李种质资源ISSR鉴定及亲缘关系分析

为了更好的利用目前收集得到的李资源,对重庆地方李品系和国内外引进的李品种共40份资源进行了ISSR分析。从100条引物中筛选出13条多态性引物,共扩增得到134条带,多态性条带109条,多态性百分率为81.3%,其中9条特征性谱带可用于品种鉴定和系谱分析的参考性标记。此外,13条引物可将40份材料完全区分开来,图谱分析表明不存在同物异名现象。UPGMA聚类分析将供试品种分成2组,进一步可细分为4个亚组;主坐标分析将其分成6类,其中奉节李、脆红李和万盛鸡血李分别单独成类。2种分析方法所得的结果均与按原产地划分的结果不完全相符,奉节李、脆红李和万盛鸡血李与其余品种(品系)的亲缘关系较远。来自江苏的早黄李与日本和美国李品种间的亲缘关系相对较近,初步推测国外中国李可能来源于我国华东地区。     

李ISSR—PCR反应体系的优化

本研究以田黄李叶片总DNA为材料,分析了DNA模板浓度、循环次数、退火温度和引物浓度等因素对李ISSR—PCR效果的影响。根据试验结果建立李ISSR—PCR扩增的最佳反应体系。试验结果表明,当模板DNA量为40ng,引物浓度为0．3或0．4斗M,退火温度为48．8℃,循环数为35或40时可获得较好的扩增效果。     

贵州樱桃种质资源的ISSR分析

 以64份贵州地方樱桃（Prunus pseudocerasus L.）种质资源及栽培品种黑珍珠为试材进行ISSR分析。结果表明：用从90条ISSR引物中筛选出的21条稳定性强、条带清晰及多态性丰富的引物进行PCR扩增,共获得228个标记,其中多态性标记为199个,多态性比例为87.28%;采用NTSYS 2.01软件计算,相似系数为0.49 ~ 0.90,表明贵州地方樱桃资源的多样性丰富;UPGMA聚类分析显示,毕节、遵义及黔南等地资源具有丰富的多样性,尤其毕节地区拥有大量品质优良的资源,可作为品质育种的亲本。     

中国李种质资源研究进展

从李种质资源收集、不同栽培种起源关系、中国李不同栽培品种群间的演化关系以及资源鉴定评价等方面对近几十年来国内的研究工作进行了回顾,并针对李种质资源研究存在的问题提出了建议,以期为中国李种质资源评价、创新与利用提供科学依据。     

李属种质资源的抗寒性鉴定

为了给品种区化和资源的育种利用提供理论依据,于１９９５－１９９６年在辽宁熊岳作者用外渗电导法、揭变观察法和恢复生长法测定了属于中国李、欧洲李、杏李、加拿大李、美洲李、包苏里李、樱桃李和李、杏杂种的３６个代表品种和类型的抗寒性。结果表明;（１）李的抗寒性表现出丰富的多样发表一多数李品种对低温的适应能力较强;（２）起 的生态２条件与品种的抗寒性密切相关;（３）李几个主要种的抗寒性顺序为：乌苏里李〉美洲     

贵州砂梨种质资源遗传多样性的ISSR分析

【目的】探明贵州砂梨种质资源遗传多样性及亲缘关系,为其保护与利用提供理论依据。【方法】采用ISSR标记技术,对贵州59份砂梨种质资源的遗传多样性及遗传结构进行分析。【结果】16条ISSR引物共扩增出155个位点,其中126个是多态性位点,多态百分率为81.29%。POPGENE分析结果表明,贵州砂梨种质资源具有一定的遗传变异(在物种水平上Ne=1.418 0,H=0.251 1,I=0.381 6;在区域品种群上Ne=1.300 2,H=0.177 1,I=0.266 7),以黔西南地区和毕节地区遗传多样性最高,且亲缘关系最近。【结论】贵州砂梨种质资源具有丰富的遗传多样性,区域品种群的较高遗传分化可能与地理隔离以及人为干预等因素有关。ISSR标记可有效揭示贵州砂梨种质资源的遗传多样性、分化程度和亲缘关系,研究结果对梨种质资源的保护利用和遗传改良有重要意义。     

红麻种质资源遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR分子标记对38份红麻品种进行遗传多样性分析。利用自行筛选的引物共扩增出117条带,其中多态性条带98条,多态性条带比率为83.7%。品种之间的遗传相似系数为0.36～0.98,表明部分红麻品种间存在显著的遗传分化。聚类分析表明:红麻栽培品种间基因型差异较小,亲缘关系较近,遗传基础相对狭窄;而野生种、近缘种和栽培种之间存在着较大的遗传差异性。     

福建永泰主要李种质资源及其利用

介绍了福建省永泰县李地方品种和引入李品种的果实主要性状和其他方面的一些重要性状。并介绍利用已有的李资源进行的品种选优工作和成就,以及李资源研究工作中存在的问题和对策。     

中越金柑种质资源的ISSR分析

为了更好地利用和创新金柑种质资源,用ISSR分子标记技术分析了25份来自中越金柑属种质资源与金弹变异系的亲缘关系及特异性。从100条引物中筛选出10条多态性好、扩增清晰的引物。结果显示,10条引物共扩增出120条带,其中102条具有多态性,多态性带比率为85%。用UPGMA软件进行聚类分析,25份金柑种质资源的遗传相似...     

黑龙江李种质资源抗寒性评价

分别调查了1993—1994、2006—2007、2011—2012年冬春黑龙江省61个李品种(系)主干、主枝和1～2年生枝条田间受冻情况,分析评价其树体抗寒能力。调查结果表明,61个李品种(系)中有13个李品种(系)无冻害,38个李品种(系)轻度冻害,10个李品种(系)中度冻害。为我国李资源抗寒性鉴定、李树抗寒育种及李种质资源合理开发利用提供依据。     

红千层ISSR反应体系的优化

以红千层(Callistemon rigidus R．Br．)的幼叶为材料,利用正交试验设计,对ISSR反应体系中的主要影响因子进行优化筛选,研究了Mg2 、TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度5种因素对扩增结果的影响,同时研究了退火温度和循环次数对PCR扩增结果的影响。实验结果表明,在25μL ISSR反应体系中各组分的最适浓度分别为:1×PCR buffer,2．5 mmol／L Mg2 ,0．2 mmol／L dNTPs,0．4μmol／L引物,1．2ng／μL模板DNA,0．5UTaqDNA聚合酶。通过梯度PCR测验,适宜的退火温度为50℃,循环次数45次。并且在红千层ISSR分析中,带纹清晰,稳定性好。     

平欧杂种榛ISSR反应体系的优化与验证

以5-’(AG)8(AGC)C-3’为引物对育种代号为82-6的平欧杂种榛品系的ISSR反应体系中各个主要影响因子进行优化筛选。结果表明:在20μL ISSR反应体系中各组分的最适浓度分别是,DNA模板为2.5 ng/μL,Mg2+浓度为1.875 mmol/L,1×buffer(不含MgCl2),引物的浓度为0.3μmol/L,Taq DNA聚合酶1 U,dNTP浓度为200μmol/L。并利用该优化体系对平欧杂种榛的15个品种(系)进行了ISSR扩增,证实该体系稳定可靠。     

三叶悬钩子自然居群遗传多样性的ISSR 分析

 利用ISSR分子标记对云南特有植物三叶悬钩子（Rubus delavayi Fanch.）的12个居群共248个个体进行了遗传多样性分析。结果表明：16个ISSR引物共扩增到199个位点,其中185个是多态性位点,占92.96%。三叶悬钩子居群具有很高的遗传多样性水平,在物种水平上平均每个位点的多态位点百分率（PPB）为97.99%,有效等位基因数（A_e）为1.427,Nei’s遗传多样性（H）为0.267,Shannon’s多态信息指数（I）为0.417;在居群水平上PPB为62.10%,A_e为1.289,H为0.177,I为0.275。居群间基因分化系数G_st = 0.3351,与AMOVA分析的居群间遗传变异量占总量的33.03%相近,说明三叶悬钩子居群间存在一定程度的遗传分化。居群间遗传分化占总遗传变异的33.51%,居群内的遗传变异为66.49%,基因流（N_m）为0.9923。通过Mantel检测,居群间的遗传距离与地理距离不存在相关性。UMPGA聚类分析和二维主成分分析（PCA）结果一致。导致居群内高遗传变异水平原因主要是有限的基因流,而居群间较低的遗传多样性水平可能与生态破坏和生物入侵有关。     

姬松茸ISSR特异扩增体系的研究

为了建立稳定的姬松茸(Agaricus blazei Murill)简单序列重复区间(Inter-Simple Sequence Repeats,ISSR)分子标记技术体系,笔者通过单因子试验分别研究了模板DNA、Mg2 浓度、dNTP、引物浓度和Taq酶用量对姬松茸ISSR-PCR扩增的影响,确定了姬松茸ISSR分析的最佳PCR条件为:25μL反应体系中,模板DNA20ng,引物0.75μmol/L,dNTP200μmol/L,Mg2 2.0mmol/L,Taq DNA polymerase 1.5U。并应用该优化体系筛选到6个适合姬松茸ISSR-PCR扩增的引物,为利用ISSR标记技术研究姬松茸的种质资源提供了参考。     

木菠萝种质资源数据库系统的建立

木菠萝是我国南方的特有果树之一。为便于在木菠萝种质资源调查和评价过程中各类数据资料的管理和共享,本文以Delphi 7.0为主导设计语言,建立了木菠萝种质资源信息系统。该系统将各类数据分成9张表,主要包括种质的收集地信息、种质评价信息、种质管理和利用信息及种质性状信息,除实现多年性状调查数据的管理外,还能按种质关联显示其相关的环境信息、利用信息和评价信息,并在实际应用中收到了较好的效果。木菠萝种质数据库系统的成功建立,为其他果树种质资源数据库的建立积累了经验。     

花椰菜最适ISSR反应体系的建立及优化

以花椰菜9901A×9908杂交种为材料,用高盐低pH值法提取的基因组DNA为模板,对ISSR-PCR反应体系中的镁离子浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶量、引物用量以及最适退火温度等影响因子进行了优化和筛选,建立了适合花椰菜的ISSR反应体系:20 μL PCR反应体系,含10×PCR反应缓冲液2 μL,2.0 mmol/L MgCl2,4×dNTP混合物0.2 mmol/L,引物0.5 μmol/L,Taq酶1.5 U,基因组DNA约30 ng,最适退火温度为52.8℃.     

我国南方长茄种质资源的ISSR标记分析

从分子水平用ISSR标记法对南方长茄资源的遗传多样性进行分析,从100个ISSR引物中共筛选出12个多态性明显、条带清晰、反应稳定的引物,对57个样品DNA共扩增出116条谱带,平均每个引物扩增出9·67条带,其中多态性位点84个(71%)。品种间遗传相似系数在0·51~0·98之间,表明茄子栽培种内品种间的遗传基础相对较狭窄。利用UPGMA聚类分析,能将57个南方长茄品种划分为6个类群,类群的划分与地方来源没有很大的关系。     

李品种选育研究进展

主要李生产国通过有性杂交育种已经成功地选育出一批具有早中晚熟,丰产,果肉硬,中大果型,抗寒和耐低温的中国李(Prunus salicina)优良品种。欧洲李(P.domestica)的品种选育倍受欧美一些国家的重视,先后选育出果皮蓝、紫、黄、红色,含糖量高,抗寒,自花结实和极丰产的品种。除中国李与中国李和欧洲李与欧洲李的种内杂交外,中国李、樱桃李、杏李、比西砂樱李、美洲李、狭叶李、果酱李、雁李和加拿大李之间已经杂交成功,并获得杂种单株。已经从樱桃李、中国李、杏李和比西樱李与杏和梅杂交后代中选育出一些较好的种间杂交栽培品种。还介绍了国内外目前新品种的育种目标。     

木菠萝ISSR反应体系的建立和优化

以木菠萝为材料,研究了模板DNA、Taq DNA聚合酶、引物、Mg2+ 及dNTPs浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响,得出木菠萝ISSR的较佳反应体系为:在20μI反应体系中DNA模板1.6 ng·μI-1,Taq DNA聚合酶1.25 U·(20μl)-1,引物0.24 μmol·L-1,dNTPs 0.2 mmol-1 ,Mg2+ 2 mmol· L-1,10×PCR缓冲液2.0μl.