鄂梨2号叶片高效再生体系的建立

以早熟砂梨品种鄂梨2号组培苗叶片为外植体,建立叶片再生体系。结果表明,鄂梨2号叶片再生不定芽最佳培养基为NN69+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA,愈伤组织再生率达到100%,不定芽再生率为36.67%;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,增殖系数为2.19;不定芽在1 000mg/L ABT中浸蘸5 s后接种在添加500 mg/L活性炭的1/2MS培养基上,生根率最高,为66.67%;试管苗移栽成活率为84.44%。     

连翘(Forsythia suspensa (Thunb.)Vahl)的试管苗快速繁殖

[目的]连翘是中国常用中草药,也是庭院绿化的常用树种,需求量较大.建立连翘(Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl)的试管苗快速繁殖体系,以期为连翘的大规模栽培育种奠定基础.[方法]以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA与NAA诱导连翘幼茎外植体再生芽的发生;以1/2 MS为基本培养基,添加IAA、IBA或NAA等单一激素,诱导再生芽生根.[结果]结果表明,BA与NAA的比例对于新芽发生有重要影响,NAA的存在通常不同程度导致愈伤组织的发生,当NAA与6-BA比例达到2∶1时,茎段外植体完全脱分化形成愈伤组织.而不含有NAA,即仅含有6-BA单一激素情况下,更有利于芽的发生.对于生根诱导,低浓度IAA或NAA (0.1 mg/L)均不能诱导连翘试管苗生根,高浓度(0.5 mg/L)会导致茎基部先发生愈伤化,之后才有根从愈伤组织处长出.IBA在0.1～0.5 mg/L范围内,均可以诱导90％以上的再生小芽生根.[结论]以连翘的幼茎为外植体诱导连翘的试管苗快速繁殖,MS+6-BA 0.5 mg/L为最佳的芽诱导培养基;1/2 MS+IBA 0.2 mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率达到90％以上.     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

真梅系梅花‘三轮玉蝶’叶片再生体系的初步建立

【目的】初步建立真梅系梅花叶片的再生体系,为真梅系梅花良种培育及叶盘法基因转化等研究奠定基础。【方法】以真梅系梅花‘三轮玉蝶’叶片为试验材料,通过正交试验对外植体处理方法以及愈伤组织诱导、分化和生根培养基进行筛选,探讨真梅系梅花叶片再生的影响因素。【结果】选用梅花‘三轮玉蝶’1年生枝条基部的叶片,背面向上接种并黑暗培养,有益于愈伤组织形成。在培养基1/2MS+TDZ 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L中,叶片愈伤组织诱导率可以达到85.04%;愈伤组织转接在培养基1/2 MS+TDZ 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L中,分化率可达46.44%;分化出的不定芽在添加6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L+NAA 0.3mg/L的1/2MS培养基上诱导生根效果较好,生根率达88.29%。【结论】明确了处理方法和部分外源激素对梅花‘三轮玉蝶’叶片愈伤组织形成的影响,初步建立了梅花‘三轮玉蝶’叶片再生体系。     

罗汉果叶片离体再生快繁技术

以罗汉果叶片为外植体,探讨不同培养方式、不同激素组合对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,以期建立起稳定高效的罗汉果叶片离体再生快繁体系.结果表明:罗汉果叶片在培养基MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.7 mg/L上培养4周,愈伤组织的诱导率在90%以上;罗汉果愈伤组织在培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+TDZ 0.1 mg/L上不定芽的分化率可达70%,平均出芽指数达3.7;罗汉果试管苗在培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L上芽增殖比较稳定,在培养基MS+IBA 0.1 mg/L上培养2周开始分化不定根,生根率在90%以上.     

膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch) Bunge)组织培养再生体系的建立

本研究以膜荚黄芪的子叶、下胚轴、幼茎、幼叶为外植体,诱导愈伤组织及再生芽,建立膜荚黄芪组织培养再生体系。结果表明,子叶是最佳的外植体。在6-BA与2,4-D或NAA培养基组合中,以MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织及芽诱导培养基。黄芪再生植株较难生根,在IAA、IBA和NAA激素培养基组合中,以1/2MS+IBA 2.0mg/L或1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率50%左右。     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

艾纳香的组织培养

以贵州药用植物艾纳香的叶片为材料,MS培养基为基本培养基,探讨影响艾纳香组织培养的因素,为艾纳香的组织培养快速繁殖提供重要的参考依据。结果表明:外植体灭菌组合以0.1%氯化汞8 min+75%乙醇5 s最佳;诱导愈伤组织培养基以MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L最佳,诱导率为88.17%;愈伤组织继代培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最佳;愈伤组织分化为芽的培养基以MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L最佳,以试管苗(由野外艾纳香培育出的完整幼苗)叶片为外植体诱导愈伤组织,其分化率为93%;芽继代培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最佳,平均苗高4.3 cm;IBA有利于艾纳香的无根绿苗生根,以MS+IBA 1.4 mg/L培养基培养,生根率为100%。     

高丛越橘组培快繁技术研究

[目的]探讨不定芽的直接再生方式,建立高丛越橘组培快繁体系.[方法]以高丛越橘‘比洛克西’带腋芽茎段为外植体,在培养基中添加不同配比的ZT、6-BA、NAA和IBA,进行腋芽诱导、不定芽增殖和试管苗生根研究.[结果]消毒处理以0.1％ HgCl24 min为宜,诱导率为68.3％;适宜不定芽继代增殖的培养基为WPM+ZT 2.0 mg/L,不定芽的增殖系数达到11.3;将试管苗转接至生根培养基WPM+IBA0.2 mg/L中,生根率为63.3％,平均每个苗形成4.8条根,根长9.4 mm.当试管苗长至5 cm时出瓶移栽,成活率可达80％以上.[结论]建立了高丛越橘组培快繁体系,为试管苗规模化生产奠定基础.     

激素对菘蓝叶片组织培养的影响

[目的]为提高菘蓝的生产效率、降低其生产成本提供技术支持。[方法]以菘蓝无菌苗的叶片为外植体,利用正交设计研究6-BA和NAA对菘蓝叶片分化的影响。[结果]处理6-BA 1．5mg／L ＋NAA0．6mg／L和6-BA2．0mg/L＋NAA0．2mg／L的不定芽分化率均为93．75％,分化系数分别为40．0和38．75。NAA对叶片分化率的影响最大,其与6-BA的交互作用较强,6-BA的影响相对较小。菘蓝叶片分化的最佳培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA 0．6mg／L。IBA和NAA对菘蓝试管苗生根均有一定的促进作用。单独使用0．1mg／LNAA的生根率迭卯％以上且根的质量较好,而过高浓度抑制生根。IBA对菘蓝生根的促进作用不如NAA,生根率较低且根的质量较差。菘蓝生根的适宜培养基为MS＋NAA0．1mg／L。[结论]该研究为菘蓝的组织培养和快速繁殖奠定了初步基础。     

木本曼陀罗丛生芽的诱导及快速繁殖

以茄科药用植物木本曼陀罗的叶片为外植体,通过一步法再生获得丛生芽及其再生植株,建立了木本曼陀罗的快速无性繁殖体系.结果表明：木本曼陀罗最佳丛生芽诱导培养基为MS＋6-BA3.0mg/L＋NAA0.2mg/L,丛生芽分化率可达91.4%,平均丛生芽倍增数为13.5.试管苗生根培养基以1/2MS＋IBA1.0mg/L最好,生根率高达94.5%.     

木本曼陀罗丛生芽的诱导及快速繁殖

以茄科药用植物木本曼陀罗的叶片为外植体,通过一步法再生获得丛生芽及其再生植株,建立了木本曼陀罗的快速无性繁殖体系.结果表明:木本曼陀罗最佳丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,丛生芽分化率可达91.4%,平均丛生芽倍增数为13.5.试管苗生根培养基以1/2MS+IBA 1.0 mg/L最好,生根率高达94.5%.     

玉米湘农3号幼胚愈伤组织诱导及再生体系建立

以玉米品种湘农3号幼胚为外植体,以MS为基本培养基,研究2,4-D与NAA浓度配比对愈伤组织诱导、KT与IBA浓度配比对愈伤组织分化、NAA与6-BA浓度配比对试管苗生根的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;愈伤组织分化的最适培养基为MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根的最适培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.6 mg/L。     

单瓣长寿花‘萨姆巴’高效快速繁殖体系的构建

选取单瓣长寿花‘萨姆巴’的叶片为外植体,设计正交试验,研究不同种类植物生长激素及其浓度配比的培养基对长寿花叶片愈伤组织的诱导、不定芽的分化和不定芽生根的影响,并研究试管苗炼苗及移栽的成活情况。试验结果表明,诱导长寿花叶片产生愈伤组织的最适培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,诱导率是83.33%。诱导愈伤组织不定芽分化的最适培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增殖系数是21.4。最适的不定芽生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L,生根系数为7.03。试管苗移栽到蛭石∶营养土=1∶1的基质中培养,移栽的成活率可达100%。     

箭杆杨组织培养再生体系的建立

【目的】探讨常温下适宜箭杆杨试管苗腋芽增殖、生根的最佳培养条件。【方法】以MS培养为基本培养基,附加不同浓度的吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)以及6-氨苄基腺嘌呤(6-BA)组成试验培养基,对箭杆杨组织进行培养,观察其生根情况和愈伤组织诱导情况。【结果】箭杆杨脱分化最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA,该条件下的愈伤组织诱导率为90%;不定芽分化诱导培养基为:1/2MS+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L6-BA,该条件下的诱导分化率为67.1%;芽增殖培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA,该条件下的增殖数为5.8;最佳生根培养基为:1/2MS+1.0 mg/L IBA,该条件下的生根率为81.3%。【结论】建立了箭杆杨组织培养再生体系,为其种质资源的试管保存奠定了基础。     

中国石竹叶片愈伤组织形成·分化及植株再生

[目的]为了研究中国石竹叶片愈伤组织的诱导及植株的再生。[方法]通过叶片愈伤组织诱导再分化和叶片直接诱导不定芽2种途径获得了石竹的再生植株。[结果]以植株中部带叶基的叶片愈伤组织诱导再分化效果最好。叶片愈伤组织在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L培养基中不定芽分化率最高(50%～60%)。幼叶在MS+NAA 0.3mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上培养47d可直接诱导出不定芽。与愈伤组织分化成芽相比,幼叶直接诱导不定芽芽数少,但生长快,苗较高。最佳增殖培养基是MS+6-BA 0.2mg/L+IAA 0.2mg/L,最佳生根培养基是1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+0.2%活性碳。[结论]叶片作为外植体具有来源丰富、取材方便、操作简单的优点,探讨植物叶片的再生分化特性具有实际的意义。     

2,4-D等植物生长调节剂对金银花叶片植株再生的影响

以金银花叶片为外植体,研究了2,4-D等植物生长调节剂对愈伤组织诱导和植株再生的影响.结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MB+1.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT,愈伤组织诱导率达91.84%,生长良好;最佳不定芽分化培养基为MB+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA,不定芽分化率达93.33%,且生长旺盛;最佳不定芽生根培养基为1/2MB+2.0mg/L IBA+0.2mg/L IAA,生根率达83.33%,且根较多,苗健壮.试管苗移栽成活率达89.3%.     

杂交构树叶片愈伤诱导及植株再生

以杂交构树试管苗叶片为外植体,探讨了不同植物生长调节剂组合、叶片着生部位、GA3浓度对杂交构树不定芽再生的影响,建立了叶片不定芽再生体系,为今后的遗传转化奠定了基础。结果表明:杂交构树叶片愈伤诱导和不定芽分化的最适培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,愈伤诱导率为100%,不定芽再生率为91.7%;叶片培养最佳取材部位是自试管苗顶端向下伸展叶第l～3片叶;培养基添加0.5mg/LGA3,芽增殖系数高达8.22,芽有一定的伸长生长;附加低浓度的6-BA0.3mg/L,芽明显伸长,长为3.89cm,得到壮苗,可直接用于生根培养;生根培养添加NAA1.0mg/L,诱导生根的时间最短为9d,生根率最高,达86.7%。     

植物生长调节剂对白芦笋花药培养来源试管苗生根诱导的研究

为建立白芦笋单倍体育种技术体系以解决白芦笋新品种资源贫乏问题,以白芦笋花药培养经愈伤组织途径分化而来的绿芽的茎尖为外植体,研究培养基中不同生长素(IBA、IAA、NAA)和植物生长延缓剂(S3307)对白芦笋试管苗生根的影响.结果表明:IBA单独使用可诱导试管苗生根,但有效生根率低;复合使用IBA、NAA和IAA 3 种生长素能提高试管苗的有效生根率;较高培养温度 (25±1) ℃下,在生根培养基中添加植物生长延缓剂S3307 0.1 mg/L,能提高试管苗的有效生根率;白芦笋花药培养来源试管苗适宜的生根培养基为1/2MS KT 0.1 mg/L NAA 0.1 mg/L IAA 0.5 mg/L IBA 2.0 mg/L S3307 0.1 mg/L.     

红掌离体叶片再生途径的研究

本文是以红掌的叶片做为外植体,探讨植株再生途径,以期为红掌组培苗工厂化提供一定的技术储备。通过培养基对比试验研究表明：诱导红掌叶片愈伤组织的理想配方是：1/2 MS＋6-BA2.0 mg/L＋2,4-D 0.5 mg/L,诱导出愈率为64.3%;诱导愈伤组织分化及不定芽增殖的培养基是MS＋6-BA2.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L,分化率达63.3%,增殖系数为4.1,芽苗健壮;最佳的生根培养基为1/2MS＋NAA 0.1 mg/L,生根率达92.2%。