戊糖片球菌的耐酸及耐胆盐能力研究

本实验对戊糖片球菌进行耐酸、耐胆盐能力表征及模拟胃液和模拟肠液实验.结果表明,在pH 2.5、3.5条件下培养4h后,戊糖片球菌PP的活菌数分别能达到108 cfu/mL和1010 cfu/mL以上.在胆盐质量分数为0.1％、0.2％和0.3％的MRS培养基中培养4h后,戊糖片球菌PP生长良好,活菌数均在106cfu/mL以上,其中胆盐质量分数为0.1％时,戊糖片球菌PP存活率能达到133.3％.模拟胃液和模拟肠液实验结果表明,该菌株能够有效通过胃环境,能在肠道中繁殖.结果可见,戊糖片球菌PP具有较强的耐酸耐胆盐能力,符合微生态制剂和乳酸菌发酵功能食品菌种的要求.     

戊糖片球菌对肉仔鸡生长性能、肉品质及抗氧化指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同剂量戊糖片球菌制剂,对AA肉鸡生长性能及常规肉品质的影响.选用1日龄AA肉公鸡200只,随机分为4个处理组,每组50只,每个重复10只.Ⅰ组饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别饲喂含1×1011cfu、1× 1010 cfu、1× 109 cfu戊糖片球菌的基础日粮,试验期42 d.结果表明,试验期内每日每只鸡饲喂1×1010 cfu戊糖片球菌制剂可显著降低饲料的料重比,同时改善AA肉鸡的肉品质及抗氧化功能.     

戊糖片球菌PP-23对AA肉鸡生长性能和免疫性能的影响

本试验旨在研究戊糖片球菌PP-23对AA肉鸡生长性能和免疫性能的影响。将1日龄体重相近、雌雄各半的240只AA肉鸡分为5组,对照组C0饲喂基础日粮,T1～T4试验组饲喂基础日粮添加(持续或间断)不同浓度戊糖片球菌PP-23,试验期为3周。结果表明,与C0组相比,T1组FW和ADG均显著提高,F/G显著降低,ADFI差异不显著;T2～T4组各指标与C0组均差异不显著;T1组半净膛率和全净膛率、T3组全净膛率均显著升高。T3组法氏囊指数显著升高,其他3组差异不显著。qRT-PCR分析显示,各试验组空肠IFN-γ、IL-1β基因及脾脏IFN-γ基因的表达量均显著下调;T1、T2及T3组脾脏IL-1β基因表达水平显著下调。与C0组相比,T1～T4组空肠绒毛高度和宽度均显著提高;T1、T2组空肠和回肠中的绒隐比显著提升;T4组十二指肠肌层厚度显著提升。由此可见,在AA肉鸡日粮中添加戊糖片球菌PP-23可以提高AA肉鸡的生长性能,改善小肠的肠道结构,增强其免疫性能,持续饲喂戊糖片球菌PP-23 1.0×10⁷ CFU/g的效果最佳。     

饲粮中添加戊糖片球菌对育成期水貂生长性能、营养物质表观消化率以及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究饲粮中添加戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)对育成期水貂生长性能、营养物质表观消化率以及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响。选取(75±3)日龄的健康雄性短毛黑水貂100只,随机分为5组,每组20个重复,每个重复1只水貂。每天在每只水貂的基础饲粮中添加1 mL浓度分别为0(Ⅰ组,作为对照组)、1×107(Ⅱ组)、1×108(Ⅲ组)、1×109(Ⅳ组)和1×1010 CFU/mL(Ⅴ组)的新鲜戊糖片球菌菌液。预试期7 d,正试期56 d。结果表明:1)试验第1~28天,各组之间粪便评分差异均不显著(P>0.05);试验第29~42天和第43~56天,Ⅲ、Ⅳ组的粪便评分显著低于对照组(P<0.05);试验第1~56天,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的粪便评分显著低于对照组(P<0.05)。2)试验第1~56天,Ⅲ组的平均日增重和平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05);试验第29~42天,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的平均日采食量极显著高于对照组(P<0.01)。3)各组之间干物质、粗蛋白质、粗脂肪和碳水化合物的表观消化率差异不显著(P>0.05)。4)Ⅲ组水貂血清胆固醇含量显著低于对照组(P<0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇含量显著高于对照组(P<0.05);Ⅲ和Ⅳ组水貂血清低密度脂蛋白胆固醇含量显著低于对照组(P<0.05)。5)各组水貂血清谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量无显著差异(P>0.05);Ⅲ组水貂血清总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05)。6)各试验组水貂血清免疫球蛋白A含量显著高于对照组(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组水貂血清免疫球蛋白M含量显著高于对照组(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组水貂血清免疫球蛋白G含量显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加1×108 CFU/(d·只)戊糖片球菌时,可提高育成期水貂的生长性能,调节血脂水平,并提高机体抗氧化能力和免疫功能。     

聚丙烯戊糖片球菌对肉仔鸡生长性能、屠体指标及肉品质的影响

为研究日粮中添加不同水平聚丙烯戊糖片球菌对肉仔鸡生长性能、屠体指标以及肉质性状的影响,将1日龄AA肉公鸡400只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复20只鸡。前3周均饲喂基础饲粮,第4周起,第1组为对照组,第2、3、4组在基础饲粮基础上分别饲喂109、1010、1011CFU/d.只的聚丙烯戊糖片球菌,试验期42 d。结果表明:(1)高、中、低剂量的聚丙烯戊糖片球菌对肉仔鸡生长性能的影响均不显著(P>0.05)。(2)1011CFU聚丙烯戊糖片球菌添加组肉仔鸡的胸肌率和腿肌率较对照组显著提高6.72%和5.2%(P<0.05)。(3)109CFU聚丙烯戊糖片球菌添加组肉仔鸡胸肌的L*值和腿肌的剪切力显著降低(P<0.05),腿肌的失水率极显著降低(P<0.01)。     

1株高产乳酸粪肠球菌的筛选、鉴定及益生性能的研究北大核心

研究旨在获得能够高产乳酸的畜源益生菌。试验从新鲜仔猪粪便中筛选得到一批乳酸菌,根据碳酸钙透明圈结果和乳酸含量测定结果得到1株高产乳酸菌株SWS50,对其进行形态特征、生理生化特征、分子生物学结果及系统发育树等鉴定,并进行抑菌试验、抗逆性试验和胃肠道模拟试验。结果显示,菌株SWS50为粪肠球菌,培养48 h后乳酸产量最高可达117.9 mmol/L;菌株SWS50对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌表现出较强的抑制作用;菌株SWS50具有较高的抗胆盐能力和耐酸能力,在人工肠液中基本可正常生长,存活率较高。研究表明,菌株SWS50具有较强的抗逆特性和一定的胃肠道存活能力,可发展为畜禽领域应用的潜力益生菌。     

一株重组乳酸乳球菌菌株抗氧化能力的研究

本试验通过测定表达外源谷氨酰胺转胺酶(MTG)的重组乳酸乳球菌与其野生型的抗过氧化氢能力、氧自由基清除能力,及MTG与重组菌株抗氧化能力获得之间的关系,力图揭示重组乳酸乳球菌菌株的抗氧化机制。以期通过有氧代谢方式来提高乳酸乳球菌细胞数量,为拓宽乳酸乳球菌的工业应用领域提供新的思路。     

植物乳杆菌和戊糖片球菌活菌计数检测

对本研究室所研制的一种微生物青贮剂所含植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum,LP)、戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus,PP)建立了活菌数量的检测方法。PP比LP繁殖能力和活力都强。     

全株水稻表面优势乳酸菌的筛选与鉴定

本试验旨在对全株水稻表面的优势乳酸菌进行分离、筛选与鉴定，以期挖掘出青贮优良菌种资源。利用平板涂布法对全株水稻上的乳酸菌进行分离，以生长速度和产酸能力进行初筛，以抗氧化能力（H2O2耐受能力、DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率）进行复筛，对筛选出的优势乳酸菌进行生理生化特性分析和分子生物学鉴定。结果表明，从水稻植株表面共分离得到154株乳酸菌，培养48 h后，有16株OD600nm值>2且pH值<4的乳酸菌，其中有9株乳酸菌具有抗氧化能力，综合表现最好的菌株是YMA3，对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率分别为72.23%、72.46%、86.33%。YMA3表现出较强的高温或酸性环境适应性，鉴定为粪肠球菌。     

弯曲杆菌中具有高抑菌活性乳酸菌的筛选

使用微生态制剂来替代抗生素用于动物疫病防制是未来的发展趋势,而乳酸菌是目前微生态制剂最主要的成分。试验旨在筛选弯曲杆菌中具有高抑菌活性并耐受动物胃肠道环境的乳酸菌。从广东不同地区采集家禽粪便样品,对分离的乳酸菌进行生化鉴定、PCR鉴定及16S rDNA测序。同时,对分离菌株进行鸡源空肠弯曲杆菌、鸭源空肠弯曲杆菌和鹅源结肠弯曲杆菌的抑菌试验,以及模拟胃肠道环境的耐酸、耐胆盐和耐胰蛋白酶试验。结果表明,唾液乳杆菌R3对不同禽源的弯曲杆菌都具有高抑菌活性和耐受能力。因此,唾液乳杆菌R3为开发防控家禽弯曲杆菌疾病的微生态制剂提供了候选株。     

乳酸片球菌对肥育猪生长性能及肠道抗氧化能力、形态结构和菌群的影响

本试验旨在研究乳酸片球菌对肥育猪生长性能及肠道抗氧化能力、形态结构和菌群的影响。选取48头体重为(62.46±1.20)kg的"杜×长×大"肥育猪,将其随机分为2组,每组4个重复,每个重复6头猪(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮中添加0.1 g/kg乳酸片球菌制剂(1.0×10~(10)CFU/g)的试验饲粮。试验期56 d。结果表明,与对照组相比:1)饲粮添加乳酸片球菌对肥育猪平均日采食量、平均日增重、料重比无显著影响(P0.05)。2)饲粮添加乳酸片球菌显著提高了肥育猪十二指肠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、空肠总抗氧化能力(T-AOC)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性以及回肠过氧化氢酶(CAT)活性(P0.05)。3)饲粮添加乳酸片球菌显著降低了肥育猪十二指肠隐窝深度(P0.05),显著提高了黏膜厚度(P0.05)、肠壁厚度(P0.05)以及绒毛高度/隐窝深度(P0.05);显著降低了空肠隐窝深度(P0.05),显著增加了绒毛高度/隐窝深度(P0.05);显著增加了回肠绒毛高度(P0.05)。4)饲粮添加乳酸片球菌显著增加了肥育猪空肠乳酸菌数量、定植抗力(P0.05),显著降低了大肠杆菌数量(P0.05)。由此可见,饲粮添加0.1 g/kg乳酸片球菌(1.0×10~(10)CFU/g)能改善肥育猪肠道菌群和肠道形态结构,增强肠道抗氧化能力,进而促进肥育猪的肠道健康。     

酸马奶中分离到的乳酸菌耐酸性及抗霉菌活性的研究

从锡林郭勒盟正蓝旗采集的3份酸马奶样品中分离得到30株菌株,未分离到球菌,均为杆菌,分别鉴定为:Lactobacillus coryniformis subsp.Torquens、Lb.bifermentans、Lb.amylophilus、Lb.helueticus和Lb.delbrueckii subsp.Bulgarcus。并从这5种乳酸菌中选出6株菌株进行了耐酸实验及抗霉菌活性测定。结果为:所测菌株均对酸的耐受性良好。选出的菌株Lb.coryniformis subsp.Torquens1、Lb.bifermentans2、Lb.amylophilus3、Lb.helueticus5对本试验中使用的6株霉菌具有较广的抗霉菌活性,其抗霉菌效果一般;菌株Lb.helueticus4、Lb.helueticus5虽然是从同一类群中选出来的,但其抗霉菌效果明显不同;菌株Lb.delbrueckii subsp.Bulgarcus6其抗霉菌活性不是最广的,但对Fusarium oxysporum f.sp.Cucumerinum JCM9284具有较强抗性。     

紫甘薯乳酸发酵醪体外抗氧化性研究

测定5种乳酸发酵醪和紫甘薯醋的总抗氧化能力和对二苯代苦昧酰基（DPPH）自由基清除率,结果表明紫：甘薯乳酸发酵后抗氧化能力轻微增强,总抗氧化能力达200．18mg／mL,添加量为100μL时对DPPH自由基清除率达96．99％,与紫甘薯醋抗氧化能力相当。5种乳酸发酵醪中,紫甘薯乳酸发酵醪抗氧化能力最强。     

Screening of Pychrotrophic Lactic Acid Bacteria from Changbai Mountain Soil

The purpose of the experiment was to screen psychrotrophic lactic acid bacteria with strong stress-resistant growth ability,acid production ability and good bacteriostatic characteristics in vitro,and analyze its related biological characteristics,so as to provide excellent psychrotrophic lactic acid bacteria resources for low temperature silage in Northeast China.The culture condition of 10 ℃ was used to screen the psychrotrophic lactic acid bacteria.After the determination of the growth characteristics of Lactobacillus under different pH,temperature and salinity conditions,the species identification of the candidate strains was carried out,and the growth curve,acid production curve,acid and bile salt resistance,bacteriostatic performance and feeding test of mice were conducted for the candidate strains.The results showed that 11 strains of psychrotrophic lactic acid bacteria could grow well at 10 ℃.The strains C37,C34 and C4212 were identified as Lactobacillus plantarum by 16S rRNA sequencing analysis.The pH of C37,C34 and C4212 decreased to below 4.25 after 7 days of culture.In addition,C37,C34 and C4212 could grow well at 4 ℃,45 ℃,pH 3.0 and 6.5% NaCl.The analysis of growth curve showed that the three strains of Lactobacillus all had a fast growth rate,entered the logarithmic growth period at 4 h,and entered the stable growth period in 10-12 h after inoculation.In the aspect of acid production rate,C37,C34 and C4212 could reduce pH below 4.04 at 24 h of culture.At pH 3.0,C37 and C4212 had a high survival rate,they all had a certain tolerance to 0.5% bile salt,and the survival rate was more than 80%.C37,C34 and C4212 had inhibitory effect on enterotoxin producing Escherichia coli,Salmonella Typhimurium,Staphylococcus aureus and Salmonella Enteritis,and the animal test of three Lactobacillus plantarum were safe.Based on the results of this experiment,Lactobacillus C37,C34 and C4212 were screened and identified from the forest soil of Changbai Mountain,which could provide excellent lactic acid bacteria resources for low temperature silage in winter in Northeast China.     

紫甘薯乳酸发酵醪体外抗氧化性研究

测定5种乳酸发酵醪和紫甘薯醋的总抗氧化能力和对二苯代苦味酰基(DPPH)自由基清除率,结果表明紫:甘薯乳酸发酵后抗氧化能力轻微增强,总抗氧化能力达200.18mg/mL,添加量为100μL时对DPPH自由基清除率达96.99%,与紫甘薯醋抗氧化能力相当。5种乳酸发酵醪中,紫甘薯乳酸发酵醪抗氧化能力最强。     

新疆传统酸奶中产胞外多糖乳酸菌的筛选与鉴定

试验选择6种新疆地区不同传统酸奶,通过平板涂布、划线分离、革兰染色、接触酶试验和凝乳试验鉴定后得到4株乳酸菌,分别命名为L1、L2、L3、L4。通过PCR鉴定16S rDNA序列,证明L1、L2株为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）,L3、L4株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）;4株乳酸菌L1、L2、L3、L4的产胞外多糖含量分别为176、248、205、294 mg/L;L4株产胞外多糖量最高,L1株产量最低。研究丰富了产胞外多糖乳酸菌发酵剂的种类。     

长白山原始森林土壤源耐低温乳酸菌的筛选

试验旨在筛选长白山原始森林土壤中耐胁迫生长能力强、产酸能力强、体外抑菌特性好的耐低温乳酸菌,并对其相关生物学特性进行分析,为东北地区寒冬季节低温青贮提供优良乳酸菌菌种资源。采用低温（10℃）进行耐低温乳酸菌初筛,经不同pH、温度及盐度等条件下进行乳酸菌生长特性测定后,进行候选菌株的种属鉴定,并对候选菌株进行生长曲线、产酸曲线、耐酸和耐胆盐性能、抑菌性能测定及小鼠饲喂试验。结果显示,通过10℃低温条件培养,初筛获得11株能够良好生长的耐低温乳酸菌,其中C37、C34和C4212经16S rRNA测序分析后鉴定为植物乳杆菌,在培养7 d时,pH均可下降至4.25以下,均能够在4℃、45℃、pH 3.0、6.5% NaCl等条件下良好生长。生长曲线分析发现,3株乳酸菌均在4 h达到对数生长期,10~12 h后进入生长稳定期。在培养24 h时,C37、C34和C4212可将pH分别降至4.04以下,在pH 3.0条件下,C37和C4212具有较高的存活率,且对0.5%胆盐具有一定的耐受性,其存活率均在80%以上。对常见病原菌体外抑菌表明,3株乳酸菌对产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及肠炎沙门氏菌均有抑制作用,小鼠饲喂试验表明生物安全性好。本试验结果表明,从长白山原始森林土壤中筛选和鉴定出的乳杆菌C37、C34、C4212可作为东北地区寒冬季节低温青贮优良乳酸菌菌种资源。     

螺旋霉素高产菌株的选育

以螺旋霉素链霉菌(Streptomyces spiramyceticus)SPM-14078菌株作为出发菌株,利用常压室温等离子体(ARTP)诱变、紫外线(UV)诱变和亚硝基胍(NTG)诱变的方法对菌株进行诱变处理,比较3种方法的诱变效果,通过诱变筛选出1株遗传稳定性好且具有Co~(2+)和豆油耐受性、噬菌体抗性的菌株SPMAR-1603,其发酵效价比出发菌株提高了294.9%,此结果对螺旋霉素高效生产、品质提升具有重要意义。     

产胞外多糖乳酸菌筛选及胞外多糖提取方法

从实验室保存及市售泡菜和发酵乳中分离的乳酸菌中进行筛选,通过黏度和EPS产量的测定,筛选出一株高产EPS的乳酸菌,为实验室保存菌株干酪乳杆菌,黏度为354.04mPa·s,产量为731.58mg/L。EPS提取过程中,比较了Sevag法和三氯乙酸法两种除蛋白方法,8%三氯乙酸除蛋白的方法效果最好。