不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂（SL）冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5% SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异（P<0.05）;添加18%蛋黄和1%～2% SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异（P>0.05）;添加18%蛋黄和1.0%～1.5% SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异（P>0.05）。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1～2%（g／L）。     

附睾尾液对绵羊精液冷冻保存的影响

实验旨在研究冷冻稀释液中添加附睾尾液（Cauda Epididymal Fluid,CEF）对绵羊精液冷冻保存的影响。利用假阴道法收集4只湖羊精液并混合,以附睾尾液中总蛋白为基准,在冷冻稀释液中分别添加不同浓度CEF(0、140、280、420μg/mL)。精液经过冷冻后投入液氮保存,解冻后检测精子活力、运动参数,以及质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位、37℃精子存活时间等指标。结果表明：冷冻-解冻后280μg/mL CEF组的精子活力、前向运动、平均路径速度、直线运动速度、直线度、线性度、头部横向位移幅度均显著高于其他各组（P<0.01）,曲线运动速度高于其他各组（P<0.05）;精子质膜完整率、顶体完整率也高于其他各组（P<0.05）;JC-1染色结果显示,280μg/mL CEF组精子线粒体膜电位高于其他各组（P<0.05）;280μg/mLCEF组精子在37℃环境下可存活14h,较对照组精子能多存活4h。可见,在冷冻稀释液中添加适量CEF可以提高精液的冷冻效果。     

稀释液中添加维生素E对绒山羊冷冻精液品质的影响

在绒山羊精液冷冻稀释液中添加不同浓度的维生素E,比较其对绒山羊冷冻精液品质的影响。结果表明:维生素E添加量为0.8～1.2 mg/mL时精子解冻后活率和顶体完整率显著高于对照组和其他各添加组(P<0.05);维生素E添加量为0.8～2.0 mg/mL时,畸形率显著低于对照组和其他各添加组(P<0.05);维生素E添加量为1.2 mg/mL时,质膜完整率显著高于对照组和其他各添加组(P<0.05)。说明适量的添加维生素E可以提高绒山羊精液冷冻的效果,且稀释液中维生素E的适宜添加量为0.8～1.2 mg/mL。     

冷冻家猫附睾精液效果初探

为了筛选出适宜冷冻家猫精液的稀释液、冷冻保护剂和解冻温度,本试验采用家猫附睾精液,分别用2种不同的稀释液,3种不同的冷冻保护剂进行稀释、冷冻和解冻。结果显示,Ⅱ号稀释液冷冻效果优于Ⅰ号稀释液。用乙二醇作为冷冻保护剂,解冻后家猫精子活率达到52.7%±4.9%,畸形率为37.3%±4.2%,顶体完整率为52.4%±4.1%,各项指标均显著高于甘油组和二甲基亚砜组（P<0.05）;其中甘油组解冻后活率为35.5%±7.6%,顶体完整率为39.8%±4.4%,高于二甲基亚砜组的33.6%±7.3%和39.1%±4.1%,但两者之间差异不显著（P>0.05）。37 ℃水浴解冻后顶体完整率为36.4%±8.7%,显著高于30 ℃水浴解冻后的25.3%±6.7%（P<0.05）,但它们之间的活力,畸形率差异不显著,总体上37 ℃的解冻效果优于30 ℃。因此,乙二醇和稀释液Ⅱ配合使用冷冻家猫附睾精液效果较好,37 ℃为较优解冻温度。     

小尾寒羊精液冷冻技术研究

本试验对11只2～3岁小尾羊种公羊的精液品质、保存稀释液和冻精制作技术进行了研究。结果表明:小尾寒羊种公羊的射精量、精液品质、精液pH值、密度、色泽、活率和畸形率均属正常范围,优于无角道塞特和莎福克绵羊;4种稀释液中,A液低温保存效果优于B、C、D 3种稀释液,差异极显著(P<0.01)。B液作为小尾寒羊冷冻精液稀释效果较理想(P<0.01)。6％甘油作为小尾寒羊冷冻精液保护剂效果较理想。     

维生素E对猪精液常温负压保存效果的影响

为了探究不同浓度维生素E在负压(-0.04 MPa)条件下对猪精液常温(17℃)保存效果的影响，试验将猪精液分为A～D组，分别在含0,0.1,0.5,1 mg/mL维生素E的Modena基础稀释液中保存，用全自动精子质量分析仪检测猪精子质量指标及畸形率，用相应试剂盒检测总抗氧化能力(T-AOC)及H₂O₂含量，用酸度计检测猪精液pH值。结果表明：在精液保存至第7,11天时，C组精子活率显著高于其他各组(P<0.05),且在保存至第1～5天时精子活率高于60%;在精液保存期间，C组精子活力高于其他组，且在第9天显著高于其他组；在精液保存期间，C组精子平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度及鞭打频率均高于其他组，畸形率低于其他组；在精液保存至第9天时，C组精子T-AOC显著高于其他组(P<0.05);在精液保存至第9,11天时，C组H₂O₂含量显著低于其他组(P<0.05);在精液保存期间，C组pH值的下降趋势相较其他组最缓慢，pH值最高，使猪精子处于较为适宜的弱酸环境中。说明将0....     

不同稀释液配方对奶牛冷冻精液的影响

采用假阴道法采集成年种公牛精液,经精液品质检查后,合格精液用四种不同冷冻稀释液进行稀释、冷冻、以筛选出适宜的冷冻稀释液和最佳冷冻保护剂.结果表明:Ⅱ号稀释液优于其它3种稀释液(P＜0.05);甘油为最佳冷冻保护剂.优于乙二醇和DMSO冷冻效果(P＜0.05),其最佳浓度为7%,精子冷冻后活率平均可达0.45±0.575,畸形率15.44%,项体完整率57.82%;奶牛细管冻精的解冻效果以75℃水浴,2 S到6 S的解冻时间最佳.     

稀释液中添加维生素E对宠物犬精液冷冻效果的影响

在宠物犬冷冻精液稀释液中添加质量浓度为0,200,400,600μg/mL的维生素E,以观察对精液冷冻效果的影响。结果表明:冷冻精液稀释液中添加维生素E 400μg/mL时,解冻后精子活力显著高于对照组(P0.05);畸形率极显著低于对照组(P0.01),各浓度维生素E组精子解冻后体外存活时间均极显著高于对照组(P0.01),解冻后精子顶体完整率和冻后精子运动速率(VAP、VSL、VCLL)较对照组都有所提高,但差异不显著(P0.05)。综合各项指标后表明以质量浓度为400μg/mL维生素E组的效果最好。     

生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻效果的影响

为了研究冷冻稀释液中添加不同浓度的抗氧化剂生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响,试验分别在冷冻稀释液中添加0,0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL的生物类黄酮和0,2,4,6,8 mg/mL的维生素C以及二者最佳配伍浓度的混合物,分别检测各试验组精液冷冻解冻后的活率、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活率等指标。结果表明:除了添加4,6 mg/mL维生素C顶体完整率与对照组相比差异不显著(P>0.05)外,添加0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL生物类黄酮或2,4,6,8 mg/mL维生素C精子活率、质膜完整率与对照组相比差异均显著(P<0.05),其中添加0.8 mg/mL生物类黄酮和6 mg/mL维生素C效果最好,但随着添加浓度的增加冷冻效果逐渐降低。说明在猪精液冷冻稀释液中联合添加生物类黄酮和维生素C,解冻后精液质量显著高于对照组(P<0.05)。     

绵羊冻精稀释液加复合维生素B提高冻精解冻后的品质

将山梨醇、氯前列烯醇、复合维生素B在绵羊冷冻精液稀释液中进行添加、筛选。解冻后活率结果显示1号稀释液(41.17±4.72)%和4号稀释液(37.76±3.15)%极显著地高于对照组稀释液(22.80±4.49)%(P<0.01)。表明在绵羊冻精稀释液中添加复合维生素B可有效提高冻精解冻后活率并保护精子形态结构的完整性。 绵羊冻精稀释液加复合维生素B提高冻精解冻后的品质@哈福$甘肃农业大学动物科学技术学院!730070     

不同稀释液成分对绵羊精子低温保存效果的影响

本实验旨在探究一种更为高效可行且有利于绵羊精液在 4℃条件下延时保存的稀释液配方。采用含有不同成分及含量脱脂牛奶、维生素 A、维生素 D、维生素 E 等物质的 6 个稀释液配方稀释精液,每隔 6 h 测定稀释后精液中精子的畸形率、死亡率、活力以及运动速率,持续检测 96 h。结果表明:72 h 时配方四稀释液稀释后精子畸形率为 15.89%、死亡率为 48.52%、活力为 41.05、运动速率为 42.10 μm/s,精子畸形率和死亡率极显著低于其他 5 个稀释液配方(P<0.01),精子活力和运动速率极显著高于其他 5 个稀释液配方(P<0.01);通过测定分析,配方四精液稀释液中添加脱脂牛奶、维生素 A、维生素 D、维生素 E、卵黄、恩诺沙星、双抗和高浓度柠檬酸钠有助于提高精子活力和保存时间,筛选出的最佳精液稀释液配方操作过程简便有效,快速可行,精液保存 48 h 后精子活力达 68.17%,可用于绵羊人工授精。     

金华猪精液冷冻保存技术研究

本试验用0.5 mL细管作为冷冻载体对金华猪精液进行冷冻保存研究,比较3种冷冻稀释液及不同冷冻方法、解冻程序对金华猪精液冷冻的效果,以解冻后的精子活力、畸形率和质膜完整率为判定指标。结果表明:Ⅱ、Ⅲ号冷冻稀释液处理组解冻后精子的活力、畸形率和质膜完整性都明显地高于Ⅰ号冷冻稀释液(P0.05);Ⅱ号冷冻稀释液和Ⅲ号冷冻稀释液处理组之间没有明显差异(P0.05)。采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液冷冻保存精子,并在60℃,8 s条件下水浴解冻精子后,精子活力和质膜完整率最高分别为42.3%和50.3%,畸形率最低为17.7%。因此,采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液,在60℃,8 s条件下水浴解冻方法较为适合0.5 mL细管金华猪精液冷冻保存及解冻。     

维生素E提高绵羊颗粒冻精品质的机理研究

以无角多赛特公羊为试验对象,采用2步稀释法,在冷冻精液稀释液中添加维生素E,对维生素E提高绵羊颗粒冻精品质的机理进行初探.试验1证明,试验组的活率(0.435)极显著高于对照组(0.365)(P＜0.01),其精子顶体总异常率(33.72%)极显著低于对照组(44.35%)(P＜0.01),且顶体完整率与冻精活率相关极显著(r＝0.662,P＝0.037).添加维生素E可降低冷冻对精子顶体的损害程度,冷冻精液品质得到显著改善.试验2结果表明添加维生素E后AST、ALP、GGT、CK、LDH与ALT的活性均与对照组无显著差异.但对照组与试验组比较,GOT及CK释放量与解冻精子的活率负相关下降(分别为r＝-0.536,r＝-0.209及r＝-0.419,r＝-0.051),LDH的释放量与解冻精子的活率之间正相关(r＝0.123与r＝0.507).试验3结果证明在绵羊冷冻精液稀释液中添加维生素E可以显著提高精子顶体酶的活力,分别为82.91 mu/ml和99.82 mu/ml(P＜0.05).绵羊冷冻精液精子顶体酶活力与精子活率呈正相关(r=0.490),与精子畸形率呈负相关(r=-0.122),冷冻精子活率随着精子顶体酶活力的提高而提高.     

黄芩多糖对长白猪精液冷冻保存效果的研究

本研究旨在探讨不同浓度的黄芩多糖添加方案对猪冷冻精液保存效果的影响。猪冷冻处理的精液共6组,分别为空白对照组和添加不同浓度黄芩多糖的试验组（在冷冻稀释液中分别添加0.2、0.4、0.6、0.8、1.0g/L黄芩多糖）,对冷冻-复苏的精液进行精子活力及相关运动参数、精子质膜完整性、顶体完整率等指标检测。结果表明：与空白对照组相比,添加0.4 g/L的黄芩多糖对冷冻-复苏后的精子直线速度、曲线速度、平均路径速度、顶体完整率、DNA完整率和精子抗氧化酶活性均有提高（P<0.05）。0.6 g/L黄芩多糖组精液冷冻复苏后精子的运动参数、顶体完整率及抗氧化酶活性与0.4 g/L黄芩多糖组无显著差异。此外,0.8 g/L黄岑多糖组的质膜完整率及直线性高于其他组（P<0.05）。综上所述,添加不同浓度的黄芩多糖均可提高猪冷冻精液品质,其中提高猪冷冻精液保存质量的最适添加量是0.4 g/L。     

咖啡因对猪精液冷冻的影响及冷冻-解冻方法的优化

本试验对猪精液冷冻保护液中添加咖啡因的作用进行了研究,并优化冷冻-解冻程序,提高0.5 mL细管猪精液冷冻解冻后的质量。在预先设计稀释液配方的基础上,使咖啡因终浓度为0、0.2、0.4、0.6 mg/mL,选择最佳咖啡因浓度,选出最优组合与传统的TCG稀释液和商业用Androhep CryoGuardTM冷冻稀释液进行比较,比较3种不同的冷冻曲线对猪冷冻精液解冻后精子品质的影响,最后对38℃下30 s、50℃下13 s 2种解冻方法进行比较。结果表明,咖啡因浓度为0.2、0.4mg/mL的精子冷冻后活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于00、.6 mg/mL(P0.05),最佳添加浓度为0.2 mg/mL;预设计的稀释液配方及冷冻方案优于传统的TCG法(P0.05),但与Androhep CryoGuardTM稀释液(美国商业用)有一定差距(P0.05);A曲线在猪精液冷冻-解冻后活力、质膜完整率和顶体完整率方面均显著优于B和C冷冻曲线(P0.05);50℃水浴解冻13 s显著优于38℃解冻30 s(P0.05)。     

无角陶赛特羊冻精制作技术

对无角陶赛特种公羊 (n =10 )精液品质、精液保存稀释液和冷冻精液制作技术进行了研究。结果表明 :精液密度为 2 0 .0 3± 0 .2 5亿个 /ml,活率 (冻前为 0 .80± 0 .0 6 ,冻后为 0 .5 1± 0 .0 1) ,畸形率 (冻前为 10 .1± 1.0 3,冻后为 2 9.6±0 .3) ,死精子百分率为 14 .1± 7.1;冻精的平均菌落数小于 5 0 0个 /剂。从 3种精液稀释液中选出了一种最佳稀释液 (三羟基氨基甲烷 卵黄 葡萄糖 柠檬酸 ) ;从 3种冷冻保护剂中筛选出甘油为理想的抗冻保护剂 ,其最佳浓度为 4 %～ 6 %。     

不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃液态保存效果的影响

鱼精蛋白具有一定的抗菌效果和保护精子的作用,为探讨不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃保存效果的影响,本实验在Modena稀释液中分别添加0、5、10、20μg/m L的鱼精蛋白,在常温保存过程中,检测精子活率、路径速度、直线速度、畸形率等质量参数。结果表明:精液在17℃保存过程中,在Modena稀释液中添加10μg/m L的鱼精蛋白,精子活率、路径速度、直线速度显著高于其他组(P0.05),畸形率显著低于其他组(P0.05)。综上可知,17℃保存的过程中,在Modena稀释液中添加10μg/m L的鱼精蛋白能够提高精液的保存效果,延长猪精液的保存时间。     

维生素E对驴冷冻精液品质的影响

本试验是在驴冷冻精液稀释液中添加不同浓度的维生素E,通过对冻后精液活力、顶体完整率、顶体膨胀率、顶体破损率、尾部畸形率等几项指标的检测,筛选添加维生素E的最佳含量。结果表明：在驴精液稀释液中添加4%的维生素E后,冻后驴精液的品质要显著（P〈0.05）高于对照组与其它添加组。     

近交五指山小型猪精液冷冻保存技术的研究

用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。     

不同家禽卵黄对德国牧羊犬精液冷冻的影响

为了探索不同家禽卵黄在德国牧羊犬精液冷冻中的应用效果,分别在精液冷冻稀释液中添加不同家禽(鸽、鸡、鸭、鹅和鹌鹑)和不同浓度(10%、15%、20%、25%和30%)的卵黄,并分别对冷冻前和解冻后的精子活率、顶体完整率和畸形率进行比较分析。结果:在德国牧羊犬精液冷冻稀释液中加入相同浓度的5种不同家禽卵黄,家鸽组冻后活率、顶体完整率和畸形率分别为(52.0±2.1)%、(54.3±3.7)%和(27.7±1.8)%,对德国牧羊犬精液冷冻有最佳的保护效果,其最佳浓度为20%。因此,鸽卵黄可替代鸡卵黄,作为冷冻稀释液的组成成分,用于德国牧羊犬的精液冷冻。