黑曲霉固体发酵木聚糖酶条件的优化

采用单因素试验对黑曲霉（Aspergillus niger）Y-2菌株产木聚糖酶的固体发酵条件进行了研究。结果表明,以麸皮和玉米芯（7：3）作为复合碳源,1%的（NH4）2SO4作为氮源,添加0.5%的无机盐KH2PO4,料水比为1：1.4,接种量为5%,32℃培养72h时,菌株产木聚糖酶活力达到了5213 U/g干物质,比未优化前提高了127%。     

航天诱变菌株黑曲霉ZM-8发酵玉米秸秆产β-葡萄糖苷酶的条件优化及其酶学特性

黑曲霉ZM-8是一株经航天诱变筛选出的高产纤维素酶菌株。以玉米秸秆和麸皮为原料,利用固态发酵法研究了发酵时间、发酵温度和初始pH对该菌株产β-葡萄糖苷酶的影响,采用正交试验对各因素进行了优化,并对酶学特性进行了初步研究。结果表明,发酵时间和发酵温度对酶活影响均达到极显著水平(F=14.994>F0.01=5.85;F=10.872),初始pH(F=5.843)对其影响达到显著水平;当初始pH为5.5、培养温度为35℃、培养时间为72 h时,β-葡萄糖苷酶的酶活达到了58.95 U/mL。该酶最适温度为55℃,保温2 h后仍具有95%以上的酶活力;最适pH为5.5,pH在3.0～6.0时,酶活力稳定性良好。     

黑曲霉液态发酵产植酸酶的条件优化研究

文章以黑曲霉为出发菌株,通过初筛、复筛,得到一株产植酸酶的菌株,对发酵时间、温度及pH进行单因素试验,并利用正交设计进行工艺优化。结果表明,当培养基pH为5.5、温度为30℃、发酵时间为5d时,黑曲霉发酵产植酸酶活力最大,为14.35U/mL。     

黑曲霉变种产α-半乳糖苷酶菌株的筛选及发酵条件优化

试验研究黑曲霉变种产α-半乳糖苷酶菌株的筛选及发酵条件优化。黑曲霉菌株MX-H通过紫外诱变和传代培养后,得到一株能够变种产α-半乳糖苷酶较稳定的菌株MX-H1,并优化了MX-H1的产酶培养基。18S rDNA鉴定结果表明,菌株MX-H1被鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。结果显示,最佳优化条件为碳源15 g/L蔗糖、氮源10 g/L牛肉膏、产酶诱导物0.5 g/L棉籽糖、初始pH值6.0、培养温度为30℃、培养基装样量30 mL/250 mL、摇床180 r/min、培养96 h。在最佳优化条件下,发酵液中产α-半乳糖苷酶酶活力达到4.95 U/mL。试验为α-半乳糖苷酶的工业化生产提供参考依据。     

耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及发酵条件优化

研究耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶在枯草芽孢杆菌中异源表达。从耐碱性木聚糖酶高产短小芽孢杆菌BYG5-20中克隆得到带有自身启动子的木聚糖酶基因xynA,将其构建在大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pGJ148中得到重组质粒pGJ148-xynA。采用电转化法将重组质粒pGJ148-xynA转入枯草芽孢杆菌1A747中,得到重组菌B.GJ148-xynA,然后进行诱导表达以及培养基的优化。重组菌GJ148-xynA发酵上清液中木聚糖酶酶活可达93.32IU/ml。耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶基因xynA可以在枯草芽孢杆菌中实现异源表达,为枯草芽孢杆菌木聚糖酶分泌表达系统的进一步优化奠定了基础。     

黑曲霉液体发酵产植酸酶条件的研究

试验以黑曲霉(Aspergillusniger)30132为材料,研究了碳源、氮源、培养基、起始pH值、接种量、温度对该菌株产植酸酶活力的影响。结果表明:黑曲霉30132的最适发酵温度为28℃,产酶pH值为5,最佳接种量为10%;在此条件下,以8%麸皮为碳源、0.5%硫酸铵为氮源时,产酶活力最高,发酵3d后发酵液中植酸酶活力高达35.5U/ml。     

黑曲霉固态发酵制备大豆肽发酵条件的研究

<正>近年来大豆肽的营养及其功能性质在国内外引起了广泛的兴趣。现代研究发现,许多小分子量肽在经人体消化道时不被水解,可直接被人体吸收利用,具有降血压和降胆固醇的功能,能消除疲劳,使肌肉变得结实有力。     

高产纤维分解酶黑曲霉诱变选育与发酵条件优化

本试验旨在研究高产纤维分解酶黑曲霉诱变选育与发酵条件优化。通过对黑曲霉X1诱变选育(紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯复合诱变),获得产纤维分解酶能力强的突变菌黑曲霉,并对其产酶发酵条件和水解秸秆能力进行研究。结果表明,黑曲霉X1经紫外、硫酸二乙酯及紫外-硫酸二乙酯复合诱变,筛选出1株产酶能力高的突变菌黑曲霉X1U4-1;与原菌相比,突变菌滤纸酶活性提高了66.7%,β-葡萄糖苷酶活性提高了22.3%,木聚糖酶活性提高了3.8%,还原糖含量(12 h)提高了6.8%。黑曲霉X1U4-1最适发酵产酶条件为发酵时间72 h,玉米芯∶麸皮=3∶7,接种量1.2 mL,硫酸铵浓度4%;在此条件下,滤纸酶活性达到0.77 U/g,纤维素酶活性达到93.80 U/g,木聚糖酶活性达到9 383.18 U/g。本研究表明,采用紫外-硫酸二乙酯复合诱变可有效改善黑曲霉产酶性能和水解秸秆能力。     

白腐真菌利用小麦秸秆产漆酶的筛选及产酶条件的优化

试验对9种白腐真菌进行筛选,获得利用小麦秸秆产漆酶水解圈较大的菌株,以小麦秸秆为碳源进行产漆酶液体发酵的单因素(培养时间、培养温度、初始pH值、碳源添加量、氮源种类、氮源浓度)试验和正交试验。研究表明,试验筛选出的高产漆酶的菌株为一色齿毛菌,对一色齿毛菌产漆酶进行单因素试验和正交试验,获得小麦秸秆的最佳添加量为25 g/L,最佳氮源为酵母浸粉,最佳氮源浓度为1.5 g/L,最佳培养基初始pH值为3.0,最佳培养温度为28℃。一色齿毛菌产漆酶的酶活由最初的1.09 U/mL提高至7.94 U/mL,较优化前提高7.28倍。     

黑曲霉发酵酱油渣的研究

试验研究了黑曲霉的耐盐能力,试验结果表明:NaCl浓度在0-120 g/l以内,黑曲霉生长速率随NaCl浓度的增加先增加后减小,当NaCl浓度为40 g/l时黑曲霉生长速率达到最大值,为2.08 cm/d;并且以酱油渣为试验材料,研究了黑曲霉对酱油渣中粗纤维成分的降解能力,试验结果表明,黑曲霉能高效降解酱渣中半纤维素,30 d降解率达到了84.28%;同时对纤维素和木质素也有一定程度降解,30 d时降解率分别为23.86%和9.43%。本研究结果为酱油渣的饲料化利用提供了必要的数据支持。     

黑曲霉发酵对黄柏中游离态小檗碱含量的影响

中药材黄柏经黑曲霉菌液发酵15 d后,将发酵后药材烘干、氨醇水浸泡、索式提取等方法处理,与未发酵原药材比较小檗碱含量变化。检测结果表明,经黑曲霉菌液发酵过的黄柏中游离态小檗碱含量较高。该结论可为进一步开发中药发酵饲料添加剂提供依据。     

黑曲霉糖化酶基因在毕赤酵母X33中的高效表达

为高效表达黑曲霉糖化酶基因,根据GenBank中糖化酶的氨基酸序列(登录号:AY652617),选用毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子偏嗜性,全基因合成新的cDNA序列。改造后的基因克隆到pGAPZαA质粒中,获得重组分泌型酵母表达质粒pGAPZαA-EC,经限制性内切酶Bln Ⅰ酶切线性化后,电击转化入毕赤酵母细胞X33内。经高浓度博莱霉素抗性筛选,得到高拷贝转化子,PCR检测结果显示,糖化酶基因与毕赤酵母染色体稳定结合。糖化酶蛋白获得分泌表达,SDS-PAGE分析其分子质量约为80 ku,其表达量约为180 mg/L。表达产物经Starch-PAGE活性染色,显示其具有酶学活性。     

纤维素酶产生菌黑曲霉X-15的选育及其产酶条件

突变型黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｒｓ ｎｉｇｅｒ）Ｍ００１分别经紫外线（ＵＶ）、亚消基胍（ＮＴＧ）、ＴＤＰ辐射仪及空间微重力辐射（ＳＣ）等因素的多级循环处理，得到１株形态发生改变的变异菌株Ｘ－１５。其固体培养纤维素酶的滤纸分解酶活力（ＦＰＡ）为１９Ｕ／g，羟甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）活力为４５３Ｕ／g，β－葡萄糖苷酶（β－ｇｌｕａｓｅ）活力为１５４Ｕ／g，与出发菌株Ｍ００１相比，分别为其２．８倍、     

凉茶渣的黑曲霉发酵工艺和抗氧化活性研究

为促进凉茶渣在畜牧业中的资源化利用,本研究以黑曲霉为菌种固态发酵凉茶渣,首先在单因素试验条件下考察了时间、温度、含水量、浸泡液pH、氮源和碳源对凉茶渣降解率和产物pH的影响;再根据单因素试验结果和规模化生产实际需要,以4%硫酸铵为氮源,2%葡萄糖为碳源,以降解率为考察指标,通过正交试验优化发酵工艺;并通过检测超氧自由基清除率、羟基自由基清除率和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率,评价凉茶渣在最优工艺条件下发酵前后抗氧化活性的变化。结果发现,含水量为60%,浸泡液pH为9.0,31℃发酵168 h是凉茶渣的最佳发酵工艺参数。最佳工艺条件下凉茶渣的降解率为25.23%,发酵产物pH为4.53。当凉茶渣发酵前水提液浓度为24 mg/mL时,超氧自由基清除率为43.56%,羟基自由基清除率为47.06%,DPPH自由基清除率为90.71%;当最优条件下发酵产物水提液浓度24 mg/mL时,超氧自由基清除率为30.77%,羟基自由基清除率为95.63%,DPPH自由基清除率为87.36%。本试验结果表明,黑曲霉是适宜的凉茶渣发酵菌种,且凉茶渣经过黑曲霉发酵后具有良好的抗氧化活性。     

白腐菌及黑曲霉对玉米秸秆生物降解的研究

利用白腐菌5.776和黑曲霉3.3148对玉米秸秆木质纤维素进行降解,以提高反刍动物对玉米秸秆的消化利用。先对白腐菌和黑曲霉降解玉米秸秆木质纤维素的能力进行了研究,在此基础上,采用正交试验,探索白腐菌和黑曲霉混合后对玉米秸秆的降解效果。结果表明,接种比例、黑曲霉接入时间,接种比例与黑曲霉接入时间的交互作用以及发酵时间对混菌发酵降解玉米秸秆都有显著影响(P<0.05)。最佳方案为:白腐菌液体菌种和黑曲霉孢子悬浮液的接种比例为5:1,白腐菌接种2 d后再接入黑曲霉孢子悬浮液,发酵10 d,所得产物中性洗涤纤维的含量为52.07%,真蛋白为7.89%,干物质损失率为18.75%。     

体外法研究米曲霉培养物对瘤胃发酵参数及微生物酶活性的影响

本试验旨在通过体外产气试验研究高酶活力的米曲霉培养物(AOC)对瘤胃发酵的影响。以米曲霉产酶特性为标准研制米曲霉培养物,体外法研究0、3、6、12 mg米曲霉培养物对瘤胃发酵和微生物酶活力的影响。结果表明:培养48 h的AOC酶活力最高(P<0.05);与对照组相比,添加6、12 mg AOC显著增加了24 h产气量、微生物蛋白浓度、总挥发性脂肪酸、乙酸和丙酸的含量(P<0.05),12 mg AOC组的氨态氮浓度显著高于其他各组(P<0.05)。6 mg AOC组微晶纤维素酶活性显著高于其他组(P<0.05),木聚糖酶活性显著高于对照组和3 mgAOC组(P<0.05);12 mg AOC组的羧甲基纤维素酶和淀粉酶活性显著高于对照组和3 mg AOC组(P<0.05)。综上所述,添加米曲霉培养物可通过提高瘤胃微生物酶活性而促进体外瘤胃发酵。     

黑曲霉益生菌对断奶仔猪生长及日粮养分消化的影响

选取28和35日龄健康杜长大断奶仔猪,研究日粮添加黑曲霉出发菌或变异菌对仔猪生长及日粮养分消化的影响。结果表明,黑曲霉变异菌株(ANO2)可提高仔猪的日增重和采食量(P<0.05),降低其料肉比(P<0.05);黑曲霉出发菌和变异菌均可以显著提高饲料中干物质和粗纤维的消化率(P<0.05),但对粗蛋白质、无氮浸出物和粗脂肪的消化率无显著影响;黑曲霉还可提高断奶仔猪肠道内纤维酶活性(P<0.05)。变异菌株的促生长效应要明显好于出发菌;变异菌可以显著提高仔猪肠道内总蛋白酶活性(P<0.05),但出发菌对仔猪的日增重、采食量和肠道总蛋白酶活性没有显著影响。这表明,利用N 离子注入诱变选育益生菌是可行的,其实际饲喂效果也是比较理想的。     

黑曲霉A-1发酵啤酒糟生产富酶蛋白饲料的研究

以啤酒糟为主要原料,研究了黑曲霉A-1固态发酵生产富酶蛋白饲料的培养基及工艺条件。试验结果表明:最适发酵培养基为啤酒糟:棉粕比例为5:5,KH2PO40.2%,最适发酵条件为:料水比为1:1.0,接种量为含4.0×106个孢子的孢子悬液,发酵温度为30℃,培养时间为54h～60h,纤维素酶达到1991u/g,木聚糖酶达到1998u/g,酸性蛋白酶达到4559u/g,粗蛋白为37.4%。     

Optimization of 0-8 Aspergillus oryzae Solid State Fermentation Conditions and the Effect of Fermented Product on Nutrient Digestion of Broiler

The high-yield protease was obtained by screening high-yield protease Aspergillus oryzae and optimizing its solid-state fermentation conditions, and then the effect of fermented product on nutrient digestion in broiler was studied. After the screening and re-screening of 8 different Aspergillus oryzae spores, a new Aspergillus oryzae strain 0-8 with high acid protease was obtained. The fermentation conditions of acid protease were optimized by single factor and orthogonal test experiment. The results showed that the optimum temperature was 30℃, the most suitable fermentation time was 66 h, the initial water content was 47.40%, the inoculation quantity was 1.5×10⁷ spores/mL, the content of bran was 80%, C/N was 1/3, the optimized vigor of acid protease reached 14 416.64 U/g, which was 157.02% higher than that before optimization. 500 mg/kg Aspergillus oryzae 0-8 fermented product was added in the broiler diet, and the mutrient digestibility of broiler were measured after 10 d of adaptation and 5 d of test period. The results of the nutrient digestion of broilers showed that feeding Aspergillus oryzae 0-8 fermentation increased the CP and energy digestibility of broiler in a certain degree compared to control group, but there's no significant difference (P>0.05). Dietary supplementation of Aspergillus oryzae fermentation was beneficial to the production of broilers, but its additive dose or feeding pattern should be further studied.