸-果糖为基础配方的稀释液3。通过假阴道方法采集健康成年绵羊精液,用3种不同稀释液按照精液:稀释液=1:8的比例稀释后在4℃环境进行保存,分别在0、24、72、120 h和168 h后检测分析精子活力、运动参数、顶体完整性、线粒体膜完整性、精子总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和细胞丙二醛（MDA）浓度。结果表明：精液保存168 h时,稀释液3组的保存效果最好,其总运动精子比例为54.91%、前向运动精子比例为43.27%、快速运动精子比例为19.73%、线粒体完整性为68.03%,均高于稀释液1和稀释液2组（P<0.05）;稀释液3组的顶体完整率为60.55%,高于稀释液2组（P<0.05）。保存120 h时,稀释液3组T-AOC为0.76 mmol/mg prot,高于稀释液2组（P<0.05）;稀释液3...     

益母草碱对绵羊精液低温保存效果的影响

【目的】探究益母草碱对绵羊精液低温保存效果的影响,为实际生产中制备适宜的绵羊精液低温保存稀释液提供理论依据。【方法】采用假阴道法采集3只多浪羊公羊精液,在精液低温保存稀释液中分别添加0(对照)、20、40、60、80和100μmol/mL益母草碱,检测精液低温保存过程中精子活率、顶体完整率和质膜完整率等精液品质指标以及总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量等抗氧化指标,筛选精液保存过程中最适益母草碱浓度;添加最适浓度益母草碱后,利用实时荧光定量PCR法检测精液低温保存过程中TNF受体超家族成员6(Fas)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2关联X蛋白(Bax)等相关凋亡基因表达量;采用子宫颈口内输精方式完成两次输精,统计母羊受胎率。【结果】与对照组相比,低温保存48 h, 40μmol/mL益母草碱组精子活率、质膜完整率、顶体完整率及T-AOC水平、SOD、GSH-Px、CAT活性均显著提高(P<0.05),MDA含量显著降低(P&l...     

绵羊精液不同处理方法对体外受精效果的影响

试验通过开展绵羊低温保存精液和冷冻精液制备精子对体外受精效果影响的研究,旨在探讨制备绵羊IVF优质精液的新方法。结果表明:利用低温保存精液和冷冻精液,分别采用Percoll离心法和上游法制备精子进行体外受精,低温保存精液上游法的卵裂率78.6%显著高于低温保存精液和冷冻精液Percoll离心法和60.2%、62.3%,(P<0.05),极显著高于冷冻精液上游法21.1%,P<0.01;低温保存精液和冷冻精液Percoll离心法组间无显著(P>0.05)差异,但均显著(P<0.05)高于冷冻精液上游法。低温保存绵羊精液可用于制备IVF精子,上游法优于Percoll离心法,可显著提高体外受精效果。     

绵羊精液低温保存中降温曲线与敏感温度的初步测定

精液保存一直是限制羊人工授精技术推广及品种改良进程的重要因素,主要是超低温保存精液常规输精受胎率低。目前有关羊精液保存的报道以稀释液研究最多,配方虽然很多,原理和成分基本相似。在对羊精液冷冻研究中大家关注的也主要是冷冻和解冻过程,对冷冻曲线也有一些研究。但是在多数研究报告中,对于30～5℃的降温过程都是一带而过,各报道间的说法也并不一致,试验旨在对这一降温过程中的降温曲线进行测定,通过分析比较,确定最佳的降温方案,以提高精液保存效果。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验动物试验动物为来自青岛奥特种羊场的良种肉用绵…     

葡萄籽原花青素对山羊精液低温保存效果的影响

为提高精液低温保存质量,在山羊精液低温保存基础稀释液中分别添加浓度为0、10、30、50、70 mg/L葡萄籽原花青素,检测精液保存过程中各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性、T-AOC、MDA等精子质量评定指标,探讨葡萄籽原花青素对山羊精液低温保存效果的影响及最适添加浓度。结果表明:一定浓度葡萄籽原花青素可提高精液保存质量,且最适添加浓度30 mg/L。在30 mg/L处理组中,精液各项指标(MDA除外)在保存期间均最高,且5 d时精子活率、顶体完整率.、线粒体活性、T-AOC显著高于其他组(P0.05),其精子活率为51.46%,顶体完整率为67.55%,质膜完整率为50.97%,线粒体活性为50.78%。     

谷胱甘肽对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究谷胱甘肽(GSH)对湖羊精液低温保存效果的影响,在基础稀释液中分别添加了0(对照组)、2、4、8、10 mM的GSH,在4℃保存过程中对精子的活率、活力及直线速率等运动性能指标进行了检测.结果表明,与对照组相比,在保存1～3 d时,4～8 mM的GSH显著提高了精子活率(P<0.05),10 mM的GSH对精子活...     

原花青素对吐鲁番黑羊精液低温保存效果的影响

为研究原花青素（PC）对吐鲁番黑羊精液低温保存效果的影响,本实验采用假阴道法采集5只2岁成年吐鲁番黑羊公羊精液,在精液基础稀释液中添加不同浓度（0、10、20、30、40μg/mL）的PC进行低温保存,每隔24 h检测精子活率、活力、曲线速率（VCL）、直线速率（VSL）、畸形率、质膜完整率等指标,在保存24、72、120 h时检测总抗氧化能力（T-AOC）活性和过氧化氢酶（CAT）活性。结果表明：各PC添加组的精子活率、活力、VCL、VSL、质膜完整率、T-AOC和CAT活性均高于对照组（P<0.05）,畸形率低于对照组（P<0.05）,其中20μg/mL PC添加组的精子质量高于其他各组（P<0.05）。综上所述,在基础稀释液中添加PC可以显著提高精液品质,且PC添加浓度为20μg/mL时对吐鲁番黑羊精液低温保存效果最佳。     

牛精液低温保存时间长短对受胎率的影响

牛精液低温保存时间长短对受胎率的影响龚宏智（陕西省眉县家畜繁育改良站，７２２３０３）牛的人工授精受胎率的高低与精液品质有很大关系，而低温（０—５℃）和常温（１５—２５℃）保存的精液质量是否受保存时间长短的影响？为了探索这个问题，我们进行了本调查。１基...     

安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响,本实验采集3只1～2岁健康成年湖羊精液,混匀后取5份等量精液,按1:9的比例加入不同安石榴甙浓度（0、5、15、30、45μmol/L安石榴甙）的稀释液,4℃保存7 d。检测精子的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）含量、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）活性等指标。结果显示：保存4～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子活率、活力显著高于其他各组;保存2～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子质膜完整率、顶体完整率显著高于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子的MMP显著高于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组精子ROS含量显著低于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液MDA含量显著低于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液CAT活性显著高于其他各组。本研究结果表明,在稀释液中添加30μmol/L安石榴甙可以显著提高精液保存质量。     

维生素E对湖羊精液低温保存效果研究

为研究维生素E对湖羊精液4℃保存效果的影响,在前期筛选的湖羊精液稀释液中添加不同质量浓度(0.0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mg/mL)的维生素E用于湖羊精液冷藏试验,检测湖羊精子活率和顶体完整率,以及精液中总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。结果表明:维生素E的添加显著减少MDA的生成,提高了总抗氧化能力(T-AOC);但维生素E的添加对精子活率和顶体完整率无显著提高,本试验中0.6 mg/mL的添加质量浓度保存效果与对照组无显著差异,但质量浓度过高或过低保存效果欠佳。因此,在4℃保存条件下,在湖羊精液稀释液中添加维生素E不能提高精液保存质量。     

绵羊精液低温保存 低温输精试验

常规绵羊人工授精的某些技术环节,已不适应当前广大牧区绵羊改良和育种工作的需要。笔者经过筛选,采用葡萄糖—柠檬酸纳—卵黄稀释液,进行绵羊精液低温保存、低温输精试验。试验结果:精子最长存活时间达196h;用保存24—48h的稀释精液,在—2—2℃环境下给发情母羊输精,一次输精392只,产羔302只,情期受胎率为77.04％。这为改进常规绵羊人工授精的主要技术环节,实现新型的分散性绵羊人工授精技术,提供了重要依据。     

黄芪多糖对猪精液低温保存的影响

通过在改进的猪精液低温稀释液中添加不同质量浓度的黄芪多糖(0、0.10、0.20、0.30、0.40g/L),对比7d内、4℃低温保存下猪精子的活率、活力、精子畸形率、精子质膜和顶体的完整性等参数,探讨黄芪多糖在猪精液低温保存应用的效果。结果显示,在猪精液低温保存后的质量上,0.10g/L质量浓度组与对照组差异不显著(P0.05),0.40g/L质量浓度组显著差于对照组(P0.05),0.20、0.30g/L质量浓度组显著好于对照组(P0.05),所有各组中0.30g/L质量浓度组效果最好。结果表明,在本试验条件下,适宜质量浓度的黄芪多糖可以明显改善4℃低温条件下猪精液的保存效果,其中最佳添加质量浓度是0.30g/L。     

低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响

为了探讨低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)法检测低温保存前后绵羊精子头膜和尾膜的完整性。试验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110,130,150,170,190 mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色与否分为4种类型进行统计。结果表明:低温保存后,绵羊精子头膜、尾膜均完整的Ⅳ型精子发生率和头膜、尾膜均损伤的Ⅰ型精子发生率与鲜精相比分别极显著减少和增多(P<0.01),说明低温保存过程对精子质膜完整性有极显著影响;在低温保存过程中头膜损伤-尾膜完整的Ⅱ型精子发生率极显著增多(P<0.01),而头膜完整-尾膜损伤的Ⅲ型精子发生率显著减少(P<0.05),说明精子头膜或尾膜的损伤是独立发生的,且头膜比尾膜更易损伤。5种低渗液中,150 mOsm染液检测效果最好。     

甘草多糖对猪精液低温保存的影响

通过在猪精液低温稀释液中添加不同质量浓度的甘草多糖(0.0 g/L、0.10 g/L、0.30 g/L、0.50g/L),在4℃低温保存下于试验第1天、第3天、第7天,对猪精子的活率、活力、畸形率、顶体完整率、质膜完整率、SOD及MDA等参数进行测定,探讨甘草多糖对猪精液低温保存应用的效果.结果显示,在精子质量评价和抗...     

还原型谷胱甘肽对西门塔尔牛精液低温保存效果的影响

本实验旨在探究还原型谷胱甘肽（GSH）对西门塔尔牛精液低温保存（0℃）的影响。在精液稀释液中分别添加0（对照组）、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛（MDA）水平、三磷酸腺苷（ATP）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性。结果表明：在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组（P<0.05）;在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组（P<0.05）,MDA水平低于其他组（P<0.05）。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。     

甘油和海藻糖对低温保存精液品质的影响

为了研究低温保存下海藻糖和甘油对牛精液品质的影响,本试验选取了宁夏四正生物技术公司的健康荷斯坦种公牛的精液,在低温保存液里分别添加5%的甘油以及0.028mol/L、0.014mol/L、0.0416mol/L的精液保护剂海藻糖为试验组,以不添加试剂的低温保存精液为对照组,对保存不同时间的精液品质进行测定。结果显示添加甘油的试验组精子活力低于对照组,但差异不显著（P〉0.05）。海藻糖浓度为0.0416mol/L组的精子畸形率低于对照组及其他海藻糖组,并且差异显著（P〈0.05）;海藻糖组与对照组精子活力相比,在24h、48h、72h时差异不显著（P〉0.05）;在96h、216h、240h时差异显著（P〈0.05）,其活力下降明显。     

二甲亚砜对绵羊精液低温保存效果的影响

为了比较添加不同浓度二甲亚砜(DMSO)对绵羊精液低温保存的影响.本试验选取3只2岁的健康公湖羊,采集精液并混合均匀后等分精液,用不同浓度DMSO的低温保存稀释液对精液进行稀释处理并置于4℃低温保存.在精液低温保存期间,每天采用全自动精子分析仪(CASA)对精子活率、活力、直线速率、曲线速率和路径速率等精子运动性能进行...     

低温保存对绵羊精子运动参数与线粒体活性和抗氧化水平的影响

低温造成的氧化损伤是精液品质下降的主要原因。本试验旨在研究4℃低温保存对绵羊精子运动参数、线粒体活性和抗氧化水平的影响。采集3只杜泊公羊的精液,使用常规卵黄稀释液进行8倍稀释后放入4℃冰箱保存,分别在0 h、24 h、48 h和72 h后检测精子运动参数和抗氧化水平。结果表明,随着保存时间的延长,精子活率和运动参数逐渐下降,但72 h后精子活力仍保持在50%左右,活率高于70%;GSH-Px酶活性和T-AOC逐渐降低,MDA逐渐升高,72 h后精子线粒体活性显著低于0 h,但与48 h相比差异不显著。研究表明,精液在低温保存72 h后,其质量、抗氧化水平和线粒体活性均会显著下降,可以考虑在这个时间段加入线粒体靶向抗氧化剂,以延长精子的保存时间,减缓精液品质下降程度。     

火鸡精液液态低温保存

本文研究了3种稀释液在0～5℃下保存火鸡精液的效果及稀释液pH值、稀释比例和卵黄浓度对精子存活力的影响。原精及稀释精液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不保存时,受精率分别为71.7％,64.03％,63.29％和63.77％(P<0.05);在0～5℃下保存48h后,原精完全丧失受精率(0％),而稀释精液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的受精率分别为52.40％,45.30％和20.33％(P<0.01)。火鸡精液在0～5℃保存过程中,pH值降低,原精比稀释精液降低程度大。在本研究条件下,pH6.5和1:3稀释最适合于火鸡精子的存活,稀释液中添加5％或10％卵黄可提高火鸡精子的存活力。