农杆菌浸种法介导中华结缕草遗传转化体系的建立

以中华结缕草萌动种子为转化受体,利用NPT-Ⅱ筛选基因对影响农杆菌介导的遗传转化外部因素进行探索,通过优化转化条件,建立了农杆菌浸种途径介导的中华结缕草遗传转化体系。结果表明：利用催芽6-7d的种子,加入OD600值为0.9的农杆菌浸染菌液（在浸染菌液中添加100μmol.L-1乙酰丁香酮）,附加5min+30s真空处理,振荡浸染48h,共培养3d后,用75mg.L-1卡那霉素筛选能够获得较好的转化效果。通过对卡那霉素抗性苗进行PCR检测和GUS组织化学染色,初步验证NPT-Ⅱ和GUS基因已经整合进植物基因组,阳性转化率为55.21%。     

水土保持优良草种—结缕草

结缕草是禾本科结缕草属的植物。主要分布在中国、朝鲜和日本等温暖地带。结缕草适应性较强,喜温暖气候,喜阳光。耐高温,抗干旱,耐荫。利用它的优势,容易形成单一成片的群落及纯草层。耐瘠薄,耐踩踏,并具有一定的韧度和弹性。在我国不仅是良好的固土护坡植物,还是优良的草坪植物。日本和朝鲜也有广泛分布,北美有引种栽培。但在水土保持方案编制过程中,只有鞍山市岫岩县采用结缕草种作为护坡植物,其它地区却很少有人采用,大概是对结缕草不甚了解。鉴于结缕草的生长优势,建议水土保持方案应多多采用结缕草。     

不同施氮量对结缕草生长及光合荧光特性的影响

研究不同氮肥用量(N 0、3和9 g·m-2)对结缕草生理、光合及荧光特性的影响。结果表明,3和9 g·m-2氮肥均使结缕草地上及地下生物量增加;提高了结缕草叶片叶绿素含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、水分利用率(WUE)、PSⅡ最大光能转换效率(Fv/Fm)、光系统Ⅱ(PSⅡ)的活性(Fv/Fo)、实际光化学量子效率(ΦPSII)、光化学淬灭系数(qP),降低了非光化学淬灭系数(qN)。3 g·m-2氮肥处理效果好于9 g·m-2氮肥处理,对结缕草的生长和发育的促进作用更加明显。     

中华结缕草成熟胚再生影响因素研究

以中华结缕草(Zoysia sinica Hance)成熟胚为外植体,研究了培养基、水解酪蛋白(CH)、水解乳蛋白(LH)、植物生长调节剂等对愈伤组织诱导及其生长的影响,以及不同继代周期对愈伤组织分化及植株再生的影响。结果表明:2,4-D是影响愈伤组织诱导的关键因素;MS无机成分及有机成分含量对愈伤组织生长影响不显著,附加CH 500mg/L利于愈伤组织生长;继代培养次数直接影响胚性愈伤组织的诱导及植株再生;不经继代培养转入分化培养基的愈伤组织植株再生率最高达34.2%,随继代次数的增加,再生率明显下降,继代培养3次的愈伤组织再生率低于10%。     

优良的水土保持植物——结缕草栽培技术要点

结缕草系禾本科多年生草本植物，根系发达，固土能力强，减少地表径流效果显著，抗旱、抗盐碱、抗病虫害能力强，耐瘠薄、耐践踏，不仅是优良的水土保持植物，也是重要的草坪植物，其种子可出口创汇。介绍了结缕草的繁殖、养护、采种等栽培技术。     

农杆菌介导的花生遗传转化体系的优化

以花生胚小叶及其诱导形成的愈伤组织为转化受体,采用农杆菌介导法,通过评估外植体GUS基因瞬时表达率,优化花生遗传转化条件。结果表明,侵染液中添加表面活性剂2-氮吗啉乙烷磺酸(MES)150mg/L或烟草提取物0.5ml/30ml有利于提高胚小叶外植体GUS瞬时表达率;采用针刺法辅助农杆菌介导转化,其胚小叶外植体多点GUS瞬时表达率(29.1%)明显高于未针刺的对照(12.1%);利用愈伤组织作为转化受体,其多点GUS瞬时表达率高达70.1%。利用此优化体系进行花生遗传转化,获得的抗性苗2011年经嫁接、移栽于试验田,PCR检测获得了T0代转基因植株,2012年部分T1代植株也检测出目的条带。     

氮肥对镉胁迫下结缕草光合和叶绿素荧光特性的影响

采用盆栽试验,研究了不同氮肥用量[0、200、300和400 mg/kg CO(NH2)2]对Cd胁迫(50 mg/kg)下结缕草光合及叶绿素荧光特性的影响。结果表明:不同浓度的氮肥均能使Cd胁迫下结缕草叶片叶绿素含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间二氧化碳浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)、光化学猝灭系数(q P)、叶片PSⅡ最大光量子产量(Fv/Fm)及表观光电子传递效率(ETR)有所提高,而非光化学猝灭系数(NPQ)有所降低,说明氮肥对Cd污染具有一定的缓释作用。从结缕草叶片叶绿素(叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a+b)含量、气孔导度、胞间二氧化碳浓度、叶片PSⅡ最大光量子产量及表观光电子传递效率指标来看,以氮肥浓度300 mg/kg缓解作用最大,200 mg/kg次之,400 mg/kg最弱;相对于叶片净光合速率、蒸腾速率、水分利用率(WUE)、非光化学猝灭系数来说,以氮肥浓度300 mg/kg缓解作用最为明显,400 mg/kg次之,200 mg/kg最弱;不同施肥浓度及镉胁迫对结缕草叶片光化学猝灭系数基本无影响(P0.05)。通过本研究得出:施用氮肥对Cd胁迫下结缕草具有一定的缓解作用,当氮肥浓度为300 mg/kg时缓解效果最为显著。     

60Coγ射线辐照对沟叶结缕草的离体诱变效应

分别以0(对照)、5、10、20和40Gy的60Coγ射线辐照沟叶结缕草匍匐茎诱导的胚性愈伤组织,比较愈伤组织的生长和再生情况,测定再生植株的染色体倍性以及脯氨酸含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明:5Gy辐照对愈伤组织的生长、再生没有影响;10和20Gy处理对愈伤组织的再生速度有显著的促进作用,再生分化形成3个以上小苗的外植体比率分别比对照提高12.50%和8.68%;而40Gy辐照使愈伤组织的胚性保持能力和再生率分别下降21.67%和8.78%。不同处理对再生植株的SOD、POD、CAT活性及染色体倍性没有影响;与对照相比,经γ射线辐照的愈伤组织获得的再生植株中脯氨酸含量显著提高,最高可达对照的2.4倍(20Gy)。     

根癌农杆菌介导的向日葵遗传转化体系的建立

采用携带gus和hpt基因双元表达载体pCAMBIA1301的根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105对向日葵（Helianthus annuus）品种新葵杂6号的茎尖分生组织进行遗传转化,以共培养后7 d外植体的gus基因纯合表达频率为指标测定转化率.结果表明,潮霉素适宜的筛选浓度为10mg/L,根癌农杆菌侵染浓度OD600=0.8,果胶酶（0.05%）与纤维素酶（0.1%）共同消化外植体30 min,共培养温度24℃,共培养培养基中添加乙酰丁香酮（ACS）100μmol/L,向日葵茎尖gus基因纯合表达率高达32.8%.对抗性苗进行PCR和Southern blot检测,初步证明T-DNA上的hpt基因已整合向日葵的基因组中.     

沟叶结缕草愈伤组织生长及再生对铜胁迫的响应

为探索不同胁迫对沟叶结缕草(Zoysia matrella[L.]Merr.)愈伤组织生长及再生的影响,以继代了9年的胚性愈伤组织为材料,以MS(murashige and skoog)为基本培养基添加不同浓度的铜(Cu2+),研究其对继代培养中愈伤组织的直径、鲜重增长率和再生培养中的植株再生率,以及愈伤组织及再生植株根和叶的过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性、铜含量、叶绿素含量、丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明,在铜浓度为10.0μM时,愈伤组织直径、鲜重增长率、植株再生率及叶绿素含量均达最大值;愈伤组织可生长和再生的铜的临界浓度分别在300.0~500.0μM、50.0~100.0μM间。经长期处理(12周)的愈伤组织和24周再生的植株叶片和根系中,4种抗氧化活性酶活性和MDA含量在10.0μM下均为最低;经短期处理(10 d)的愈伤组织,SOD、POD、APX的活性及MDA含量持续上升,而CAT先上升后下降。愈伤组织、再生植株叶片和根系中铜含量随培养基中铜浓度的升高而增加。本试验为进一步筛选耐铜突变体提供了试验依据。     

辐照改良水稻淀粉特性的研究

以相似AAC的不同类型水稻 (籼稻、粳稻和杂交稻 )和不同AAC早籼稻品种为材料 ,研究了辐照对淀粉粘滞性、理化品质和淀粉颗粒的影响。研究表明 ,最高粘度 (PKV)、热浆粘度 (HPV)、冷胶粘度 (CPV)、消减值 (SBV)和回复值 (CSV)等 5个RVA谱特征参数随剂量增加均显著下降。辐照明显降低了低AAC品种、糯稻和中等AAC品种的AAC ,但对高AAC品种的AAC影响不显著。辐照对碱消值 (ASV)无影响 ,但最高粘度时间 (PKT)随剂量增加而下降。胶稠度尤其是高AAC的胶稠度 (GC)随剂量增加明显提高。胚乳内淀粉颗粒经辐照处理也有所变形。结果表明 ,辐照可提高稻米食用和蒸煮品质。     

辐照处理对木质包装材料中松墨天牛幼虫发育的影响

研究了60Coγ射线对松材中松墨天牛(Monochamns altevnatusHope)老龄幼虫辐射检疫效应。结果表明,辐照对松墨天牛幼虫的化蛹、羽化能力造成明显影响。当吸收剂量达到400Gy时开始出现畸形蛹,450Gy5、00Gy时,试虫最终化蛹率低于10%,而在450Gy未发生羽化。500Gy、21d后松墨天牛幼虫死亡率高达90%以上。试验表明松墨天牛幼虫死亡率与辐照处理之间符合剂量效应关系。     

辐照对棉铃虫精子传导及产卵反应的影响

本文报道辐照棉铃虫与正常棉铃虫精子传导。棉铃虫的精子传导是一个复杂的过程 ,正常棉铃虫精子传导的失败率为 1 9% ,经 2 50Gy和 40 0Gy辐照后 ,精子传导的失败率分别为 2 1 %和 50 %。精包“帽”定位的异常是精子传导失败的一个重要原因。当棉铃虫雌虫与高剂量辐照雄虫交配后 ,产卵反应表现异常。     

低剂量辐照对淡腌大黄鱼贮藏的影响

为探索伽马辐照对淡腌大黄鱼的保鲜效果,以感官、菌落总数(TVC)、总挥发性盐基氮(TVB-N)和硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)为指标,探讨1kGy低剂量辐照对常温(25℃)贮藏淡腌大黄鱼品质和货架期的影响。结果表明,低剂量辐照处理可延长淡腌大黄鱼的货架期,对照组货架期分别为9和11d,而试验组的货架期可分别延长至16和20d;辐照处理后淡腌大黄鱼的菌落总数显著减少,在贮藏期间试验组数量始终比对照组少;辐照处理可显著减缓淡腌大黄鱼挥发性盐基氮的增加;对脂肪氧化的影响较小。研究结果为海产品辐照商业化应用提供了技术依据。     

山茶花Camellia japonicalL辐射诱变效应

本试验用~(60)Co γ射线处理山茶花的嫩枝插条,1年生小苗和3—4年生植株,研究其辐射敏感性和诱变规律。结果表明,嫩枝插条的适宜剂量范围为1—3krad,成长植株宜控制在2krad以下。不同品种对射线敏感性不同,所引起的花色、花型突变频率亦不同,其辐度在2.5—12.0％。经3年选育,已获得观赏价值高的突变体。     

辐照对卷烟感官品质的影响

为研究辐照处理对卷烟感官品质的影响,以3种市售卷烟为材料,研究辐照对卷烟光泽、香气、协调、杂气、刺激性和余味等感官指标及总体感官评分的影响。结果表明:辐照处理对卷烟单个指标的感官评价有一定的影响,适宜的辐照剂量可以适当改善卷烟的感官品质。卷烟品牌不同,类型不同,经相同剂量辐照后感官品质的变化也不同。同一品牌的卷烟经不同剂量辐照后,单一感官指标评价得分高低与辐照剂量的大小没有明显的关系。总之,卷烟经不同剂量辐照后感官品质的变化有可能满足不同吸烟者对卷烟口感的不同要求。     

甜玉米辐照保鲜研究

用6 0 Coγ射线辐照新采摘的甜玉米 ,研究结果表明 :辐照对可溶性固形物、蔗糖、淀粉和总糖没明显影响 ;淀粉粘滞性随剂量的增大而下降 ;辐照过的甜玉米在室温 ( 2 5± 2℃ )下贮藏 ,保鲜期比对照延迟 7d,其甜、香、味无异常变化     

辐照灭菌对鱿鱼品质的影响

研究了辐照对冻鱿鱼维生素A和E、脂肪酸、蛋白质、氨基酸的影响。结果表明 :VA 、VE含量随辐照剂量的增加而逐渐下降 ,蛋白质、氨基酸有一定变化 ,脂肪酸无明显变化。根据品质因素综合分析确定 ,辐照鱿鱼的适宜剂量为 4～ 6kGy。     

γ辐照对鸡枞菌保鲜的研究

以野生鸡枞菌子实体为供试材料 ,经γ射线 0、0 2 5、0 5和 1kGy的剂量辐照后 ,在 1 4℃打孔自发气调储存。结果表明。辐照抑制了鸡枞菌膜脂的过氧化过程 ,保持了膜结构的完整性 ,延缓了鸡枞菌的衰老过程。其中 0 5kGy辐照处理可得到较好的储藏效果。     

猕猴桃辐照保鲜效果的研究

本文研究了猕猴桃辐照保鲜效果 ,结果表明 ,辐照对果实硬度、Vc含量有显著影响 ,对可溶性固形物、总糖和总酸没明显影响。 0 3～ 1 5kGy的辐照剂量处理可使猕猴桃在室温条件下 ( 2 0± 2℃ )贮藏保鲜期比对照延长 1 3d。