水牛有腔卵泡颗粒细胞凋亡的生物形态学特征

为了解水牛有腔卵泡闭锁的起因和有腔卵泡中是否存在卵泡颗粒细胞凋亡，本研究选择青春期前水牛和成年（发情间期和发情期）水牛的卵巢，采用石蜡组织切片、HE染色技术进行光镜观察，并采用DNA原位末端标记（TUNEL）技术和透射电镜观察研究了卵泡颗粒细胞凋亡的特征。结果表明：青春期前水牛的健康有腔卵泡上无或仅有极个别凋亡的卵泡颗粒细胞（GCs），而闭锁有腔卵泡上存在有多量凋亡的GCs，凋亡的形式：GCs层内出现单个或多个凋亡细胞，卵泡腔内出现凋亡小体群。在成年水牛发情间期的闭锁大卵泡上，GCs层弯曲皱折，存在多量凋亡的GCs。发情期水牛成熟卵泡的GCs层也存在GCs凋亡，排卵前的GCs层细胞全部脱落到卵泡腔内。本研究首次在同一组织切片上先后分别应用HE染色和TUNEL检查细胞凋亡，且证实了水牛有腔卵泡GCs凋亡的存在。超微结构显示了GCs凋亡的核边集化、核浓缩及凋亡小体的形态。上述结果提示：在水牛闭锁有腔卵泡中存在着GCs凋亡，GCs凋亡是启动水牛有腔卵泡闭锁的潜在机理。     

猪卵泡闭锁期间凋亡因子对颗粒细胞的影响

在哺乳动物卵巢中,约有99%的卵泡经历一个"闭锁"的退化过程,在卵泡发育期间仅有少数发育、排卵.多数未知的分子机制(包括细胞死亡配体-受体系统)是控制哺乳动物闭锁卵泡上颗粒细胞凋亡的主要因素,在猪卵巢颗粒细胞的报道中至少有5种细胞死亡配体-受体系统.文章阐述了猪卵泡闭锁期间凋亡因子对颗粒细胞的影响.     

啮齿动物卵泡颗粒细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡一直是生物学研究的热门课题。卵泡颗粒细胞凋亡引起的卵泡闭锁是卵巢衰退的原因之一,揭示卵泡颗粒细胞凋亡的分子机制有助于降低细胞的凋亡率,延长卵巢寿命。本文对细胞凋亡的过程与调控机制以及影响啮齿类动物卵泡颗粒细胞凋亡的因素进行阐述,为进一步研究细胞凋亡调控机制奠定理论基础。     

颗粒细胞凋亡影响家禽卵泡闭锁的研究进展

卵巢是家禽的重要繁殖器官,会产生大量卵泡,而卵泡在生长发育的各个阶段中都可能因为不同因素的调控而发生闭锁,最终导致繁殖性能衰退。颗粒细胞对卵泡的生长发育有重要调控作用,其凋亡会诱导卵泡发生闭锁。诱导颗粒细胞发生凋亡的因素较多,包括激素、细胞因子、氧化应激、线粒体及其他体外因素。颗粒细胞凋亡主要由线粒体途径导致,其涉及到半胱天冬酶（Caspase）家族参与,当线粒体裂解时会释放细胞色素C （Cyt-C）,随后形成凋亡小体激活Caspase-3和Caspase-8,最终激活Caspase-9导致颗粒细胞凋亡;当颗粒细胞发生凋亡,家禽体内卵泡丧失生物功能并且卵泡细胞之间的调控失衡,促使卵泡内卵母细胞和膜细胞凋亡,最终导致卵泡发生闭锁;颗粒细胞在存活状态下所分泌的生长因子、性腺类固醇、细胞因子能减少卵母细胞氧化损伤,防止细胞内活性氧（ROS）水平过高导致的线粒体DNA损伤,从而避免线粒体功能障碍而造成的颗粒细胞凋亡。作者从颗粒细胞凋亡及其影响因素、颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁的关系、颗粒细胞凋亡对卵泡闭锁的影响3个方面进行阐述,以期为减少卵泡闭锁、提高家禽繁殖性能提供理论依据。     

猪卵巢发育的组织学变化及卵泡闭锁规律研究

旨在对不同日龄猪卵巢组织结构以及卵巢发育过程中卵泡闭锁规律进行研究。取3、40、50、60、72、86、95及165日龄猪卵巢各3例,采用常规石蜡切片、HE染色和TUNEL技术检测卵巢组织结构及卵泡闭锁规律,结果表明,猪卵巢发育从组织学上可分为卵原细胞增殖期、卵泡缓慢生长期及卵泡快速生长期3个阶段。卵原细胞增殖期主要以卵原细胞的增殖分裂为特点;在卵泡缓慢生长期,原始卵泡的数量随日龄增加逐渐减少,初级卵泡数量及体积则明显增加;至卵泡快速生长期,生长卵泡的数量及体积继续增大,其数量在86日龄达到最大值;72日龄卵巢中出现三级卵泡,至95日龄卵巢中出现近成熟卵泡。在各时期的卵巢组织,均可观察到卵原细胞及卵泡的闭锁现象,以原始卵泡的退化最为显著。TUNEL检测表明,在卵原细胞增殖期,可见大量原始卵泡及初级卵泡的闭锁,其闭锁主要源自卵泡卵母细胞的凋亡。在卵泡缓慢生长期,各级生长卵泡均可出现闭锁,初级卵泡的闭锁主要由卵母细胞的凋亡引起,也有部分是同时伴有卵母细胞和卵泡细胞凋亡的;次级卵泡的闭锁则主要由于颗粒层细胞的凋亡所致。在卵泡快速生长期,随着卵泡的快速生长,各级卵泡的闭锁也变得更加明显,次级卵泡及三级卵泡的闭锁主要是由颗粒细胞凋亡引起。     

辽宁绒山羊卵泡闭锁中颗粒细胞凋亡特点的研究

本试验采用TUNEL原位法和DNA梯度电泳法等方法对卵巢上闭锁卵泡中凋亡的颗粒细胞类型和分布状况等进行研究。结果表明，辽宁绒山羊闭锁卵泡是细胞凋亡引起的。DNA梯状电泳表明，不同健康程度卵泡颗粒细胞凋亡程度不同；而颗粒细胞TUNEL原位标记表明，健康卵泡、轻度闭锁卵泡及闭锁卵泡中颗粒细胞凋亡比例分别为13.21%±1.23％、32.13%±2.13％、51.31%±3.02％；不同健康程度卵泡中类固醇激素水平不同，健康卵泡中E2水平较高，孕酮浓度较低；闭锁卵泡中E2浓度较低，P4浓度较高，健康、轻度闭锁和闭锁三类卵泡中E2/P4比值分别是2.62±0.03、0.074±0.0003、0.028±0.0004。     

miRNA调节卵泡颗粒细胞凋亡及其机制的研究进展

微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类内源性非编码RNA,具有广泛的基因表达调控作用,可以在转录后水平通过影响靶基因来调控相应蛋白质的表达,进而调节细胞的生命活动。miRNA在哺乳动物卵泡颗粒细胞中表达,并调控颗粒细胞的凋亡。颗粒细胞作为卵巢卵泡中数量最多的细胞群,在卵泡发育过程中起着至关重要的作用,不仅为卵母细胞提供营养物质,还调控其发育和成熟。颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因,影响卵泡的数量和质量从而影响雌性动物的繁殖性能。颗粒细胞凋亡过程受多种因素的调控。文章简述了miRNA对卵巢颗粒细胞凋亡的调控作用及其机制,其中包括miRNA通过调控激素分泌和细胞凋亡相关因子的表达进而调节颗粒细胞的凋亡,miRNA对颗粒细胞凋亡相关信号通路的影响,miRNA调控颗粒细胞凋亡导致的卵巢相关疾病,并总结了对颗粒细胞凋亡有调控作用的miRNA,以及miRNA在疾病诊断和治疗中的潜在作用,以期为后续相关卵巢疾病的发病机制和治疗方案研究,以及提高雌性哺乳动物生殖性能提供指导和参考。     

优良家畜(奶牛、猪)卵巢资源高效利用的生物学基础研究

哺乳动物出生时，卵巢中存在大量处于成熟分裂前期的原始卵泡卵母细胞。以牛为例，母牛在出生时，其卵巢上的原始卵泡数有数百万个，随着母牛年龄的增长其数量下降，在原始卵泡中不断有一些卵泡在发育的过程中闭锁退化。在母牛达到初情期以后，周期性地有卵泡发育成熟并排卵。在母牛有效繁殖年限内，卵巢上发育为有腔卵泡的数量(无论是退化的还是排卵的)只占原始卵泡库极少比例，绝大多数卵母细胞均未被利用，造成遗传资源的浪费。     

家禽卵泡闭锁研究进展

家禽卵泡闭锁是繁殖过程中重要生理现象,也是一种多因素调控的选择性细胞凋亡过程。研究卵泡的闭锁可以为家禽繁殖性能提高提供理论依据。对家禽的卵泡颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁、激素对颗粒细胞凋亡的影响、颗粒细胞凋亡的相关基因、生长因子、细胞因子和mi RNAs等方面进行了综述。     

生殖激素调节颗粒细胞凋亡的机制研究进展

研究表明颗粒细胞凋亡是卵泡闭锁的重要原因,调控颗粒细胞凋亡的因素是多种的,而生殖激素如生长激素、抑制素、活化素、卵泡抑素等间接地和直接地对卵巢卵泡颗粒细胞凋亡发挥重要的综合调控作用,这些激素通过多种信号转导途径调节颗粒细胞的凋亡,成为卵泡的存活因子和死亡因子.这些途径相互交联,构成信号网络,与卵巢的旁分泌、内分泌、自分泌途径一起参与卵泡闭锁和颗粒细胞的凋亡.     

牛卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡基因表达研究

颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁是颗粒细胞功能基因及凋亡相关基因的表达结果,通过手术法获取三种不同直径的牛卵泡(小型卵泡2 mm;中型卵泡2~6 mm;大型卵泡6mm),分离卵泡颗粒细胞并提取总RNA,以研究不同直径卵泡中颗粒细胞相关基因的表达。结果表明,牛卵巢上小型卵泡颗粒细胞中Fshr的表达显著低于中型和大型卵泡(P0.05),而中型和大型两者之间差异不显著(P0.05);中型卵泡和小型卵泡颗粒细胞中CYP19的相对表达显著低于大型卵泡(P0.05);中型卵泡和小型卵泡颗粒细胞中促细胞凋亡基因BAX的表达显著低于大型卵泡(P0.05),而在中型和大型卵泡颗粒细胞中抑制细胞凋亡基因BCL2的表达显著低于小型卵泡(P0.05),且随着卵泡的增大而下调;Casapase 8与Caspase3的表达模式相同,其表达量均随着卵泡直径的增加显著上升(P0.05)。随着卵泡生长与直径增加,卵泡内部分颗粒细胞虽然在继续增殖,部分颗粒细胞已经开始凋亡,卵泡逐渐进入闭锁阶段。     

辽宁绒山羊卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡的研究

采用TUNEL原位法和DNA梯度电泳法等方法对卵巢上闭锁卵泡中凋亡的颗粒细胞类型和分布状况等进行研究.结果表明,辽宁绒山羊闭锁卵泡是细胞凋亡引起的.DNA梯状电泳表明,不同健康程度卵泡颗粒细胞凋亡程度不同;而颗粒细胞TUNEL原位标记表明,健康卵泡、轻度闭锁卵泡及闭锁卵泡中颗粒细胞凋亡比例分别为13.21%±1.23%、32.13%±2.13%、51.31%±3.02%;不同健康程度卵泡中类固醇激素水平不同,健康卵泡中E2水平较高,孕酮浓度较低;闭锁卵泡中E2浓度较低,P4浓度较高,健康、轻度闭锁和闭锁三类卵泡中E2/P4比值分别是2.62±0.03、0.074±0.000 3、0.028±0.000 4.     

一氧化氮与卵母细胞发育

一氧化氮(NO)是一种在生物体内具有多种生物学效应的气体自由基。论文根据国内外研究资料,介绍了NO的发现、生物学特性、作用途径,着重阐述了NO在卵巢组织中的分布以及NO与卵母细胞的发生、成熟、排卵和卵泡细胞凋亡与卵泡闭锁的关系。     

生殖激素控制卵泡细胞凋亡的研究进展

研究表明颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因，而颗粒细胞凋亡涉及许多因素，其中生殖激素，如GnRH、FSH、LH、P4、E、A、GH、Mel、inhibin、activin、follistatin等间接地和直接地对卵巢卵泡细胞凋亡发挥重要的综合控制作用，因此正确理解激素对体内、外卵泡及颗粒细胞发育和衰亡的调节网络具有很重要的理论和实践意义。     

猪卵巢细胞中凋亡抑制因子cFLIP在卵巢卵泡和黄体中的表达

采用免疫组织化学法检测猪卵巢中细胞凋亡调控蛋白即细胞内FLICE样抑制蛋白（Cellular FLICE-like inhibitory protein,cFLIP）在猪卵巢卵泡和黄体中的表达水平。结果显示,在健康卵泡和功能性黄体中均能够观察到cFLIP的高度表达,而闭锁卵泡和退化黄体中cFLIP的表达显著减弱。结果表明,cFLIP作为一种细胞凋亡抑制因子,参与猪卵巢中的卵巢闭锁和黄体退化。     

Bcl-2基因RNA干扰对体外培养的鹅卵泡颗粒细胞凋亡、增殖和孕激素分泌的影响

根据已发表的Bcl-2基因序列设计3对siRNA（Small interference RNA）序列，构建干扰表达载体，转染体外培养的鹅卵泡颗粒细胞，48h后利用流式细胞术（Flow cytometry，FCM）检测颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量、凋亡和增殖情况，收集细胞培养液用放射免疫分析法检测孕激素（P）的分泌水平；此外，还检测了F1～F4卵泡、最小的排卵前卵泡（The smallest preovulatory follicle，SPF）、小黄卵泡（Small yellow follicle，SYF）和闭锁卵泡（Atresic follicle）颗粒细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡情况。结果表明：（1）各级卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白的表达存在着差异，正常卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量显著高于闭锁卵泡（P〈0．05），SPF颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平显著高于SYF（P〈0．05）；（2）干扰组Bcl-2蛋白表达水平显著低于所有对照组（P〈0．05），而细胞凋亡指数（Apoptosis index，AI）、增殖指数（Proliferation index，PI）和P分泌水平均高于对照组。     

镉诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡时MDA含量及SOD活性变化

镉（Cadium，Cd）是一种有色重金属元素，是一种半衰期很长（20年以上）的多器官、多系统毒物，于1817年被Stromeyer发现。镉对雌性生殖系统也具有明显的毒性作用，镉可直接作用于卵巢，引起卵巢积液、出血、萎缩等病理改变，使卵母细胞损害，成熟卵泡减少或空泡变、闭锁卵泡增多，干扰排卵和受精过程，引起暂时性不育；还可以抑制卵巢颗粒和／或黄体细胞类固醇生物合成，还可能对雌激素受体、孕酮受体及基因表达产生影响。镉还可以激活应激蛋白酶，使细胞内Ca^2＋增加，原癌基因c-myc、c—fos、C—jun表达增强；镉还可以引起DNA单链断裂，并损害DNA修复酶系统，诱导多种细胞凋亡。因此，WHO确定镉为优先研究的食品污染物，联合国环境规划署提出12种具有全球性意义的危险化学物质，镉被列为首位。但镉对卵巢颗粒细胞（GC）的体内毒性研究国内外罕见报道，本研究探讨了氧自由基在镉诱导卵巢颗粒细胞凋亡过程中所起到的作用。     

家禽衰老进程中加速卵泡闭锁的微环境因素

家禽衰老进程中卵泡发生快速闭锁,这种生物学现象很可能是导致家禽后期产蛋性能下降的重要原因。卵泡微环境影响颗粒细胞与卵母细胞的互作关系,并决定着卵泡的生长与成熟。研究表明,颗粒细胞凋亡的发生是引起卵泡闭锁发生的主要因素。本文综述了近年来衰老进程中颗粒细胞微环境变化及卵泡闭锁信号相关研究,主要包括激素紊乱、氧化应激等因素,同时本文深入讨论氧化应激诱导的线粒体损伤和内质网应激现象,旨在阐释衰老诱导的颗粒细胞微环境变化与卵泡闭锁机制,为产蛋后期蛋禽繁殖性能或产蛋性能的调控提供参考。     

颗粒细胞增殖或凋亡在家禽卵泡发育中的调控作用

作为影响家禽繁殖功能的重要器官,卵巢生理生殖活动活跃,可产生大量卵泡,而在家禽生殖过程中,绝大多数卵泡都闭锁或退化吸收。家禽卵巢中卵泡的生长和闭锁不仅受激素系统的调控,还受到卵巢内的激素类固醇、生长因子、细胞因子和细胞内蛋白等分子调控。除此之外,颗粒细胞也已被证明在卵泡生长过程中发挥着重要作用。文章讨论了影响卵泡生长和闭锁的因素,重点阐述了颗粒细胞的调节作用。     

水牛胎儿卵泡细胞和卵母细胞凋亡的特征

选择5月龄胎儿水牛的卵巢，采用石蜡切片、HE染色的光镜观察和DNA末端原位标记技术（TUNEL）进行了研究。结果表明：5月龄胎儿卵巢上分布着大量的凋亡细胞；在皮质部存在的大量腔前卵泡中，均匀分布有单个凋亡的卵泡细胞和卵母细胞，凋亡细胞的主要组织学变化是细胞缩小，核浓缩；DNA末端标记变化主要显示出TUNEL阳性。上述结果提示：水牛卵泡细胞和卵母细胞凋亡在胎儿时期已经存在，细胞凋亡是启动水牛腔前卵泡闭锁的潜在机理。