药用真菌在茶饮料上的应用前景

１前言药用真菌，即可入药又可食用（木质菌除外）且对人畜无毒害的高级真菌，如羊肚菌（Ｍ．ｅｓｃｕｌｅｎｔａ（Ｌ．）Ｐｅｒｓ．）、香菇（Ｌ．ｅｄｏｄｅｓ（Ｂｅｒｋ）．Ｓｉｎｇ）、竹荪（Ｐ．ｉｎｄｕｓｔｉａｔａ（Ｖｅｎｔ．ｅｘ）Ｄｅｒｓ．Ｆｉｓｃｈｅｒ）等...     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的表达

将含有传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１的Ｓ１基因ｃＤＮＡ（从ＡＴＧ到Ｓ前体蛋白裂解位点）的片段克隆到具有多角体启动子（ＰＸＩＶ）和人工合成启动子（Ｐｓｙｎ）的杆状病毒转移载体质粒ｐＳＸ－ＩＶＶＩ＋Ｘ３中，构建了重组转基因载体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３－Ｓ１．Ｄ４１。用该重组转移质粒与无包涵体的粉纹夜蛾核型多角体病毒ＴｎＮＰＶ－ＳＶＩ－ＧＤＮＡ（ｏｃｃ－，ｇａｌ＋）共转染草地夜蛾（Ｓｆ９）细胞，筛选并纯化出既能表达Ｓ１基因又能形成多角体的重组病毒ＴｎＮＰＶ－ＩＢＶＳ１－ｏｃｃ＋（ｏｃｃ＋，ｇａｌ－）。通过间接ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ等方法在感染了重组病毒的Ｓｆ９细胞中成功地检测到分子量约６２０００的Ｓ１基因表达产物。虽然该重组Ｓ１糖蛋白可能由于Ｎ－糖基化不完全而分子量小于天然蛋白，但它可以像正常病毒粒子一样，被鸡抗ＩＢＶＤ４１株血清特异识别。     

大鹅观草的染色体组组成

以大鹅观草（ＲｏｅｇｎｅｒｉａｇｒａｎｄｉｓＫｅｎｇｅｔ．Ｓ．Ｌ．Ｃｈｅｎ）与竖立鹅观草（Ｒ．ｃｉｌｉａｒｉｓｖａｒ．ｊａｐｏｎｅｎｓｉｓ（ｈｏｎｄａ）Ｂ．Ｒ．Ｌｕ，Ｙｅｎｅｔ．ｙａｎｇ２ｎ＝２８，ＳＳＹＹ）犬草（Ｅｌｙｍｕｓｃａｎｉｎｕｓ（Ｌ．）Ｌ，２ｎ＝２８，ＳＳＨＨ）拟鹅观草（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｅｇｎｅｒｉａｓｐｉｃａｔａ（Ｐｕｒｓｈ）Ａ．ｌｏｖｅ，２ｎ＝２８，ＳＳＳＳ）三个种进行杂交，对亲本     

对虾病毒性疫病检疫

到目前为止，已报道过的对虾病毒病有１５种之多［１］ ，其中对虾杆状病毒病（Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ ｐｅｎａｅｉｄ ｄｉｓ－ｅａｓｅ，ＢＰ）和斑节对虾杆状病毒病（Ｐｅｎａｅｕｓ ｍｏｎｏｄｏｎ－ｔｙｐｅ ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓｄｉｓｅａｓｅ，ＭＢＶ）被我国农业部列为二类水生动物疫病［２］；传染性皮下和造血器官坏死病（Ｉｎｆｃｔｉｏｕｓ ｈｙｐｏ－ｄｅｒｌｍａｌａｎｄｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｎｅｃｒｏｓｉｓ，ＩＨＨＮ）、 白斑综合症（Ｗｈｉｔｅ ｓｐｏｔｓｙｄｒｏｍｅ，ＷＳＳ）、ＢＰ、ＭＢＶ、中肠腺坏死…     

鸡传染性喉气管炎ELISA诊断方法研究──SPA─ELISA检测ILTV抗原方法的初步建立

鸡传染性喉气管炎ＥＬＩＳＡ诊断方法研究──ＳＰＡ─ＥＬＩＳＡ检测ＩＬＴＶ抗原方法的初步建立彭万强，黄承锋，吕敏娜，孔庆飞，朱治远，幸桂香，杨海金（广东省农科院兽医研究所广州．５１０６４０）葡萄球菌Ａ蛋白（ＳａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓＰｒｏｔｅｉｎＡ─Ｓ...     

奶牛临床型和隐性型乳房炎的细菌学分析

对１０２例临床型和１８７例隐性型乳房炎病例的奶样进行了细菌学分析。临床型病例中，８５．３％的乳样检出了细菌，检出率高于隐性乳房炎病例（７２．２％）。传染性病原，包括无乳链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅ），金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）和牛棒状杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｏｖｉｓ），在临床型病例中的检出率是４１．２％，隐性型病例中的检出率是３９．５％，是检出率最高的一类致病菌。临床型乳房炎的另一类重要致病菌是环境性细菌。本研究检出的这类致病菌有乳房链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｕｂｅｒｉｓ），粪链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ），牛链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｂｏｖｉｓ），埃希氏大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）和变形杆菌（Ｐｒｏｔｅｕｓｓｐｐ．），检出率是２０．６％，而隐性乳房炎中的检出率只有２．２％。凝固酶阴性的葡萄球菌（Ｃｏａｇｕｌａｓｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ，ＣＮＳ）在两类乳房炎中的检出率分别是１４．７％和１３．４％。此外还检出了一些乳区有两种或两种以上的细菌混合感染。     

阻断ELISA和IPMA检测猪PRRSV抗体的比较研究

建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测猪血清中猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒（ＰｏｒｃｉｎｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅａｎｄｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅＶｉｒｕｓ，ＰＲＲＳＶ）抗体并与欧洲广泛使用的血清学诊断试验一免疫过氧化物酶单层试验（Ｉｍｍｕｎｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｍｏｎｏｌａｙｅｒａｓｓａｙ，ＩＰＭＡ）加以比较。当使用野外血清和实验感染ＰＲＲＳＶ后早期采集的血清试验时发现，阻断ＥＬＩＳＡ是特异性的，而且比ＩＰＭＡ更敏感。没有遇到在ＩＰＭＡ或间接ＥＬＩＳＡ中所见的底色深的问题。     

牛呼吸道合胞病毒的研究进展

牛呼吸道合胞病毒的研究进展朱其太（连云港动植物检疫局·江苏·２２２０４２）收稿日期：１９９６－１２－３０牛呼吸道合胞病毒（ＢｏｖｉｎｃＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＳｙｎｃｙｔｉａｌＶｉｒｕｓ，ＢＲＳＶ）是引起犊牛呼吸道疾病的主要病毒。１９６８年，Ｄｏｇｇｅ...     

狂犬病病毒糖蛋白基因在原核细胞中的表达

将狂犬病病毒糖蛋白（ＲＶｇｐ）基因ＢｇｌⅡ片段（１６７５ｂｐ）分别正向插入到原核高效表达载体ｐＥＴ－１７ｂ和ｐＥＴ－１７ｂ２（用ＳａｃⅠ－ＮｄｅⅠ缺失掉ｐＥＴ－１７ｂ６０ｂｐ含起始密码子ＡＴＧ小片段）的ＢａｍＨⅠ切点，构建重组质粒ｐＥＴ－１７ｂＲＶｇｐ和ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ。将其分别转化表达受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）和Ｅ，ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ．ＩＰＴＧ诱导表达，菌体经超声波裂解处理后ＳＤＳ－ｐＡＧＥ，染色，在分子量约６００００处可见重组质粒表达的较宽的蛋白带，以抗ＲＶｇｐＭｃＡｂ进行Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测，表明该表达蛋白为ＲＶｇｐ。通过扫描显示，表达的ＲＶｇｐ占菌体总蛋白的１０％～１４％，其中ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ在Ｅ。ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中的表达量最高。     

猫免疫缺陷综合症

猫免疫缺陷综合症连云港动植物检疫局朱其太猫免疫缺陷综合症（Ｆｅｌｉｎｅｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃ－ｅｎｅｙＳｙｎｄｒｏｍｅ，ＦＩＳ）是由猫免疫缺陷病毒（ＦｅｌｉｎｅｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｅｎｅｙＶｉｒｕｓ，ＦＩＶ）引起猫的一种慢性进行疾病，特征是免疫缺陷...     

猪核移植重组胚胎的发育能力

以ＭｃＧｒａｔｈ－Ｓｏｌｔｅｒ（１９８３）提供的去（注）核方法，将猪胚胎的单个卵裂球细胞注入去核的次级成熟卵母细胞，借助电融合的方法（ＡＣ；５Ｖ，１．５ＭＨｚ，１２－１５ｓ；ＤＣ：２ｋＶ／ｃｍ，４０μｓ。电激活／融合液：０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋－．１ｍｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４＋０．１ｍｍｏｌＣａｃＬ２＋７．５ｍｇ／ｍｌＣＣＢ）融入受体胞质构成重级胚，体外培养（培养液为改衣ＴＣＭ－１９９；培养条件为５％     

新城疫病毒F48E9株HN基因的克隆与酶切分析

为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。     

阻断ELISA和IPMA检测猪PRRSV抗体的比较研究

建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测猪血清中猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒（ＰｏｒｃｉｎｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅａｎｄｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅＶｉｒｕｓ，ＰＲＲＳＶ）抗体并与欧洲广泛使用的血清学诊断试验－免疫过氧化物酶单层试验加以比较。当使用野外血清和实验感染ＰＲＲＳＶ后早期采集的血清试验时发现，阻断ＥＬＩＳＡ是特异性的，而且比ＩＰＭＡ更敏感，没有遇到的在ＩＰＭＡ或间接ＥＬ     

拓展AcMNPV宿主域至家蚕的研究

将核型多角体病毒（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ　ｃａｌｉｐｈａｎｉｃ ｎｕｃｌｅａｒ ｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓ　ｖｉｒｕｓ，ＡｃＭＮＰＶ）与家蚕核型多角体病毒（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ　ｎｕｃｌｅａｒ　ｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓ　ｖｉｒｕｓ，ＮｍＮＰＶ）基因组ＤＮＡ的Ｓｍａ　Ｉ酶切Ｃ片段共转染Ｓｆ细胞，共转染上清液接种到ＢｍＮ细胞中进行扩增，然后在ＢｎＮ中进行空斑分析，挑取多角体空斑进行扩增。发现所得到的病毒即能在Ｓｆ纫胞中增殖，也能在ＢｍＮ细胞中增殖，并产生多角体颗粒。用重组病毒的多角体口服感染幼虫，能引起家蚕幼虫发病。     

高钠所致肉用雏鸡肺动脉高压模型的心电图学研究

本试验用心电描记法对三组共２８５ 羽健康 Ａ Ａ 肉鸡从８ 日龄开始分别用含氯化钠０．０％ ,０．１５％ 、０．３０％ 的饮水所致肉用雏鸡肺动脉高压综合征（ Ｐｕｌｍ ｏｎａｒｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ Ｓｙｎｄｒｏｍ ｅ, Ｐ Ｈ Ｓ）进行了研究。结果表明：①试验组的右心室（ Ｒｉｇｈｔ Ｖｅｎｔｒｉｃｌｅ, Ｒ Ｖ） 和全心室（ Ｔｏｔａｌ Ｖｅｎｔｒｉｃｌｅ, Ｔ Ｖ）的重量比（ Ｒ Ｖ／ Ｔ Ｖ）较对照组显著增高;②回归分析表明Ⅱ、ａ Ｖ Ｅ 导联 Ｓ波波幅的变化与 Ｒ Ｖ／ Ｔ Ｖ 和（ Ｒ Ｖ／ Ｔ Ｖ）／ Ｂ Ｗ （ｂｏｄｙ ｗ ｅｉｇｈｔ）的变化呈强负相关（ Ｒ＝ － ０．７９８ 到－ ０．８１２）;平均组合向量（ Ｍｅａｎ Ｒｅｓｕｌｔａｎｔ ｖｅｃｔｏｒ, Ｍ Ｒ Ｖ）的变化与收稿日期：１９９９０５０４基金项目：国家自然科学基金和江苏省“九五”农业科技重点攻关资助项目 Ｒ Ｖ／ Ｔ Ｖ 和（ Ｒ Ｖ／ Ｔ Ｖ）／ Ｂ Ｗ 呈强正相关（ Ｒ＝ ＋ ０．７２３ 到＋ ０．７２８）;③对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组分别有 ０． ０％ , ６． ２５％ ,２８．７５％ 鸡发展成临床型腹水。因此心电图上的这些特征性变化可作为 Ｐ Ｈ Ｓ早期阶段的一个准确、可靠的指标。另外,     

猪生殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及其用作诊断抗原的研究

对猪生殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）核衣壳蛋白（Ｎ）作为ＥＬＩＳＡ抗原进行了研究，将编码ＰＲＲＳＶＮ蛋白的基因０ＲＦ７ｃＤＮＡ插入杆状病毒表达载体ｐＢｌｕｅＢａｃＨｉｓ２Ａ，通过同源重组获得了重组杆状病毒ＯＲＦ７－ＡｃＭＮＰＶ，感染昆虫细胞ＳＦ９表达了Ｎ蛋白，占细胞总蛋白的７．０７％，纯化后作为抗原建立了间接ＥＬＩＳＡ，与ＩＤＥＸＸ公司的ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒有９６％的符合率，与ＩＦＡ有１００％的符合率。试验证实：ＰＲＲＳＶＮ蛋白在昆虫细胞中得到高效表达且是检测ＰＲＲＳＶ抗体的良好抗原。     

检测羊感染的捻转血矛线虫（Haemonchus contortus，Hc）的两种酶免疫分析方法的比较（摘要）

检测羊感染的捻转血矛线虫（Ｈａｅｍｏｎｃｈｕｓｃｏｎｔｏｒｔｕｓ，Ｈｃ）的两种酶免疫分析方法的比较（摘要）Ｓｃｈａｌｌｉｎｇ，Ｈ．Ｄ．等我们以成熟的Ｈｃ排泄或分泌的产物（ＥＳ）和虫体粗提物（ＣＳＡ）作为抗原建立的两种酶免疫分析方法，比较他们分别检测抗...     

用双抗体夹心ELISA法检测鸡病毒性关节炎病毒的研究

应用鸡病毒性关节炎病毒Ｕ．ＣｏｎｎＳ１１３３株，建立了检测鸡病毒性关节炎病毒抗原的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法。用该法检测三组接毒鸡的关节液，接毒后３天即可检出阳性，阳性率为５８．３％；发病严重的４～１１天阳性检出率达９５７％，１４天阳性率为５０％；１７天阳性率为３１．３％；２０天以后则全部为阴性。用该法对大肠杆菌（Ｅ．ＣｏＬｉ）、葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、败血支原体（ＭＧ）、滑膜支原体（ＭＳ）、新城疫病毒（ＮＤＶ）、传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、传染性脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）进行检测，结果均为阴性。试验表明，我们建立的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，能早期、特异、敏感地检出鸡病毒性关节炎病毒抗原，从而解决了对该病早期诊断及类症鉴别带来的困难。     

应用生物素标记的NDV—cDNA探针检测感染尿囊液中DNV—RNA的初…

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＤＮＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体－Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐ ｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后，即成ＤＮＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＤＮＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ，而不与ＩＢＤＶ－ｄｓＲＮＡ，ＡＩＢＶ－ｓｓＲＮＡ，ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ０ｄｓＤＮＡ、Ｆ     

猪细小病毒生物学特性研究

应用ＰＫ－１５传代细胞复制猪细小病毒（ＰＰＶ）参考株ＮＡＤＬ－２和云南分离株ＫＭ，研究得出细胞培养物半数细胞感染量分别为１０＾－７．９／ｍｌ和１０＾－６．８／ｍｌ经ＣｓＣｌ密度梯度离心，两种病毒颗粒其浮力密度值分别为１．３３ｇ／ｃｍ＾３和１．３９／ｃｍ，电镜观察病毒粒子呈圆形，直径约２０ｎｍ。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，表明纯化的ＰＰＶ细胞培养毒，主要含两种蛋白成分，分子量