丰香草莓叶片离体再生不定芽的研究

本试验以丰香草莓组培苗叶片为试材,研究了离体再生过程中激素配比、叶龄、放置方式、暗培养等对不定芽再生效率的影响。     

不同处理对丰水梨离体叶片不定芽再生的影响

采用多因素组合试验设计,研究了噻重氮苯基腺(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)浓度组合、外植体类型、叶片放置方式、暗培养时间以及乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对丰水梨离体叶片再生体系建立的影响.结果表明,NN69 TDZ 2.0 mg·L-1 IBA 0.1 mg·L-1处理的叶片再生频率和再生芽数分别达到86.7%和2.92,为丰水梨最佳培养基与植物生长物质组合.同一叶片的基部和中部比顶端更容易产生愈伤并再生形成不定芽.叶片远轴面向下接触培养基比近轴面向下利于叶片不定芽再生.AgNO3质量浓度在0.1～1.5 mg·L-1范围内对离体叶片再生有显著促进作用, NN69 TDZ 2.0 mg·L-1 IBA 0.2 mg·L-1 AgNO3 1.0 mg·L-1以及NN69 TDZ 1.5 mg·L-1 IBA 0.3 mg·L-1 AgNO3 0.1 mg·L-1使丰水梨叶片再生频率均达到100%.     

不同处理对丰水梨离体叶片不定芽再生的影响

采用多因素组合试验设计,研究了噻重氮苯基腺(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)浓度组合、外植体类型、叶片放置方式、暗培养时间以及乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对丰水梨离体叶片再生体系建立的影响.结果表明,NN69+TDZ 2.0 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1处理的叶片再生频率和再生芽数分别达到86.7%和2.92,为丰水梨最佳培养基与植物生长物质组合.同一叶片的基部和中部比顶端更容易产生愈伤并再生形成不定芽.叶片远轴面向下接触培养基比近轴面向下利于叶片不定芽再生.AgNO3质量浓度在0.1～1.5 mg·L-1范围内对离体叶片再生有显著促进作用, NN69+TDZ 2.0 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1+AgNO3 1.0 mg·L-1以及NN69+TDZ 1.5 mg·L-1+IBA 0.3 mg·L-1+AgNO3 0.1 mg·L-1使丰水梨叶片再生频率均达到100%.     

抗生素对梨离体叶片不定芽再生的影响

以沙梨‘金花’和西洋梨‘丰产’两个品种的无菌苗幼叶为试材,研究了卡那霉素、头孢霉素和羧苄青霉素对梨离体叶片不定芽再生的影响。用新梢顶端1～3节新展开的叫‘片制备外植体,分别接种在NN69 BA5mg／L NAA0．3mg／L CH300mg／L的培养墓上,附加不同浓度的抗生素,黑暗处理20d,结果表明：500mg／L的浓度下,头孢霉素完全抑制供试品种叶片的再生;400mg／L的浓度下,羧苄青霉素完全抑制供试品种叶片的再生。丰产和金花对卡那霉素均敏感,5mg／L就极显著的抑制不定芽再生;10mg／L时不定芽不能正常生长,白化死亡,同浓度下供试品种不能分化不定根。     

草莓叶片再生不定芽研究进展

综述了国内外草莓叶片再生方面的研究进展,包括基本培养基的选择,外植体的选择及应用,培养条件、抗生素、激素和其他添加物的影响,以及不定芽发生的细胞组织学观察等内容,并提出了存在问题及今后的研究方向.     

雪蜜草莓不定芽离体再生技术

随着生物技术的飞速发展,利用遗传转化手段改良农作物的品质在很多作物中都得以实现.草莓是一种经济价值较高的水果,但很多草莓品种抗病能力差,且果实采收后不耐贮运,因此利用遗传转化手段改良草莓品种是很有潜力的[1,2].草莓品种雪蜜是江苏省农业科学院园艺研究所选育的草莓新品种,丰产性好,品质优良,适于设施栽培.     

结球甘蓝离体叶片不定芽的再生研究

以结球甘蓝强力50组培苗叶片为外植体,研究不同激素配比、苗龄对其不定芽再生的影响。结果表明,在不含任何激素以及单独添加不同浓度的6-BA或NAA的MS培养基上,均不能诱导外植体不定芽的分化;结球甘蓝离体叶片不定芽在MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.80 mg·L-1分化培养基上再生频率最高,为79.86%,最适宜的苗龄为8 d;外植体在生根培养基1/2 MS+0.30 mg·L-1NAA中,不定芽的生根效果好,生根率达100.0%,且根系生长健壮。     

抗生素对沂州木瓜离体叶片不定芽再生的影响

[目的]研究卡那霉素（Kan）、头孢霉素（Cef）和羧苄青霉素（Carb）对木瓜幼芽嫩叶不定芽再生的影响。[方法]采取沂州木瓜培养新梢嫩叶处理,依次接种在再生培养基及生根培养基上,注入设计浓度的对应抗生素,分析3种常见抗生素Cef、Kan、Carb对沂州木瓜培养新梢嫩叶上不定芽产生的效果。[结果]沂州木瓜对Kan反应极强烈,浓度为5mg/L时,叶片不定芽再生率非常低（2.4%）;浓度为10mg/L时,芽分化被完全抑制,叶柄略有膨大,组织变白,有微量愈伤组织;浓度为15～30mg/L时,叶片既不能形成愈伤组织也不能分化不定芽。Cef和Carb对沂州木瓜叶片生根及生长的作用呈负相关关联,浓度在100mg/L时均同对照差异很小,随着添加浓度的升高,抑制作用则显著表现出来,500mg/LCef或400mg/LCarb即可阻止沂州木瓜新梢嫩叶的愈伤组织出现。[结论]沂州木瓜叶片对Kan敏感,Cef和Carb对木瓜离体培养的影响相似,但Carb抑制再生的作用比Cef强烈。     

几种抗生素对山新杨离体叶片不定芽再生的影响

以山新杨无菌苗幼叶为试材,分别研究了3种选择剂卡那霉素、新霉素、G418和4种押菌剂头孢噻肟钠、头孢唑林钠、头孢曲松钠及羧苄青霉素对山新杨离体叶片不定芽再生的影响。结果表明:浓度为20 mg/L的卡那霉素和浓度为50mg／L的新霉素作为山新杨叶片转化的选择压是合适的,而G418不是山新杨叶片转化的最佳选择剂。在4种押菌抗生素中,头孢唑林钠对不定芽的再生没有影响,但褐化率高,羧苄青霉素抑制不定芽的再生,故二者均不适合作为山新杨遗传转化的抑菌剂;头孢噻肟钠和头孢曲松钠对不定芽的再生影响不大,是山新杨遗传转化的最佳抑菌剂。     

不同培养条件对蝴蝶兰离体叶片不定芽发生的影响

以蝴蝶兰品系RSW1离体叶片为外植体,探讨了基本培养基、6-苄基腺嘌呤(6-BA)和噻重氮苯基脲(TDZ)、暗培养时间及叶片生育期对叶片不定芽发生的影响.结果表明,基本培养基以MS、1/2MS最为适宜,改良Knudson C(改良KC)不利于不定芽发生.TDZ诱导不定芽发生的效果好于6-BA,1.5 mg·L-1 TDZ对蝴蝶兰叶片不定芽诱导率最高,达到60.9%.适当时期的暗培养有利于不定芽的发生,以暗培养21 d效果最好,不定芽诱导率达到74.5%,分化系数达6.90.选择生育期45 d左右的叶片作外植体,可获得较高的不定芽诱导率和分化系数.     

不同培养条件对蝴蝶兰离体叶片不定芽发生的影响

以蝴蝶兰品系RSW1离体叶片为外植体,探讨了基本培养基、6-苄基腺嘌呤(6-BA)和噻重氮苯基脲(TDZ)、暗培养时间及叶片生育期对叶片不定芽发生的影响.结果表明,基本培养基以MS、1/2MS最为适宜,改良Knudson C(改良KC)不利于不定芽发生.TDZ诱导不定芽发生的效果好于6-BA,1.5 mg·L-1 TDZ对蝴蝶兰叶片不定芽诱导率最高,达到60.9%.适当时期的暗培养有利于不定芽的发生,以暗培养21 d效果最好,不定芽诱导率达到74.5%,分化系数达6.90.选择生育期45 d左右的叶片作外植体,可获得较高的不定芽诱导率和分化系数.     

澳洲青苹离体叶片不定芽再生体系的建立

以澳洲青苹试管苗的叶片为外植体诱导不定芽再生,研究不同的BA浓度、TDZ浓度、暗培养时间、叶片放置方式和AgNO3对叶片不定芽再生的影响。结果表明:最适宜的叶片不定芽再生的培养基为MS TDZ 2.0mg/L NAA 0.3 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L和MS BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L,最适的暗培养时间是20 d,在上述2种培养基中澳洲青苹离体叶片不定芽的再生频率分别达到100.0%和91.7%。     

昌红苹果离体叶片不定芽的诱导及植株再生

 以昌红苹果的组培苗为试材,研究建立叶片的离体再生体系。用30~40 d继代的新梢顶部1~3节新展开的叶片作为外植体,分别接种在分化的培养基上,黑暗处理15 d, 昌红苹果叶片不定芽的最高再生率为100%。在6号培养基上,昌红苹果叶片的再生能力最高; 诱导叶片不定芽适宜的培养基为MS+TDZ 1.0 mg /L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖 30 g/L+ 琼脂 5.5 g/L。     

悬铃木叶片不定芽再生

以普通果球和少果球悬铃木为供试材料,建立了叶片不定芽再生体系。结果表明:种子苗于附加IBA0.01 mg/L、ZT 0.10 mg/L及6BA 0.10 mg/L的WPM基础培养基上扩繁,叶片小而多,叶色深绿;取扩繁苗倒1~5叶片外植体,于附加不同浓度6BA、IBA及KT的WPM培养基上,普通果球和少果球悬铃木最高不定芽再生频率分别达59.5%和100.0%,每个外植体长芽数分别近5个和2个。再生所需最佳激素组合因品种而异,普通果球和少果球悬铃木分别为IBA 0.2 mg/L、6BA 2.0 mg/L及KT 0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L、6BA 2.0 mg/L及KT 0.5 mg/L;不定芽及芽点在WPM 0.01 mg/L IBA 0.10 mg/L ZT 0.10 mg/L 6BA伸长培养基上迅速伸长,且株体健壮;在WPM 0.2 mg/L IBA 0.5%活性炭生根培养基上,根系和上部发育较好。     

苹果组培苗离体叶片诱导不定芽分化

以福早红、鲁加3号和鲁加6号3个苹果品种的组培苗叶片为试材,研究了植物生长调节剂、基因型、暗培养、AgNO3对苹果叶片不定芽分化的影响.结果表明:福早红、鲁加3号和鲁加6号3个苹果品种的组培苗叶片分化最佳培养基分别为MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.20 mg/L,MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.10 mg/L,MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.05 mg/L;基因型是决定苹果组培苗叶片分化的重要因素,3个苹果品种叶片分化不定芽的能力从大到小依次是福早红、鲁加6号、鲁加3号;暗培养可以明显促进苹果叶片进行脱分化,提高叶片的分化率,苹果叶片暗培养处理的最佳时间为15 d;AgNO3抑制苹果叶片愈伤组织的形成,不能促进其叶片不定芽的形成.     

结球甘蓝离体下胚轴不定芽再生研究

以结球甘蓝强力50（QL50）和甘19 CMS下胚轴为外植体,研究不同激素配比、苗龄和AgNO3浓度等对其不定芽再生的影响。结果表明,在不含任何激素以及单独附加不同浓度的6 BA和NAA的MS培养基上,均不能诱导外植体不定芽的分化;QL50下胚轴在MS+6 BA 2 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1+AgNO3 6 mg·L-1分化培养基上再生频率最高,为93.0%,最适宜的苗龄为9 d,再生系数为9.17;甘19 CMS在MS+6BA2 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+AgNO3 6 mg·L-1分化培养基上再生频率最高,为73.8%,最适宜的苗龄为6 d,平均再生系数为4.27。外植体在1/2 MS生根培养基中添加0.5 mg·L-1 NAA时,不定芽的生根效果较好,生根率达1000%,且根系生长健壮。     

平邑甜茶与M_7离体叶片不定芽再生的研究

以苹果砧木平邑甜茶(Malus hupehensisRehd)和M7(Malus pumila Var.ParadisiacaSchneid)的组培苗叶片为材料,研究了暗培养、接种方式和植物生长调节剂对叶片不定芽再生的影响。结果表明,适合二者叶片不定芽再生的最佳暗培养时间是14d。平邑甜茶叶片以远轴面向下接触培养基再生效果好,叶片接种方式对M7叶片不定芽再生无显著影响。适合平邑甜茶叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.1mg/L,再生率达93.3%。适合M7叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA4.0mg/L+IBA0.3mg/L,再生率达96.7%。适合平邑甜茶新梢伸长的最佳培养基是MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.03mg/L+GA30.5mg/L,适合M7新梢伸长的最佳培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.05mg/L+GA31.0mg/L。适合平邑甜茶生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L,生根率为86.7%。适合M7生根的最佳培养基是1/2MS+IBA1.0mg/L,生根率为93.3%。     

两个蓝莓品种离体叶片不定芽再生体系的建立

以Sunrise和Geo两个蓝莓品种试管苗叶片为外植体材料,以改良的WPM为基本培养基,研究了暗培养时间、叶片放置方式和不同浓度激素组合（ZT、IBA、TDZ）对2个蓝莓品种叶片不定芽再生的影响。结果表明：最适的暗培养时间为14d,近轴面放置效果最好,不同基因型不定芽再生能力不同,Sunrise品种在WPM＋4．0mg／L ZT＋0．3mg／L IBA＋1．0mg／L TDZ＋20g／L蔗糖＋6g／L琼脂培养基中生长最好,离体叶片不定芽再生频率达100％,再生不定芽数可达4．5个以上;Geo品种最适宜培养基为WPM＋4．0mg／LZT＋0．3mg／LIBA＋20g/L蔗糖＋6g／L琼脂,叶片不定芽再生频率达到100％。     

山新杨叶片不定芽再生系统优化

为山新杨种质资源的利用奠定基础,以WPM为基础,探究NAA和6-BA不同浓度配比对山新杨叶片不定芽诱导的影响。结果表明:在WPM+NAA 0.4mg/L+6-BA 2mg/L培养基上,山新杨叶片的分化率最高,为100%,平均分化芽数为2.60,且多为单株,长势好。在叶片分化率相同的情况下该方法比以往研究方法提前15d获得不定芽。山新杨对卡那霉素和草丁膦的耐受浓度分别为25mg/L和1mg/L,对卡那霉素耐受的临界浓度较以往方法有所降低。