显微注射法制备转基因鼠和转基因猪的技术特点比较

本文采用显微注射技术制作转基因鼠和转基因猪并对其进行比较，阐明了用显微注射方法制作两种转基因动物的技术原理和实验方法。对两者相似点进行了归纳和总结，同时也对两种转基因动物制作过程中的不同之处进行了比较和分析。根据两种不同的实验动物，描述了它们各自不同的实验特点，技术方法和实验要求，本文同时也在理论上和实践中对转基因动物的制作进行了探索。     

利用逆转录病毒侵染技术制备转基因动物研究进展

转基因技术已成为现代生命科学中的一项重要技术,它不仅广泛地用于研究基因的功能,同时也用来快速改变生物的遗传性状。本文简要介绍了利用逆转录病毒侵染技术制备转基因动物的原理,概述了此项技术近年的研究进展。在比较了原核显微注射与慢病毒侵染技术优缺点的基础上,进一步提出慢病毒侵染技术可能成为一种制备转基因动物的较好工具。     

转基因动物培育方法及其应用

转基因动物培育研究是近十年来人们开辟的一个崭新的热门研究领域,是外源基因转移从细胞水平到机体水平的一大飞跃。进入80年代以来,人们应用转基因技术,已将来源于人、动物、细菌和病毒等许多种不同的外源基因导入小鼠、大鼠、兔、羊、牛的生殖细胞,成功地培育出了相应的转基因动物,使得动物的基因操作能以前所未有的规模向前发展。转基因动物已经成为考察发育和发育的基因调节机理、致癌基因的作用和免疫系统内部错综复杂的细胞反应的有效工具。它还可以用来进行动物新种培育以及肿瘤和遗传性疾病防治。一、转基因动物的培育方法1.DNA 的显微注射将外源 DNA 经显微注射直接导入受精卵的雄前核是目前应用最广泛也是最成功的转基因技术。将注有外源基因的受精卵移     

家兔的转基因研究及其应用

自 Palmiter等 (1982)把大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵获得“超级巨鼠”以来，世界各国科学家对家畜的转基因研究产生了极大的兴趣，并相继在兔、羊、猪、牛、鸡、鱼等动物上获得转基因成功。家兔既是常用的实验动物，又是重要的经济动物。从其自然特性来看，转基因家兔的研究与培育，不仅可以促进其自身基因表达和调控的研究，而且能为大家畜的转基因研究提供重要的技术依据。 1家兔的转基因技术 1.1显微注射法 　　显微注射法是采用显微注射仪对受精卵进行注射的一种技术，其基本原理是用精细的显微注射针将外源基因直接注入动物受精卵…     

RecA 蛋白介导的转基因小鼠制备

受精卵原核内核酸酶对外源基因的降解是导致显微注射法制备转基因动物效率低的重要原因之一,RecA蛋白可与单链DNA结合而阻止细胞核内核酸酶对单链DNA的降解。本试验建立了显微注射和RecA蛋白结合制备转基因动物的技术模型,并初步探讨了RecA蛋白对显微注射法制备转基因动物效率的影响。以单链DNA、RecA蛋白与单链DNA的复合体以及双链DNA为外源基因进行受精卵原核显微注射转基因试验,分别获得F0代小鼠28、41和32只,并通过PCR和Southern blot进行了转基因鉴定。结果显示,在小鼠受精卵原核显微注射RecA＋ssDNA复合体获得的F0代中14．6％（6／41）为转基因个体,显微注射dsDNA获得的F0代中转基因个体占6．2％（2／32）,而显微注射SSDNA获得的F0代中无一为转基因个体。     

精子载体转基因法研究进展

精子载体转基因法是以动物精子为载体，并通过显微注射等途径而完成转基因的一种方法。本文就近年来该领域的研究现状、存在的问题等进行了综述，并对其前景做一展望。     

利用牛卵母细胞体外受精技术生产转基因动物

介绍了对利用体外受精技术,尤其是原核显微注射方法生产转基因动物的基本操作步骤及存在的主要问题,旨在原有的基础上进一步加以改进,以提高转基因效率。     

家蚕转基因研究进展

近年来,显微注射和生殖系转化已成为家蚕转基因研究的主流技术与方法.本文简要介绍了近几年来家蚕转基因转座子和启动子选择上的发展以及家蚕转基因在研究家蚕基因功能、生产目的蛋白、改善蚕丝质量与增强家蚕抗病性方面的应用.表明家蚕转基因技术的巨大发展潜力和很高的利用价值.     

转基因小鼠的制备

近二十年来,分子生物学研究获得了长足的发展,而其核心部分基因工程技术的发展尤为突出,特别是转基因动物技术的出现,它不仅为人们研究外源基因在整体动物中的表达调控规律提供了最为有效的手段,而且还可通过改变动物的基因型,使其表现型更符合人类的需要,以培育优良品种及生产人类所需的有生物活性的蛋白质.因此,动物的基因转移这一生物技术已经广泛地应用于生命科学研究的众多领域.所谓转基因动物是指用实验手段将特定外源基因导入动物早期胚胎细胞,由此整合到染色体上,并通过生殖细胞系传递给后代的一类新动物.常见的转基因方法有DNA显微注射法、胚胎干细胞介导法、逆转录病毒转染法、精子载体法、电转移法等,其中以DNA显微注射法最为成熟,使用最广泛、最可靠,该法常用的哺乳动物是实验小鼠.本文所要介绍的就是显微注射法制备转基因鼠所涉及的关键技术和原理(一般程序如图1所示).     

转基因技术在畜牧生产中的应用

80年代早期 ,产生了将外源基因显微注射到受精卵 ,产生携带外源基因的动物品系新技术 ,这种携带有外源基因的动物称为“转基因动物”。随着现代分子生物学技术的发展 ,相继出现了 DNA体外重组、某些重要生产性状基因的分离、基因融合、胚胎体外操作等转基因相关技术 ,并在畜牧生产中得到了广泛的应用。目前已报道的转基因动物有线虫、果蝇、海胆、两栖动物、鱼类、小鼠、猪、牛、羊、鸡、兔等。本文就目前转基因的方法及该技术在提高畜禽生产性能、抗病育种、疾病治疗等方面的应用作一论述。1　外源基因转移方法1 .1　显微注射法　 Jaenis…     

转基因技术在草坪草育种中的应用进展

以转基因技术在草坪草育种中的应用进展为研究对象,参考了国内外相关文献,就转基因技术在草坪草育种中的应用进行了简要的概述,并结合我国实际,展望了转基因技术在草坪草育种中的应用前景。     

PBL模式《小动物透明标本制作与技术改良》建设与教学探索

《小动物透明标本制作与技术改良》课程引入国际流行的PBL(Problem based learning)教学模式,通过教师引导,学生自主学习、讨论制定实验方案,主动动手操作,并总结汇报实验成果的教学流程,探讨小动物透明标本的制作方法及技术改良手段,以及创新性实验课程的开设模式.教学实践表明:基于PBL的实验教学模式不仅...     

精子载体法转基因技术研究进展

精子载体法是以精子作为外源基因的载体,在受精过程中将外源基因导入动物胚胎,从而使外源基因进入子代的基因组中。作者就精子结合外源基因的机制,精子与外源基因结合的方法、影响精子转染外源基因和生产转基因动物的精子因素进行简要介绍,并对发展起来的输精管内注射转染法、曲细精管微注射法和睾丸直接注射法等精子载体转基因新途径进行综述。     

转基因兔的研究进展

本文简要介绍了以ＤＮＡ显微注射法、胚胎干细胞介导法为主,包括其它一些转基因技术的转基因兔的生产方法,着重阐述影响外源基因在受体兔中的整合及性传递的因素,对转基因兔在基础理论研究、动物生产性能改良,建立人类疾病模型及作为生物反应器等方面的应用进行了概括总结。     

转基因山羊研究进展

近年来,动物转基因技术发展日淅完善,在牛、羊、猪等家畜上的应用日益增多.为全面了解山羊转基因技术的研究进展,论文简要回顾了国内外转基因山羊生产的里程碑事件,总结了生产转基因山羊的方法和原理,并对转基因山羊研究状况、应用前景及存在问题进行了较为系统的概括和分析,从而为借助现代生物技术丰富我国山羊育种手段,加快山羊新良种培...     

绵羊羊水干细胞外源基因高效转染及快速筛选方法的建立

试验旨在建立绵羊羊水来源多潜能干细胞(amniotic fluid-derived stem cells,AFSC)外源基因高效转染及快速筛选方法,同时保持其多潜能特性。采用脂质体法,以pCMV-DsRed为报告质粒,转染绵羊AFSC,36 h后,流式细胞仪分析外源基因的瞬时转染效率为69.17%。以浓度为6 mg/mL的G418筛选5 h获得纯化转基因绵羊AFSC单克隆。转基因绵羊AFSC RT-PCR检测表达Oct-4、SSEA-1,体外悬浮培养可形成类胚体。结果表明,转基因标记绵羊AFSC保持了发育全能性的潜能,构建的转基因绵羊AFSC可以示踪性研究其在体内的分化路径和最终宿主。     

转基因疾病动物模型的研究进展

人类疾病动物模型(animalmodelsofhumandiseases)是为阐明人类疾病的发生机制或建立治疗方法而制作的、具有人类疾病模拟表现的实验动物。疾病动物模型对医学发展做出了很大贡献。但是,许多疾病难以用人工诱发的方法制造动物模型,或许多疾病在实验动物身上不发生或仅仅是高等哺乳类动物才发生,因此难以通过自发或人工定向培育的方法获得动物模型。转基因技术的出现,为人类精确地研究基因与疾病的相关关系提供了可能,而且可以在个体发生的每个阶段中使用任何个体进行遗传功能的分析。因此,转基因疾病动物模型的开发成为转基因动物的热点。文章就转基因疾病动物模型的建立制作及应用前景做一综述。     

哺乳动物的克隆技术——哺乳动物克隆的原理、方法、影响因素及存在的问题

哺乳动物细胞克隆是20世纪末生命科学领域最引人注目的高新技术,该技术对于优良种畜的复制、减少试验用动物数目、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培育等方面具有重要意义。近年来克隆技术发展迅速,多种哺乳动物相继克隆成功,但也存在克隆效率太低、克隆动物表型正常而实质异常的问题。作者阐述了动物克隆的基本原理、操作方法及其相关影响因素,提出了解决相关问题的关键。     

非手术法移植牛体外转基因胚研究初报

本文介绍了牛体外胚移植及转基因胚移植的意义;详细阐述了利用非手术法移植牛体外转基因胚胎的技术过程,并对相关问题进行了探讨;移植的结果和经验为进一步研究转基因胚胎移植提供了重要的实践依据和借鉴作用。     

可遗传与非可遗传构件应用与转基因动物食品安全评价介绍

近年来基因工程技术不断发展,转基因生物及其产品如雨后春笋般不断涌现,随之而来的转基因食品安全问题也逐渐引起关注和重视。可遗传与非可遗传构件的应用作为生产转基因动物的方法,其存在的潜在风险与巨大的发展前景共存。作者就可遗传与非可遗传构件应用及与转基因动物食品安全评价的关系进行了介绍和讨论,并对其未来的发展做出展望。