结缕草高频再生体系的建立和优化

以结缕草叶片为外植体进行离体再生研究.结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基是 MS+1.5 mg·L-1 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.5 mg·L-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+26 g·L-1 蔗糖+5.0 g·L-1 琼脂,诱导率为 65.36%,无性世代增殖倍数高达 9.56;正交试验和方差分析筛选出不定芽分化最佳培养基为 MS+3.0 mg·L-1 6-BA + 0.5 mg · L-1 萘乙酸(NAA) +1.5 mg·L-1 AgNO3+35 g·L-1 蔗糖+6.5 g·L-1 琼脂,分化率为 67.30%,增殖系数为 8.67;生根培养基选用 1/4 MS+0.2 mg·L-1 吲哚丁酸(IBA)+0.3 mg·L-1 NAA+28 g·L-1 蔗糖+4.5 g·L-1 琼脂,生根率为 90.00%.     

虎舌红茎尖高频再生体系的建立

以虎舌红(Ardisia mamillata Hance)幼嫩茎尖为外植体,采用正交设计及方差分析对影响虎舌红植株离体培养的因素进行了优化研究。结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS 2,4-D0.7mg/L 6-BA0.2mg/L 蔗糖28g/L 琼脂6.0g/L;不定芽诱导最佳培养基为MS NAA0.2mg/L CPPU0.4mg/L 蔗糖30g/L 琼脂6.0g/L,分化率为96%,增殖率为5.5;最佳生根培养基为1/2MS NAA0.4mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖26g/L 琼脂5.0g/L,生根率为93%。     

银白杨下胚轴高频离体再生体系的建立和优化

【目的】建立银白杨(Populus alba)下胚轴高频再生体系,为银白杨遗传转化和推广利用奠定基础。【方法】以银白杨下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导形成不定芽,探讨苗龄、接种方式及不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖质量浓度等对银白杨下胚轴不定芽分化和生根的影响。【结果】适宜银白杨下胚轴不定芽分化的最佳培养基为:MS+AgNO33.5 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂6.0 g/L+IBA 0.3 mg/L+TDZ 1.5 mg/L,用该培养基培养银白杨下胚轴外植体,其分化率为98.63%,平均每个外植体形成的不定芽为23.81个。银白杨下胚轴外植体不定芽未经愈伤组织而直接产生于下胚轴的表皮或近表皮等表层细胞。3~7 d苗龄银白杨下胚轴诱导不定芽分化能力无显著差异,诱导率均达到95%以上,7 d后随着苗龄的增加,不定芽分化、诱导能力快速下降,苗龄为11 d时不定芽分化率只有52.28%。不同切段下胚轴不定芽再生能力由强到弱表现为:上部切段(靠近子叶端的下胚轴部分)>中部切段>下部切段。以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的外植体不定芽再生能力显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放的。【结论】优化了银白杨的组织培养体系,初步找到了影响银白杨下胚轴诱导分化及植株再生的主要因子。     

薄荷离体培养再生体系的建立及优化

试验结果表明,薄荷芽苗增殖的最佳培养基为附加6-BA1.0mg/L、NAA0.05mg/L、ag0.7%、Su3.0%的MS培养基,最佳培养温度条件为25℃,增殖系数最高可达10.7。在附加IBA1.0mg/L的MS培养基上培养10d,生根率达90%;在增殖培养基上延长继代时间至30d时,生根率达84%。     

辣椒离体培养和植株再生体系建立

选3种不同基因型的辣椒(Capsicum annuum L.)材料,建立了辣椒高频离体再生体系,试验结果表明:芽分化的最适培养基为:MS 6-BA 5 mg/L I AA 0.2 mg/L;芽伸长的最适培养基为MS 6-BA 5 mg/L I AA 0.2 mg/L GA3 2 mg/L;生根的最适培养基为MS NAA 0.1mg/L,当植株长到10～12片叶时,进行移栽.     

辣木离体再生体系的建立

以辣木种子为外植体,诱导获得无菌苗,然后通过用无菌苗的嫩茎诱导愈伤组织分化不定芽,再将不定芽诱导生根,获得完整植株,建立辣木的离体再生体系。结果表明,适合辣木种子诱导无菌苗的培养基为MS_0,诱导率达95%;适合无菌苗茎段诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,诱导率达87.03%;适合愈伤组织分化不定芽及不定芽增殖的培养基为改良MS+6-BA0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,芽分化率达83.33%,芽增殖系数达4.2;适合不定芽生根的培养基为1/3MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达92.7%,平均根数达5.78。     

应用均匀设计法优化钻天柳嫩叶柄植株再生体系

应用均匀设计法筛选钻天柳最适合的培养基.结果表明,钻天柳组织培养的不同阶段需要不同的培养基.最适合的嫩叶柄愈伤组织诱导培养基为:MS+KT 2.00mg/L+NAA 0.05mg/L,诱导率为95.5%;嫩叶柄愈伤组织不定芽的分化培养基为:MS+6-BA 3.90mg/L+NAA 0.01mg/L,分化率为98%;生根培养基为:1/2MS+IBA 0.07mg/L,生根率达99%以上.成功建立了钻天柳嫩叶柄再生体系.     

均匀设计在柑橘砧木离体培养再生体系建立中的应用

[目的]建立枳壳离体培养再生体系。[方法]采用均匀设计研究了不同时期枳壳茎尖、茎段、芽的愈伤组织诱导、增殖、分化、及生根情况。[结果]愈伤组织诱导率及生长量由高到低为春梢夏梢秋梢冬梢;不同时期外植体诱导愈伤组织所需生长调节物质种类、浓度、配比不同,春梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好,夏梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 4.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好。愈伤组织增殖的最优配方是MT+6-BA 0.25 mg/L+NAA 0.2 mg/L。在MT+6-BA 0.25 mg/L+IBA 0.3 mg/L培养基上不定芽分化效果好,不定根发生率、根数、根的质量均在1/2MT+NAA 4 mg/L培养条件下最佳。[结论]为枳壳快速繁殖、脱毒技术和相关细胞工程的研究奠定基础。     

姜花离体再生体系的建立

为建立姜花离体再生体系,对姜花离体培养过程中种子萌发诱导与不定芽增殖培养基的筛选,以及试管苗生根、移栽等关键技术进行了试验。结果表明:诱导外植体萌芽的最适培养基为MS;培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L利于诱导丛芽及增殖,芽的增殖系数可达4.76,培养基1/2 MS+IBA 0.5 mg/L适宜再生苗的生根诱导。     

2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

罗汉果子叶高效再生体系的建立

以无菌萌发罗汉果子叶为外植体,进行罗汉果高效离体再生体系的研究。探讨了不同MS、琼脂含量、不同激素浓度配比、种子萌发时间和活性炭在罗汉果种子萌发、子叶诱导不定芽及试管苗生根方面的影响。结果表明：1／4 MS、0．5％-0．6％的琼脂含量比较适合罗汉果种子萌发,萌发率达89．2％;降低无机盐和蔗糖浓度有利于罗汉果试管苗的生根;最适生根培养基为1／2 MS＋IBA0．5mg／L＋1．5％蔗糖;罗汉果子叶直接诱导不定芽最适合培养基为1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋IBA0．1mg／L,分化率达94．8％,平均每块子叶出芽10个;培养基中添加低浓度（0．2％）活性炭有利于生根,但不利于子叶不定芽的诱导;子叶不定芽的分化率还受种子萌发时间的影响,萌发时间以2—4d为宜;试管苗经过炼苗2～4d能极大提高移栽成活率,达91．7％。     

大白菜真叶高频再生体系的建立

【目的】建立大白菜真叶高效再生体系。【方法】选择‘06J28’、‘92S105’、‘06J30’、‘06J31’4种不同基因型大白菜作为试验材料,以刚长出第2片真叶的大白菜幼苗的第1片真叶为外植体,研究不同激素(6-BA、NAA、TDZ)组合、外植体切割与接种方式以及不同基因型对真叶不定芽再生的影响。【结果】在MS+4.0mg/L 6-BA+0.14mg/L NAA培养基上培养时,‘06J28’真叶不定芽再生率和再生系数达到最大分别为87.63%和2.62;在MS+0.3mg/L TDZ+0.14mg/L NAA培养基上培养时,‘06J28’真叶不定芽的再生率和再生系数分别为80.73%和1.89,表明TDZ的作用与6-BA相似。在真叶柄基部和下胚轴交接处横切,保留完整真叶作为外植体为最佳切割方式,以真叶柄的下端竖直向下插入培养基为最佳接种方式。在供试的4种基因型材料中,‘06J28’真叶的再生率最高,达87.63%;‘92S105’的再生系数最高,达3.76。【结论】建立了大白菜真叶高效再生体系,为大白菜转基因研究奠定了基础。     

月季离体培养植株高效再生体系的建立

以月季品种红双喜为试材,以MS为基本培养基,研究不同6-BA与NAA浓度配比、不同芽龄对丛生芽增殖的影响,不同NAA浓度与培养基大量元素强度组合对芽苗再生根诱导的影响等。结果表明:月季品种红双喜丛生芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.05 mg/L,增殖倍数可达5.0;芽龄在5周以上的腋芽丛生芽增殖倍数可达5.0以上;芽苗再生根诱导的最佳培养基为1/2MS NAA 0.05 mg/L,再生根诱导率可达90%,平均再生根数为8.1条,瓶苗的移栽成活率高达100%。本研究成功建立了月季品种红双喜离体培养植株高效再生体系,为进一步开展月季基因工程研究奠定了基础。     

牛尾山药离体再生体系的建立初探

采用安顺刘官牛尾山药茎段和顶芽为外植体,研究了不同激素对山药再生体系建立的影响.结果表明:以MS为基本培养基幼嫩茎段在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L的培养基中,可直接形成根系发达、健壮的山药组培苗,顶芽在6-BA 4.5 mg/L、NAA 2.0 mg/L的MS培养基中愈伤诱导效果最好,以MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基适于丛生芽分化,以0.3 mg/L NAA与0.3 mg/L 6-BA的培养基有利试管苗增殖,生根以加NAA 0.2～0.3 mg/L的MS培养基生根效果最佳,生根率达90%以上.     

薰衣草茎段再生体系的建立

以薰衣草带芽茎段为外植体,探讨不同激素种类与水平等因素对其愈伤诱导、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响,并筛选了薰衣草试管苗过渡移栽的适宜基质等。试验结果表明:不定芽启动培养以MS+BA1.0~2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;继代增殖以MS+BA1.0~2.0mg/L+IBA0.25mg/L+GA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;不定根分化以White+IBA0.4mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L或White+NAA0.8mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5 g/L为宜。     

薰衣草茎段再生体系的建立

以薰衣草带芽茎段为外植体,探讨不同激素种类与水平等因素对其愈伤诱导、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响,并筛选了薰衣草试管苗过渡移栽的适宜基质等。试验结果表明:不定芽启动培养以MS+BA1.0².0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;继代增殖以MS+BA1.02.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;继代增殖以MS+BA1.0².0mg/L+IBA0.25mg/L+GA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;不定根分化以White+IBA0.4mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L或White+NAA0.8mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5 g/L为宜。     

火焰南天竹组织培养体系建立与优化

火焰南天竹(Nandina domestica‘Fire power’.)属于小檗科(Berberidaceae)南天竹属(Nandina)的常绿小灌木,在园林应用中具有十分重要的观赏价值。常规育苗方法扦插繁殖,繁殖率低,火焰南天竹组培中繁殖率及生根仍是一大难题。研究了不同激素对火焰南天竹不定芽诱导、增殖、生根的影响。结果表明:最佳诱导培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖,诱导率为93%;增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖,增殖系数为3.5;生根培养基为1/2MS+0.3 mg/L IBA+20 g/L蔗糖,诱导率达97%。火焰南天竹种苗经有效成分含量为50%的多菌灵稀释1 000倍,浸泡1 h后移栽,移栽成活率高,长势良好。所建立的火焰南天竹快繁体系增殖速度快,短期内可获得大量植株,为工厂化生产提供技术支持,满足市场需求。     

北五味子丰产株系离体培养及高效植株再生体系的建立

以北五味子新生嫩芽作为外植体,应用均匀设计法筛选其最适宜的基部直接再生芽苗和诱导芽苗生根的预处理培养基,结果表明:最适合基部直接再生芽苗的诱导培养基为ER+反式ZT2.20mg·L-1,芽苗诱导率为92%;茎段生根的预处理培养基为1/8MS+IAA0.80mg·L-1+KT0.50mg·L-1;以再生芽苗的节段为材料进行快繁,将节段在芽苗生根的预处理培养基上培养48h,取出后进行30d的砂培,其生根率达95%以上.     

藏药波棱瓜离体再生体系的建立

由于长期对波棱瓜野生资源的采挖,使其现已濒临灭绝,通过组培快繁技术进行繁殖是解决波棱瓜资源短缺的有效途径之一.本试验以波棱瓜的顶芽为外植体进行离体培养与植株再生的研究.结果表明,波棱瓜的继代增殖以MS+1.5 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1NAA为宜,每个外植体可平均产生4.5个芽;生根培养基以1/2MS+1.0 mg.L-1IAA为宜,生根率达96%.     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。