2-甲氧基肉桂醛缓解猪IPEC-J2细胞氧化损伤的效果研究

本试验旨在研究2-甲氧基肉桂醛(2-MCA)对猪肠上皮细胞IPEC-J2氧化损伤的保护效果。利用过氧化氢(H₂O₂)建立IPEC-J2细胞氧化损伤模型;通过CCK8法确定2-MCA缓解H₂O₂处理后IPEC-J2细胞适宜的浓度与处理时间;随后通过试剂盒法测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)、应激产物丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、抗氧化指标总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性;通过荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞内CAT、GPx-1、HO-1、NQO-1、SOD和Nrf2基因表达量。结果显示：(1) 1 000μmol/L H₂O₂处理4 h时,细胞存活率为50%左右,细胞上清LDH活性增加(P<0.01),表明氧化应激模型建立成功;(2) 12、24、48 h时2.5～40μmol/L 2-MCA处理细胞均可缓解H₂O₂引起的存活率...     

丁酸钠与VD3对IPEC-J2细胞β-防御素3 mRNA表达的协同作用

研究旨在验证丁酸钠与维生素D3 (VD3)联合使用对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)β-防御素-3(pBD3) mRNA表达的协同作用.试验分别设置丁酸钠组、VD3组、丁酸钠与VD3联合使用组.使用荧光定量PCR检测各试验组对猪小肠上皮细胞pBD3基因表达水平的影响.结果 表明,不同浓度丁酸钠均能上调β-防御素-3 m...     

不同锌源和锌水平对猪IPEC-J2细胞GLP-2基因表达的影响

本试验旨在探讨不同锌源及锌水平对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)胰高血糖素样肽2(GLP-2)表达的影响。分别以乳酸锌、硫酸锌(锌浓度分别为50、100、150、200 mg/L)作用IPEC-J2细胞,实时荧光定量RT-PCR方法检测GLP-2 mRNA表达,以β-actin mRNA水平作为内参对照。结果表明:在6、12 h检测时间点,不同锌源和水平及其互作对GLP-2 mRNA表达影响极显著(P<0.01);在24 h时不同锌源对其表达影响极显著(P<0.01),锌添加水平对其表达影响显著(P<0.05),不同锌源与锌添加水平交互作用则不显著(P<0.05);乳酸锌、硫酸锌促进GLP-2基因mRNA表达均具有正向浓度效应。乳酸锌和硫酸锌均可上调肠道细胞GLP-2基因mRNA的表达;在同等锌浓度水平下,乳酸锌促进GLP-2基因表达的效果优于硫酸锌。     

超氧化物歧化酶模拟物对氧化应激IPEC-J2细胞抗氧化性能的影响

试验旨在探究在H₂O₂诱导的氧化应激状态下,超氧化物歧化酶模拟物（SODm）对仔猪空肠上皮细胞系（IPEC-J2）的保护作用。利用MTT法筛选出构建氧化应激模型H₂O₂的适宜浓度;将IPEC-J2细胞分别用0、0.05、0.5、5、50、500、2 000 U/mL SODm进行培养,利用MTT法分别在2、4、8、12 h时测定各组细胞存活率,筛选出SODm作用的适宜浓度和时间;根据构建的氧化应激模型和SODm适宜浓度和时间,将IPEC-J2细胞随机分为空白组、模型组、SODm处理组（SODm_0.5、SODm₅、SODm₅₀）和超氧化物歧化酶（SOD）处理组（SOD_0.5、SOD₅、SOD₅₀）,分别测定各组细胞存活率、活性氧（ROS）含量及细胞内SOD、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量和总抗氧化能力（T-AOC）。结果表明：①H₂O₂构建细胞氧化应激模型的适宜浓度是1.0 mmol/mL。②当不同浓度SODm分别作用4、8、12 h时,0.5~50 U/mL SODm组细胞存活率显著高于空白组（P<0.05）;且8 h时存活率最高,在12 h时处于下降趋势。③除空白组外,SODm₅和SOD₅预处理的IPEC-J2存活率显著高于其他组（P<0.05）;且SODm和SOD组中细胞ROS含量显著低于模型组（P<0.05）;模型组与空白组相比,均显著降低了SOD、GSH-Px活性和T-AOC水平,提高了MDA含量（P<0.05）;与模型组相比,所有SODm和SOD处理组均显著提高了SOD、GSH-Px活性和T-AOC水平,降低了MDA含量（P<0.05）,同时SODm₅₀组T-AOC水平显著低于SOD₅₀组（P<0.05）。综上,SODm对H₂O₂诱导氧化损伤状态下IPEC-J2具有保护作用。     

地锦草水提物在IPEC-J2细胞中的抗炎与抗氧化作用

【目的】为了揭示地锦草(EH)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中的抗炎和抗氧化作用。【方法】利用不同浓度EH水提物(0、5、10、50、125、200μg/mL)处理IPEC-J2细胞12 h,通过CCK-8法检测IPEC-J2细胞活力,确定EH处理细胞的最佳浓度。将IPEC-J2细胞随机分为对照组(CT)、脂多糖(LPS)组(LPS)、EH+LPS组(ELP),每组3个重复。CT组细胞正常培养不做任何处理,LPS组细胞用5μg/mL LPS处理,ELP组细胞用5μg/mL LPS和最佳浓度EH共处理,各组细胞均处理12 h后,收集细胞和上清。利用实时荧光定量PCR方法检测细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)mRNA表达;ELISA法检测上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,化学荧光法检测上清液中活性氧(ROS)水平。【结果】与0μg/mL EH组相比,5、50μg/mL EH组IPEC-J2细胞...     

枯草芽孢杆菌对轮状病毒感染IPEC-J2细胞相关TLRs mRNA表达的影响

为研究枯草芽孢杆菌(B.subtilis)是否通过激活猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中Toll样受体(TLRs)的表达抑制轮状病毒(RV)的复制,本研究采用RV感染灭活B.subtilis预处理的IPEC-J2细胞,鉴定B.subtilis对RV在细胞中增殖的抑制作用,并检测不同时间点RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞中相关TLRs的表达。结果显示,RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞24 h后,与未处理细胞相比,其病毒的增殖能力显著被抑制。通过荧光定量PCR检测不同处理组细胞TLRs m RNA的表达水平,结果表明RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞在感染早期(1 h和3 h)与其他组相比,TLR2、TLR3、TLR9 m RNA表达均显著增加。本研究表明,灭活的B.subtilis能够抑制RV在IPEC-J2细胞中的增殖,并在病毒感染初期显著提高细胞TLRs m RNA表达,推测可能与调节宿主细胞的先天免疫反应有关。     

蝇蛆抗氧化肽对IPEC-J2细胞氧化应激损伤的保护作用

【目的】以蝇蛆抗氧化肽(FTP)为研究对象,利用体外化学和细胞试验,探究FTP对DPPH和ABTS⁺·自由基清除能力以及对IPEC-J2细胞氧化应激损伤的保护作用。【方法】通过测定不同浓度(500、1 000、2 000、3 000、4 000μg/mL)FTP对DPPH、ABTS⁺·自由基的清除率检测FTP的体外抗氧化能力;将IPEC-J2细胞用不同浓度(0、100、250、500、1 000、2 000μg/mL)FTP培养,利用MTT法测定孵育24 h后各组细胞的存活率;利用MTT法筛选出适宜的过氧化氢(H₂O₂)浓度构建氧化应激模型;根据构建的氧化应激模型和FTP适宜的浓度梯度,将IPEC-J2细胞随机分为空白组、模型组、试验组(100、250、500、1 000μg/mL),分别测定各组细胞存活率、活性氧(ROS)水平以及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)水平。【结果】当FTP浓度为4 000μg/mL时DPPH和ABTS⁺·自...     

虾青素对IPEC-J2细胞抗氧化、抗炎和抗凋亡能力的影响

本试验旨在研究虾青素（AST）对IPEC-J2细胞抗氧化、抗炎和抗凋亡能力的影响。以IPEC-J2细胞作为研究对象,经不同浓度[0（对照组）、5、10、20、40、80和100μmol/L]的AST处理24 h后,通过实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术检测AST对IPEC-J2细胞的影响。结果显示：1）与对照组（未添加AST）相比,10～80μmol/L的AST极显著提升细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性（P<0.01）,细胞内总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）的mRNA相对表达量分别在10～100μmol/L AST和40～100μmol/L AST处理后显著或极显著增加（P<0.05或P<0.01）。2）核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的mRNA相对表达量随着AST浓度的增加整体呈现下降趋势,100μmol/L的AST与对照组的差异达到极显著水平（P<0.01）;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓样分化因子88(MyD88)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA相对表达量在AST浓度达到10...     

乳酸菌对IPEC-J2细胞黏着斑激酶磷酸化及紧密连接蛋白Occludin表达的影响

本试验旨在探讨嗜酸乳杆菌(LAB1)如何影响黏着斑激酶(FAK)磷酸化及紧密连接蛋白Occludin的表达。用高(1.0×109 CFU·mL-1)、中(1.0×108 CFU·mL-1)、低(1.0×107 CFU·mL-1)3种浓度的致病性大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)和霍乱沙门菌(Salmonella choleraesuis,S.cho)对猪空肠上皮细胞系(IPEC-J2)进行感染后,用高、中、低3种浓度的LAB1作用于感染后的IPEC-J2(模拟治疗试验),用Western blotting检测FAK第397位酪氨酸磷酸化水平;用ELISA方法检测Occludin表达水平。结果显示:在LAB1模拟治疗S.cho感染的试验中,FAK磷酸化水平和Occludin的表达量与LAB1浓度呈正浓度效应,而与S.cho浓度呈负浓度效应;3种浓度的LAB1处理中、低浓度S.cho感染时,组间相互比较差异显著(P<0.05)。在LAB1模拟治疗E.coli感染的试验中,FAK磷酸化水平和Occludin表达量与LAB1浓度呈正浓度效应,3种浓度的LAB1处理低浓度E.coli感染时,组间相互比较差异显著(P<0.05)。结论:LAB1激活受E.coli和S.cho抑制的FAK磷酸化,并能上调细胞紧密连接蛋白Occludin的表达。     

N-乙酰半胱氨酸预处理对热应激IPEC-J2细胞氧化损伤和内质网应激的影响

本试验旨在研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）对热应激诱导的猪小肠上皮细胞IPEC-J2抗氧化能力、内质网应激通路蛋白表达和细胞凋亡的影响。采用单因子试验设计,试验分3组,分别为对照组（CON,37℃）、热应激组（HS,43℃）和NAC加热应激组（NAC+HS,43℃）。其中NAC+HS组细胞在NAC(0.5 mmol/L)预处理12 h后,进行热应激处理4 h,测定细胞氧化损伤情况、活性氧自由基（ROS）含量、抗氧化酶的活性、线粒体膜电位变化、细胞内质网应激和凋亡相关蛋白的表达。结果表明：与CON组相比,热应激导致细胞中ROS和丙二醛（MDA）含量显著增加,铜锌超氧化物歧化酶（SOD1）、锰超氧化物歧化酶（SOD2）和过氧化氢酶（CAT）的表达量提高（P<0.05）;与HS组相比,添加NAC降低了氧化损伤和抗氧化酶（SOD2、CAT）的表达（P<0.05）。与CON组相比,热应激增加热休克蛋白A5(HSPA5)、磷酸化真核细胞翻译启始因子2α(p-eif2α)、转录激活因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白（CHOP）蛋白表达量（P<0.01）;添加NAC降低HSPA5、...     

热敏肠毒素促进产肠毒素大肠杆菌对小肠上皮细胞系IPEC-J2的黏附的初步研究

本试验利用PCR技术,以K88ac标准株C83902基因组DNA为模板扩增出热敏肠毒素(heat-labile toxins,LT)基因,大小约1.1 kb。将其克隆入表达质粒载体pACYC184,构建和筛选出含正确插入LT基因的pACYC-LT重组质粒。采用同样方法,构建和筛选出两种含点突变LT基因的重组质粒(pACYC-LT72和pACYC-LT192)。进一步将上述重组质粒DNA转化入不表达任何毒素的大肠杆菌SE5000株。GM1-ELISA结果表明,上述重组菌均能在体外正常表达LT毒素蛋白。以猪小肠上皮细胞系IPEC-J2为模型,比较了表达和不表达LT的细菌对细胞黏附性能。数据表明,LT的表达使细菌对肠上皮细胞的黏附效应明显增加(12.3±3.4倍)。两种LT毒素蛋白的单氨基酸突变体的表达证明了LT毒素的ADP核糖基化作用对其增强致病菌对肠细胞的黏附作用是必要的。蛋白激酶A的抑制剂Rp-cAMP、腺苷酸环化酶的抑制剂DDA和LT毒素的受体GM1都可阻断LT毒素对细菌黏附性能的提升作用。     

7S β-伴大豆球蛋白通过NF-κB信号通路引起IPEC-J2细胞的炎性反应

采用细胞体外培养技术,研究不同浓度7Sβ-伴大豆球蛋白对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)的影响。试验分为A、B、C、D、E、F 6组,其中A为对照组,其余各组中分别添加1、5、10、5、5 mg·mL^-1的β-伴大豆球蛋白,并且在E和F组分别添加1μmol·L^-1 NF-κB(PDTC)和iNOS(L-NAME)抑制剂。用CCK-8法检测各组细胞存活率,用ELISA法检测细胞NO、DAO、5-HT、IL-6和IL-10含量,用Western blot法检测细胞p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量,用qPCR法检测细胞NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对转录量。结果显示:β-伴大豆球蛋白降低IPEC-J2细胞存活率,添加PDTC和L-NAME增高IPEC-J2细胞存活率,促进NO、DAO、5-HT和IL-6的分泌,并降低IL-10的分泌,同时增加p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量及NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对转录量,添加PDTC和L-NAME后抑制了β-伴大豆球蛋白的作用。结果表明,β-伴大豆球蛋白引起IPEC-J2细胞损伤,随浓度增大损伤增加,PDTC和L-NAME可以降低β-伴大豆球蛋白对细胞的作用。     

乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响

旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4 mRNA表达的影响.用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200 mg·L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方法检测Zn T2、DMT1、IREG-1、MT1及ZIP4 mRNA表达,以TBPmRNA的表达水平作为内参对照.在细胞培养前36 h,乳酸锌对IPEC-J2细胞基本没有影响,随锌浓度递增细胞增殖幅度升高;乳酸锌处理IPEC-J2细胞后,Zn T2、DMT1、IREG-1及MT1 mRNA表达随锌浓度增高而升高,ZIP4 mRNA表达则随锌浓度增高而降低.添加乳酸锌可以促进IPEC-J2细胞增殖,上调ZnT2、DMT1、IREG-1、 MT1 mRNA表达,下调ZIP4 mRNA表达.     

低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮对IPEC-J2细胞紧密连接蛋白表达的影响

试验旨在探究低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮（zearalenon,ZEN）对猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）紧密连接蛋白表达的影响。试验分为对照组（C）、ZEN （30 μg/mL ZEN）、ZEN+0.5 Se （30 μg/mL ZEN+0.5 μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计）、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组。待细胞长至60%~70%汇合时,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组培养液更换为含对应Se浓度的培养液,C和ZEN组更换为正常培养液,12 h后向含ZEN组加入30 μg/mL ZEN,继续培养24 h。收集各组细胞培养液,检测碱性磷酸酶（AKP）活性;Western blotting法检测闭锁连接蛋白（zonula occludens-1,ZO-1）、闭合蛋白（Occludin）的表达,免疫荧光法检测ZO-1和Occludin蛋白的表达和定位情况。AKP活性检测结果表明,与对照组相比,ZEN、ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se组AKP活性均显著升高（P<0.05）,ZEN+3 Se组AKP活性差异不显著（P>0.05）;与ZEN组相比,ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组AKP活性均显著降低（P<0.05）。Western blotting检测结果表明,与对照组比,ZEN组ZO-1和Occludin蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）;与ZEN组比,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组ZO-1表达水平均差异不显著（P>0.05）,但随着Se浓度的增加,ZO-1表达水平逐渐升高,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se、ZEN+3 Se组Occludin表达水平均显著升高（P<0.05）。免疫荧光结果表明,低聚壳聚糖硒可缓解ZEN引起的ZO-1和Occludin蛋白荧光信号减弱现象,并恢复ZO-1和Occludin蛋白的定位分布。由此说明,低聚壳聚糖硒可降低ZEN引起的IPEC-J2细胞AKP活性升高,上调ZEN引起的ZO-1、Occludin蛋白表达水平下降,并调节其定位分布。     

赭曲霉毒素A对IPEC-J2细胞生长和氧化还原平衡的影响

实验以IPEC-J2细胞为材料,研究不同浓度和时间处理下赭曲霉毒素A(OTA)对仔猪空肠上皮细胞增殖存活的影响,并进一步考察不同浓度OTA对细胞的结构功能完整性和抗氧化防御系统的影响。结果表明:OTA暴露时间和浓度对细胞存活率均有影响(P<0.01),且二者存在显著交互效应(P<0.01)。在OTA暴露24 h条件下,细胞钠钾ATP酶(Na+,K+-ATPase)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽S转移酶(GST)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)随OTA浓度增加呈线性或者二次曲线降低(P<0.01),过氧化氢酶(CAT)活性有降低趋势,丙二醛(MDA)含量呈线性增加(P<0.05);胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性随OTA浓度增加呈线性或者二次曲线增加(P<0.01);OTA处理对超氧化物歧化酶(SOD)活性无明显影响(P>0.05)。结果显示,OTA破坏了IPEC-J2细胞的结构功能完整性,最终导致细胞的增殖或存活率降低,氧化应激可能是毒性效应发生的重要机制。     

辣蓼黄酮正丁醇部位对PRV感染3D4/2细胞氧化应激相关因子水平的影响

【目的】探究辣蓼黄酮正丁醇部位(N-butanol fraction of Polygonum hydropiper flavonoids, FNB)对猪伪狂犬病毒(Pseudoabies virus, PRV)体外感染猪肺泡巨噬细胞(3D4/2细胞)氧化应激相关因子的影响,旨在初步分析FNB的抗氧化效果。【方法】采用10^-1至10^-10浓度PRV体外感染猪肾细胞(PK15细胞),计算病毒半数组织培养感染剂量(TCID₅₀);将3D4/2细胞分为BC组、DMSO组、PRV组、FNB 1、FNB2和FNB3组,BC组用DMEM培养液处理,其余各组用感染复数(multiplicity of infection, MOI)=0.1 RPV处理,孵育2 h后,PRV组添加DMEM培养液,DMSO组及FNB1、FNB2、FNB3组分别添加0.05%DMSO及12.5、25、50μg/mL FNB的DMEM培养液。培养4、8、12、24 h后,分别收取各组细胞培养液上清和细胞,通过试剂盒测定细胞培养液上清中一氧化氮(NO)的含量、细...     

乳酸锌和硫酸锌对猪肠上皮细胞锌转运载体和屏障功能影响的比较研究

本研究旨在比较乳酸锌和硫酸锌对仔猪肠上皮细胞IPEC-J2锌转运功能、物理屏障和免疫屏障的影响。将IPEC-J2细胞分别用0、1.0、5.0、7.5、10.0和20.0 mg/mL的乳酸锌或硫酸锌(以锌计)培养36 h,筛选出细胞增殖的最适浓度。根据筛选结果将IPEC-J2细胞随机分为对照组、乳酸锌组和硫酸锌组,每组3个重复。结果表明：1)与对照组相比,7.5 mg/mL乳酸锌和硫酸锌均可显著提高细胞活力(P<0.05),且同等浓度条件下乳酸锌的促进效果更显著。2)与对照组相比,乳酸锌组和硫酸锌组细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量均显著降低(P<0.05),且硫酸锌组细胞内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P<0.05),乳酸锌组细胞内TNF-α mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,乳酸锌组细胞内封闭蛋白-1(claudin-1)的蛋白相对表达量显著提高(P<0.05),细胞内E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白相对表达量无显著差异(P>0.05)。4)与对照组相比,硫酸锌组...     

猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及10⁰、10^-1、10^-2和10^-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清（FBS）的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮（NO）水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧（ROS）水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽（GSH）水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法测定白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）以及环氧合酶1（COX-1）和COX-2的分泌水平。【结果】10⁰至10^-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,10⁰ PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高（P<0.01）,10^-1至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;10⁰至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高（P<0.05）,细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,其中10⁰ PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且10⁰ PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。     

镉对小鼠生精细胞凋亡及bax和bcl-2基因表达的影响

将150只小鼠随机分成4个处理组和1个对照组，每组30只。给4个处理组小鼠分别一次性注射氯化镉1、2、4、6mg／kg（按体重给药），对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后第3、6和9d用原位末端标记法（TUNEL）测定睾丸内生精细胞的凋亡率，并用免疫组织化学方法检测bax和bcl-2基因的表达水平。结果显示，各染毒组小鼠的生精细胞凋亡率明显升高，与对照组相比差异显著（P〈0．05），并具有剂量-反应关系和时间-反应关系。bax基因的表达水平明显上升，而bel-2基因的表达水平明显下降。表明，镉可以诱导小鼠生精细胞凋亡，其机制可能与bax基因上调和bcl-2基因下调有关。     

大豆异黄酮对过氧化氢诱导IPEC-J2细胞氧化应激的影响

本文旨在研究大豆异黄酮(SIF)对缓解猪肠道细胞氧化应激损伤的影响。试验采用体外细胞培养方法,使用过氧化氢(H_2O_2)将猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)诱导为氧化应激状态后,分别用10、50、100μmol/L大豆异黄酮和100μmol/L乙氧基喹啉(EMQ)处理16 h。结果表明,经H_2O_2诱导的氧化模型组细胞存活率显著低于溶剂对照组、SIF 10组、SIF 50组和SIF 100组(P﹤0.05),细胞内ROS和MDA水平,SIF 10组、SIF 50组和SIF 100组均极显著低于氧化模型组(P﹤0.01),而细胞内SOD水平均高于氧化模型组,且SIF 100组达到极显著水平(P﹤0.01);乙氧基喹啉(EMQ)组与氧化模型组相比,细胞存活率和ROS显著降低(P﹤0.05),但细胞内MDA和SOD水平没有显著差异(P0.05)。结果提示大豆异黄酮具有缓解细胞氧化应激作用。