贵州黑山羊RERG基因cDNA克隆与序列分析

选择与羊同源性较高的牛RERG基因组序列设计特异性引物,提取贵州黑山羊脾脏总RNA,通过RT-PCR技术对RERG基因进行克隆测序及序列分析。结果:首次克隆了贵州黑山羊RERG基因cDNA序列629 bp,GenBank登录号为JN672576,编码199个氨基酸;贵州黑山羊RERG基因蛋白与牛的同源性高达98.5%;聚类分析表明RERG基因编码区适于构建种间系统进化树。     

贵州黑山羊FAS基因CDS区的克隆与组织表达分析

为探究FAS基因在贵州黑山羊各组织中的表达情况,试验参考山羊FAS基因CDS区序列设计合成特异引物,利用PCR技术扩增贵州黑山羊FAS基因CDS区序列并进行生物信息学分析,利用qRT-PCR检测FAS基因在贵州黑山羊各组织中的表达量。结果：贵州黑山羊FAS基因CDS区全长981 bp,编码326个氨基酸,分子式为C₂₉₅₈H₄₉₃₇N₉₈₁O₁₂₂₁S₁₉₅;其核苷酸序列与绵羊同源性最高,蛋白二级结构主要由α螺旋和无规则卷曲组成;FAS基因在贵州黑山羊各组织中均有表达,表达量依次为脂肪>背最长肌>肺脏>大肠>脾脏>肾脏>腿肌>心脏>肝脏>小肠。结论：FAS基因在贵州黑山羊脂肪组织中表达量最高,对贵州黑山羊脂肪形成具有重要调控作用。     

贵州黑山羊繁殖性能调查报告

调查表明,贵州黑山羊具有性成熟早、多胎、双羔、常年可发情配种、繁殖力强等肉用山羊的特点。母羊初情期为3月龄左右,5～6月龄可配种繁殖;公羊8～10月龄就可配种。母羊产后第1次发情时间平均为28.68±5.47d,产配间隔70.26±15.43d。季节性繁殖较为明显,以每年2-3月、9-11月产羔,窝产羔1.57±0.25只。     

贵州黑山羊母羊血液生化指标测定分析

试验测定了5月龄、8月龄、1岁、2岁、3岁黑山羊(母羊)血液20项生化指标.结果表明:甘油三酯含量随黑山羊年龄的增长呈下降趋势,球蛋白含量为2岁黑山羊最高,极显著(P<0.01)高于 5月和8月龄的含量,显著(P<0.05) 高于1岁的含量.总胆固醇、高密度脂蛋白、总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、α-羟丁酸脱氢酶和钾等12项指标在各年龄段间不具有统计学意义,各年龄段与总平均值相比没有差异性.贵州黑山羊母羊在各年龄段大部分血液生化指标具有相对稳定性,这一结果能为黑山羊选育、疾病诊断、治疗和饲养管理提供参考.结果也表明贵州黑山羊具有较好的抗病及抗应激能力.     

贵州黑山羊秋季牧食行为观察

在秋季全放牧条件下,对体况相近、健康无病的10只贵州黑山羊的放牧行为进行昼夜跟踪观察。结果表明:贵州黑山羊昼夜反刍时间最长,为445 min,占昼夜24 h的30.9%,其中夜间反刍时间占全天反刍时间的73.2%,而采食、运动、静立、睡眠的时间分别为297.25、325.17、63.22、244.59 min;采食时间、运动时间均为白天大于夜间,而反刍时间、卧息时间和静立时间则是夜间大于白天,反刍与采食时间比为1.5︰1,昼夜反刍总食团数为个293.04个;该品种羊耐粗饲,采食快,攀爬能力强,对各种气候条件有良好的适应能力。     

饲料中不同脂肪含量对浏阳黑山羊肝功能的影响

目的旨在探索饲料中不同脂肪含量对本地浏阳黑山羊肝功能相关生化指标的影响。方法选取健康的浏阳黑山羊15只,分为对照组、高脂组Ⅰ和高脂组Ⅱ。根据国际标准方法检测饲料中的脂肪含量,并配制不同脂肪含量的饲料饲喂浏阳黑山羊,其中,对照组饲料中脂肪含量为3.8%,高脂组Ⅰ饲料中脂肪含量为15.2%,高脂组Ⅱ饲料中脂肪含量为7.6%。分别于饲喂后的第0天、第15天、第30天采集血液样本,并检测血清中丙氨酸转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、血清总蛋白（TP）、甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）含量。结果在饲喂不同脂肪含量饲料30 d后,高脂组Ⅰ与高脂组Ⅱ山羊体重均显著升高（P<0.05）,而试验前后对照组山羊体重无显著差异（P>0.05）。血清生化检测结果显示,与对照组比较,高脂组Ⅰ浏阳黑山羊血清中AST、ALP、TP含量显著升高（P<0.05）,而ALT、TC及TG含量无显著差异（P>0.05)。高脂组Ⅱ浏阳黑山羊血清中ALT、AST、ALP、TC含量显著升高（P<0.05）,TP含量无显著差异（P>0.05),而TG含量显著（P<0.05）下降。结论饲料中添加脂肪可促进山羊增重,但添加过多会引起山羊肝功能相关生化指标异常。该试验可为确定饲料中脂肪含量的合理配比提供参考。     

贵州黑山羊独立生长因子1B基因cDNA克隆与生物信息学分析

选择与羊同源性较高的牛独立生长因子1B(GFI1B)基因序列设计特异性引物,提取贵州黑山羊脾脏总RNA,通过RT-PCR技术对GFI1B基因进行克隆测序及序列分析。结果表明:首次克隆了贵州黑山羊GFI1B基因cDNA序列996 bp,GenBank登录号为JN662390,编码331个氨基酸。贵州黑山羊GFI1B基因与牛的同源性高达97.0%。聚类分析显示:哺乳动物、禽类和两栖类各为一类。生物信息学分析表明:山羊GFI1B分子包括1个低组分复杂性区域、6个锌指结构域ZnF-C4。同时,预测结果还表明GFI1B分子不包含信号肽序列且没有跨膜螺旋结构域,26个磷酸化位点,蛋白糖基化位点有7个。     

贵州黑山羊遗传结构的RAPD分析

用27条多态性引物对15份贵州黑山羊个体基因组进行RAPD分析结果共扩增出258条带,其中多态带为119条,多态频率在0-77．78％之间,平均多态频率为46．12％．单个引物获得的扩增带数在4-14条之间,平均每条引物扩增出9．56条带、扩增带分子量范围为230bp-2800bp、用Nei氏公式计算品种内个体间的遗传相似性指数平均为0．9023结果表明：贵州黑山羊个体间的遗传变异较大,具有较丰富的遗传结构。     

波尔已山羊与贵州黑山羊杂交改良效果研究

为对贵州黑山羊的选育与开发利用提供理论依据,试验以波尔山羊为父本,贵州黑山羊为母本,开展杂交效果研究,对波本一代(F1)和贵州黑山羊纯繁一代(F1)的产羔率、相关月龄体重变化及体尺进行对比分析.结果表明:波尔山羊配种能力强,产羔率、双羔率及成活率较之"本×本"杂组合均有较大幅度的提高,分别提高13.25%、19.49%...     

海南黑山羊血液生化指标与其肌间脂肪含量及肌纤维直径的相关分析

为研究利用血液生化指标间接选育海南黑山羊肉质的可能性,用SAS软件分别分析了海南黑山羊的血液生化指标与其肌间脂肪含量和肌纤维直径的相关、血液生化指标对肌间脂肪含量和肌纤维直径的直接和间接影响以及血液生化指标对肌间脂肪含量和肌纤维直径的决定程度,建立海南黑山羊血液生化指标与其肌间脂肪含量和肌纤维直径的最优回归模型.结果表明:①球蛋白与肌间脂肪含量呈极显著的负相关(r＝-0.4945,P＜0.01),球蛋白对肌间脂肪含量的决策系数最大,是影响肌间脂肪含量的最主要因素;葡萄糖与肌纤维直径呈显著的负相关(r＝-0.4014,P＜0.05),葡萄糖对肌纤维直径的决策系数最大,是影响肌纤维直径的最主要因素.因此,选择血液中球蛋白低的羊只有利于形成肌间脂肪丰富的海南黑山羊新品系;选择血液中葡萄糖高的羊只有利于形成肌纤维直径细的海南黑山羊新品系.②海南黑山羊各血液生化指标对其肌间脂肪和肌纤维直径的最优回归模型分别为Y1＝0.6000X1-0.1611X2-0.6238X3+0.1816X4-0.0586X5-0.0849X6-0.0691X7和Y2＝-0.0763X1+0.0629X2+0.2348X3-0.3403X4-0.3919X5+0.3140X6-0.2174X7.     

贵州黑山羊胚胎移植手术不同麻醉方法比较

为了筛选适合于贵州黑山羊胚胎移植手术的麻醉方法,试验以贵州黑山羊为试验动物,比较了速眠新Ⅱ注射液2种麻醉方法（肌肉麻醉和静脉麻醉）对山羊生理指标,麻醉山羊的诱导期、麻醉期、苏醒期,麻醉苏醒后山羊的采食、反刍及精神状况的影响。结果表明：2种麻醉方法下,麻醉效果优、良的山羊数量和生理指标无明显差异;速眠新Ⅱ注射液静脉注射麻醉时,山羊的诱导期、麻醉期和苏醒期均较短,在苏醒后0.5 h,90.0%的山羊可以采食,83.3%的山羊可以反刍,93.3%的山羊精神状况良好;苏醒后1 h基本上全部可以恢复正常;采用静脉注射麻醉山羊进行胚胎移植手术,速眠新Ⅱ注射液用药剂量小,且安全、有效,明显优于肌肉注射。     

毕节市贵州黑山羊养殖情况调查及发展建议

近年来,毕节市贵州黑山羊养殖量有所下降。为弄清原因,通过深入毕节市各县（区）养殖（场）户调查,分析得出放养区域大幅度减少、养殖方式尚未创新和比较效益逐年下降为主要原因,提出了允许科学利用灌木林和疏林地、推进黑山羊舍饲或半舍饲和提高养殖效益等建议。     

不同稀释液配方和冷冻保护剂对贵州黑山羊精液品质的影响

为探究适合贵州黑山羊冷冻精液的稀释液和冷冻保护剂,通过精液质量分析系统比较4种常用的山羊冷冻精液稀释液配方和2种冷冻保护剂对贵州黑山羊精液品质的影响。结果:不同配方中以甘油作为冷冻保护剂对贵州黑山羊精液的保护效果均优于乙二醇,且配方1的精子前进式活力最高(22.73±6.25),配方3次之(20.14±5.25)。结论:经综合评价,在贵州黑山羊冻精生产过程中可选择配方1或配方3作为冷冻精液稀释液,以甘油作为冷冻保护剂。     

贵州黑山羊羔羊早期断奶育肥试验

选择体重接近的贵州黑山羊1月龄羔羊20只,随机分为2组,对照组正常断奶,试验组实施30天断奶及直线强度育肥,在断奶期与育肥期设计不同的日粮进行饲喂.结果表明:早期断奶羔羊对断奶日粮适应期过渡正常,试验组与对照组体重差异不显著(P＞0.05).早期断奶补饲可以明显增加贵州黑山羊的体重及日增重(P＜0.01).试验组体尺在...     

调控CTSK基因的候选miRNA在单羔、多羔贵州黑山羊卵巢和子宫体的表达分析

以贵州黑山羊为研究对象,通过生物在线软件预测调控CTSK基因表达的候选miRNAs,采用荧光定量PCR法检测CTSK及其候选miRNAs在贵州黑山羊单、多羔性腺轴下丘脑、垂体、卵巢、输卵管、子宫体及子宫角6种组织中的表达量。结果：CTSK在单、多羔贵州黑山羊的6个组织中均有表达,在单羔组中表达量依次为子宫角>输卵管>卵巢>子宫体>垂体>下丘脑,其中在子宫角中的表达量显著高于其他组织(P<0.05),在多羔组中,其表达量依次为子宫体>输卵管>子宫角>卵巢>垂体>下丘脑,其中子宫体的表达量显著高于其他组织(P<0.05);组间比较可知,CTSK基因在多羔组子宫体中的表达量极显著高于单羔组(P<0.01),卵巢中的表达量极显著低于单羔组(P<0.01)。在线软件预测结果表明：miR-122、miR-205、miR-7、miR-30-5p和miR-124为调控CTSK表达评分最高的5条miRNAs。qPCR结果表明：5条miRNAs在子宫体和卵巢中均有表达,在子宫体中,单羔组和多羔组的表达量均依次为miR-12...     

双胎素对贵州黑山羊的试验效果

通过对80只贵州黑山羊适龄母羊注射双胎素,使胎繁殖率、双羔率达到118.8%和66.2%,较对照组分别提高40.8和22.4个百分点,差异极显著(P<0.01),且对怀孕母羊有保胎防流产作用;注射双胎素的母羊,每只每胎可净增加收入28.8元,能显著提高养羊户经济效益。     

贵州黑山羊BMP15和NPY-Y1R基因多态性与产羔数关联性分析

为了寻找贵州黑山羊产羔数相关性状的分子标记,采用PCR产物直接测序技术对贵州黑山羊BMP15、NPY-Y1R基因的两个位点进行多态性检测,并与产羔数进行关联性分析.结果表明,贵州黑山羊群体BMP15基因C6260G位点存在CC、GC、GG三种基因型,频率分别为0.55、0.29、0.16;该位点的多态信息含量0.33,...     

1周岁大足黑山羊体重与体尺的相关性研究

运用SPSS软件分析了1周岁大足黑山羊公羊、母羊的体尺与体重相关关系,并将其划分为直接作用和间接作用。确定各项体尺指标对体重的决定程度,并建立体尺对体重的最优回归方程。结果表明：1周岁大足黑山羊公羊的胸围、胸宽是影响其体重的最主要因素,其体尺指标对体重的最优回归方程为Y=51．683＋0．867X4＋1．148X6;母羊尻高、胸围和腰角宽是影响其体重的最主要因素．其体尺指标对体重的最优回归方程为Y=-18．890＋0．419X3＋0．250X4＋0．405X8。     

miR-7和miR-30-5p抑制CTSK表达对贵州黑山羊繁殖基因的影响

为验证miR-7和miR-30-5p对贵州黑山羊CTSK基因的调控效率及其对产羔基因的影响,通过生物软件筛选出调控CTSK效率最高的2条miRNAs:miR-7和miR-30-5p;将2条miRNAs转染至卵巢颗粒细胞,并于转染后24 h和48 h分别提取细胞总RNA,采用qRT-PCR法分别检测2条miRNAs在转染24 h和48 h的表达效率;同时检测miR-7和miR-30-5p过表达对CTSK基因及产羔相关基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B表达水平的影响。实验结果表明：转染miR-7和miR-30-5p至卵巢颗粒细胞24 h后,2条miRNAs的表达水平均极显著高于对照组（NC组）;转染48 h后,miR-30-5p表达水平极显著低于NC组,而miR-7与NC组相比无显著性差异。此外,过表达2条miRNAs对CTSK基因和繁殖相关基因的影响发现,与NC组相比,转染miR-7 24 h后能极显著抑制CTSK的表达,且上调产羔基因FSHβ、GDF9、BMP15的表达;而转染miR-30-5p对CTSK的表达无明显抑制作用,但极显著上调了产羔基因FSHβ、GDF9、B...     

绒山羊不同肌肉组织及肌内脂肪细胞的基因表达分析

试验旨在研究脂肪沉积关键基因在内蒙古白绒山羊的表达规律,以期深入分析绒山羊肌内脂肪沉积特征.利用实时荧光定量PCR技术检测PPARγ、FTO、Lipin、LPL、HSL、A-FABP和Perilipin7个基因在绒山羊10个不同肌肉组织及肌内前体脂肪细胞分化的3个时期(早期(D3)、中期(D7)、末期(D11))、诱导分化关键时间点(24、48、72和96 h)的变化,分别从组织和细胞角度对其进行分析,并研究其与肌内脂肪含量的关系.结果表明,FTO基因的表达水平高于其他基因;Lipin基因的表达量最低;LPL和HSL是脂肪合成和分解的关键酶类,其表达趋势大致相同,仅仅在腰大肌和斜方肌这两个部位的表达模式相反.A-FABP和Perilipin基因表达模式也较为特殊,整体表达量较低,前者仅仅在胸下矩肌中有较高表达,后者在股二头肌中有较高表达.从细胞水平分析发现Lipin、PPARγ、A-FABP和Perilipin的表达模式相似,随着前体脂肪细胞培养日龄的增加和甘油三酯的积聚,其表达量逐渐升高;Lipin基因在各个时间点的表达丰度极低;HSL基因的表达量随分化程度的升高而逐渐降低;Perilipin基因仅仅在诱导分化的后期有较高表达.相关性统计分析发现,PPARγ基因mRNA与肌内脂肪多呈负相关;而其他成脂基因HSL、LPL、FTO、Lipin、Perilipin、A-FABP mRNA与肌内脂肪含量多呈正相关.因此,脂肪沉积关键基因的表达具有特异性,总体上看基因表达量为FTO> PPARγ> LPL >HSL> A-FABP >Perilipin >Lipin,该结果为进一步研究脂肪沉积机制及优化山羊肉品质奠定基础.