马铃薯纺锤块茎类病毒的检测和防治

马铃薯纺锤块茎类病毒病(potato spindle tuber viroid,PSTVd)是一种严重为害马铃薯生产的病害,降低产量20%—30%。防治的主要措施是应用无类病毒的种薯。由于目前还没有脱掉类病毒的有效措施,只能从未被饱和侵染的群体中鉴定筛选出未被侵染的个体,再脱掉其它病毒,作为核心繁殖材料。1987年以来,利用自制的电泳设备,以往复聚丙烯酰胺凝胶电泳法(return-polyacrylamide gel electrophoresis,R-PAGE)检测类病毒,筛选出未感病的个体,再用茎尖组织培养法脱掉其它病毒。经用马铃薯卷叶病毒等8种病毒酶标抗体鉴定筛选,获得既无类病毒也无主要马铃薯病毒的克新1、2、3和4号等主栽马铃薯品种的核心种。并已提供给省内外的良种场繁殖推广。1989和1990年抽样检测克山良种场繁殖的原种、一级和二级良种,未检测到类病毒。     

马铃薯纺锤块茎类病毒株系鉴定

 以加拿大的马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTV)强毒、中毒和弱毒株系样品作对照,用改进的往返-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,鉴定了发生在我国北方种植的马铃薯上的PSTV株系类型。从60个马铃薯品种488个样品中,所有检测到的PSTV的电泳迁移率与加拿大的弱毒株系迁移率相同。表明所有检测到的PSTV都属弱毒株系。首次明确发生在我国北方种植的马铃薯上的PSTV以弱毒株系为主要类型。没有分离到强毒株系或其它株系。     

利用cDNA双体探针检测马铃薯纺锤块茎类病毒

类病毒是已知最小的可以在植物体内进行自我复制的病原,具有广泛的寄主范围.由于类病毒缺少外壳蛋白,因此不能通过免疫学方法进行诊断.     

马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）脱除技术研究进展

马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）是影响马铃薯生产、育种和种质资源保存的重要病原。脱除PSTVd是其防控的重要手段之一。本文综述了PSTVd的发生情况及其危害以及主要脱除技术。同时分析了PSTVd脱除工作中存在的主要问题及其难以脱除的可能机制,并提出了意见和建议,以期为PSTVd防控提供借鉴。     

马铃薯纺锤块茎类病毒核糖核酸(PSTV-RNA)的分离结果

作者在本文报道的是:从选自克山农科所1978年夏播田克新二号品种马铃薯纺锤块茎(经茎尖培养汰除其它病毒而未脱掉 PSTV)1979年在北京西郊栽培的植物叶组织,提取2M LiCl 可溶性核糖核酸,经5%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出 PSTV—RNA。马铃薯纺锤块茎病害在我国最早发现于黑龙江省,一般减产率达20～70%。     

4个马铃薯品种感染马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）的症状

马铃薯纺锤块茎类病毒在中国及世界许多国家都是检疫性病害, 该病害可大幅度降低马铃薯产量和品质。根据植株及块茎的症状, 汰除感病的马铃薯种薯, 是控制PSTVd传播和危害的重要手段。本研究利用分子克隆及测序技术, 分离并鉴定了PSTVd的分离物351-17, 利用PSTVd田间接种技术, 分别接种了4个黑龙江省常用的马铃薯品种‘夏坡地’、‘克新18’、‘荷兰15’和‘尤金’, 对其侵染后第一代的株高、叶片、块茎外观和单株产量进行了调查, 结果表明：4个供试马铃薯品种感染PSTVd后均表现出了一定的症状, 其中‘克新18’在株高、叶片和块茎的症状方面最为明显, 单株产量下降显著, 表明其对PSTVd非常敏感。     

广东省马铃薯块茎软腐病病原菌鉴定

为明确广东省惠州市马铃薯块茎软腐病的病原菌,采用常规病组织分离法获得4株菌株,通过生理生化特征和分子生物学特性对其进行鉴定,并测定了该病原菌对20个马铃薯品种的致病力。结果显示,该病原菌为革兰氏阳性菌,在LB平板上菌落有透明和不透明2种形态;除葡萄糖发酵阳性、对链霉素和青霉素具有抗性等特征不同外,BP-hd-1、BP-hd-2、BP-hd-3和BP-hd-4菌株与短小芽胞杆菌Bacillus pumilus菌株的其它生理生化特征均相同。系统进化分析结果表明,4株菌株的16S rDNA序列分别与短小芽胞杆菌AI-Khrj18(KY123871)、ML270(KC692158)、NCTC10337(LT906438)和ARD21(KX023236)的相似性为100.0%;4株菌株的gyrB基因序列均与短小芽胞杆菌AUEC29菌株(HM585095)的gyrB基因相似性最高,为99.7%～99.8%。生理生化特征及分子生物学鉴定结果表明,引起广东省马铃薯块茎软腐病的病原菌为短小芽胞杆菌。致病力测定结果显示,接种菌株BP-1后20个马铃薯品种的发病率均为100.0%,表明该病原菌对马铃薯有强致病力。     

宁波海关邮路全国首次截获检疫性有害生物——马铃薯纺锤块茎类病毒

正2020年5月,宁波邮局海关从来自冰岛的邮件中截获1罐(0.08 kg)非法进境辣椒种子,经实验室检疫鉴定发现,其携带检疫性有害生物——马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd),这是宁波邮局海关首次从非法邮寄进境的植物种子中截获该类病毒。马铃薯纺锤块茎类病毒可引起马铃薯块茎纺锤形病变,严重威胁着马铃薯的生产、保存和育种工作。该病害在美国、加拿大的马铃     

马铃薯块茎蛾取食诱导的马铃薯防御反应

为探究马铃薯在应答马铃薯块茎蛾Phthorimaea operculella取食时相关抗虫指标的动态变化, 本研究以‘青薯9号’‘合作88’‘米拉’3个马铃薯品种为材料进行室内盆栽试验, 在马铃薯块茎蛾取食0、3、6、12、24、48、72、96 h时取样测定各品种生理指标。结果表明, 被马铃薯块茎蛾取食的叶片中过氧化氢酶、多酚氧化酶、萜烯合成酶活性, 单宁和类黄酮含量与对照相比都有不同程度的显著升高, 总氨基酸含量显著下降, 且各指标在马铃薯品种之间存在差异。从各指标平均增降率来看, ‘合作88’对马铃薯块茎蛾取食的响应程度要强于‘青薯9号’和‘米拉’‘米拉’的响应程度最小。本研究为进一步明确马铃薯抗虫生理防御机制和害虫综合防治提供理论依据。     

马铃薯S病毒的分子鉴定与检测

An isolate of PVS, HZ00P1, was obtained from nature infected Solanum tuberosum from Hang-zhou, Zhejiang province. It was primarily identified by DAS-ELISA and host reaction tests. 3' end partial sequence of the virus isolate was cloned. Nucleic acid sequence of the cp gene and deduced cp amino acid se-quence alignments were compared with 16 other isolates registered in GenBank. The results showed that the 17 PVS isolates were divided into two groups. Among them, two Andean isolates were classified to group Ⅱ, HZ00P1 and the other 14 isolates were assigned to group Ⅰ. Compared with other PVS isolates in group Ⅰ, PVS HZ00P1 had 93.1%-98.1% and 95.9%-99.3% homologies of nucleotide sequence and deduced amino acid sequence respectively, whereas its similarities to the group Ⅱwere 81.4%-81.7% and 93.5%-93.9%. A survey of PVS occurrence in Zhejiang province was achieved by RNA spot hybridization (RSH). Among the 30 samples collected from different areas of the province, 26.7% were found to have the infection of PVS. It is concluded that PVS has become a common virus in Zhejiang province.     

马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定

从马铃薯块茎上分离内生细菌,以块茎病原真菌为指示菌,采用平板对峙法筛选拮抗菌株,并利用形态学特征和16S rDNA基因序列分析对优良拮抗菌株进行鉴定。结果表明,从定西马铃薯块茎中共分离得到72株内生细菌,其中19株对5种块茎病原真菌的抑菌率均高于51.87%,特别是内生细菌6-5和5-6分别对马铃薯炭疽病菌Colletotrichum coccodes和马铃薯黑痣病菌Rhizoctonia solani的抑菌率达85.82%和72.18%,且具有固氮和产吲哚乙酸(IAA)功能,其产IAA量分别为3.37 mg/L和19.25 mg/L;根据形态特征及16S rDNA基因序列将菌株5-6鉴定为萎缩芽胞杆菌Bacillus atrophaeus,菌株6-5鉴定为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis。     

马铃薯Y病毒属三种病毒通用型单克隆抗体的鉴定

构建了马铃薯Y病毒属的大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus,CLYVV)的原核表达载体pET28-SMV CP、pET28-PVY CP和pET28-CLYVV CP,经IPTG诱导、表达和纯化,获得SMV、PVY和CLYVV的CP蛋白。采用ELISA方法,用9株实验室制备的单克隆抗体对含SMV、PVY、CLYVV的病毒汁液和纯化的重组CP蛋白进行检测分析。结果表明,9株单克隆抗体均识别SMV病毒,2D3、4F9、4G12和6E7单克隆抗体能够识别PVY病毒,4F9和4G12能够识别CLYVV病毒,但PVY、CLYVV病毒与抗体的亲和力低于SMV病毒;对于重组表达的衣壳蛋白:SMV、CLYVV与抗体2D3、4F9、4G12和6E7反应强烈,PVY与4F9和4G12抗体反应稍强。综上,本研究鉴定出能识别SMV、PVY、CLYVV的通用单克隆抗体4F9和4G12。     

取食马铃薯块茎和叶片的马铃薯块茎蛾肠道内可培养细菌的多样性

为明确取食马铃薯块茎和叶片的马铃薯块茎蛾Phthorimaea operculella幼虫肠道可培养细菌种类组成的多样性及其差异,分别对取食马铃薯块茎和叶片的马铃薯块茎蛾4龄幼虫的肠道细菌进行分离培养,根据菌落形态和生理生化特征及16S rDNA序列分析对菌株进行分类鉴定。结果表明,从取食马铃薯块茎的马铃薯块茎蛾肠道内共分离获得细菌有4门8科10属15种,其中褪色沙雷氏菌Serratia marcescen和乙酸钙不动杆菌Acinetobacter calcoaceticus为优势种,其相对多度分别为17.20%和16.06%。从取食马铃薯叶片的马铃薯块茎蛾肠道内共分离获得细菌有4门10科10属16种,其中琥珀葡萄球菌Staphylococcus succinus和乙酸钙不动杆菌为优势种,其相对多度分别为11.86%和15.07%。取食马铃薯块茎和叶片的马铃薯块茎蛾肠道内相同的可培养细菌有4属5种,分别为褪色沙雷氏菌、深红沙雷氏菌Serratia rubidaea、阿氏肠杆菌Enterobacter asburiae、乙酸钙不动杆菌和琥珀葡萄球菌。表明取食马铃薯块茎和叶片的马铃薯块茎蛾...     

两个马铃薯Y病毒黑龙江马铃薯分离物株系鉴定

为明确分离自黑龙江省克山县马铃薯上的2个病毒分离物KS4和KS7的分类地位,通过RTPCR扩增、克隆获得其基因组序列,利用重组分析程序包和最大似然法分别进行重组分析和系统发育分析。结果显示,分离物KS4和KS7的开放阅读框均有9 186个核苷酸,编码3 061个氨基酸,分离物KS4的核苷酸和氨基酸序列均与马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)分离物Mb112一致率最高,分别为96.9%和98.4%;分离物KS7的核苷酸序列与PVY分离物12-94一致率最高,为97.4%,其氨基酸序列与PVY分离物SYR-Ⅱ-Be1一致率最高,为97.8%。重组分析表明,分离物KS4和KS7均为分离物N-605和Oz的重组体,其中KS4基因组5′-端的2 392个核苷酸来自分离物N-605,其余核苷酸来自分离物Oz;KS7基因组的第800～2 227个核苷酸和第5 637～8 950个核苷酸来自分离物N-605,其余核苷酸来自分离物Oz。系统发育分析发现,分离物KS4被聚类到N:O株系(PVY~(N:O)),分离物KS7被聚类到NTN株系(PVY~(NTN))b型。     

马铃薯块茎蛾综合防治技术

马铃薯块茎蛾是一种危害马铃薯生产和储藏的检疫性害虫,在我国多个省区发展迅速已经严重制约当地马铃薯生产。本文针对马铃薯块茎蛾的生物学特性和发生规律,提出综合运用药剂防治、栽培管理及收获措施等技术减轻马铃薯块茎蛾的发生与危害。     

马铃薯块茎蛾发生规律初探

近年来,有机会对马铃薯块茎蛾进行了一些调查研究,初步积累了一些感性材料,提出几点看法: 块茎蛾能否在我国北方越冬? 回答这个问题,首先要看马铃薯是怎样冬藏的。如果在加温室内冬藏,块茎蛾不但能够越冬,因为它没有滞育现象,还能继续发育(发育起点在10℃上下)。据今年3月在山西芮城调查,一般是在不加温的室内、或在室外稍加盖复而冬藏的。剖开被害薯检查,并未找到一头幼虫。据     

利用线虫防治马铃薯块茎蛾

S.carpocapsae隶属于能侵染4目100多种昆虫(包括马铃薯块茎蛾)的Sfeinernema线虫科。以其幼虫肠中共生的细菌(Achromobacter nematopnilus)进入昆虫血淋巴后引起败血病死亡。紫外线可制约其效果。每块茎蛾幼虫上的致病体120个以上时,3天内可使该幼虫死亡率达97.8％,从每蛾幼虫产生的有侵染力线虫的幼虫数最高达1.3万～1.7万个。     

怎样清除马铃薯块茎上的线虫

马铃薯线虫的防治,是一个复杂而长期的过程。线虫随土壤,主要随栽种材料传播。将马铃薯从发病区向无病区调运十分危险。正如实践指出,在一些农场中由于没有执行预防的和检疫的规定使发病点的数量逐年增加。因此,实行预防的和检疫的措施有很重要的意义。我局负责输往立陶宛共和国境外的马铃薯检疫工作。我们对储备马铃薯的农场进行了调查;对马铃薯块茎在发运前也进行了检查。但现有的分析方法有时不能发     

马铃薯块茎腐烂病的检测方法

引言马铃薯块茎腐烂病 Phomaexigua varfoveata 系 EPPO 组织 A,级检疫性病害,其生物学,分布及经济重要性详见 EPPO活页资料78号(EPPO 会刊第12卷第1期)。根据EPPO专项检疫要求