上海市动物及其产品中大肠埃希菌O157:H7带菌情况的调查

为了解上海市动物及动物产品中大肠埃希菌O 157∶H 7带菌情况及其毒力采集上海市猪、牛等动物粪便以及市场和超市猪肉、牛肉、牛奶、虾仁等样本568 份,应用免疫胶体金技术、分离培养、形态特征观察生化特性鉴定、血清学试验、多重引物PCR进行大肠埃希菌O 157∶H 7的分离、鉴定及毒力基因分析。结果表明,上海市动物及动物产品中存在大肠埃希菌O 157∶H 7,检出率为2.05%。其中牛粪、猪粪中检出率较高,分别为9.76%和8.57%。     

屠宰场分离大肠埃希氏菌O157:H7药敏试验及耐药基因分析

为了解2018年-2019年从广东省内生猪屠宰场分离的19株大肠埃希氏菌O157:H7耐药情况,采用微量肉汤稀释法测定阿莫西林等16种抗菌药物对分离菌株的最小抑菌浓度(MIC),并用普通PCR法检测blaNDM-1等10种耐药基因。结果表明,19株大肠埃希氏菌O157:H7分离菌株对不同抗生素存在耐药差异,其中对阿莫西林、氨苄西林、青霉素、氯霉素和恩诺沙星的耐药率均为100%,对头孢哌酮的耐药率最低为5.26%,其余10种抗菌药物的耐药率位于31.58%～84.21%之间;mcr-1、tetM、floR和rmtB 4种耐药基因未检出,blaNDM-1等6种耐药基因检出率范围为5.26%～89.47%。生猪屠宰场大肠埃希氏菌O157:H7耐药且多重耐药严重,分离株携带丰富的耐药基因。     

肠出血性大肠埃希菌O157疫苗研究进展

肠出血性大肠埃希菌感染是重要的新发传染病，在世界范围内多次暴发流行。肠出血性大肠埃希菌O157能引起人的出血性结肠炎、溶血性尿路综合征和血栓性血小板紫癜等全身性并发症。控制该病暴发流行的最好措施是免疫预防，但目前还没有研制出可用于人的疫苗。该菌的主要毒力因子包括染色体上原噬菌体编码的志贺毒素、LEE致病岛编码的毒力相关蛋白及质粒编码的肠溶血素等。研制中的O157疫苗种类包括亚单位苗、基因工程减毒活菌苗、重组载体活菌苗和转基因植物疫苗等。近年来，随着基因组序列的解析及分子生物学技术的发展，针对大肠埃希菌O157免疫预防研究取得了重要进展。     

大肠肝菌O157:H7紧密素研究进展

WHO不久前指出在过去的20年里,世界上出现了约30种新的传染病,1982年美国首次报告的由大肠埃希菌O157:H7引起的出血性肠炎就是其中之一。大肠肝菌O157:H7属于肠出血性大肠埃希氏菌(EnterohemorrhagicE.coliEHEC),尽管大肠杆菌O157:H7高致病力的机制尚未明了,但已确定紧密素(int     

肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法的建立

为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等不同动物来源的样品进行了大肠埃希菌O157检测。结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,敏感性达到5×10~3CFU。从检测阳性样本中均分离到目的菌。应用建立的方法在确定样品中是否含有大肠埃希菌O157的同时,还能对菌株毒力进行初步判定。成功建立了肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法,为该病原菌感染的预防和监测提供了简便、快速的技术手段,具有良好的应用前景。     

大肠埃希氏菌O77的鉴定

１菌种来源某动物园有一只患败血症死亡的卷尾猴，取其肝、肺、脾组织，分别接种血液琼脂平皿，３７℃培养２０ｈ后，均长出纯粹的灰色菌落，以此菌落移植后作细菌鉴定。２细菌鉴定２．１细菌形态以琼脂斜面培养物涂片镜检，为革兰氏阴性杆菌，大小为０．５～０．７×１．...     

大肠埃希菌O157:H7 eaeA基因的克隆及其表达质粒的构建

采用自行设计的引物,应用PCR方法直接从广东分离株大肠埃希菌0157：H7021210的染色体DNA中扩增出既8A基因的完整阅读框,得到了一条大小约为2800bp的基因片段。T—A克隆后将其亚克隆至原核表达载体pET-28a（＋）,经PCR鉴定、酶切鉴定及核苷酸序列测定,证实成功构建原核重组表达质粒pET—eaeA。大肠埃希菌O157：H7eaeA基因的克隆及原核表达质粒的成功构建,为下一步进行诱导表达、活性鉴定及既8A基因表达蛋白诊断抗原的研制奠定了基础。     

国内外致泻大肠埃希氏菌O157:H7的检测标准比较及建议

致泻大肠埃希氏菌O157:H7（STEC O157:H7）是大肠埃希氏菌中致病性最严重的一种食源性致病菌,主要存在于牛肉、牛奶、水果及其制品中,对身体健康造成很大危害,甚至引发死亡。食品中STEC O157:H7检测尤为重要。本文对国内外STEC O157:H7的检测标准进行比较,提出我国标准在样品前处理、快速筛选方法的应用等方面需要加强,以便为该菌快速准确检测提供帮助,实现与国际标准化体系建设接轨,满足实验室检测需要。     

O157∶H7型大肠埃希菌CRISPR/Cas系统结构的生物信息学分析

为了解O157∶H7型大肠埃希菌中成簇的规律间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）分布和结构特征及cas基因分布情况,本试验通过GenBank数据库和CRISPRdb database获得92株O157∶H7型大肠埃希菌全基因组序列、CRISPR位点位置、CRISPR的侧翼序列及cas基因簇的序列范围,利用多序列比对、启动子预测和RNA二级结构预测等方法分析细菌中CRISPR系统的特点。结果显示,O157∶H7型大肠埃希菌的基因组存在3个CRISPR位点（CRISPR1、CRISPR2和CRISPR3）,每个CRISPR位点上的序列一致;CRISPR1和CRISPR2的重复序列可形成茎环状结构,环上的碱基易发生变化;CRISPR2中存在一段长451 bp的序列（命名为序列X）,该序列X将CRISPR2分为2个部分CRISPR2a和CRISPR2b,其碱基A和T比例为74%,在91株O157∶H7型大肠埃希菌中均存在该序列,在该序列中可预测出至少有1个启动子和9个转录因子结合位点;侧翼序列中的疑似前导序列位于CRISPR2下游,序列长340 bp,其碱基A和T比例为69%,在92株O157∶H7型细菌中均存在该序列,其可预测出至少有1个启动子和3个转录因子结合位点;在20株O157∶H7型大肠埃希菌的全基因组序列中,有15株具有完整的cas基因簇,有5株缺乏cas3基因。本试验结果表明,O157∶H7型大肠埃希菌的CRISPR系统结构稳定,序列具有较高保守性,cas基因簇也相对保守。CRISPR2的结构与其他类型大肠埃希菌有较大差别。本研究发现的序列X在O157∶H7型大肠埃希菌分布广泛且序列保守,可作为鉴定O157∶H7型大肠埃希菌的潜在分子靶标。     

黑龙江 家兔大肠埃希氏菌污染情况的调查

在自１９９６年至１９９９年的４年中，共从腹泻兔群中分离出１５株致病性大肠杆菌，血清型鉴定表示，这１５株大肠杆菌分属于７个血清型，其中以０６８的频率最高，达２０．０％，其次是０７和０１３０，达１３．３％。用试管凝集试验对１９９６年前自黑龙江省部分兔群中采集的血清进行检查，发现以０１３和０７血清型的污染率最高，分别达４８．４％和２４．３％。结果表明，近年来血清型的菌株流行为主，变为最近两年的以０６８等     

控制大肠杆菌O157：H7对食品、水源等的污染

大肠埃希菌O157：H7感染性腹泻是人类新发生的传染病，已成为世界关注的公共卫生问题。大量研究证实，家禽、家畜是大肠埃希菌O157：H7的重要宿主。近年来，由肠出血性大肠杆菌O157：H7引起的食源性疾病的暴发、流行呈逐年上升的趋势。它能引起出血性肠炎、溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癫等临床症状，致病性强、死亡率高，对人体的健康造成很大的威胁。     

牦牛致病性大肠埃希氏菌病的诊断

西藏那曲地区牦牛发病死亡数量较大，本病症状与大肠埃希氏菌病极为相似。通过对流行病学调查，临床症状及病理变化观察，细菌学、血清学检查鉴定，动物回归试验，首次证明引起那曲地区牦牛死亡的病因是由致病性大肠埃希氏菌所致。     

鸭源致病性大肠埃希氏菌生物学特性的研究

对从自然病例鸭实质脏器中分离的致病性大肠埃希氏菌的生物学特性进行了观察。结果表明，不同血型和同一血清型不同菌株的培养特性、生化试验基本一致，抗生素耐药性呈多重性，所有菌株均能使小鼠和雏鸭发病死亡。     

农牧区牦牛致病性大肠埃希氏菌病的诊断

通过实际调查发现,在我国西藏地区牦牛养殖行业迅速发展过程中,因为大肠埃希氏菌病等情况的出现,造成了大量牦牛死亡的现象.为了能够对该种病菌进行诊断与观察,在接下来的文章中,将具体展开全面的分析,希望能够给相关人士提供些许参考依据.     

鸡源大肠埃希氏菌的分离及生物学特性研究

从福建省几个大肠杆菌病较严重的大型养鸡场分离到的８５株大肠埃希氏菌,从致病性试验、生化试验、药敏试验及生物学我试验结果表明,其中有５２株为致病菌,致病菌分离率６１．１％;分离菌株的生化特性符合大肠埃希氏菌的生化特性;所有菌株均能凝集鸡的红细胞,并能被Ｄ－甘露糖所抑制;对人、猪、山羊、乳牛、兔、犬、豚鼠、鸽和鱼的红的细胞表现为不同的血凝（ＨＡ）和Ｄ－甘露糖血凝抑制特性;２４株强致病菌中有７９．２％的表现为盐凝集试验（ＳＡＴ）阳性：所有菌株对丁胺卡那霉素（ＡＫＮ）和菌必治敏感,对氯霉素（ＣＭＰ）、先锋霉素（ＣＴＮ）、卡那霉素（ＫＡＮ）、呋喃妥因（ＮＩ）、氟嗪酸（ＯＦＬ）、壮观霉素（ＳＰＴ）、妥布霉素（ＴＯＢ）、新霉素（ＮＥＯ）、氟哌酸（ＮＯＲ）、复合磺胺（ＳＸＴ）和强力毒素（ＤＯＸ）有较高敏感性,而对红霉素（ＥＲＹ     

大肠埃希菌O157∶H7 eae A基因的克隆及其表达质粒的构建

采用自行设计的引物,应用PCR方法直接从广东分离株大肠埃希菌O157∶H7021210的染色体DNA中扩增出eaeA基因的完整阅读框,得到了一条大小约为2 800 bp的基因片段。T-A克隆后将其亚克隆至原核表达载体pET-28a( ),经PCR鉴定、酶切鉴定及核苷酸序列测定,证实成功构建原核重组表达质粒pET-eaeA。大肠埃希菌O157∶H7 eaeA基因的克隆及原核表达质粒的成功构建,为下一步进行诱导表达、活性鉴定及eaeA基因表达蛋白诊断抗原的研制奠定了基础。