小花棘豆产苦马豆素内生真菌的筛选与鉴定

通过对小花棘豆内生真菌的分离纯化,筛选产苦马豆素内生真菌,探讨小花棘豆内生真菌与其毒性成分苦马豆素的相互关系。本研究对采自内蒙古西部草地的6份小花棘豆样品进行内生真菌分离纯化,采用薄层色谱和气相色谱技术对内生真菌发酵液进行苦马豆素定性、定量检测,筛选产苦马豆素内生真菌;结合形态学和分子生物学方法进行内生真菌种属鉴定。从小花棘豆样品中分离得到6株内生真菌。经筛选,其中有2株产苦马豆素,编号为XJ-J-I和XJ-H-1,其发酵液中苦马豆素产量分别为4.209 2mg.L-1和16.733 8mg.L-1。鉴定结果表明,这2株内生真菌虽然形态学存在差异,但基因型相同,同属镰刀属内生真菌—层出镰刀菌(Fusarium prolifera-tum)。小花棘豆中存在产苦马豆素内生真菌。     

苦马豆素人工抗原免疫对饲喂小花棘豆家兔血清免疫和生化指标的影响

用小花棘豆饲喂经苦马豆素人工抗原免疫接种过的家兔,通过检测家兔的血清学和免疫学指标,探讨苦马豆素人工抗原免疫接种对动物机体的保护作用.将30只家兔随机分为免疫对照组、免疫攻毒组、攻毒对照组和正常对照组,免疫组家兔接种苦马豆素人工抗原,攻毒组家兔按干重拌料饲喂10 g/(kg·d)小花棘豆草粉,检测血清抗体效价、相关生化指标和苦马豆素含量的变化以及E玫瑰花环率的变化.结果表明,免疫组家兔均有抗苦马豆素抗体产生,免疫攻毒组家兔较攻毒对照组家兔血清酶活性异常变化延缓,苦马豆素含量降低,E-玫瑰花环率升高.说明苦马豆素人工抗原能够有效预防小花棘豆对家兔造成的损伤,有一定的利用前景.     

小鼠小花棘豆生物碱中毒的病理学观察

将32只小鼠随机分成4组，包括3个试验组和1个对照组。试验组每日分别按剂量400、800、1600mg／kg给小鼠灌服小花棘豆生物碱正丁醇萃取部分(粗碱)水溶液，同时给对照组灌服等量的生理盐水。60 d后，采集心、肝、肾、脾和脑进行病理组织学及超微结构检查。结果发现，肝、肾等实质器官的细胞胞质空泡变性，这与苦马豆素中毒引起的病理变化一致，表明小花棘豆的主要有毒成分是苦马豆素。     

新疆小花棘豆的毒性危害与利用

小花棘豆（Oxytropisglabra）在新疆分布广泛，可引起放牧牲畜中毒。本文概述小花棘豆的生物学特性和牲畜小花棘豆中毒的机理及其危害，分析牲畜中毒与采食量、饲养管理和草原生态的关系，评价了小花棘豆的利用前景。     

棘豆属植物中产苦马豆素内生真菌的研究进展

苦马豆素(SW)是棘豆属(Oxytropis)植物引起家畜中毒的主要原因,而苦马豆素的产生与棘豆属植物的内生真菌有关。目前,棘豆属植物中能够产生苦马豆素的内生真菌不断被发现,所以文章对产苦马豆素内生真菌的寄主植物、形态、培养条件及其与苦马豆素的关系、对寄主植物的影响等进行了综述,为棘豆属植物的有效利用及家畜中毒的防治提供理论依据。     

苦马豆素对家兔脑组织抗氧化功能的影响

为了探讨苦马豆素对家兔脑组织抗氧化功能的影响,进一步揭示苦马豆素的毒性作用机理.24只家兔随机分为4组,即对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组.将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15％(含苦马豆素30 mg/kg)、Ⅱ组添加30％(含苦马豆素60 mg/kg)、Ⅲ组添加45％(含苦马豆素90mg/kg)的比例制作混合饲料,饲喂至出现中毒典型临床症状为止.攻毒后14,35,70 d每组随机采集2只家兔的肝脏组织,检测SOD、GSH-Px、CAT、NOS活性及MDA、NEFA、·OH、LPO、NO和Glu含量的变化.结果显示,与正常对照组相比,试验组家兔肝脏SOD、GSH-Px、CAT等抗氧化物酶的活性极显著下降(P＜0.01),而MDA、NEFA、·OH、LPO、NO和Glu含量极显著上升(P＜0.01).结果表明,不同浓度苦马豆素对家兔脑组织抗氧化功能有显著影响,且具有一定的时间效应和剂量效应关系,长期低剂量摄入苦马豆素可引起家兔不同程度的脑组织损伤.     

小花棘豆中毒对家兔睾丸细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

将24只家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组饲粮分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含量90mg/kg)的比例添加小花棘豆,对照组仅饲喂青干草,试验期70d;分别于攻毒后第14,35,70天每次每组随机采集2只家兔的睾丸,通过TUNEL法检测细胞凋亡,real-time PCR检测Bcl-2、Bax mRNA的表达,免疫组化检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果显示:从第35天开始,试验Ⅱ组和Ⅲ组家兔睾丸细胞凋亡指数、Bcl-2和Bax mRNA的表达均与对照差异极显著(P<0.01),试验Ⅰ组家兔睾丸细胞凋亡指数、Bcl-2和Bax mRNA的表达均与对照差异显著(P<0.05);试验组家兔睾丸组织Bcl-2蛋白表达均明显低于对照,Bax蛋白表达均明显高于对照,其差异性随中毒时间的延长而变化。结果表明:小花棘豆中毒可导致家兔睾丸组织生精细胞凋亡,且与小花棘豆中毒呈现一定的时间-剂量效应,这种作用可能与Bcl-2和Bax基因表达有关。     

小花棘豆与玉米混贮微生物特性及脱除苦马豆素乳酸菌的筛选

旨在探讨小花棘豆与玉米按不同比例混贮对微生物特性及乳酸菌多样性影响,挖掘具有脱除苦马豆素活性的乳酸菌,为小花棘豆青贮饲料的开发利用提供理论参考。以小花棘豆和全株玉米为原料,按不同比例10∶0(T1)、9∶1(T2)、8∶2(T3)7∶3(T4)、6∶4(T5)、5∶5(T6)、4∶6(T7)、0∶10(T8)混合青贮,室温发酵60d,检测青贮前、后微生物种类、数量变化,鉴定分离出的乳酸菌,并测定其对苦马豆素的脱除率。试验结果:1)原料中乳酸菌数量随着玉米混入量的增加逐渐升高,青贮饲料各处理间乳酸菌数量无显著差异;原料中的肠细菌各处理间无显著差异,经过青贮发酵后肠细菌均未检测到;好氧细菌数量在原料和青贮饲料中均随着玉米比例的增加逐渐减少;酵母菌数量在各处理间均无显著差异;原料中的霉菌数量随着玉米混入比例增加逐渐增加,而青贮饲料中的霉菌数量均在检出线以下。2)从小花棘豆与玉米混贮的原料中共分离得到乳酸菌菌株4株,经鉴定属于Lactococcus lactis subsp.hordniae、Lactococcus lactis subsp.lactis和Lactococcus taiwanensis 3种;从青贮饲料中分离出乳酸菌菌株9株,经鉴定属于Lactobacillus plantarumsubsp.plantarum、Lactobacillus brevis、Lactobacillus pentosus和Lactobacillus amylovorus 4种,当玉米混入比例升高时,原料中乳酸菌多样性有所增加,而青贮饲料中乳酸菌多样性有所下降。3)不同乳酸菌菌株对苦马豆素的脱除率均高于85%,其中菌株JD6E、JD4D、JD10D、JD2E和JD1F对苦马豆素的脱除率高达100%。经过热处理后,菌株JD10D和JD2E对苦马豆素的脱除率分别为100%和97.76%,而其他菌株对苦马豆素的脱除率下降31.76%~100%,其中菌株JD6D和JD1E经过热处理后对苦马豆素的脱除率分别下降到2.17%和0。结果表明,小花棘豆与玉米混贮可以增加青贮原料中乳酸菌的数量及多样性,降低青贮饲料和原料中好氧细菌的数量,有助于提高青贮成功率;乳酸菌对苦马豆素具有良好的脱除效果,菌株JD10D和JD2E对苦马豆素的吸附脱除作用最强,而菌株JD6D和JD1E对苦马豆素的降解作用最强,均可用作小花棘豆青贮脱除苦马豆素的发酵菌株。     

小花棘豆与玉米混贮微生物特性及脱除苦马豆素乳酸菌的筛选

旨在探讨小花棘豆与玉米按不同比例混贮对微生物特性及乳酸菌多样性影响,挖掘具有脱除苦马豆素活性的乳酸菌,为小花棘豆青贮饲料的开发利用提供理论参考。以小花棘豆和全株玉米为原料,按不同比例10:0(T₁)、9:1(T₂)、8:2(T₃)7:3(T₄)、6:4(T₅)、5:5(T₆)、4:6(T₇)、0:10(T₈)混合青贮,室温发酵60 d,检测青贮前、后微生物种类、数量变化,鉴定分离出的乳酸菌,并测定其对苦马豆素的脱除率。试验结果:1)原料中乳酸菌数量随着玉米混入量的增加逐渐升高,青贮饲料各处理间乳酸菌数量无显著差异;原料中的肠细菌各处理间无显著差异,经过青贮发酵后肠细菌均未检测到;好氧细菌数量在原料和青贮饲料中均随着玉米比例的增加逐渐减少;酵母菌数量在各处理间均无显著差异;原料中的霉菌数量随着玉米混入比例增加逐渐增加,而青贮饲料中的霉菌数量均在检出线以下。2)从小花棘豆与玉米混贮的原料中共分离得到乳酸菌菌株4株,经鉴定属于Lactococcus lactis subsp. hordniae、Lactococcus lactis subsp. lactis和Lactococcus taiwanensis 3种;从青贮饲料中分离出乳酸菌菌株9株,经鉴定属于Lactobacillus plantarum subsp. plantarum、Lactobacillus brevis、Lactobacillus pentosus和Lactobacillus amylovorus 4种,当玉米混入比例升高时,原料中乳酸菌多样性有所增加,而青贮饲料中乳酸菌多样性有所下降。3)不同乳酸菌菌株对苦马豆素的脱除率均高于85%,其中菌株JD6E、JD4D、JD10D、JD2E和JD1F对苦马豆素的脱除率高达100%。经过热处理后,菌株JD10D和JD2E对苦马豆素的脱除率分别为100%和97.76%,而其他菌株对苦马豆素的脱除率下降31.76%~100%,其中菌株JD6D和JD1E经过热处理后对苦马豆素的脱除率分别下降到2.17%和0。结果表明,小花棘豆与玉米混贮可以增加青贮原料中乳酸菌的数量及多样性,降低青贮饲料和原料中好氧细菌的数量,有助于提高青贮成功率;乳酸菌对苦马豆素具有良好的脱除效果,菌株JD10D和JD2E对苦马豆素的吸附脱除作用最强,而菌株JD6D和JD1E对苦马豆素的降解作用最强,均可用作小花棘豆青贮脱除苦马豆素的发酵菌株。     

苦马豆素研究最新进展

疯草(locoweed)是豆科棘豆属(Oxytropis)和黄芪属(Astragalus)有毒植物的统称,其主要毒性成分是苦马豆素,动物采食后发生慢性神经机能障碍性中毒病,每年给牧区造成巨大的经济损失。另外,苦马豆素因其具有毒性和药理活性双重作用,受到毒理学界和医学界的普遍重视。本文不仅对苦马豆素毒性及作用机制、药理活性、来源和苦马豆素生物合成通路的最新研究进展进行了综述,而且还对合成通路中可能涉及的调控酶进行了推测。同时,又对未来苦马豆素的研究进行了展望,以期为疯草中毒病的防治提供参考。     

家畜小花棘豆中毒的研究进展

小花棘豆是豆科棘豆属多年生草本植物 ,全株有毒 ,在国内分布广泛 ,适于在干旱地区生长 ,家畜采食一定量后可逐步“成瘾”,常使大批家畜发病死亡 ,使该草分布地区蒙受巨大的经济损失。文章主要从小花棘豆的生态、部分地区小花棘豆中毒的情况、家畜小花棘豆中毒后的临床症状、病理学、引起小花棘豆中毒的毒性成分 (溶血毒素和有毒生物碱等 )及对小花棘豆中毒家畜采取的防治措施等进行了综述     

新疆阿克苏地区天然草地毒草分布及危害状况调查

采用现场调查与资料收集相结合,对新疆阿克苏地区天然草地毒草种类和地理分布及危害等进行了调查。结果表明,阿克苏地区天然草地毒草分布面积62.05万hm2,占可利用草地面积7.12%,年平均牲畜毒草中毒数超过7 000余头(只)。天然草地主要毒草有66种,分属22科,49属,对畜牧业生产造成危害的主要有小花棘豆、苦豆子、苦马豆、骆驼蓬、黄花棘豆、无叶假木贼、盐角草、盐生草、醉马芨芨草、苍耳等。结合调查结果提出了毒草防控建议。     

甘肃天然草原主要毒草分布、危害及其防治对策

甘肃天然草原有毒植物有18科39属178种。对家畜危害性大、分布较广的毒草主要有:豆科棘豆属的甘肃棘豆Oxytropis ransuensis、黄花棘豆O．ochrocephala、小花棘豆O.glabra、糠形棘豆O.falcate、蓝花棘豆O．coerulea,豆科黄芪属的变异黄芪Astragalus variabilis,瑞香科狼毒属的狼毒Sellera chmaejas- me,禾本科芨芨草属的醉马草Achnatherum inebrians、由于自然和人为因素的影响,甘肃省天然草原退化严重,生态环境逐渐变劣,有毒植物大量繁衍增生,家畜采食后,中毒的现象时有发生,造成较大的损失。为此,对毒草的地理分布、生境条件、家畜中毒症状做了简要阐述,提出了防治对策,以减少家畜中毒死亡。     

苦马豆素抗血清治疗家兔小花棘豆中毒

通过检测苦马豆素（swainsonine,SW）抗血清治疗小花棘豆中毒家兔血清免疫和生化指标变化,评价SW抗血清对家兔小花棘豆中毒的治疗效果。将18只家兔随机分为对照组（6只）、攻毒组（6只）和攻毒治疗组（6只）,攻毒试验兔按干重拌料饲喂10g／（kg·d）小花棘豆草粉,攻毒组试验兔出现死亡时（第70天）停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW抗血清,每只兔每天0．5mL,连续注射4d。以攻毒试验开始进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW含量显著高于对照家兔（P〈0．05）;第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔（P〈0．05）,血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔（P〈0．05）;第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU含量显著高于对照家兔（P〈0．05）。攻毒治疗组家免注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性及BuN、CRE、GLU、SW含量较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E～玫瑰花环率显著上升。结果表明,SW抗血清可有效治疗家兔小花棘豆中毒。     

小花棘豆中毒对和田羊瘤胃微生物数量的影响

探讨小花棘豆对和田羊瘤胃微生物区系的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将12只和田羊随机分为3组,即对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。试验组分别按10g/kg和20g/kg的剂量饲喂小花棘豆,至典型临床症状出现为止。攻毒前及攻毒后每隔7d取瘤胃液,检测瘤胃液中微生物数量的变化。结果显示,与正常对照相比,试验羊瘤胃液中总细菌数、白色瘤胃球菌数、黄化瘤胃球菌数、纤毛虫数、内毛虫数和双毛虫数极显著下降（P〈0.01）,并与小花棘豆中毒呈现较强的相关性;而瘤胃液中厌氧真菌数、产琥珀酸拟杆菌数和等毛虫数与小花棘豆中毒无明显相关性。结果表明,小花棘豆中毒可显著影响和田羊瘤胃纤维素分解菌和纤毛虫数量,且具有一定的时间效应和剂量效应关系。     

小花棘豆中毒对和田羊血清蛋白和血脂的影响

12 Hetian sheeps were randomly and equally divided into 3 groups (the control group, experimental groupⅠ,groupⅡ) to investigate the effect of Oxytropis glabra DC poisoning on serum protein and blood fat, then reveal the toxicity mechanism of Oxytropis glabra DC. These experimental groups of sheeps were fed daily contents of 10 or 20 g/（kg·BW） until typical symptoms were observed. The contents of serum protein and blood fat were determined respectively before challenge test and at intervals of 7 days in this test. Meanwhile, the serum proteins were analysed by electrophoresis. After 42 days test, the results demonstrated that the contents of serum TP, GLO, α-globulin and HDL-C did not significantly change in each group (P>0.05); the contents of β-globulin, TC, LDL-C and VLDL-C in experimental groups were higher than normal control group, the contents of ALB, γ-globulin and TG in experimental groups were lower than normal control group, with significant differences between the experimental groups （P <0.05 or P <0.01）; the content ratio of albumin to globulin(A/G) in test groups were decreased. The results showed that the sheeps’ liver displayed different degrees of damage by poisoning of Oxytropis glabra DC.     

《马可波罗游记》中记载的肃州毒草及其生态环境背景调查

调查了<马可波罗游记>所记载的中国古代肃州引起牲畜中毒的毒草类型、分布特征及其发育地的生态环境背景.结果表明:在马可波罗当年旅行经过的肃州地区,狼毒Stellera chamaejasme,棘豆Oxytropis,醉马草Achnatherum inebrians 3种毒草大面积分布,已泛滥成灾,造成了数万头(只)牛、羊等家畜大量中毒死亡,严重影响了当地畜牧业的发展.肃南县是毒草生态灾害的重灾区,狼毒、棘豆、醉马草在该区广泛发育.狼毒、醉马草、黄花棘豆O.ochranthd发育在海拔3000 m左右、降水量近300 mm的祁连山中高山区草原生态环境;小花棘豆O.glabra分布在降水量不到100mm、蒸发量可达2 900 mm、严重盐碱化的明花区走廊荒漠草原生态环境.棘豆植物分布区地理位置和牲畜中毒征状说明肃南县的棘豆毒草很可能是<马可波罗游记>中所记栽的引起牲畜中毒的毒草.     

甘肃天然草地毒草危害、防控与综合利用

甘肃拥有天然草地1564.83万hm~2,位列全国第6位。长期以来,由于受干旱、鼠虫害和超载放牧等因素影响,天然草地退化严重,并伴随大量毒草滋生和蔓延,导致大批牲畜中毒,给畜牧业带来严重经济损失。甘肃天然草地常见毒草有78科187属312种,主要毒草有:瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)、甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis)、黄花棘豆(O.ochrocephala)、小花棘豆(O.glabra)、变异黄芪(Astragalus variabilis)、醉马芨芨草(Achnatherum inebrians)、橐吾(Ligularia sibirica)、苦豆子(Sophora alopecuroides)、马先蒿(Pedicularis resupinata)及栎属(Quercus L.)植物等。本文结合课题组对甘肃天然草地毒草资料整理及实际调查分析,分别就近年来甘肃天然草地毒草对区域草地生态及畜牧业生产造成的毒草灾害、地理分布、毒草种类、防控对策及合理利用进行综述。     

新疆小花棘豆对大鼠亚急性毒性及解毒剂解毒效果观察

In order to understand the effect of Oxytropis glabra on the structure of liver tissue and observe the effect of antidote on the detoxification in mice,30 mice were randomly divided into 5 groups,the control group was fed with basal diet, group 1 was fed with basal diet supplemented with Oxytropis glabra,group 2 was gavaged alkaloid solution extracted from Oxytropis glabra,group 3 was fed with basal diet supplemented with Oxytropis glabra and injected antidote into intraperitoneal simultaneously,group 4 was gavaged alkaloid solution extracted from Oxytropis glabra and injected antidote into intraperitoneal simultaneously. The mice were fed in single cage,and the trial lasted for 21 days.The results showed that the different degree of hyperemia and hemorrhage were appeared in liver and kidney tissue of groups 1 and 2.Most of the liver cells in hepatic lobule were swelled and vacuoles degenerated.The organ coefficient analysis showed that there were significant differences （P＜0.05） or extremely significant differences （P＜0.01） between the detoxification groups and the poisoned groups.In couclusion,the antidote had a certain protective effect for liver tissue damage caused by Oxytropis glabra and its alkaloids.     

小鼠日粮中添加小花棘豆黄酮的安全性试验

试验旨在研究小鼠日粮中添加不同剂量的小花棘豆黄酮在其饲喂过程中的安全性。选用48只6~8周龄、体重为(20±2)g的小鼠,随机分为4组,每组12只,雌、雄各半。对照组饲喂全混合日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在全混合日粮中分别添加10、30、50 mg/kg小花棘豆黄酮,试验期为30 d。结果表明,小鼠采食小花棘豆黄酮后未见异常临床症状;小鼠血液学指标、血清生化指标和脏器系数均在正常范围内。提示,小鼠日粮中添加小花棘豆黄酮未发现亚慢性毒性,可以被安全利用。