奶牛一步细管法冷冻胚胎移植试验

以PBS+20%FCS+1.5 mol/L乙二醇(EG)+0.1 mol/L蔗糖(SU)液作为冷冻液,对122枚奶牛胚胎进行一步细管法冷冻,管内解冻,然后移植给122头受体黄牛,结果有49头供体牛妊娠,受胎率为40.09%,产犊率38.52%.结果表明一步细管法是一种可行性良好的便于在农牧区奶牛胚胎移植中推广的方法.     

奶牛冷冻胚胎细管内一步解冻法的应用效果

奶牛冷冻胚胎细管内一步解冻法的应用效果贺文杰和彦利徐照学王二耀辛晓玲李峰（河南省农业科学院畜牧兽医研究所，郑州４５０００２）为了在畜牧业生产中推广应用冷冻胚胎移植技术，就必须简化冷冻胚胎的解冻、脱除冷冻保护剂的操作步骤。为此，我们于１９９４年开展了该...     

奶牛胚胎一步冷冻保存的研究

用ＦＳＨ－ＰＧＦ＿（２α）超排黑白花奶牛２２头，以非手术方法采得７～８日龄胚胎６８枚，其中４５枚胚胎用于一步冷冻试验。水浴解冻后共回收４０枚胚胎。用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖一步除去保护剂，胚胎形态完好率为９０％（３６／４０）；荧光染色阳性率为８７．５％（７／８）；体外培养发育率为７５％（６／８）；冻胚移植受体妊娠率为４３．５％（１０／２３）。     

冷冻奶牛胚胎移植黄牛研究

采用国产试剂、器械超数排卵22头黑白花奶牛,超排成功率72.7％(16/22)。采集胚胎143枚,其中可用胚占70％(100/143),超排母牛采集胚数和可用胚数头均6.5枚和4.5枚,按采得胚母牛计算采集胚数和可用胚数头均8.9枚和6.3枚。胚胎移植经冷冻—解冻后68.2％(30/44)可用,胚胎移植18头同期发情黄牛受体,3头妊娠。其中两头受体双胎6个月时流产,1头受体黄牛产下1头黑白花公犊。     

自制简易胚胎冷冻器冷冻奶牛胚胎试验

用FSH+PGF_(2)超排黑白花奶牛,以非手术方法采得7日龄早期胚胎。应用含10％甘油卵细胞培养液作为胚胎冷冻保护液,采用自制简易胚胎冷冻器冷冻,在-196℃液氮中保存。冻胚在35℃水浴中解冻,应用92.1g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS,46g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS和171.2g/L蔗糖PBSS三步脱去甘油,用含20％犊牛血清PBS将胚胎清洗2遍后装管移植。共解冻18枝冻胚,16枚可用。可用胚率为84.2％(16/18)。采用非手术方法移植16头受体牛,5头妊娠产犊,移植妊娠率为31.5％(5/16)。     

家兔胚胎一步冷冻试验

自从Whittingham(1971)在小鼠胚胎冷冻上首次获得成功以后,国外在牛(1973)、绵羊(1974)、家兔(1974)、大鼠(1975)、山羊(1976)、马(1982)、羚羊(1983)、人(1983)、狒狒(1984)的胚胎冷冻方面陆继成功。在国内,对绵羊(1979)、小鼠(1980)、家兔(1980)、牛(1983)及山羊(1988)的胚胎冷冻亦相继成功。近十几年来,随着胚胎冷冻技术的不断改进和在生产上的推广应用,对冷冻程序和除去冷冻剂的方法越来越要求简化。     

奶牛胚胎移植试验研究

通过奶牛胚胎移植技术在昭阳区的应用,用CIDR PGF2α法,对母牛同期发情效果作研究,得到了持栓率、发情率、可移植率和移植妊娠率;提出牛胚胎移植是促进奶牛业快速发展的重要措施。     

提高牛冷冻胚胎移植妊娠产犊率的研究

分别对牛冷冻胚胎的解冻液、解冻后胚胎的质量评定、解冻后的胚胎处理,及受体牛的同步发情处理方法和移植方法等方面开展研究。结果表明：(1)进口解冻液脱甘油的胚胎复苏率为76％(19／25),优于传统解冻液。(2)解冻后未作任何处理直接移植的妊娠率(68．4％),产犊率(47．37％)最高,切割未作培养的次之(妊娠率37．5％,产犊率25％,流产率33．3％),移植前切割培养的最差(妊娠率、产犊率均为9．09％);(3)受体黄体发育正常、同步发情率高达83％,妊娠率高达62．5％;(4)移植枪加套管受体妊娠率(52．9％)明显比不加套管的高。熟练的操作技术受体妊娠率较高(62．5％)。     

牛胚胎移植、冷冻及一步解冻技术

供体牛应选择品种优良、生产性能好、遗传性能稳定、谱系清楚、体质健壮、繁殖机能正常、无遗传性和传染性疾病的种牛,年龄在15月龄到10岁以内为宜。若供体牛的数量多时,应对供体牛进行同期化发情处理,便于集中冲卵。     

牛细管冷冻精液人工授精关键技术

随着牛冷冻精液改良配种技术的推广,牛细管冻精因使用方便、受胎率高等优点被广泛采用.如何正确使用牛细管冻精,关系到配种员配种技术水平高低,是决定受胎率高低的关键.     

布尔山羊细管冷冻精液研制初报

首次在国内建立了布尔山羊的细管精液冷冻程序,试验证明,选用３０ｇ／Ｌ的葡萄糖,１３ｇ／Ｌ的柠檬酸钠和１ｇ／Ｌ的乙二胺四乙酸钠（ＥＤＴＡ）作基础稀释液,乙二醇作保护剂,精液冻前经１００ｍＬ／Ｌ卵黄处理,离心除去精清。     

小鼠卵泡卵母细胞的一步冷冻研究

通过对冷冻液和平衡时间的筛选,研究了裸露小鼠卵泡卵母细胞的一步冷冻。结果表明:当冷冻液含25％的1,2—丙二醇和0.25mol/L的蔗糖,平衡时间为10min时,冷冻效果最为有效,解冻后存活率和形态正常率分别达66.2％和58.1％.解冻后形态正常的卵泡卵母细胞可以发育成熟,成熟率为22.7％。     

布尔山羊细管冷冻精液研制初报

首次在国内建立了布尔山羊的细管精液冷冻程序。试验证明,选用３０ｇ／Ｌ的葡萄糖、１３ｇ／Ｌ的柠檬酸钠和１ｇ／Ｌ的乙二胺四乙酸钠（ＥＤＴＡ）作基础稀释液,乙二醇作保护剂,精液冻前经１００ｍＬ／Ｌ卵黄处理,离心除去精清。精液稀释并经冻前处理后装入０．５ｍＬ细管,在４℃下平衡１．５ｈ,再以１１～３０℃／ｍｉｎ的速率降温至－８０℃以下（３～５ｍｉｎ）投入液氮,可获得良好的冷冻效果。用乙二醇作保护剂的冷冻精液,解冻后在１２～１５℃的常温下放置２４ｈ,其活力仍可满足输精的要求。     

程序降温法冷冻犬细管精液的实验

分别将6条公犬每次采集的精液(每条采6次),按同样的方法稀释、平衡、分装,而后将分装的细管分为两组,分别采用程序Ⅰ和程序Ⅱ进行冷冻,其冻后活率分别为0.47±0.10和0.34±0.05(P<0.01);复苏率分别为57.86±8.85和42.27±3.80(P<0.01);顶体完整率分别为34.47±5.20和29.77±4.37(P<0.01)。结果表明:程序Ⅰ的冷冻效果明显优于程序Ⅱ。     

奶牛冷冻胚胎规模化移植效果研究

为了提高奶牛良种化程度,对奶牛冷冻胚胎的规模化移植效果进行了研究。结果表明:PG二次肌注法的发情率显著高于(P<0.05)PG一次肌注法,两种方法的发情同期率均超过85%,受体牛发情时间多集中在肌注PG后48～72h;胚胎解冻后的复苏率达到82.58%,且早期囊胚与囊胚的复苏率要高于桑椹胚(P>0.05);共移植受体牛218头,受胎97头,受胎率为44.5%,且春、秋季的移植效果差异不显著(P>0.05)。为奶牛冻胚的规模化移植研究提供了参考依据。     

奶牛胚胎移植实用技术的研究

我们于１９９６年至１９９７年进行了奶牛胚胎移植实用技术的研究。三年共移植奶牛胚胎１３７枚,受胎率为３５．７７％,移植Ａ级胚胎的受胎率为７０％,移植Ｂ级胚胎受胎率为４３．０２％,移植Ｃ级胚胎的受胎率为１２．１９％,移植Ａ级胚胎的受胎率比移植Ｂ级胚胎受胎率高２６．９８％;移植Ａ组胚胎的受胎率分别比移植Ｃ级胚胎受胎率有５７．８１％和３０．８３％。