无铜饲料对小鼠肠道菌群的影响

铜是动物机体必需的金属元素,参与重要的代谢反应。本试验旨在研究无铜饲料对小鼠肠道微生物菌落组成和相关代谢通路的影响,选择健康、体重相近、遗传背景为野生型C57BL/6J的成年公鼠20只,随机分为2组,试验组和对照组各10只。待小鼠适应性饲养1周后用无铜饲料饲喂,对照组饲喂25 mg/L含铜水,试验组饲喂无铜水,试验期30 d。试验期结束时,尾静脉采血进行铜蓝蛋白含量的测定,并采集小鼠新鲜盲肠内容物利用高通量测序技术对小鼠的盲肠内容物16S rRNA基因组进行分析。结果显示,与对照组相比,无铜组小鼠血清铜蓝蛋白含量极显著降低（P < 0.001）。无铜组小鼠盲肠微生物菌群在门、属水平分别与对照组有5和43个差异显著菌群（P < 0.05）;通过差异菌群功能预测分析发现,两组共有19种KEGG二级代谢通路差异显著（P<0.05）,其中与代谢相关的功能是脂代谢、甘氨酸生物合成与代谢、多酮类化合物和萜类化合物代谢、其他次生代谢产物的生物合成和氨基酸代谢,说明饲料中铜的缺失可以改变少数肠道菌群的组成及其功能,本试验为研究铜在小鼠肠道菌群结构及代谢中的功能提供了重要思路。     

肠道菌群介导半乳糖促进小鼠采食的机制研究

本试验旨在研究肠道菌群介导半乳糖促进小鼠采食的机制。首先选用40只3周龄C57/BL6J公鼠,随机分为4组,每组10只,对照组给予饮用双蒸水,试验组分别给予半乳糖浓度分别为0.5%、1.0%和1.5%的饮水,记录每周体重和采食量。根据剂量筛选试验结果选定1.0%为后续试验饮水中半乳糖浓度后,利用在下丘脑神经肽Y(NPY)和阿片-促黑素细胞皮质素原（POMC）神经元特异性表达绿色荧光蛋白（GFP）的转基因小鼠,研究饮水添加半乳糖对小鼠下丘脑弓状核中这2种神经元兴奋性的影响。通过实时荧光定量PCR、超敏多因子电化学发光技术（MSD）以及Western blot检测对照组和饮水添加1.0%半乳糖的小鼠肠道中炎症信号的变化。通过对肠道菌群和代谢物的分析探讨半乳糖调控小鼠生长的途径,并以猪肠上皮细胞（IPEC-J2）为模型进行验证。最后选用32只3周龄C57/BL6J公鼠,随机分为4组,每组8只,利用抗生素构建伪无菌小鼠模型,验证肠道菌群在半乳糖促进采食中的作用。结果表明：1）相比于0.5%和1.5%的添加剂量,饮水添加1.0%半乳糖在更短的时间内发挥出促采食作用,且小鼠体重与添加剂量呈显著正相...     

猫须草提取物对动物体重的影响

本研究旨在探讨猫须草提取物对动物体重的影响。实验一：选择20只21～24g雄性C57BL/6小鼠，随机分为2组，每组10只，对照组饲喂D12492饲料，实验组饲喂D12492饲料+灌胃500mg/kg猫须草提取物；实验期为7周。实验二：选择42周龄健康新杨黑蛋鸡80羽，随机分为2组，每组20个重复，每个重复2羽，对照组饲喂常规日粮，实验组饲喂添加0.1%（质量分数）猫须草提取物的常规日粮；实验期为6周。实验一结果显示：实验组小鼠体重与对照组无显著差异（P>0.05）。实验二结果显示：实验组蛋鸡体重与对照组无显著差异（P>0.05）。结果表明：在动物饲料中添加一定剂量猫须草水醇提取物不会引起小鼠和新杨黑蛋鸡体重下降。     

日粮能量源结构对小鼠生长、血清生化指标及肠道健康的影响

为了探讨日粮能量源结构对小鼠血清生化指标、肠道黏膜形态、屏障功能及盲肠菌群结构的影响，试验将72只健康且体重相近的21日龄雄性C57BL/6J小鼠分为CON组(79%蜡质玉米淀粉组)、LSB组(70%蜡质玉米淀粉+9%大豆油组)、MSB组(61%蜡质玉米淀粉+18%大豆油组)、HSB组(52%蜡蜡质玉米淀粉+27%大豆油组),每组18只，分别饲喂4种能量源结构的等能等氮日粮(蜡质玉米淀粉和大豆油提供定量蛋白之外的所有能量),试验期为36 d。试验结束时通过测定小鼠的生长性能、血清生化指标、肠道黏膜形态、屏障功能及盲肠菌群结构研究日粮能量源结构的影响。结果表明：与CON组相比，MSB组、HSB组小鼠的终末体重分别提高5.61%、7.69%(P<0.05)。与CON组相比，LSB组、MSB组、HSB组血清中的白蛋白含量均显著降低(P<0.05);HSB组小鼠血清中尿素氮含量升高了20.11%,差异显著(P<0.05);LSB组与MSB组总蛋白含量分别降低了4.10%、3.82%,差异不显著(P>0.05)。与CON组相比，MSB组小鼠十二指肠隐窝深度显著降低(P&l...     

鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因缺失对小鼠盲肠菌群影响的研究

为探究5’-nucleotidase基因对鼠伤寒沙门菌感染小鼠盲肠菌群的影响，本研究将15只6周龄BALB/c雌鼠随机平均分为对照组、野生株SL1344组和缺失株SL1344Δ5’-nucleotidase组，对照组小鼠灌胃200μL无菌PBS,SL1344组和SL1344Δ5’-nucleotidase组分别灌胃200μL含1.0×10⁶ cfu的菌液。灌胃72 h后剖杀各组小鼠，收集盲肠内容物，采用Illumina Hiseq测序技术测定各组小鼠盲肠样品微生物16S r RNA V3-V4区序列，并比较分析其微生物群落结构、多样性和信号通路富集。结果显示，与对照组相比，SL1344和SL1344Δ5’-nucleotidase组操作分类单元(OTU)以及Alpha多样性指数Chao1和Observed species均下降，Beta多样性分析显示SL1344组部分样品分布偏远，表明SL1344和SL1344Δ5’-nucleotidase感染使小鼠盲肠微生物数目减少，且SL1344对盲肠菌群影响较大。门、纲和属水平微生物种群分析结果显示，与SL1344组相比，...     

还原型谷胱甘肽(GSH)在小鼠体外受精中的作用初探

为研究还原型谷胱甘肽(GSH)在小鼠体外受精中的作用,试验选用C57BL/6J小鼠(雄鼠12周龄,雌鼠4周龄)、ICR受体鼠(8-10周龄)。GSH添加浓度分别为终浓度0、1 mmol/L、2 mmol/L,每组超排雌鼠5只,转基因小鼠净化试验每个品系超排雌鼠10只。结果显示,在受精液(HTF)中添加GSH 1 mmol/L时,小鼠体外受精效果最好,受精率达70.8%,胚胎形状正常,未受精单细胞与异形胚较少,胚胎移植平均妊娠率达93.5%。     

发酵饲料对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质及盲肠菌群的影响

为了研究发酵饲料对蛋鸡生产性能、蛋品质及盲肠中微生物菌群多样性的影响，选择30周龄海兰褐蛋鸡288只，随机分为2组，每组6个重复，每个重复24只，其中对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂基础日粮+3%发酵饲料，试验期56 d。结果：饲料中添加3%的发酵饲料，对产蛋性能没有显著影响(P>0.05),但可以显著降低破蛋率、提升蛋壳强度(P<0.05);可以改变鸡的肠道菌群结构，其中厚壁菌属丰度显著高于对照组，拟杆菌属丰度显著低于对照组。     

C57BL/6J小鼠促性腺激素注射时间对诱导超排卵的影响

目的:确定4周龄C57BL/6J小鼠注射促性腺激素的最佳间隔时间,提高超排效果,从而优化C57BL/6J近交系作为供体鼠的生物净化体系。方法:70只4周龄的C57BL/6J雌鼠随机分为5组,腹腔注射10IU的PMSG,10IU的h CG注射间隔时间分别为47h,47.5h,48h,48.5h,49h,比较超排的卵母细胞数和受精率等数据。结果:第1组与第5组的卵母细胞数有极显著差异,其他数据差异不显著。结论:4周龄C57BL/6J小鼠对PMSG应答产生的内源性黄体生成素(LH)释放量不足以引起排卵,因而h CG注射时间无需严格控制在注射PMSG后46~48h内。     

蒙药红花清肝13味丸治疗CCl4诱导小鼠肠道损伤的转录组测序分析研究

[目的]筛选参与四氯化碳(CCl₄)诱导的小鼠肠道损伤以及蒙药红花清肝13味丸治疗过程的重要信号通路及基因。[方法]将18只6～8周龄、体重为20～22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,即空白对照组(n=6)、模型组(n=6)和治疗组(n=6)。空白对照组与模型组每天灌胃1次生理盐水,剂量为10 m L/(kg·BW),连续7 d;治疗组每天灌胃1次红花清肝13味丸,剂量为616.5 mg/(kg·BW),连续14 d;最后一次灌胃4 h后,空白对照组腹腔注射橄榄油,模型组和治疗组腹腔注射CCl₄橄榄油混合物(CCl₄∶橄榄油=1∶4,V/V),剂量均为10 m L/(kg·BW)。肠道损伤处理后第2天,分别采集3组小鼠十二指肠组织,进行高通量转录组测序。利用获得的测序数据,对差异表达基因进行预测和功能分析以及KEGG信号通路富集,筛选红花清肝13味丸治疗后显著下调信号通路富集的基因群,并与红花清肝13味丸药物靶点基因进行互交分析。[结果](1)转录组测序分析表明,与空白对照组相比,模型组与治疗组分别获得了1 4...     

猪源复合乳酸菌的筛选及其改善仔猪肠炎的研究

为了探究猪源复合乳酸菌对鼠伤寒沙门菌感染仔猪引起的肠道损伤的保护效果，对实验室前期从猪粪便中分离并保存的23株猪源乳酸菌进行体外耐酸、耐胆盐及体外抑菌试验筛选，并将筛选得到的乳酸菌等比例混合，形成复合乳酸菌。选取16只日龄、体重相近的断奶仔猪，随机分成4组，分别饲喂复合乳酸菌、沙门菌、复合乳酸菌+沙门菌和无菌PBS(对照组),每日记录仔猪体重变化，于6 d后屠宰采样，分别采集回肠、结肠及回肠内容物，利用苏木精-伊红(HE)染色观察回肠、结肠病理变化，过碘酸-雪夫(PAS)染色检测回肠中杯状细胞数量，16S rRNA测序检测回肠内容物中微生物组成，并测定沙门菌载量和肠道炎症相关细胞因子、黏蛋白(muc2)表达量。结果：经体外试验筛选得到5株耐酸、耐胆盐及体外抑菌效果良好的乳酸菌，等比混合组成的复合乳酸菌能有效改善鼠伤寒沙门菌导致的仔猪体重增长减缓(P=0.087),并能修复肠道组织学损伤，显著降低回肠中鼠伤寒沙门菌载量(P<0.05),抑制促炎因子白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达(P=0.083,P=0.073)。本研究还发现，复合乳酸菌能够显著改善沙门菌...     

C57BL/6J小鼠非酒精性脂肪肝模型的建立

本试验分别采用高脂饲料和高脂饲料复合四氯化碳对C57BL/6J小鼠进行诱导,研究建立非酒精性脂肪肝模型的条件.本试验将C57BL/6J小鼠分成高脂组、高脂复合四氯化碳组(复合组)和正常组.各组分别于饲喂4、6、8周处死5只,称小鼠体重与肝重,采血测血清中生化指标情况,并取肝脏做H.E.染色、油红O染色.通过肝指数、生化与病理检查等指标,评价非酒精性脂肪肝的进程.结果显示,随着饲喂时间加长,高脂组动物肝脏脂肪变性加重;复合组动物除肝脏脂肪变性外,出现纤维化和明显的炎性浸润;4周时,高脂组中脂肪变性比复合组明显.6～8周时高脂组和复合组中生化指标明显高于正常组.本试验经饲喂高脂饲料成功复制了小鼠非酒精性脂肪肝模型.     

一种抗菌肽的体外抑菌试验、安全性评价及其对肠道菌群的影响

本试验通过体外抑菌,比较了1种抗菌肽和3种临床常用抗生素对几种不同的大肠杆菌的抑菌效果,旨在为抗菌肽在实际生产中部分替代抗生素提供资料,并对其安全性及调节肠道菌群方面进行了评价与统计。实验结果：抗菌肽的体外抑菌效果明显;安全性实验证实抗菌肽对小鼠各内脏器官无不良影响;肠道菌群计数结果显示,高剂量抗菌肽能促进试验小鼠肠道内有益菌的数量,抑制有害菌在试验小鼠肠道食糜中的含量,但这一作用与抗菌肽的添加剂量有较大相关性。     

乳酸链球菌素对腹泻小鼠盲肠菌群结构及脂代谢的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究乳酸链球菌素(Nisin)对腹泻小鼠盲肠菌群结构和脂代谢的影响。选择7~9周龄无特定病原体(SPF)级50只小鼠(雌雄各占1/2),随机分成5组,分别为空白对照组、阴性对照组、环丙沙星组、氨苄青霉素组及Nisin组。除空白对照组小鼠腹腔注射等量灭菌生理盐水外,其余各组小鼠连续3 d腹腔注射致病性大肠杆菌(E.coli)O1悬液(2.50×1011CFU/mL)0.2 mL/只构建小鼠腹泻模型。连续注射3 d后,空白对照组和阴性对照组灌胃灭菌生理盐水,其他组灌胃对应物质,每天2次,每次0.3 mL,连续灌胃15 d。第15天灌胃2 h后采样,采用高通量测序技术对小鼠盲肠内容物中细菌结构测序分析,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法对小鼠血清、空肠、回肠和脑组织中金属肽酶含血小板反应蛋白1(ADAMTS1)、总胆固醇(TC)和胰岛素(INS)的含量进行检测。结果显示:与阴性对照组相比,Nisin使小鼠血清、回肠和脑组织中ADAMTS1的含量和回肠中INS的含量显著降低(P<0.05),血清、空肠和脑组织中TC的含量显著增加(P<0.05),并使小鼠各阶段的体重显著增加(P<0.05)。Nisin组小鼠盲肠菌群丰富度最高(ACE指数=2 469.54、Chao1指数=3 340.29)且多样性最高(Shannon指数=7.56),而阴性对照组则最低。Nisin组中疣微菌门(Verrucomicrobia)、蓝细菌门(Cyanobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)及厚壁菌门(Firmicutes)为优势菌门。阴性对照组中放线菌门(Actinobacteria)、芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)、变形菌门(Proteobacteria)及拟杆菌门为优势菌门。由此得出,Nisin可提高盲肠菌群多样性,降低血清、回肠和脑组织中ADAMTS1的含量和回肠中INS的含量,增加血清、空肠和脑组织中TC的含量,从而影响腹泻小鼠盲肠菌群结构及脂代谢。     

SPF级BALB/cC57BL/6小鼠繁殖性能及生长发育的比较研究

为提高SPF级实验动物的质量,选择10周龄BALB/c C57BL/6小鼠各50只（雌雄各半）,采取雌雄1？1近亲交配繁殖,并统计其生长发育和繁殖性能指标。BALB/c小鼠1～3周龄的平均窝重及离乳后的体重增长明显大于C57BL/6小鼠（p〈0.01）。第1胎交配分娩间隔,第1和第3胎离乳育成率品系间差异均有显著性（P〈0.05及P〈0.01）。BALB/c小鼠的体格比C57BL/6小鼠大,带乳能力比C57BL/6小鼠强但产仔能力比C57BL/6小鼠弱。     

C57BL/6NcGAS基因敲除鼠的构建及对猪伪狂犬病病毒增殖的影响

胞质DNA感受器环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase, cGAS)能够识别胞质中的双链DNA(double stranded DNA,dsDNA),从而激活Ⅰ型干扰素信号通路抵御外界病原微生物的感染。为研究cGAS基因对猪伪狂犬病病毒(PRV)增殖的影响，本试验首先利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建cGAS基因敲除小鼠，通过H&E染色检测C57BL/6N小鼠和C57BL/6N-cGAS^-/-小鼠肺脏和脑组织形态差异及感染PRV后肺脏组织中炎性浸润的影响；Q-PCR检测C57BL/6N小鼠和C57BL/6N-cGAS^-/-小鼠感染PRV后对PRV-gB、PRV-TK、IFN-β、ISG15和ISG20基因mRNA表达水平的差异；Western blot及免疫组化检测C57BL/6N小鼠和C57BL/6N-cGAS^-/-小鼠感染PRV后PRV-gB和PRV-gE蛋白表达水平；最后利用病毒PFU法检测cGAS敲除鼠对PRV子代病毒滴度的影响。Western blot检测结果显示...     

日粮铁缺乏与补充甘氨酸螯合铁对小鼠十二指肠抗氧化能力、铁转运和炎性细胞因子表达的影响

试验旨在探究铁缺乏和补充甘氨酸螯合铁（Gly-Fe）对小鼠十二指肠抗氧化能力、铁转运、炎性细胞因子表达的影响。将18只4周龄的C57BL/6J雄鼠根据体重随机分为对照组、5 FeSO4组和45 Gly-Fe组，每组6只。对照组小鼠饲喂含有45 mg/kg FeSO4的AIN93G日粮，5 FeSO4组小鼠饲喂含有5 mg/kg FeSO4的AIN93G日粮，45 Gly-Fe组小鼠饲喂含有45 mg/kg Gly-Fe的AIN93G日粮。适应期为7 d，试验期为20 d。结果表明：与对照组相比，5 FeSO4组小鼠十二指肠绒毛高度降低、隐窝深度增加、绒毛高度与隐窝深度比值降低（P<0.05），十二指肠铁含量降低（P<0.05），铁转运蛋白1(Fp1)基因表达水平升高（P<0.05），十二指肠组织中过氧化氢（H2O2）含量升高（P<0.05）；与对照组相比，上述指标在45 Gly-Fe组中均无显著变化。与对照组相比，5 FeSO4组小鼠十二指肠中抗氧化相关基因Nrf2、NQO1、GSTA4无显著变化，白介素6(IL-6)和IL-22基因表达水平升高（P<0....     

富硒益生菌对小鼠脂代谢的影响

观察富硒益生菌对高脂饲料诱导的实验性高脂血症小鼠脂代谢的影响作用,并从分子水平进一步阐述富硒益生菌降血脂的机理。将24只4周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机均分为4组(n=6):正常对照组(NC)、高脂对照组(HFD)、无机硒+益生菌组(IPS)和富硒益生菌组(OPS),其中IPS组和OPS组都是饲喂高脂饲料。8周以后,测定小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度胆固醇酯(LDL-C)、高密度胆固醇酯(HDL-C)的含量以及肝脏、附睾脂肪的湿重。结果表明:与高脂对照组比较,高脂+富硒益生菌组小鼠的血清TC、TG、LDL-C含量下降,HDL-C水平显著升高,肝脏和附睾脂肪的湿重减少;富硒益生菌对小鼠的各检测指标的影响显著优于无机硒+益生菌组。富硒益生菌能有效地降低高脂血症小鼠模型的血脂,而富硒益生菌组的降血脂功效比无机硒+益生菌组明显。     

短链菊粉与高脂饲粮对不同基因型小鼠血清葡萄糖含量及盲肠微生物区系关联性的影响

本试验旨在研究短链菊粉与高脂饲粮对不同基因型小鼠血清葡萄糖含量及盲肠微生物区系关联性的影响。将8周龄40只雄性野生型C57BL/6J小鼠与40只雄性瘦素(Leptin)基因敲除小鼠分为8组，每组10只，单笼饲养。1～4组为野生型小鼠的不同处理组：野生型对照组(CT组)、野生型+10%短链菊粉组(CI组)、野生型+高脂组(CH组)、野生型+高脂+10%短链菊粉组(CHI组);5～8组为Leptin基因敲除小鼠的不同处理组：Leptin基因敲除对照组(OT组)、Leptin基因敲除+10%短链菊粉组(OI组)、Leptin基因敲除+高脂组(OH组)、Leptin基因敲除+高脂+10%短链菊粉组(OHI组)。试验期为8周，期间监测采食量与体增重。于第8周腹腔注射葡萄糖，注射后15、30、60和120 min测定血清葡萄糖含量。之后脱臼处死，测定体重与体长，取肝脏、生殖腺脂肪称重。取盲肠段及内容物测定微生物群落组成。结果表明：1)第12天CHI组体重显著低于CI组(P<0.05),第42～54天CH组体重显著低于CI组(P<0.05),Leptin基因敲除组间体重无显著差异(P&g...     

肠道菌群对仔鸡肠道发育、黏膜形态和免疫器官发育的影响

本试验旨在以"无菌鸡"为模型,研究添加鸡源性乳酸菌和盲肠内容物后,对仔鸡肠道发育、黏膜形态及免疫器官发育的影响。试验选用无特定病原体(SPF)种蛋80枚,经无菌孵化后,选择健康仔鸡60羽,分3组(每组20羽),转入3台无菌隔离器内饲养,并分别饲喂:无菌饲粮(CT组)、无菌饲粮+乳酸菌液(LB组)、无菌饲粮+鸡盲肠内容物(CC组);饲养21 d后试验结束,于试验7、14、21日齡从各组取6只进行屠宰,测定鸡肠道各段长度和免疫器官重量,并对肠道黏膜形态显微观察。结果显示:饲喂乳酸菌或盲肠内容物的仔鸡各阶段中的空肠长度均高于CT组,盲肠长度和体积均低于CT组的无菌鸡;仔鸡的脾脏指数高于CT组(P=0.010);饲喂乳酸菌或盲肠内容物后仔鸡的十二指肠、空肠和回肠隐窝深度降低、绒毛高度/隐窝深度增大。本试验说明,饲喂肠道菌群能促进仔鸡肠道发育,盲肠体积变小;同时促进脾脏的发育,提高机体免疫力。     

微生物发酵饲料对仔猪肠道菌群的影响

本试验旨在探究微生物发酵饲料替代部分基础饲料对仔猪肠道菌群的影响。本试验选择160头21日龄的断奶仔猪(体重约为7.0 kg)，按照单因素试验设计原则，将它们随机分成4组，每组4个重复，每个重复10头(公、母各半)。对照组仔猪饲喂基础饲料，试验组仔猪分别饲喂含有5%、10%和15%微生物发酵饲料，等量替换基础饲料，试验周期为4周。试验结束后，采集各组仔猪粪便，用于检测肠道菌群。结果表明，5%、10%和15%微生物发酵饲料组的仔猪的肠道中大肠杆菌数量显著低于对照组仔猪的(P <0.05),10%和15%微生物发酵饲料组仔猪肠道中的乳酸菌和双歧杆菌数量显著高于对照组仔猪的(P <0.05)。研究表明，在仔猪养殖生产中使用适量的微生物发酵饲料替代基础饲料，可以降低仔猪肠道中的大肠杆菌数量，增加乳酸菌和双歧杆菌的数量，通过调节肠道菌群结构改善肠道健康。