半胱胺对牛卵母细胞早期胚胎发育能力的影响

半胱胺（Cysteamine）是一种重要的巯基物,在体外培养体系中添加半胱胺能够增强谷胱甘肽（GSH）的合成和胚胎发育能力。本研究旨在探讨不同浓度半胱胺处理对牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育能力的影响。结果表明,在牛卵母细胞体外成熟液中添加100μM的半胱胺,其囊胚率与对照组有显著差异;但是,与同时在成熟液和发育液中都添加100μM的半胱胺组差异不显著。研究结果也表明,在牛卵母细胞体外成熟培养液中添加半胱胺会提高牛卵母细胞的囊胚发育率,而且随着浓度的增加这种作用将达到饱和,其最佳作用浓度为100μM。     

原花青素对青春期前羔羊卵母细胞体外成熟的影响

青春期前羔羊的卵母细胞发育能力低于成年母羊的卵母细胞,这限制了幼畜体外胚胎移植（Juvenile in vitro Embryo Transfer,JIVET）技术的广泛应用。为探讨原花青素B2(Procyanidin B2,PCB2)对提高青春期前羔羊卵母细胞发育能力的影响及其机制,本研究收集了经促性腺激素刺激的4～8周龄羔羊卵母细胞,在体外成熟液中培养。在卵母细胞成熟液中添加5μg/mL PCB2作为PCB2组,未添加PCB2组为对照组,培养24 h后测定卵母细胞第一极体排出率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚率,并进一步测定胞内活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）含量、线粒体活性和线粒体膜电位水平等。结果表明：PCB2组卵母细胞第一极体排出率高于对照组（36.76%vs 31.11%,P<0.05）,但卵裂率（49.17%vs 49.68%）及囊胚率（47.47%vs 54.06%）与对照组无显著差异;进一步研究发现在IVM液中添加5μg/mL PCB2降低了卵母细胞ROS水平（P<0.01）,并提高了GSH水平（P<0.05）、线粒体活性（P<0.01）以及线粒...     

羔羊不同超排方法的筛选及其对卵母细胞体外成熟的影响

旨在比较不同超排方案对羔羊超数效果及其对卵母细胞体外成熟的效果，筛选最佳幼畜超排方案。试验以1～2月龄绵羔羊为研究对象，分为3组，其中2组(方案I和方案II注射激素)为试验超排组，1组为对照组(未注射激素),探究不同超排方法对绵羔羊卵巢的反应性、卵巢的大小及卵母细胞体外成熟的影响。结果表明，6次×12 h间隔、注射总剂量180 U促卵泡素(FSH)的超排方案Ⅱ效果优于4次×12 h间隔、注射总剂量200 U FSH的超排方案Ⅰ,超排方案Ⅱ获得发育卵泡数(348.00±8.25)枚/只优于超排方案Ⅰ发育卵泡数(265.00±6.32)枚/只；体外培养卵母细胞24 h后，超排方案Ⅱ卵母细胞成熟率45.4%优于超排方案Ⅰ卵母细胞成熟率32.2%。研究筛选出6次×12 h间隔、注射总剂量180 U FSH,第1次注射FSH时同时肌内注射330 U PMSG的超排方案为最佳幼畜超排方案。本试验结果为绵羔羊扩展体外受精所需卵子的来源，缩短世代间隔，产生大量优秀后代，加速育种进程等方向的研究奠定一定的理论基础。     

激素对卵母细胞体外成熟的影响

激素对卵母细胞体外成熟的影响赵伟黄夺先（江苏省农科院牧医所２１００１４）近年来,随着商业化胚胎移植的发展,卵母细胞体外成熟和体外受精作为胚胎来源的主要途径已受到关注,而直接影响胚胎数量和质量的卵母细胞体外成熟显得尤为重要。影响卵母细胞体外成熟的因素很...     

季节对绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响

试验采用梯度LH与E2的作用浓度比较卵母细胞的体外成熟率,并采用添加7.0μg/mLLH、1.3μg/mLE2研究季节性对绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响。结果表明:①LH与E2的作用浓度对非繁殖季节(5月)卵母细胞成熟率影响差异不显著(P>0.05),但以添加LH7.0μg/mL、E21.3μg/mL组卵母细胞成熟率较好。②LH与E2的作用浓度对繁殖季节(12月)卵母细胞成熟率影响差异不显著(P>0.05),以LH10.0μg/mL与E21.3μg/mL时卵母细胞成熟率较好。③湖羊和其他季节性发情绵羊卵母细胞的成熟率在繁殖季节(72.08%vs69.82%)与非繁殖季节(67.89%vs65.79%)差异不显著(P>0.05),但以繁殖季节的成熟率较高。④湖羊的卵母细胞在非繁殖季节与繁殖季节胚胎卵裂率(72.28%vs75.43%)、桑葚胚率(36.14%vs34.97%)差异不显著(P>0.05),繁殖季节囊胚率比非繁殖季节囊胚率偏高(16.18%vs14.40%)。     

血清对水牛卵母细胞体外成熟、体外受精及早期胚胎发育的影响

从屠宰场收集了本地水牛55头、黑白花奶牛22头的卵巢共获卵泡847枚,平均每个水牛卵巢回收3.67枚可用卵母细胞,约为黑白花奶牛(10.23枚/头)的1/3。试验分别采用添加与不添加血清的培养液体外成熟培养水牛卵母细胞,结果二者的成熟率无明显毒性差异(58.23%对56.67%),但体外受精后早期胚胎发育的8-细胞率有显著差异(35.4%对23.0%),表明体外成熟液中有无血清对水牛卵母细胞体外成熟率没有影响,但血清对卵母细胞的早期胚胎发育有重要影响。进一步比较成熟液中不添加血清但在受精液及胚胎液中添加血清和在各个阶段均有血清参与的早期胚胎发育率(8-细胞率),表明二者差异不显著(33.8%对35.4%)。经无血清成熟培养液培养的成熟卵母细胞可以经孤雌激活后得到早期胚胎(4细胞)。     

不同条件对牛卵母细胞体外成熟的影响

本研究分析了卵巢不同离体时间（＜３ｈ、４～５ｈ、＞６ｈ），不同培养时间（１８～２２ｈ、２３～２４ｈ、＞３０ｈ），不同成熟培养液（添加ＦＳＨ、ＨＣＧ、ＦＣＳ）以及不同培养温度（３４℃、３６℃、３８．５℃）对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明，小于３小时离体时间成熟率、受精率（７８．８３％、５８．０％）高于其它组；培养时间大于３０小时组成熟率高于其它组（９３．８１％），但受精率低于其它组（２３．０％）；添加ＨＣＧ与ＦＣＳ组成熟率、受精率（８９．４％、７８．９５％）大于ＦＳＨ组；培养温度以３８．５℃为佳，成熟率与受精率（８７．２％、７３．６％）皆高于另二组，差异显著。     

激素对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响

为研究不同激素及其组合在猪卵母细胞体外成熟及对其后孤雌胚胎发育的影响,我们对比了孕马血清促性腺激素(PMSG)与人绒毛膜促性腺激素(hCG)组合、卵泡刺激素(FSH)与促黄体素(LH)组合、雌二醇(E2)及这些卵母细胞经孤雌激活后囊胚率的影响;以及不同FSH和LH浓度组合对猪卵母细胞体外成熟率。结果表明,在卵母细胞体外成熟液中添加10 U/mL PMSG和10 U/mL hCG的成熟率和孤雌囊胚率都达到最高(85.9%和55.3%);FSH与LH的组合次之,分别为77.1%和53.5%;E2最差,成熟率仅为54.0%囊胚率为19.5%。而在FSH与LH不同浓度配比中以10 U/mL FSH和20 U/mL LH时,猪卵母细胞成熟率最高达到80.9%。     

哺乳动物卵母细胞的体外成熟

哺乳动物卵母细胞的体外成熟刘红林（南京农业大学动物科技学院，２１００９５）范必勤（江苏省农科院牧医所）１引言哺乳动物卵母细胞移离卵泡环境，在体外能够不依赖激素自发成熟。卵母细胞的成熟过程至少需要经过周围卵丘细胞、卵母细胞核以及核外细胞质等方面的变化。...     

生殖激素对哺乳动物卵母细胞体外成熟的影响

生殖激素是卵母细胞成熟培养液中必不可少的成分，它对卵母细胞的完全成熟至关重要。本文综述了其化学特性和对卵母细胞成熟培养的影响，并对其作用机理进行了简单阐述。     

影响卵母细胞体外成熟的因素

卵母细胞体外成熟培养技术是现代生物技术中的重要内容之一。多年来科研人员为了进一步提高卵母细胞体外培养成熟率以及更深入了解卵母细胞成熟机制,对影响卵母细胞体外成熟的因素进行了大量的研究。本文较全面的综述了影响卵母细胞体外成熟培养的有关因素及其机制。     

卵母细胞体外成熟的影响因素

随着哺乳动物体外受精、细胞核移植技术的不断深入,人们对成熟卵母细胞以及哺乳动物胚胎需求量日益增加,卵巢内丰富的卵泡资源是胚胎工程迅速发展的基础。本文从卵巢因素、供体、体外培养条件和成熟培养液中添加成分等对卵母细胞IVM的影响进行了分析,为胚胎的体外生产提供理论基础和科研依据。     

高浓度葡萄糖对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响

试验旨在探究高浓度葡萄糖对猪卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育能力的影响。取体外分离处于生发泡期的猪卵丘卵母细胞复合体(COCs),分为3个处理组。分别用含葡萄糖浓度为5.6 mmol/L(C组)、10 mmol/L(G-1组)、15 mmol/L(G-2组)的培养液,进行体外成熟(IVM)处理,42 h后观察,并统计卵丘细胞扩散情况和第一极体排出率;对体外成熟42 h后的卵母细胞孤雌激活,统计2-细胞、4-细胞和第7天囊胚发育。结果发现,G-1组和G-2组卵丘细胞扩散度显著低于C组(P<0.05);G-1组和G-2组的MII期卵母细胞死亡率和存活率与C组相比无显著差异(P>0.05),但G-1组极体率显著降低(P<0.05),G-2组极体率极显著低于C组(P<0.01)。孤雌激活后,与C组相比,G-1组和G-2组的2-细胞分裂率显著降低(P<0.05),4-细胞分裂率以及囊胚发育率均极显著降低(P<0.01),但G-1、G-2组囊胚细胞数量与C组相比无显著性差异(P>0.05)。进一步线粒体染色发现,G-1组和G-2组的线粒体与C组相比分布不均。...     

牛卵母细胞体外成熟

卵母细胞体外成熟培养研究主要集中在提高体外成熟卵母细胞支持胚胎发育的能力上。本文主要从成熟机理、卵母细胞的来源、卵母细胞的成熟培养环境及培养时间等方面进行了综述,介绍了目前卵母细胞体外成熟培养的进展情况。     

牛卵母细胞体外成熟的研究进展

牛在大多数情况下一胎一仔，自然双胎的概率很小。其根本原因在于：牛的卵巢大多数情况下每次只排1个卵，因而可能有一个胚胎产生，这极大地影响了牛的繁殖性能。而通过牛卵母细胞体外成熟技术能获得较多的卵子，与体外受精技术的相结合，大大提高了牛的繁殖性能，近年来人们对牛卵母细胞体外成熟进行了不断研究，并取得许多新的进展，笔者就此作了综述。     

间隙连接对牛卵母细胞体外成熟的影响

该试验通过对牛卵母细胞不同形式的处理,讨论细胞间隙连接对于其体外成熟的影响作用.在最适于卵母细胞体外成熟的浓度(1.2 IU/mL)条件下,发现卵母--卵丘细胞之间的间隙连接对卵母细胞的成熟有着直接的影响,并且是体外成熟的一个有利条件.     

不同因素对湖羊卵母细胞体外成熟的影响

为了研究湖羊卵母细胞体外培养的最佳条件,试验从采集方法、温度及培养液三方面进行研究。结果表明:采用粉碎法和切割法采集卵母细胞的效果好于抽吸法且差异显著(P<0.05),但是三者的成熟率差异不显著(P>0.05);在37,38,39℃条件下对湖羊A级卵母细胞进行体外成熟培养,39℃时的成熟率高于37,38℃,但差异不显著(P>0.05);向成熟培养液中添加10%胎牛血清(FCS)组的卵母细胞成熟率高于20%FCS组和30%FCS组,且差异显著(P<0.05)。     

影响猪卵母细胞体外成熟的因素

猪卵母细胞体外成熟培养为胚胎体外生产、体细胞克隆等研究领域提供了大量廉价实验材料。本文就影响猪卵母细胞体外成熟的因素及其研究进展作简要综述。     

牦牛卵母细胞的体外成熟

以屠宰场牦牛卵巢为材料,比较了抽吸加切割法和抽吸法2种卵母细胞离体采集方法的效率和5种成熟培养液的培养效果,并研究了卵泡位置、形态对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:在牦牛乏情期,平均每个卵巢用抽吸加切割法回收卵数极显著高于抽吸法(9.33±4.30VS4.70±2.62,P<0.01),可用卵数也极显著高于抽吸法(5.63±4.19VS4.37±2.32,P<0.01)。将牦牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)分别置于5种成熟培养液中培养,其中M199(缓冲体系为Earles盐) 10% FBS 5.0mg/LLH 1.0mg/LE2 双抗(青霉素100IU/mL和链霉素100mg/L)的成熟液效果最好,成熟率为81.33%,卵裂率为49.33%。来自卵巢表面卵泡的COCs的成熟率和卵裂率均高于来自卵巢内卵泡的COCs(分别为81.33%VS69.33%,P>0.05;49.33%VS34.67%,P<0.05)。来自明亮卵泡的COCs的成熟率和卵裂率均极显著高于来自浑浊卵泡的COCs(分别为81.33%VS33.33%,P<0.01;49.33%VS3.33%,P<0.01)。     

叶酸对猪卵母细胞体外成熟的影响

将体外收集的猪卵母细胞随机分成对照组和试验组(0、1、10、50μg/L),研究叶酸对猪卵母细胞GVBD率、成熟率和孤雌激活发育潜能的影响。结果表明,10μg/L叶酸能有效的促进GVBD发生、成熟率和激活胚的发育能力,与对照组相比具有上升趋势,其中成熟率显著提高(P0.05)。当叶酸质量浓度为50μg/L时,GVBD率、成熟率和激活胚的发育能力呈下降趋势,其中GVBD率(P0.05)和成熟率(P0.01)显著低于其他处理组。综上所述,叶酸能提高猪卵母细胞体外成熟效果,在本研究中以添加10μg/L叶酸效果最明显。