雁鹅接种禽流感疫苗后抗体消长规律

通过对雁鹅使用重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)进行免疫后,定期采样,测定血清HI抗体效价,研究禽流感HI抗体的产生及消长规律。试验选取日龄相近的雏雁鹅320羽,随机分为4组,每组80羽。第1组10日龄免疫,0.5mL/羽;第2组14日龄免疫,0.5mL/羽;第3组14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免1.0mL/羽;第4组14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免1.5mL/羽。结果表明,对于雁鹅禽流感免疫,选择14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免接种1.5mL/羽可取得较为理想的免疫效果,而疫苗免疫期应定为4个月。     

猎豹禽流感疫苗免疫效果初探

为明确猎豹对禽用禽流感疫苗免疫的效果,笔者对我园7只成年猎豹进行禽流感疫苗免疫试验,使用重组禽流感病毒H5亚型二价灭活苗(Re-6株+Re-7株),1mL/只,分2点皮下注射,在连续2次基础免疫和1次补强免疫后,将7只猎豹随机分成两组,其中2只按时强免、5只空免对照,采用血凝抑制试验(HI)法对猎豹血清抗体进行检测。高峰期H5亚型Re-6平均抗体滴度在2~9~2~(11)之间,最高可达2~(11)以上,抗体滴度2~8以上可以保持11个月;高峰期H5亚型Re-7平均抗体滴度在2~7~2~8之间,2~4及以上可保持11个月。因此,针对猎豹的禽流感免疫计划,1mL/只,6个月加强免疫一次是安全有效的,理论上安全抗体滴度可以保持11个月左右。     

犬狂犬病灭活疫苗免疫后抗体水平的跟踪监测

为了解犬狂犬病灭活疫苗的免疫抗体水平,作者采用间接ELISA方法对犬狂犬病抗体水平进行跟踪监测,分别采取成年犬免疫前及免疫后7、14、21 d时血清进行狂犬病抗体水平检测。结果表明,成年犬在免疫前及免疫后7、14、21 d时,抗体均值均高于0.5 IU/mL的国际标准,而且在免疫后21 d内,抗体水平随着时间的推移而递增。     

狂犬病灭活疫苗PV2061株的免疫原性试验

本试验对兽用狂犬病灭活疫苗PV2061株的保护效率进行评估,分别以常量、1/2剂量和1/4剂量免疫本动物并进行街毒攻击试验。血清中和抗体检测结果表明,前2组在免疫4周后抗体阳性率均为100%,抗体的平均滴度分别为4.86 IU/mL和1.18 IU/mL,1/4剂量组的抗体滴度较低,平均滴度仅为0.36 IU/mL。攻毒后前2组的保护率为100%,1/4剂量组的保护率为40%,阴性对照组攻毒后全部死亡。对试验犬的脑组织进行直接荧光抗体染色检测表明仅有死亡犬脑组织中有狂犬病病原存在。综上所述,狂犬病灭活疫苗PV2061株正常免疫剂量和1/2免疫剂量的强毒攻击保护率均在80%以上,阴性对照犬的死亡率高于80%,符合国际标准。本试验为灭活疫苗PV2061株的保护效率提供了试验依据,为其实际应用并投入生产奠定了试验基础。     

硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制鸡的颉颃作用

为探究硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制的颉颃作用,将336只11日龄非免疫健康罗曼雏鸡随机均分为7组：空白对照组（BC）、免疫对照组（VC）、环磷酰胺对照组（Cy）、sGPS3、sGPS5、sGPS6和药物对照组（APS）,每组6个重复,每个重复8只鸡。BC组和VC组注射0.5 mL生理盐水,其余组均肌肉注射8 mg/mL环磷酰胺0.5 mL,每天1次,连续3 d;14日龄时,除BC组外,其余组均用新城疫疫苗免疫,同时3个硒大蒜化多糖组分别注射0.5 mL浓度为1 mg/mL的sGPS₃、sGPS₅、sGPS₆,APS组肌肉注射黄芪多糖注射液0.5 mL,Cy组、VC组和BC组注射生理盐水0.5 mL,每天1次,连续3 d,28日龄二免。分别于首免后的第7、14、21、28天,每组随机抽取6只罗曼鸡翼静脉采血,分离血清,β-微量法检测血清ND-HI抗体效价、ELISA法检测血清γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素2（IL-2）含量。称量体重后采集胸腺、脾脏和法氏囊组织并称重,计算免疫器官指数。结果显示,各给药组的血清ND-HI抗体效价、血清IFN-γ和IL-2含量、法氏囊指数均显著高于Cy组（P<0.05）;sGPS₆组血清抗体效价、IFN-γ含量在28 d,血清IL-2含量在21、28 d均显著高于其余各组（P<0.05）;在免疫后21、28 d,4个给药组中sGPS₆组体重、法氏囊指数最高,显著高于其余3个给药组（P<0.05）;在免疫后28 d,4个给药组中sGPS₆组胸腺指数、脾脏指数最高,显著高于其余3个给药组（P<0.05）。结果表明,硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致的免疫抑制具有颉颃作用,其中sGPS₆组的活性最高,可作为新型免疫抑制颉颃剂的候选药。     

硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制鸡的颉颃作用

为探究硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制的颉颃作用,将336只11日龄非免疫健康罗曼雏鸡随机均分为7组:空白对照组(BC)、免疫对照组(VC)、环磷酰胺对照组(Cy)、sGPS3、sGPS5、sGPS6和药物对照组(APS),每组6个重复,每个重复8只鸡。BC组和VC组注射0.5mL生理盐水,其余组均肌肉注射8mg/mL环磷酰胺0.5mL,每天1次,连续3d;14日龄时,除BC组外,其余组均用新城疫疫苗免疫,同时3个硒大蒜化多糖组分别注射0.5mL浓度为1mg/mL的sGPS3、sGPS5、sGPS6,APS组肌肉注射黄芪多糖注射液0.5mL,Cy组、VC组和BC组注射生理盐水0.5mL,每天1次,连续3d,28日龄二免。分别于首免后的第7、14、21、28天,每组随机抽取6只罗曼鸡翼静脉采血,分离血清,β-微量法检测血清ND-HI抗体效价、ELISA法检测血清γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2(IL-2)含量。称量体重后采集胸腺、脾脏和法氏囊组织并称重,计算免疫器官指数。结果显示,各给药组的血清ND-HI抗体效价、血清IFN-γ和IL-2含量、法氏囊指数均显著高于Cy组(P0.05);sGPS6组血清抗体效价、IFN-γ含量在28d,血清IL-2含量在21、28d均显著高于其余各组(P0.05);在免疫后21、28d,4个给药组中sGPS6组体重、法氏囊指数最高,显著高于其余3个给药组(P0.05);在免疫后28d,4个给药组中sGPS6组胸腺指数、脾脏指数最高,显著高于其余3个给药组(P0.05)。结果表明,硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致的免疫抑制具有颉颃作用,其中sGPS6组的活性最高,可作为新型免疫抑制颉颃剂的候选药。     

猪流感(H1N1+H3N2)油乳剂灭活疫苗免疫后备母猪的抗体动态

本研究对同1条生产线的1683头后备母猪接种猪流感二价灭活疫苗,免疫后对试验组和非免疫组定期进行抽样采血,检测HI抗体水平,计算各组猪群的平均抗体水平.结果表明,第1次免疫后1个月H1NI抗体水平为9.05log2,H3N2抗体水平为6.50log2;在2免后2个月H1NI抗体水平达到高峰为10.15log2,而在2免后3个月H3N2抗体水平达到高峰为10.05log2;然后抗体水平逐步下降,免疫组H1抗体水平大于8log2,H3抗体水平大于6log2的时间可维持6个月以上.     

云南某犬场犬狂犬病灭活疫苗免疫抗体效价评估

采用直接免疫荧光病毒中和试验(FAVN),对云南某犬场狂犬病灭活疫苗免疫28 d后的犬群随机抽样44只(份),检测血清中狂犬病病毒抗体效价。结果显示,44只受试犬,14只阳性(≥0.50 IU/m L),阳性率31.82%(14/44);狂犬病灭活疫苗免疫1次的31只受试犬(幼犬14只、训练犬17只),3只阳性,阳性率9.68%(3/31);免疫2次及2次以上的13只受试犬(3只训练犬,10只种犬),11只阳性,阳性率84.62%(11/13)。调查显示,该犬场狂犬病灭活疫苗免疫覆盖率为100%。笔者建议:在犬12月龄前,应进行两次狂犬病灭活疫苗免疫;在幼犬3月龄后进行第1次免疫,间隔1个月后进行第二次狂犬病灭活疫苗加强免疫,消除狂犬病免疫空挡,以后每年进行1次免疫;对于监测过程中,出现血清中和抗体效价低于0.50 IU/m L的犬只,应及时加强免疫1次;并加强犬场周围流浪犬、流浪猫管理。     

堆型艾美耳球虫早熟株免疫雏鸡后血清抗体水平动态变化的研究

用堆型艾美耳球虫早熟株对雏鸡进行一次免疫和二次免疫试验 ,研究雏鸡血清抗体的动态变化。试验结果显示 ,在一次免疫试验中 ,各剂量组雏鸡均在免疫后 2天血清抗体出现较高的 OD值 ,之后呈下降趋势 ,11天后逐渐上升 ,到 12～ 13天时出现第 2个峰值 ,各组间的血清抗体 OD值比较 ,3 0 0 0个卵囊 /只剂量组极显著 (P<0 .0 1)高于 10 0 0个 /只、2 0 0 0个 /只和 5 0 0 0个 /只剂量组。在二次免疫试验中 ,8日龄首免、14日龄二免组雏鸡的抗体水平动态变化整体呈上升趋势 ,峰值 (0 .3 75 )出现在二免后第 10天 ,其后稳定地维持在较高水平 (平均 OD值为 0 .3 5 ) ,并且其抗体水平显著地高于 6日龄首免、12日龄二免组 (P<0 .0 5 )。抗体水平动态变化表明 ,堆型艾美耳球虫早熟株有较强的免疫保护力 ,其免疫方式可选用一次免疫 ,剂量为 3 0 0 0个卵囊 /只 ,也可采用二次免疫 ,即 8日龄首免 (15 0 0个 /只 ) ,14日龄二免 (15 0 0个 /只 ) ,从抗体动态变化的稳定性看 ,二次免疫更佳     

重组禽流感三价灭活疫苗免疫商品肉鸡和蛋鸡效果的研究

研究旨在评价重组禽流感三价灭活疫苗在临床中的效果。将40 000只三黄肉鸡分为A组、B组、C组,A组20 000只,B组19 900只,C组100只。A组与B组分别免疫疫苗A与疫苗B,C组为不免疫对照组。2周龄首免,颈部皮下注射,0.3 mL/羽份。6周龄进行二免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。20 000只蛋鸡分为D组、E组、F组,D组10 000只,E组9 900只,F组100只。D组与E组分别免疫疫苗A与疫苗B,F组为不免疫对照组。2周龄首免颈部皮下注射,0.3 mL/羽份。6周龄进行二免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。13周龄进行三免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。免疫后进行安全性评价,并于不同时间监测抗体水平。结果显示,免疫后14 d,各组三黄肉鸡和蛋鸡均未出现副反应,且2～3次免疫后,疫苗基本吸收完全。免疫效力试验结果显示,三黄鸡首免2周后HI抗体即可达到5.0以上,3周后可达到完全保护水平;蛋鸡在产蛋高峰前可达到7.5 log2以上,2～3次免疫后抗体即可达到峰值9～10 log2。研究表明,不同厂家疫苗免疫后抗体均可产生100%保护,但抗体水平略有差异。     

狂犬病灭活疫苗(r3G株)的免疫效力及安全性试验报告

为检测狂犬病灭活疫苗(r3G株)的免疫效力及安全性,将威克中试生产的3批疫苗(批号2015006、2015007、2015008)和参考苗(梅里亚狂犬病灭活苗)同时以同样剂量(2.0 IU)免疫狂犬抗体阴性的3月龄健康比格犬及怀孕母犬,并监测疫苗对体温及体重的影响,定期检测血清中狂犬病病毒的抗体效价,同时跟踪免疫母犬的产仔情况。结果表明,3批中试疫苗效价高且批间稳定,各批效价均高于5.0 IU/m L,对3月龄犬具有很好的安全性及免疫原性;首免14 d抗体效价即可达到有效保护水平(大于0.5 IU/m L),免疫持续期可达15个月。中试疫苗对怀孕母犬亦具有很好的安全性。     

重组H5N1亚型禽流感疫苗免疫孔雀后的抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨孔雀对H5高致病性禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好孔雀禽流感的防控,采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型高致病性禽流感疫苗,不同剂量免疫孔雀后,跟踪其抗体消长规律。检测结果显示:小孔雀母源抗体能维持约6周;首免0.5 mL/羽颈部皮下注射,有效抗体能维持18周以上;1.0,1.5,2.0 mL/羽3个剂量组肌肉注射进行二免,以1.5 mL/羽组效果最好,有效抗体能维持10个月左右;成年孔雀1.5 mL/羽进行三免,有效抗体能维持1年以上。而且孔雀产生的抗体均一性良好,抗体阳性率均在75%以上。根据抗体消长规律,推荐了孔雀的免疫程序。     

肉鹅H5亚型禽流感疫苗免疫效果的研究

选用H 5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗(H 5N 1,R e1株)对马岗鹅作首免日龄、免疫次数与免疫剂量的免疫试验。结果表明,雏鹅在7、14或21日龄作1次免疫均产生免疫应答,其中14与21日龄免疫组免疫后第5周抗体水平均达4 log2以上,抗体动态变化均值与峰值均高于7日龄免疫组2~3个滴度。用0.5、1和2 m l/只3个剂量对14日龄雏鹅的免疫试验中,0.5m l组抗体水平上升过程缓慢,免疫后4周抗体水平才达4 log2以上,1与2 m l组在免疫1周后上升速度较快,免疫后2周即达4 log2以上,抗体水平相近,但2 m l免疫组免疫后5~7周抗体水平均低于1 m l免疫组。说明接种剂量为1或2 m lH 5N 1油苗比接种0.5 m l的免疫效果好,尤以1 m l免疫剂量效果最好。雏鹅在7、14日龄或14、21日龄作2次免疫和7、14、21日龄作3次免疫,首免后抗体上升速度快,各检测点抗体水平均值相近,均在首免后3周达到4 log2以上,4~5周达6 log2以上,4~7周的抗体水平均高于14日龄1次免疫组,且提前2周达到4 log2以上,说明2次、3次免疫组的抗体水平高于1次免疫组,而2次与3次免疫组的抗体水平无明显差异。以上结果说明,在肉鹅生产的禽流感免疫中,选择以14日龄首免0.5 m l/只,21日龄2免接种1 m l/只可取得较为理想的免疫效果。     

狂犬病病毒囊膜糖蛋白基因DNA免疫研究

狂犬病病毒(RV)囊膜糖蛋白(G)是该病毒诱导保护性免疫反应的主要抗原.为研究G蛋白基因的DNA免疫效果,本研究构建了表达哺乳动物密码子优化的RVG基因的重组真核表达质粒pCAGG-RVG,间接免疫荧光试验及westem blot结果表明,重组RV G基因在pCAGG-RVG转染的BHK-21细胞中获得正确表达.将pCAGG-RVG按500 μg剂量经肌肉注射途径免疫比格犬,间隔4周以相同剂量、途径加强免疫一次,并于初次免疫前、后不同时间检测血清RV的中和抗体.结果显示,pCAGG-RVG一次免疫即可诱导产生显著的中和抗体反应,二次免疫中和抗体滴度表现出显著地增强效果.二次免疫后,中和抗体滴度缓慢下降,保持持续平稳,至初次免疫后第54周,7只免疫犬病毒中和抗体滴度平均为2.88 IU/mL,并且全部高于0.5 IU/mL,即全部高于对强毒攻击保护的最低中和抗体滴度要求.因此,本研究构建的pCAGG-RVG具有预防狂犬病的潜力,是一种有希望的狂犬病候选疫苗.     

猫瘟热诊断及免疫的研究 Ⅱ.猫源毒细胞培养灭活苗免疫试验

用猫泛白细胞减少症病毒的FNF-8株制备的甲醛灭活和BEI灭活细胞苗免疫接种猫、貂和犬是安全的;犬能获得4/4保护;猫血清HI抗体增长4～7个滴度,且能持续到175天以上;貂一次接种后的血清HI抗体能增长1～4个滴度。BEI灭活苗的免疫效果优于甲醛灭活苗。间隔2周以上的两次接种比一次接种的血清HI抗体增长幅度大而显著。灭活苗在4℃冰箱至少可保存6～12个月。     

免疫禽流感疫苗HI抗体的试验研究

对30日龄雏鸡肌注郑州中牧股份生产的禽流感疫苗每只0.5ml,分别于免疫后第3、6、9、12周进行血清学HI检测,3周后H5亚型HI、H9亚型HI抗体均达到6Log2以上,其效价12周时已处于免疫保护临界值状态,60日龄雏鸡免疫疫苗后,其H5、H9HI抗体效价较30日龄雏鸡上升幅度快;对另一批雏鸡分别于30、120日龄免疫两次后第1、2、3、4、5月进行HI检测,抗体较首免产生水平高,1月后抗体可达到8Log2以上,5个月后抗体还达5Log2以上。     

不同免疫剂量与次数对蛋鸡禽流感抗体效价的影响

为探讨新型禽流感病毒三价灭活疫苗（H5N6 H5-Re13株+H5N8 H5-Re14株+H7N9 H7-Re4株）对蛋鸡的免疫效果,研究不同免疫剂量与次数对抗体滴度的影响。将160羽35日龄海兰褐蛋鸡随机分为四组,即单次免疫组（Ⅰ组、Ⅱ组）和两次免疫组（Ⅲ组、Ⅳ组）。其中,Ⅰ组接种0.5 mL疫苗,Ⅱ组接种1.0 m L疫苗,Ⅲ组首免和二免各接种0.5 m L疫苗,Ⅳ组首免接种0.5 mL疫苗,二免接种1.0 mL疫苗。在首免接种后的第21 d、90 d、150 d、180 d测定血液抗体滴度。结果表明：免疫接种21 d后,Ⅳ组的3种抗体滴度均达7.9log2以上,合格率达95%以上,两次免疫组（Ⅲ组、Ⅳ组）的抗体保护期达180 d以上,Ⅲ组与Ⅳ组差异不显著。     

我国部分城乡犬狂犬病中和抗体水平调查

以国际兽疫局(OIE)推荐的荧光抗体病毒中和试验(FAVN)对随机采自广东、河北、北京等地区的573份犬血清进行了狂犬病病毒中和抗体效价的测定,以确定犬群中狂犬病的免疫状况。结果显示,在不同地区或不同城市的动物防疫区域中,犬体内狂犬病病毒中和抗体平均水平存在着明显的差异,城市犬的中和抗体水平较高,有的中和抗体保护水平(0.5IU/mL)阳性率高达100%,少数则达不到保护水平,不同防疫区域狂犬病中和抗体水平为(0.08±0.03)~(4.39±1.45)IU/mL,平均保护水平阳性率为46.3%;乡村看家犬病毒中和抗体水平普遍较低,大部分犬体内无中和抗体,只有个别犬体内存在水平较低的中和抗体,平均保护水平阳性率为1.8%。     

犬瘟热弱毒疫苗免疫犬抗体消长规律及影响因素

应用犬瘟热病毒（ＣＤＶ）血清中和试验，对从日本引进的犬瘟热弱毒疫苗免疫犬的血清中和抗体效价进行了检测，探讨了免疫剂量、免疫程序和犬的年龄对抗体效价的影响。结果表明，试验犬于第１次免疫后１４ｄ左右产生１∶９以上的血清中和抗体，随后抗体水平迅速升高，３５ｄ时７８．３８％的免疫犬抗体效价超过１∶１００，６０ｄ达到高峰，６个月试验结束时，血清中和抗体效价仍维持在１∶１００以上。该犬瘟热弱毒疫苗的最低免疫剂量为１０３．０ＴＣＩＤ５０，以２周或３周间隔连续免疫３次均可使免疫犬获得完全保护。     

火鸡乌鸡禽流感(H5亚型)免疫程序的试验研究

本试验对火鸡、乌鸡进行了禽流感H5亚型母源抗体、免疫抗体消长规律以及保护性HI抗体滴度的研究,配合血清学监测及攻毒试验制定了禽流感免疫程序。火鸡免疫程序:首免,15～20日龄,哈尔滨兽医研究所生产禽流感H5亚型疫苗,0.5mL/只,肌肉注射;二免,45～50日龄,0.5mL/只,肌肉注射;三免,120～125日龄,1mL/只,肌肉注射;三免后5个月加免1次至淘汰。乌鸡免疫程序:首免,10～15日龄,哈尔滨兽医研究所生产禽流感H5亚型疫苗,0.3mL/只,肌肉注射;二免,45～50日龄,0.5mL/只,肌肉注射;三免,120～125日龄,0.5mL/只,肌肉注射;三免后根据检测结果再适时免疫。通过特禽生产应用表明,本研究制定的免疫程序是切实可行的。