不同浓度海藻糖对奶山羊睾丸组织冷冻保存效果的影响

为了研究含有不同浓度海藻糖的冷冻保护液对关中奶山羊睾丸组织冷冻保存的效果,将关中奶山羊的睾丸组织切碎后,冷冻保存在含有不同浓度海藻糖的冷冻保护液中,保存1个月后解冻,分别检测冷冻保存前后睾丸组织总细胞活力、总抗氧化酶(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。结果:各试验组总细胞活力、T-AOC、SOD、CAT活性以及GSH含量均高于对照组,各试验组MDA含量低于对照组。另外,经含有15%海藻糖的冷冻保护液保存后,总细胞活力显著高于其他试验组(P0.05),T-AOC、SOD、CAT活性和GSH含量均显著高于其他试验组(P0.05),MDA含量显著低于其他试验组(P0.05)。研究结果表明,在冷冻保护液中添加海藻糖能够通过保护组织中抗氧化酶活性,提高奶山羊睾丸组织冷冻保存的效果;添加海藻糖的最佳浓度为15%。     

关中奶山羊体尺指标和产奶量研究分析

通过对关中奶山羊的体尺指标和产奶量的调查研究分析,发现当前的关中奶山羊的年龄结构分布合理,但主要体尺指标均表现为显著性差异,其中体高、体长、腰角宽、胸围差异高度显著,管围差异不显著;各项指标和产奶性能均有退化现象,且有明显的地域性差异.     

关中奶山羊的适应性和生产性能分析

我区位于兴化湾畔，地处木兰溪下游，是一个以农牧业经济为基础的新兴城区，交通发达，人口密集，工厂、学校、医院集中；农副产品充足，草山草坡植被密集，且具有悠久的养羊历史，这些都是发展奶山羊的坚强后盾。随着我区农业产业结构的调整，奶山羊生产更是方兴未艾，每年都从陕西省调进几百只关中奶山羊在我区饲养，本人现把关中奶山羊的适应性和生产性能通过饲养观察分析总结如下。     

波尔山羊杂交改良关中奶山羊效果分析

利用波尔山羊与关中奶山羊进行级进杂交,分别对波奶F1、F2、F3和F4羔羊不同阶段的体型外貌、体重、体尺、适应性及经济效益等指标进行观测。统计结果表明,在当地饲养管理条件下,各杂交后代的生长发育性能均优于关中奶山羊,差异显著（P〈0.05）,经济效益明显增加。推广波奶杂交改良羊,对增加农民收入、推动农村经济发展意义重大。     

波尔山羊杂交改良关中奶山羊效果分析

利用波尔山羊与关中奶山羊进行级进杂交。分别对波奶F1、F2、F3、F4羔羊不同阶段的体型外貌、体重、体尺、适应性及经济效益等指标进行观测。统计结果表明：在当地饲养管理条件下，各杂交后代的生长发育性能均优于关中奶山羊，差异显著（P〈0．05）；经济效益明显增加。因此，推广波奶杂交改良羊，对增加农民收入，推动农村经济发展意义重大。     

关中奶山羊体尺指标和产奶量研究分析

通过对关中奶山羊的体尺指标和产奶量的调查研究分析,发现当前的关中奶山羊的年龄结构分布合理,但主要体尺指标均表现为显著性差异,其中体高、体长、腰角宽、胸围差异高度显著,管围差异不显著;各项指标和产奶性能均有退化现象,且有明显的地域性差异。     

黄金伴侣对关中奶山羊生产性能的影响

[目的]探讨黄金伴侣对关中奶山羊生产性能的影响,[方法]在富平县流曲镇双杨村向忠奶山羊场选取月龄、体重相近的健康关中奶山羊产奶羊60只,采用配对试验设计方法,试验组日粮中添加黄金伴侣,对照组不添加,两组饲养管理条件完全相同。[结果]试验组奶山羊日均产奶量提高0.4 kg,提高22.22%(P0.05),饲料转化率提高19.38%(P0.05)。日增重增加0.90 kg(P0.05);平均日增重增加0.15 kg(P0.05)。日纯收入增加2.06元。经济效益提高33.40%(P0.05)。[结论]在关中奶山羊日粮中添加黄金伴侣,奶山羊产奶量、饲料转化率和日增重均增加,经济效益提高。     

补硒对关中奶山羊羔羊断奶成活率的影响

为探讨补硒对关中奶山羊羔羊断奶成活率的影响,对关中奶山羊饲养区内99只断奶羔羊进行补硒饲养试验,分别羔羊在10－15日龄和2月龄时注射亚硒酸钠-维生素E注射液。试验结果表明,试验组断奶羔羊的成活率比对照组提高0.09与24.24个百分点（P〈0.05与0.01）。     

西农关中奶山羊PDCD4基因的克隆与组织表达分析

旨在研究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)基因与奶山羊乳腺发育的关系。应用RT-PCR技术克隆PDCD4基因编码区(CDS)序列，并进行生物信息学分析，运用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测不同组织mRNA相对表达量。结果表明：克隆获得的关中奶山羊PDCD4基因CDS序列长1 410 bp,编码469个氨基酸，分子质量为51.8 ku,分子式为C₂₂₄₅H₃₆₀₆N₆₃₆O₇₃₀S₁₉,理论等电点为5.03;编码蛋白含有4个N-糖基化位点、6个O-糖基化位点及53个潜在的磷酸化位点；PDCD4蛋白为亲水性酸性蛋白质，无信号肽，无跨膜结构域；系统进化树显示PDCD4蛋白的氨基酸序列在不同物种间相似度较高，奶山羊与绵羊、牛、猫、猪、弯角大羚羊、美洲白尾鹿等同源性均在90%以上，其中与绵羊的亲缘关系最近；蛋白互作分析显示PDCD4蛋白能与EIF4A1、EIF4G1、PTEN、EIF4A2、EIF4B、RECK、GMPS、EEF1G等蛋白相互作用；qRT-PCR结果显示PDCD4...     

关中奶山羊源D型产气荚膜梭菌全基因组序列测定及其分子特征分析

本研究自陕西省富平县某规模化关中奶山羊养殖场腹泻奶山羊肛门拭子中分离到5株产气荚膜梭菌,命名为21-D-1~21-D-5。毒素基因检测表明,其均为携带etx的D型产气荚膜梭菌,且21-D-5携带食源性致病毒素基因cpe。全基因组序列测定显示,5株D型产气荚膜梭菌基因组大小、GC含量和基因数量稳定;单核苷酸多态性（SNPs）分析显示,21-D-1和21-D-2以及21-D-3和21-D-4之间的SNPs差异极低（<25）,表明其大概率属于相同的产气荚膜梭菌菌株。分离的D型产气荚膜梭菌基因组中共检测到15种毒素基因,其中,毒素基因etx在分离的D型菌株中高度保守、基因环境相似,且在菌株21-D-5中毒素基因cpe位于etx下游。此外,包括噁唑烷酮类耐药基因optrA在内的9种耐药基因也在分离株中被检测到,并且erm（A）、optrA和fexA具有共同传播的可能性。本研究为国内首次对D型产气荚膜梭菌进行全基因组序列测定分析,结果对产气荚膜梭菌疾病的防治和基因组的进一步研究具有参考价值。     

关中奶山羊FGF2基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究

【目的】对关中奶山羊成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor 2，FGF2）基因进行克隆及生物信息学分析，并检测其在山羊各组织中的表达差异，为后续探究该基因的功能奠定基础。【方法】以关中奶山羊乳腺cDNA为模板，采用RT-PCR技术扩增并克隆关中奶山羊FGF2基因完整CDS区序列，进行相似性比对、系统发育树构建及生物信息学分析；运用实时荧光定量PCR方法检测FGF2基因在关中奶山羊心脏、肝脏、脾脏、肾脏、背最长肌、肺脏、乳腺和卵巢组织中的表达情况。【结果】关中奶山羊FGF2基因编码区长468 bp，可编码155个氨基酸，分子质量为17.26 ku，理论等电点为9.58，其中含量最高的是甘氨酸，占10.3%。相似性比对结果表明，关中奶山羊FGF2氨基酸序列与人、牛、马、兔、绵羊、虎鲸和野猪的相似性分别为98.7%、99.4%、100.0%、98.7%、99.4%、99.4%和62.6%。系统进化树显示，FGF2基因在不同物种间具有高度保守性，与马的亲缘关系最近。关中奶山羊FGF2蛋白不稳定指数为38.39，属于稳定亲水性蛋白质，不含跨膜结构和信号肽；FGF2蛋白二级结构含有α-螺旋、β-转角、延伸链、无规则卷曲，分别占比10.32%、14.19%、30.97%、44.52%。蛋白质互作预测分析显示，FGF2蛋白与FGFR、KDR、FGF1、FGFR4、MET和FGFR1等与乳腺生长发育相关的蛋白存在相互作用。实时荧光定量PCR检测到关中奶山羊FGF2基因在心脏、肝脏、脾脏、肾脏、背最长肌、肺脏、乳腺和卵巢中均有表达，在乳腺中表达水平最高，其次为卵巢，在背最长肌中的表达水平最低。【结论】关中奶山羊FGF2基因CDS区序列长468 bp，编码155个氨基酸，为亲水蛋白，二级结构以延伸链和无规则卷曲为主。FGF2基因在关中奶山羊泌乳高峰期的不同组织中均有表达。本试验结果为进一步探究FGF2基因在关中奶山羊乳腺发育中的作用及其具体功能提供了参考。     

关中奶山羊CSN1S1基因克隆、生物信息学及组织表达谱分析

【目的】通过分析关中奶山羊αs1-酪蛋白(alpha-s1 casein, CSN1S1)基因组织表达谱及其生物信息学功能,初步探究CSN1S1基因在奶山羊乳成分合成中发挥的作用。【方法】以关中奶山羊为研究对象,利用PCR扩增并克隆CSNIS1-1和CSN1S1-2 2个突变形态,并利用ProtParam、NetPhos、SingalP 4.1 Server、NPS和Phyre2等多种生物信息软件和在线工具对CSN1S1基因及其突变形态的蛋白质结构、理化性质、磷酸化位点等进行分析,通过实时荧光定量PCR检测CSNIS1-1和CSN1S1-2在关中奶山羊肝脏、脾脏、乳腺、肾脏、子宫、输卵管6个组织中的相对表达量。【结果】关中奶山羊乳腺上皮细胞中存在CSN1S1-1和CSN1S1-2 2种突变形态。对测序结果比对显示,CSN1S1-1存在3个碱基的突变,CSN1S1-2不仅存在3个碱基的突变,还存在6个碱基的缺失。CSN1S1-1与CSN1S1蛋白相似性为99.07%,CSN1S1-2与CSN1S1蛋白相似性为97.20%。蛋白理化性质分析显示,CSN1S1-1中碱基的突变导致第31位亮氨...     

半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响

为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验.结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山羊对照组乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育,腺导管有明显的生长,试验组乳腺有大量的腺泡发育,腺导管生长更明显,且有分泌物出现.试验期血浆中与乳腺发育相关的激素水平明显升高.以上结果提示半胱胺在一定程度上促进了奶山羊乳腺发育.     

不同外源寡糖对崂山奶山羊瘤胃微生物区系的影响

本试验旨在研究不同外源寡糖对奶山羊瘤胃微生物区系的影响。试验选用 ６只平均体重为（３２．８０±２．４５）ｋｇ、装有永久性瘤胃瘘管的崂山奶山羊,采用分期分组试验设计。各组羊饲喂基础饲粮（对照组）以及分别在基础饲粮中添加 １％甘露寡糖（ＭＯＳ组）、半乳甘露寡糖（ＧＭＯＳ组）、寡木糖（ＸＯＳ组）、低聚异麦芽糖（ＩＭＯ组）、果寡糖（ＦＯＳ组）的试验饲粮。共进行４期试验,每期 ２３ｄ,其中预试期 １４ｄ,正试期 ９ｄ。于晨饲前（０ｈ）,晨饲后 ２、４、６、８ｈ以及晚饲前（晨饲后 １０ｈ）采集瘤胃液,测定瘤胃液中细菌总数以及纤维素分解菌、原虫和真菌数量。结果表明：与对照组相比,试验组瘤胃液细菌总数趋于增加,仅晨饲前 ＭＯＳ组显著提高（Ｐ＜０．０５）;试验组瘤胃液纤维素分解菌数量有所提高,其中 ＭＯＳ组（０ｈ）、ＧＭＯＳ组（０、２、４ｈ）、ＦＯＳ组（０、２、４ｈ）显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）;试验组瘤胃液原虫数量有所提高,其中 ＭＯＳ组（２和 ４ｈ）、ＸＯＳ组（４ｈ）显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）;试验组瘤胃液真菌数量有所提高,其中ＧＭＯＳ组和 ＦＯＳ组（０ｈ）极显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）,ＭＯＳ组（２ｈ）、ＩＭＯ组（２ｈ）、ＦＯＳ组（２ｈ）、ＭＯＳ组（４ｈ）、ＦＯＳ组（６ｈ）显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。细菌总数、纤维素分解菌和原虫数量呈先下降后上升趋势,真菌数量呈先上升后下降趋势。本试验条件下,添加不同外源寡糖对瘤胃微生物影响有所差异,其中甘露寡糖、半乳甘露寡糖和果寡糖对瘤胃液纤维素分解菌、原虫和真菌的增殖作用较明显。     

不同泌乳水平奶牛瘤胃发酵及血清代谢差异的研究

本试验通过研究不同泌乳水平奶牛在瘤胃发酵和血清代谢上的差异,从消化和代谢的角度解释不同泌乳水平奶牛的泌乳合成机制差异,为提高奶牛的生产性能提供理论依据。试验采用随机区组设计,选择24头体况良好、体重[(648.50±68.65)kg]、胎次[(2.64±0.70)胎]相近的泌乳中期[(182.0±31.5)d]荷斯坦奶牛,按产奶量分为高产组[(41.7±4.8)kg/d]和低产组[(24.1±3.9)kg/d],各12头,在相同的饲养管理条件下饲喂相同的全混合日粮。分别用乳成分分析仪、酶免法、比色法和气相色谱法对乳成分、血清代谢指标及瘤胃发酵参数进行测定。结果表明:1)高产组奶牛乳成分中乳蛋白、乳脂和乳糖含量极显著高于低产组(P<0.01),乳总固形物含量显著高于低产组(P<0.05),而乳蛋白率极显著低于低产组(P<0.01);2)高产组奶牛瘤胃中总挥发性脂肪酸、丙酸及丁酸含量极显著高于低产组(P<0.01),乙酸含量显著高于低产组(P<0.05);3)高产组奶牛血清能量代谢指标葡萄糖(GLU)和甘油三酯(TG)含量极显著低于低产组(P<0.01),非酯化脂肪酸(NEFA)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著低于低产组(P<0.05),β-羟丁酸(BHBA)含量极显著高于低产组(P<0.01);抗氧化指标血清丙二醛(MDA)含量显著高于低产组(P<0.05),总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于低产组(P<0.05);免疫指标血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量极显著低于低产组(P<0.01),免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-6(IL-6)含量显著低于低产组(P<0.05),而免疫球蛋白M(IgM)含量显著高于低产组(P<0.05)。综上所述,高、低产奶牛在瘤胃发酵及血清代谢指标方面存在显著性差异。     

关中奶山羊乳房炎病理模型的建立

为建立关中奶山羊乳房炎模型,用分离的乳房炎病原菌,按照大肠埃希菌3×103 cfu/mL、金黄色葡萄球菌3×102 cfu/mL剂量,分别对关中奶山羊进行乳头管灌注.在不同时间点,观察测定产奶量、精神状况、食欲、乳汁外观、乳房性状、体温、体细胞数(LMT法)等指标,并进行病理学检查和病原菌分离鉴定.结果显示,攻菌后奶山...     

外源寡糖对奶山羊血清生化指标和抗氧化指标的影响

为研究外源寡糖对奶山羊血清生化指标和抗氧化指标的影响,试验选用体况良好、年龄相近、体重（３２．８０±２．４５）ｋｇ的崂山奶山羊 ６只,采用分期分组试验设计,分别饲喂添加 １％（以有效含量计）甘露寡糖、半乳甘露寡糖、果寡糖、寡木糖和异麦芽寡糖的试验饲粮,另设不添加寡糖的对照组。试验共分为 ４期,每期 ３５ｄ,其中预试期 ７ｄ,正试期 ２８ｄ。结果表明：与对照组相比,果寡糖可显著降低血清丙二醛和低密度脂蛋白胆固醇含量（Ｐ＜０．０５）,显著提高血清中总蛋白和球蛋白含量（Ｐ＜０．０５）;甘露寡糖可显著降低血清丙二醛含量和谷丙转氨酶活性（Ｐ＜０．０５）,提高血清中球蛋白和血清磷含量（Ｐ＜０．０５）;半乳甘露寡糖可显著提高血清中总蛋白（Ｐ＜０．０５）、球蛋白（Ｐ＜０．０１）、高密度脂蛋白胆固醇（Ｐ＜０．０５）和血清磷含量（Ｐ＜０．０５）,增强血清总超氧化物歧化酶活性（Ｐ＜０．０５）,降低血清丙二醛（Ｐ＜０．０１）、尿素氮（Ｐ＜０．０５）、甘油三酯（Ｐ＜０．０５）和低密度脂蛋白胆固醇（Ｐ＜０．０５）含量,降低血清谷丙转氨酶活性（Ｐ＜０．０５）。各种寡糖对奶山羊血清谷草转氨酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和白蛋白、葡萄糖、总胆固醇、血清钙含量无显著影响（Ｐ＞０．０５）。综上所述,饲粮中添加不同寡糖能够在一定水平上提高奶山羊的抗氧化能力,改善机体脂质代谢、蛋白质合成以及钙、磷的吸收,且对肝脏和心脏无损害,建议在奶山羊饲粮中添加的寡糖种类有果寡糖、甘露寡糖和半乳甘露寡糖,其中半乳甘露寡糖为首选。     

Polymorphism Analysis of PIS Region Sequence in Guanzhong Dairy Goat

Polled trait of goat is important economic trait in livestock production,goat polled intersex syndrome (PIS) influenced polled phenotype and intersex phenotype of goats. PIS sequence locats in a approximately 11.7 kb nucleotide sequence in chromosome 1. This experiment was aimed to study the effect of PIS sequence on polled phenotype in Guanzhong dairy goats (3 horned goats, 3 polled goats). The PIS whole sequence in Guanzhong dairy goats were amplified using four pair of primers (PIS1-1, PIS1-2, PIS2 and PIS3), the whole absence of PIS sequence was detected using the fifth primer (PIS whole). The sequencing result was assembled, analyzed and annotated. The result showed that the PIS sequence full length was 12.814 kb, and the BLAST alignment result was correct. PIS whole primer didn't amplify any srtipes, which showed that there was no a total deletion of 11.7 kb in Guanzhong dairy goats. SeqMan software analysis result showed that there was a total of 30 polymorphic sites, wihch were likely to connect with polled/horned phenotype in Guanzhong dairy goats. The annotation result of concatenation sequence showed that there were one tRNA encoding locus, two microsatellites, three microRNA encoding loci, L1-EN conserved domain, RT-nLTR-like conserved domain, also find a CpG island, one pair of inverted repeats, and two tandem repeats. This experiment result had a significant reference value for studying the molecular mechanism of polled phenotype in Guanzhong dairy goats.     

关中奶山羊PIS区域序列多态性分析

山羊无角性状是畜牧业生产中重要的经济性状,报道显示山羊无角间性综合征（polled intersex syndrome,PIS）控制着山羊的无角和间性性状。山羊PIS序列定位于1号染色体约11.7 kb的序列上,试验旨在研究这段序列对关中奶山羊（3只有角山羊、3只无角山羊）无角性状的影响。选用4对引物（PIS1-1、PIS1-2、PIS2、PIS3）扩增关中奶山羊的PIS序列,第5对引物（PIS whole）用于检测PIS序列的完全缺失,对测序结果进行拼接、多态性分析,并对序列进行基因注释。结果发现,试验成功扩增出山羊PIS的全长序列（12.814 kb）,BLAST比对结果正确。PIS whole引物没有扩增出任何条带,说明关中奶山羊中不存在11.7 kb的完全缺失。经SeqMan软件分析拼接序列发现30个多态性位点,这些多态性位点可能与关中奶山羊有角/无角性状相关。对拼接序列进行基因注释,发现存在1个tRNA编码位点、2个微卫星、3个microRNA编码位点及L1-EN、RT-nLTR-like样保守结构域,并发现1个CpG岛、1对反向重复序列和2段串联重复序列。本试验结果对关中奶山羊无角性状的分子机理研究具有重要的参考价值。