芒(Miscanthus sinensis)再生体系的建立和优化

以芒(Miscanthus sinensis)的幼穗为材料,通过外植体消毒灭菌、愈伤组织诱导、不定芽分化增殖、生根和驯化移栽,建立芒组织培养的快速繁殖体系。结果表明:芒愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+4.0 mg/L 2,4–D+1.0 mg/L 6–BA+0.5 mg/L Cu SO4,愈伤组织诱导频率达99.33%;不定芽分化和增殖的最佳培养基分别为MS+1.0mg/L 6–BA+0.4 mg/L NAA+0.4 mg/L IAA和MS+3.0 mg/L 6–BA+1.5 mg/L PP333+1.0 mg/L CCC,分化率为96%,增殖系数为9.1;生根培养基选用MS+0.5 mg/L IAA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L CCC+0.5 mg/L PP333,生根率达100%;将再生苗移栽至用黄土和营养土配制的基质上,其成活率高达95%,且生长势良好。     

玉米自交系幼胚再生体系建立的研究(英文)

以玉米自交系幼胚为外植体,研究了不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、BA浓度对苗分化和IBA对试管苗生根的影响。结果表明:2,4-D对胚性率诱导有明显影响,其诱导最佳培养基为N6+2,4-D2mg/L+水解酪蛋白(CH)500mg/L+脯氨酸(Pro)500mg/L+AgNO310mg/L;苗分化适宜的培养基是N6+BA0.5mg/L+水解酪蛋白500mg/L;试管苗生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch) Bunge)组织培养再生体系的建立

本研究以膜荚黄芪的子叶、下胚轴、幼茎、幼叶为外植体,诱导愈伤组织及再生芽,建立膜荚黄芪组织培养再生体系。结果表明,子叶是最佳的外植体。在6-BA与2,4-D或NAA培养基组合中,以MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织及芽诱导培养基。黄芪再生植株较难生根,在IAA、IBA和NAA激素培养基组合中,以1/2MS+IBA 2.0mg/L或1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率50%左右。     

沙葱再生体系的建立

【目的】建立沙葱组培快繁体系,为沙葱的规模化生产提供理论依据.【方法】以沙葱茎段为外植体,MS为基本培养基,探讨不同灭菌时间对种子污染率的影响,不同取材季节对沙葱愈伤组织诱导的影响,不同激素配比对愈伤组织、不定芽的诱导及生根的影响.【结果】种子的最佳灭菌时间为10min,污染率为6.7%.春季为沙葱的最佳取材季节,春季的沙葱茎段的出愈率、污染率分别为70.0%、15.7%.在2mol/L 6-BA和2mol/L NAA的激素配比下诱导的茎段出愈率最高,为72.5%,愈伤组织质地疏松;在1mol/L 6-BA和1mol/L NAA的激素配比下不定芽出芽时间12~15d,出芽率76%.在培养基1/2MS+0.5mol/L NAA上的生根率为88.9%、根长4.32cm、根粗0.86mm,为最适的生根培养基.【结论】沙葱种子的最佳灭菌时间为10min,茎段的最适的取材季节为春季,茎段脱分化最佳培养基为MS+2mol/L 6-BA+2mol/L NAA,不定芽最佳诱导培养基为MS+1mol/L 6-BA+1mol/L NAA,最适生根培养基为1/2MS+0.5mol/L NAA.     

马铃薯再生体系的建立

马铃薯再生体系的建立是进行马铃薯遗传转化的前提条件.本研究以马铃薯克新1号为植物材料,对马铃薯愈伤组织的诱导、不定芽的分化进行了最佳培养基优化.结果表明,马铃薯诱导愈伤组织的最佳培养基激素浓度是2.5mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA,且茎段的诱导率要高于叶片的诱导率.不定芽分化的最佳培养基激素浓度为2.0mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA、5.0 mg/L GA3,诱导率为30％,诱导的不定芽在0.2 mg/L NAA生根培养基中可以正常生根.本研究初步建立了马铃薯再生体系,为后续的金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎转基因马铃薯疫苗的制备奠定了基础.     

非洲菊再生体系的建立

以非洲菊（Gerbera jamesonii Bolus）大红花品种花托为外植体,选用MS为基本培养基,附加激素6-BA、NAA和IBA,研究了不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响。结果表明,诱导愈伤时。MS＋6．BA 10mg·L^-1＋NAA0．5mg·L^-1＋蔗糖30g·L^-1 ＋琼脂5．5g·L^-1的效果最佳,培养30d后转接到MS＋6-BA2．0mg·L^-1＋NAA1mg·L^-1＋AD（硫酸腺嘌呤）5mg·L^-1＋蔗糖 30g·L^-1＋琼脂5．5g·L^-1的培养基上诱导芽的分化。增殖培养以MS＋6-BA2．0mg/L＋NAA0．5mg·L^-1＋蔗糖30g·L^-1＋琼脂5．5g·L^-1为佳。生根培养是以1／2MS＋IBA0．2mg·L^-1＋蔗糖30g·L^-1＋琼脂5．5g·L^-1的培养基最好。     

豇豆再生体系的建立

以丰产2号豆角下胚轴、上胚轴、茎段、真叶和顶芽作外植体进行了豇豆再生体系研究,结果表明,豇豆组织培养以愈伤组织诱导培养基和继代培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 2.0 mg/L,不定芽诱导培养基为MS 6-BA2.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,生根培养基为1/2MS 6-BA 0.2 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L较适宜。     

胡萝卜再生体系的建立

以胡萝卜直根系为材料，分别研究了不同培养基、不同外植体及培养条件时愈伤组织诱导的影响．以及培养基时愈伤组织分化的影响。结果表明，在试用的6种培养基中．以2，4-D浓度为0．1mg／L时．愈伤组织状态为最佳；尽管以直根系不同部住为外植体均能诱导产生愈伤组织，但以形成层为外植体时诱导的愈伤组织质量为最佳；愈伤组织的诱导宜在黑暗条件下；培养基种类时愈伤组织的分化率影响不大，且主要以胚状体形式出芽。     

半夏再生体系的建立

【目的】优化半夏再生条件,以获得优质半夏种苗.【方法】筛选出适宜的外植体后,使用3种激素2,4-D,KT,IAA利用正交设计法设置9个处理组对半夏愈伤组织进行诱导.选取长势良好,大小均一的半夏愈伤组织接于4种培养基中进行愈伤组织增殖.选取半夏叶柄诱导出的愈伤组织将其接于5种培养基中进行愈伤组织分化,观察不同培养基对半夏愈伤组织生根和出芽的影响,最后进行炼苗与移栽.【结果】在叶柄、叶片及块茎3种外植体中,叶柄是半夏愈伤组织诱导的最佳外植体;最有利于半夏愈伤组织诱导的培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT+1.0 mg/L IAA;在暗培养条件下,将半夏愈伤组织继代于MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L IAA中生长最快;MS+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA培养基最有利于半夏愈伤组织的生根和出芽.     

甜瓜再生体系的建立

[目的]建立甜瓜再生体系。[方法]以加格达甜瓜为材料,以MS培养基为基本培养基,根据植物生长调节剂对植物愈伤组织的诱导分化的决定性作用,通过设计不同生长素和细胞分裂素的组合与不同浓度配比,研究建立和优化高效的加格达甜瓜再生体系。[结果]愈伤组织诱导培养基:MS+2,4-D 1.5 mg/L+6-BA 0.1 mg/L,出愈率93%;芽诱导培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L,出愈率76%,出芽率100%;芽的分化培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA0.2 mg/L,分化率为95%;芽的伸长培养基为:MS+6-BAI 0.05 mg/L;根的诱导培养基为:MS+IAA0.2 mg/L。[结论]建立了1套甜瓜的离体再生体系,为利用转基因技术培育出具有抗病虫害、抗逆性等优良性状的甜瓜奠定基础,在理论和实践上均具有重要的意义。     

豌豆再生体系的建立

【目的】建立用于豌豆组织培养与转基因的再生体系.【方法】利用植物组织培养的外植体的消毒、接种、脱分化、再分化和生根等方法进行豌豆再生体系的建立.【结果】以‘陇豌1号’为试验材料,其胚轴为豌豆愈伤组织诱导最佳外植体;适宜诱导培养基为MS+1.0mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA;最佳增殖培养基为:MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA;胚轴在MS+0.2mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA培养基中分化率最高,达26.21%,MS+B5+0.5mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA条件下最适宜子叶的分化(14.80%);不定芽在1/2 MS+0.5mg/L NAA下生根率最高,达66%.【结论】‘陇豌1号’的这一再生体系可用于其转基因受体系统的建立和种苗的组培快繁.     

花生再生体系的建立

取4 d龄花生(鲁花14)的胚轴、小叶和成熟子叶为外植体,对其进行离体组织培养研究。结果表明:在培养1个月后,胚轴在MS+8.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上可以诱导产生丛生芽,诱导率达到80%,平均每个外植体可以产生10~20个芽点;小叶在MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上能诱导出胚性愈伤组织,进一步诱导分化形成芽点并伸长;诱导出的丛生芽接种在MS+5mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA+50.0 mg/LAD的培养基上可以扩繁和伸长;花生成熟种子的子叶在MS+20 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0mg/LAgNO3培养基上可直接诱导形成颗粒状、表面光滑、干燥的体细胞胚,每个外植体可以诱导出8个左右的体细胞胚。     

吴屯杨再生体系的建立

以吴屯杨叶片为材料,探讨了不同消毒时间、不同激素以及不同部位叶片对吴屯杨叶片再生的影响,建立了吴屯杨叶片再生体系.试验表明:外植体最佳消毒时间为7 min,叶片分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.15mg/L,抽茎培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.15mg/L+GA(3)1.0 mg/L为最佳,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.2mg/L+NAA 0.03mg/L.     

黑果枸杞(Lycium ruthenicum)组织培养与再生体系的建立

为了探索野生黑果枸杞组织培养与再生体系建立的适宜环境条件,以采自青海省格尔木地区野生黑果枸杞浆果的种子为供试外植体材料,通过制备一系列不同激素与浓度的培养基组,以诱导黑果枸杞组织分化与再生植株的建立。结果表明:(1)黑果枸杞浆果的种子经由8%的次氯酸钠浸种7 min,无菌水泡洗2次,再用浓度为75%的消毒酒精浸种2 min,无菌水泡洗2~3次后浸种后,接种在M3(6-BA 0.0 mg/L+2,4-D 0.0 mg/L+MS)培养基中出苗率为85%。(2)无菌苗茎和叶剪短至3~5 cm后,经过杀菌消毒处理后接种到Y4(6-BA 0.3 mg/L+IAA 5.0 mg/L+MS)最适愈伤组织培养基上,出愈率为86.7%。(3)愈伤组织丛生芽诱导的最适宜培养基为C3(6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+MS),不定芽分化率为80%;不定芽剪段后继续在C3上进行壮苗扩繁培养,成活率为92%。(4)壮苗扩繁后组培苗最适宜生根培养基为G3(NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+1/2MS),植株生根率为41.6%。上述研究结果可为野生黑果枸杞组织苗的工厂化繁育提供参考依据。     

鹿茸再生干细胞成骨诱导(微粒体)培养体系的建立

针对鹿茸再生活体研究周期长、耗资大、对动物损伤大等问题,利用在培养液中加入TGF-β1、地塞米松、抗坏血酸、β-磷酸甘油等对鹿茸再生干细胞进行体外诱导,成功建立了一种鹿茸再生干细胞体外诱导成骨的培养体系,模拟了鹿茸软骨内骨化的生长过程。     

建立甜高粱(Sorghum bicolor)高频、高效再生体系的研究

【目的】建立能源植物甜高粱(Sorghum bicolor L.Moench)的高频、高效离体培养再生体系,为遗传转化奠定基础。【方法】以甜高粱品种凯勒的芽顶端分生组织为外植体,探讨在甜高粱直接诱导丛生芽的培养过程中,无菌实生苗的适合苗龄,适宜的激素组合与比例;并将获得的最佳培养方法应用于其它两个甜高粱品种:M-81E和意达利,以研究此途径的基因型依赖性。【结果】利用3d苗龄的芽顶端分生组织作为外植体容易获得较高的分生组织膨大率。甜高粱丛生芽诱导的适宜激素组合为4.0mg·L-16-苄基腺嘌呤+0.5mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸+0.5mg·L-1噻重氮苯基脲,可获得91%的丛生芽诱导频率。适合甜高粱快速生根的激素配方为0.5mg·L-1萘乙酸。通过芽顶端分生组织直接诱导丛生芽途径,每个外植体可诱导出上百个芽,最终产生30—40株再生苗。M-81E和意达利具有与凯勒相似的丛生芽诱导频率及效率。【结论】本研究成功地建立了甜高粱的高频、高效离体培养再生体系,且具有外植体来源不受限制,基因型依赖性弱,遗传稳定性好的优点。     

龟背竹组培再生体系建立

以茎段为外植体,进行龟背竹组培再生技术研究.结果表明,诱导芽分化最佳培养基为1/2MS+BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.7 mg.L-1,适宜龟背竹芽增殖的培养基为:1/2MS+BA 1.2mg.L-1+NAA 1.1 mg.L-1+KT 0.3 mg.L-1,增殖系数达4.6;试管苗的生根培养基以1/2MS+NAA 1.0 nag.L-1+0.1 96AC组合生根效果最高,生根率达96%.     

黄冠梨叶片再生体系的建立

以黄冠梨试管苗为材料,探讨了不同浓度TDZ与IAA 组合、TDZ与NAA的组合以及6-BA与IAA的组合,以及不同叶片放置方式对黄冠梨再生的影响.结果表明:TDZ与IAA组合诱导叶片再生效果最好,TDZ与NAA的组合优于6-BA与IAA的组合;叶片放置方式对再生率影响不大.在NN69+TDZ 5.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L培养基中暗培养21 d后,叶片再生率最高,平均再生率为77.10%,平均每个外植体再生芽数为5.33个.     

苦豆子再生体系的建立

以苦豆子嫩枝茎段和子叶节作为外植体,接在MS培养基上,加入激素6-苄氨基嘌呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）,建立苦豆子再生体系.结果表明：嫩枝茎段作为外植体,可以分化出芽,但生长缓慢且分化率较低;子叶节作为外植体,愈伤组织状态较好,容易诱导出丛生芽,其中采用MS＋1.0mg/L 6-BA＋0.1mg/L NAA＋0.5mg/L 2,4-D为培养基的效果最佳,芽的分化率高,丛生芽数最高可达到7个.     

绿色草莓再生体系的建立

建立高效、稳定的绿色草莓再生体系是构建其遗传转化体系的基础。本研究以绿色草莓匍匐茎茎尖为外植体,置于不同培养基中进行初代培养获得试管苗。在含有不同配比植物生长调节剂的培养基中对叶龄为30 d的试管苗叶盘进行脱分化处理。以叶盘诱导产生的愈伤组织为试验材料,探究不同植物生长调节剂对愈伤组织产生不定芽的影响。结果表明,最适用于绿色草莓初代培养的培养基是MS+0.2 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg/L赤霉素(GA₃),在此培养基中绿色草莓离体茎尖成活率最高,生长状况最好;诱导叶盘脱分化、愈伤组织再分化和诱导不定芽生根的适宜培养基分别是MS+1.5 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+2.0 mg/L噻苯隆(TDZ)、1/2 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L吲哚丁酸(IBA)和1/2 MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L吲哚乙酸(IAA),其出愈率、再分化率和生根率分别为100%、91.0%、100%。本研究建立了以绿色草莓匍匐茎茎尖为试验材料获得试管苗的组织快繁体系和以叶盘为外植体经脱分化、愈伤组织再分化2个阶段...