N,N''''-二氧喹喔啉甲醛衍生物的合成及促家禽生长活性研究

用γ-丁内酯、水杨酸酯、二酸酐与水合肼反应制备了5种酰肼中间体；用醛酮与水合肼反应制备了4种单腙：用氨基脲类、芳香胺类和上述酰肼、单腙与N，N’-二氧喹喔啉-2-甲醛反应合成了15种衍生物用元素分析、MS、IR和HNMR对这些新衍生物的结构进行了表征，并且用这些新衍生物对鸡进行了促生长活性研究。研究结果显示5种新衍生物具有明显的促鸡生长作用，相对增重率在25％以上。     

3-甲基-2-乙酰苯腙喹喔啉1，4-二氧物的合成与抑菌活性研究

为了合成一种有抑菌活性的新喹喔啉衍生物,即3-甲基-2-乙酰苯腙喹喔啉1,4-二氧物,以邻硝基苯胺为基本原料,经氧化反应,Beirut反应和加成缩合反应,制得目标产物,产率73.5%。用红外光谱法(IR)、质谱法(MS)和核磁共振谱法(NMR)对产物结构进行表征,证明合成产物为目标产物。并通过抑菌测试发现,新化合物对大肠杆菌、枯草杆菌、金葡萄球菌和青霉菌均有明显的抑菌活性,为今后开展喹喔啉及其衍生物的抗菌药用研究奠定基础。     

N,N′-二氧喹喔啉甲醛衍生物的合成及促家禽生长活性研究

用γ-丁内酯、水杨酸酯、二酸酐与水合肼反应制备了5种酰肼中间体;用醛酮与水合肼反应制备了4种单腙;用氨基脲类、芳香胺类和上述酰肼、单腙与N,N'-二氧喹喔啉-2-甲醛反应合成了15种衍生物用元素分析、MS、IR和HNMR对这些新衍生物的结构进行了表征,并且用这些新衍生物对鸡进行了促生长活性研究。研究结果显示5种新衍生物具有明显的促鸡生长作用,相对增重率在25%以上。     

1,4-二氧喹喔啉-2-甲醛席夫碱的合成与促鸡生长活性研究

用水杨醛、1,4—二氧喹喔啉—2—甲醛与邻苯二胺反应制备了二种单席夫碱中间体,用2种中间体、8种取代芳香胺与1,4—二氧喹喔啉—2—甲醛反应合成了10种新席夫碱。用元素分析法、MS法(质谱法)、IR法(红外吸收光谱分析法)和1HNMR法(核磁共振氢谱法)对这些新席夫碱的结构进行了表征。用这些新席夫碱对鸡进行了促生长活性实验,实验结果显示了苯胺、对—氯苯胺和对—乙酰胺基苯胺的席夫碱有明显促进鸡生长的作用,相对增重率在30%以上。     

高效液相色谱法测定猪肝组织中3-甲基喹喔啉-2-羧酸

本研究建立了猪肝组织中3-甲基喹喔啉-2羧酸（3-methyl-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA）的高效液相色谱检测方法。采用0.3 mol/L盐酸提取猪肝组织中药物,经MAX柱净化,以乙腈∶甲醇∶0.5%甲酸水（15∶50∶35,V/V/V）为流动相,C18色谱柱进行药物分离,320 nm波长下紫外检测,结果当药物在猪肝组织中添加水平为20～250 μg/kg时,平均回收率为72.35%～85.00%,日内测定的相对标准偏差（RSD）（n＝5）为5.56%～9.49%,日间RSD(n＝3)为5.96%～9.63%。猪肝组织中MQCA的定量限为20 μg/kg,检出限为6.65 μg/kg,表明该方法灵敏度、准确度和精密度均符合兽药残留分析技术的要求,适用于猪肝组织中MQCA的检测。     

喹喔啉-2-羧酸人工抗原合成与抗体制备

试验以喹喔啉-2-羧酸(quinoxaline-2-carboxylic acid,QCA)及其与γ-氨基丁酸(ABA)的衍生物(QCA-ABA)为半抗原,将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联,合成人工抗原。以QCA-BSA和QCA-ABA-BSA为免疫原,免疫大白兔制备多克隆抗体,利用紫外分光光度计分析结合物的结合情况,间接ELISA和间接竞争ELISA分析抗体特性。结果表明,以QCA-BSA、QCA-ABA-BSA为免疫原制备的抗体平均效价分别为12.8×10⁴、6.4×10⁴。2种抗体对QCA灵敏度低,IC₅₀均大于10000 ng/mL,而对QCA-ABA的灵敏度高,IC₅₀分别为14.2和7.75 ng/mL,特异性好,仅与3-甲基-喹喔啉-2-羧酸(12%)、卡巴氧(0.038%)和喹赛多(0.028%)有较低程度的交叉反应,与衍生试剂和结构类似物均无交叉反应(<0.01%)。该抗体为建立动物可食性组织中QCA残留物的快速检测方法奠定了基础。     

乙酰甲喹主要代谢物的合成及体外抗菌活性检测

乙酰甲喹在动物体内被代谢为多种代谢物,其中乙酰甲喹侧链乙酰基加氢还原代谢物(M1),脱一氧M1(M2)、脱二氧M1(M3)为乙酰甲喹主要代谢物。以乙酰甲喹为原料通过Na2S2O4或NaBH4还原合成了此3种代谢物,并用质谱及核磁对合成的代谢物结构进行鉴定,然后对3种代谢物的体外抗菌活性进行测定。根据质谱及核磁结果分析,化学合成的3种化合物结构与代谢物(M1、M2、M3)结构一致,表明正确合成了此3种代谢物;体外抗菌活性研究表明,代谢物M1对大肠杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为32、128和128μg/mL,与乙酰甲喹相比,抑菌活性明显下降;M2、M3对此3种细菌的抑菌效果不及M1。     

3-甲基喹噁啉-2-羧酸的制备及其细胞毒性

通过贝鲁特反应和还原、脱羧反应在体外合成制备3-甲基喹噁啉-2-羧酸,并进行理化鉴定和抗菌活性测试;通过MTT方法研究3-甲基喹噁啉-2-羧酸对多种细胞的生长抑制作用,利用单细胞电泳研究其对细胞DNA的损伤作用,利用流式细胞术研究其对细胞周期的改变。结果显示,体外成功合成制备出3-甲基喹噁啉-2-羧酸,而3-甲基喹噁啉-2-羧酸几乎没有抗菌效果,对多种细胞的生长抑制作用较弱,在剂量检测范围内细胞抑制率不到30%,但在一定剂量下能导致细胞DNA损伤,主要表现为尾长和尾部DNA含量显著升高;并且3-甲基喹噁啉-2-羧酸也能改变Chang细胞的细胞周期,表现为S期阻滞。结果表明,3-甲基喹噁啉-2-羧酸具有一定的细胞毒性。     

猪食用组织中喹喔啉-2-羧酸的高效液相色谱检测方法

为了监测猪食用组织中卡巴氧(carbadox)的残留,建立了检测猪肝脏、肾脏、肌肉等组织中卡巴氧的标示残留物喹喔啉2羧酸(Quinoxaline-2-carboxylic acid,QCA)的高效液相色谱法.组织样品经碱水解,液液分配提取,用离子交换色谱柱净化,洗脱液作浓缩后用甲醇溶解进行测定.色谱柱为ODS C18柱;流动相为甲醇-水(体积比4060),每1L中加入8 mL冰乙酸,流速为1.0 mL/min;定量分析用紫外检测器,波长320 rm,确证性分析用二极管阵列检测器,波长250～500 nm.喹喔啉-2-羧酸工作液质量浓度在0.03～0.96 mg/L范围内,药物峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 9.组织中添加药物的质量分数为0.015、0.03、0.06 μg/g时,肝脏样品回收率分别为(73.55士9.46)%、(80.33±14.95)%、(75.84±7.42)%;肾脏样品分别为(70.89±10.33)%、(74.89±7.19)%、(83.33±10.68)%;肌肉样品分别为(69.49±7.26)%、(66.44±5.09)%、(62.11±6.08)%.本方法条件下,3种组织中药物最低检出质量分数均为0.015 μg/g,回收率测定的日内及日间相对偏差(RSD)分别＜18%和＜20%.当组织中药物质量分数达0.06μg/g时,可检测到喹喔啉-2-羧酸的特征性紫外吸收光谱.     

乙酰甲喹掩味纳米前药的制备及体外释放

乙酰甲喹作为治疗畜禽肠道感染的首选药物在兽医临床上被广泛应用,然而,由于味苦、代谢快而影响了其对养殖动物腹泻的治疗效果。本试验以氨基功能化的MCM-41型介孔纳米材料MSN-NH_2为载体,通过酸敏感的席夫碱共价键将乙酰甲喹固定于介孔纳米材料的孔道内制得乙酰甲喹纳米前药MEQ@MSN-NH_2,以实现掩味的目的。分别通过扫描电镜、透射电镜、氮气吸附-脱附试验、傅里叶红外光谱等手段对载药前后纳米粒子的结构进行比较研究。结果乙酰甲喹成功载入到介孔二氧化硅的孔洞中,并形成平均直径约为100 nm的分散球状粒子。体外释放试验结果表明,该纳米药物在模拟唾液中5 min内的释放率仅为3.9%,可见其掩味性能良好;在人工胃液中迅速释放,30 min内可释放总载药量的64.5%,24 h内基本释放完毕,表明其优异的药物运载和缓释性能。该乙酰甲喹纳米前药MEQ@MSN-NH_2通过酸敏感的席夫碱有效实现了药物的控制释放,可以有效避免乙酰甲喹在口腔与味蕾接触所造成的养殖动物拒食等问题。结果表明,该pH-响应型乙酰甲喹纳米前药的掩味控释系统将会具有良好的应用前景。     

3-甲基-4-硝基酚对雄性小鼠生殖毒性的研究

目的探讨3-甲基-4-硝基酚(PNMC)对雄性小鼠的生殖毒性作用。方法 20只小鼠随机分成阴性对照组和PNMC组(分0.9、9和90mg/kg·bw组),经口灌胃染毒30天,观察睾丸和精子的形态变化。结果染毒组小鼠各剂量睾丸生精细胞发生坏死,曲细精管腔内出现细胞团,精子细胞分化异常,形成均质红染颗粒,睾丸曲细精管生精上皮/直径比值在90mg/kg组明显高于对照组;染毒组小鼠精子畸形率明显高于对照组(P<0.05),并且随着染毒浓度的增加,畸形率有增加的趋势。结论 3-甲基-4-硝基酚不仅可以引起生精细胞坏死和抑制精子形成,还可以诱导精子畸变,从而对生殖系统造成损伤。     

不同季节吸附剂XF-4对奶牛舍中CO_2、CH_4、NH_3和H_2S的吸附探究

试验选用分子筛XF-4作为吸附剂,对冬季奶牛圈舍中CO_2、CH_4、NH_3和H_2S进行吸附试验。用便携式气体检测仪检测风机口排出的CO_2、CH_4、NH_3和H_2S浓度,悬挂吸附剂的为试验组,不悬挂吸附剂的为初始组。两者之差即为吸附剂XF-4的吸附浓度,根据实际测得的气温、气压、风速,利用理想气体状态方程推导出公式,将ppm换算为mg/m3。当试验组浓度与初始浓度无差异性时停止试验。结果表明:1 kg吸附剂XF-4春季吸附CO_2 73.21 g、CH_4 10.06 g、NH_3 1.52 g、H_2S 2.05 g;夏季吸附CO_2 70.47 g、CH_4 9.23 g、NH_3 1.67 g、H_2S 2.13 g;秋季吸附CO_2 78.75 g、CH_4 10.97 g、NH_3 2.05 g、H_2S1.86 g;冬季吸附CO_2 85.95 g、CH_4 12.36 g、NH_3 2.87 g、H_2S 1.88 g。CO_2、CH_4和NH_3吸附重量与温度负相关性显著(P0.05),CO_2、CH_4吸附重量与湿度正相关性极显著(P0.01),NH_3吸附重量与湿度正相关性显著(P0.05),与气体初始浓度正相关性显著(P0.05);H_2S吸附重量与湿度负相关性显著(P0.05),与温度正相关性极显著(P0.01)。     

猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及10⁰、10^-1、10^-2和10^-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清（FBS）的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮（NO）水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧（ROS）水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽（GSH）水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法测定白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）以及环氧合酶1（COX-1）和COX-2的分泌水平。【结果】10⁰至10^-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,10⁰ PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高（P<0.01）,10^-1至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;10⁰至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高（P<0.05）,细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,其中10⁰ PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且10⁰ PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。     

Exposure to 3-methyl-4-nitrophenol affects testicular morphology and induces spermatogenic cell apoptosis in immature male rats

The pollutant 3-methyl-4-nitrophenol (PNMC), a major component of diesel exhaust particles, can cause many adverse health problems. In the present study, we investigated the effects of PNMC on the testes of Sprague Dawley rats treated subcutaneously for 5 days with different doses of PNMC (1, 10 or 100 mg/kg). Exposure to PNMC caused a significant decrease in the plasma testosterone levels and in the absolute and relative weights of the testes. Severe histological lesions were observed in the testes of PNMC-treated animals. The ratio of the epithelial height to the seminiferous tubule diameter increased markedly in the PNMC-treated rats compared with the corresponding controls. In addition, PNMC exposure significantly increased the number of apoptotic spermatogenic cells compared with the controls whereas a significant decrease in the ratios of Bcl-2/Bax was observed at the same doses. These results suggest that PNMC exerts its gonadotoxicity in the rat mainly via apoptosis.     

磷酸中和缓解Na2CO3对星星草的胁迫作用

对星星草施加用磷酸中和至不同ｐＨ的１００ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＣＯ３胁迫处理，并测定其胁变指标，结果表明，中和至ｐＨ６～９均可缓解１００ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＣＯ３对星星草的胁迫作用，其中以ｐＨ８效果最佳，中和至ｐＨ８可使茎叶和根的相以生长率分别比中和提高５８％和８８％；明显促进根生长，使根冠比提高，使茎叶中的脯氨酸含量降至未被胁迫的对照（ＣＫ）水平，柠蒙酸含量明显下降，使根中Ｋ＾＋含量上升，Ｎａ＾＋含量     

泰妙菌素对人CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6酶活性的影响

本研究通过建立人肝微粒体体外孵育试验,考察泰妙菌素对4种CYP450亚酶的探针底物睾酮、非那西丁、氯唑沙宗、氢溴酸右美沙芬代谢的影响,以反映泰妙菌素对人CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6酶活性的作用。试验分为3组：药物试验组、阳性对照组（不含NADPH）、阴性对照组（不含CYP450抑制剂）,孵育体系为100 μL,孵育试验在96孔板中进行。终止反应后使用高效液相色谱串联质谱仪（LC-MS/MS）,以内标法检测96孔板中孵育液的剩余探针底物浓度。根据药物试验组与阴性对照组的探针药物代谢浓度之比,计算药物试验组的探针药物代谢率。使用Graphpad Prism 6.0软件,以药物试验组相对代谢率为纵坐标,药物浓度对数值为横坐标作图,计算试验组药物IC₅₀值。针对泰妙菌素与CYP3A4的孵育试验设置多个孵育时间点观察孵育时间对IC₅₀值的影响。试验结果显示,酮康唑对CYP3A4的IC₅₀值为0.044 μmol/L,α-萘黄酮对CYP1A2的IC₅₀值为0.030 μmol/L、4-甲基吡唑对CYP2E1的IC₅₀值为0.022 μmol/L、奎尼丁对CYP2D6的IC₅₀值为0.096 μmol/L。泰妙菌素对CYP1A2及CYP2D6的IC₅₀值均大于50 μmol/L,对CYP2E1的IC₅₀值为0.045 μmol/L,对CYP3A4的IC₅₀值为1.609 μmol/L。延长泰妙菌素与CYP3A4的孵育时间（10~50 min）后,泰妙菌素对CYP3A4的IC₅₀值由1.609 μmol/L增加至 8.657 μmol/L。本研究中4种亚酶常用抑制剂的IC₅₀值与参照值相近,表明所建立人肝微粒体体外孵育试验方法可靠。以IC₅₀值为指标显示泰妙菌素对CYP1A2和CYP2D6无抑制作用,对CYP2E1和CYP3A4存在强抑制作用,泰妙菌素可能是CYP3A4的可逆性抑制剂。     

外源注射LHRH-A_3和P_4对波尔山羊超排效果的影响及其机理研究

将试验羊按年龄和体重配对分成试验组和对照组。试验组羊超排后在发情配种时注射促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)15μg,发情配种后3d时开始以3d6次注射孕酮(P4)6mL;对照组不注射LHRH-A3和P4。在同期发情、超数排卵和配种后的不同阶段分别进行采血,测定血清中LH、FSH、E2、P4的含量。在发情配种后6d时采用手术法冲胚。采胚结果表明,试验组的获胚数、可用胚数、卵泡数、黄体数等各项指标和对照组相比均有明显升高的趋势,但差异不显著。激素测定结果表明,外源注射LHRH-A3和P4后血液中FSH、LH、P4水平升高,说明超排过程中注射LHRH-A3和P4是有一定效用的。     

醛—铝结合法加工鞣制鹅绒裘皮工艺

应用硫酸钾铝与戊二醛结合鞣法 ,对鹅绒裘皮鞣制加工的关键工艺环节进行了探索与研究 ,结果表明 ,此法获得的成品皮绒毛丰厚洁白 ,着生牢固 ,皮板柔软抗张度高 ,出材率高且工艺程序简单     

用“磷－钒－钼酸铵”比色法测定饲料添加剂的均匀度

本试验在四种畜禽微量元素饲料添加剂生产过程中，添加经处理后的同质的磷酸氢钙，其添加量分别为０．５％、０．５％、２．５％、５．０％，添加后，各添加剂含磷分别约为：８００、８００、４０００、８０００ｐｐｍ，与添加剂中铜、铁、锌含量处于相近或相差较大的两种水平。本方法是应用７２１型分光光度计，采用“磷－钒－钼酸铵”比色法测定磷，根据含磷量的变异系数来确定添加剂的均匀度，其方法简介如下：用正确的采样方法，对每个品种采集试样十个，每样５０克，并在实验室中按规定方法进行样品制备。然后精称各制备后试样０．５克左右，放于１００ｍｌ烧杆中，用１：１ＨＣｌ２０ｍｌ和浓ＨＮＯ＿３０．５ｍｌ、煮沸３～５分钟，经反复过滤，收集所有滤液于１００ｍｌ容量瓶中，冷却至室温，再定容，摇匀，即成试样分解液。精取分解液２～４０ｍｌ于５０ｍｌ容量瓶中，加入１０ｍｌ钒钼酸铵显色剂，定容后摇匀，静放１０分钟以上，在４２０ｎｍ波长下，用１０ｍｍ比色池，用７２１型分光光度计进行测定光密度，并对照标准曲线，计算含磷量和添加剂均匀度的变异系数。另应用原子吸收光度计，测出添加剂的铜、铁、锌含量，并计算它们的变异系数（均匀度）。本实验方法的结果表明：无论含磷量与?     

喹噁啉类药物对醛固酮合成和分泌影响的研究进展

喹噁啉类药物的肾上腺毒性作用主要表现为对醛固酮合成和分泌的影响。随着喹噁啉类药物作为抗菌促生长剂在畜牧业中的广泛应用,其肾上腺毒性逐渐受到关注。本文从醛固酮合成过程和肾素-血管紧张素-醛固酮系统这两方面,综述了近年来该类药物对醛固酮影响的研究进展,旨在为后期进一步揭示喹噁啉类药物的肾上腺毒性做出贡献。