内源性绵羊肺腺瘤病毒基因在蒙古羊染色体上的分布研究

本研究旨在探究内源性绵羊肺腺瘤病毒基因在蒙古羊染色体上的分布情况.参照已登入GenBank中的内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV,登录号为DQ838493)序列,设计合成1对引物,PCR扩增gag基因的部分片段,用地高辛标记制备探针,利用荧光原位杂交(FISH)技术检测enJSRV在蒙古羊染色体上的分布.结果表明,用en-JSRV的gag基因合成的DNA探针在蒙古羊中期分裂相的6条染色体上均有杂交信号,分别为1q45、1p23、2q41、3q23、6q13、9q22和14q25,其中在6和9号染色体上出现有较强的荧光信号.结果提示,在6和9号染色体上这2个位点上有多拷贝的enJSRV基因,1q45、1p23、2q41、3q23、和14q25拷贝数少,这与内源性绵羊肺腺瘤病毒进化有关.     

番红花染色体核型分析

通过对番红花根尖细胞进行染色体常规制片,并进行核型分析.结果显示,番红花为2倍体(2n=2x=24)植物,核型公式为K(2n)=2x=24=2t+2st+8sm+12m,其中,中部着丝粒染色体(m)6对,近中部着丝粒染色体(sm)4对,近端着丝粒染色体(st)1对,端着丝粒染色体(t)1对.核型类型为2B,并且倍性不是...     

藏獒染色体核型分析

采用外周血淋巴细胞培养法和常规染色体分析技术,对青海省藏獒的染色体核型进行了分析。结果表明：藏獒二倍体染色体数目为2n=78,NF=80,按形态可分为39对,除性染色体X和Y为中着丝粒（M）染色体外,其它38对常染色体均为端着丝粒（T）染色体。     

银黑狐染色体的核型

对引入青海省的银黑狐染色体核型进行研究,结果显示：银黑狐二倍体细胞的染色体数目为３４条;不同个体或同一个体的没细胞含有微小的Ｂ染色体,数目范围在１到４个之间;公母狐的核型公式为：♂３４♀３４（Ｍ）＋８（ＳＭ）－Ｂｃｈ（０￣４）ＸＹ（Ｍ,Ｍ）ＸＸ（Ｍ,Ｍ）。狐属食肉目（Ｃａｒｎｉｖｏｒａ）、犬科（Ｃａｎｉｄａｅ）、狐属（Ｖｕｐｅｓ）、狐种（Ｖｕｌｐｅｓ）,赤狐是该物种的代表生物,而银黑儿是赤狐的毛色     

岩羊染色体核型研究

运用常规外周血淋巴细胞培养,火焰干燥染色体制备和核型分析技术,对青海省珍稀野生经济动物岩羊的染色体核型进行研究。结果显示,岩羊的染色体数目为２ｎ＝５４,染色体臂数ＮＦ＝６０;常染色体形态为４个近端（ＳＴ）着丝粒染色体,４８个端（Ａ）着丝粒染色体;性染色体形态为Ｘ是较大的中（Ｍ）着丝粒染色体,Ｙ为最小的中（Ｍ）着丝粒染色体。公母岩羊的染色体核型公式为５４,ＸＹ和５４,ＸＸ。     

顶羽菊染色体的核型分析

用根法压片法对顶羽菊染色体核进行研究的结果表明,顶羽菊是二倍体植物,体细胞染色体数为２ｎ＝２６,染色体基数为１３,染色体组成为２ｎ＝２ｘ＝２６＝２２ｍ＋４ｓｍ,属不对称核型（ＩＢ型）。     

马鹿染色体核型分析

采用常规细胞遗传学分析手段，对青海省西宁动物园饲养的马鹿染色体核型进行分析，结果：马鹿染色体数目为２ｎ＝６８，染色体臂数ＮＦ＝７０（♀）、７１（）；常染色体类型为２条中（Ｍ）着丝粒，６４条近端或端（Ａ）着丝粒；性染色体类型Ｘ为近端（Ａ），Ｙ为近中（ｓＭ）着丝粒；公母鹿核型式为６８，ＸＹ和６８ＸＸ。     

扭黄茅染色体核型分析

以云南干热河谷扭黄茅种子为材料,采用根尖压片法进行染色体核型分析。结果表明:扭黄茅染色体存在2n=20、40、60三种类型,2n=2x=20的扭黄茅染色体核型为2A类型,2n=4x=40的扭黄茅染色体核型为2B类型,2n=6x=60的扭黄茅染色体核型为1B类型。2n=2x=20的扭黄茅进化程度低,属于较原始的类型,其余两个扭黄茅材料属于较进化的类型,表明云南干热河谷中扭黄茅物种内进化程度有差异,种质资源丰富。     

钉螺染色体核型研究进展

近年来,在WHO倡导的血吸虫病二元化防治策略的指导下,对血吸虫中间宿主-钉螺的研究日渐深入。取材问题、秋水仙素浓度、低渗处理时间和染色体的制备方法是成功制备钉螺染色体标本的关键。钉螺染色体核型主要包括染色体的数目和染色体形态。地域差异或者不同地理种群是造成染色体核型差异的主要原因,染色体显带技术的发展,为钉螺染色体核型研究提供了技术基础。论文对钉螺染色体核型研究进行综述。     

凉山半细毛羊、山谷型藏绵羊染色体畸变研究

以凉山半细毛羊、山谷型藏绵羊为研究对象,以微量全血培养法制备染色体,经对大量分裂相的分析结果表明：凉山半细毛羊、山谷型藏绵羊二倍体细胞核型均为公羊2n=54,XY,母羊2n=54,XX;两品种羊染色体数目变异频率分别为33.00%,32.25%;结构变异频率分别为12.00%,17.60%,染色体结构变异主要表现为染色体断裂、染色单体臂断裂及着丝粒处变异等;将染色体或染色单体断裂位点与Ag-NORs特殊位点作比较发现部分位点间存在一一对应情况;同源染色体不等长现象在两品种羊中均有发现,且凉山半细毛羊较山谷型藏绵羊明显。     

蒙古牛MSTN基因多态性研究

针对牛肌肉生长抑制素基因编码区设计引物,以PCR扩增及测序的方法,检测了新疆巴音布鲁克自治区的18头蒙古牛样本.结果显示:蒙古牛肌肉生长抑制素基因编码区含1 128个碱基对,通过比对,在所检蒙古牛样本中,存在1个核苷酸多态位点,含有2种核苷酸类型(C 55.6%和T 44.4%);在该位点上,欧洲牛(T)、瘤牛(C)和牦牛(C)均为单型.说明了蒙古牛与欧洲牛、瘤牛和/或牦牛三者间存在一定的基因交流,但根据本研究无法确定蒙古牛是与瘤牛,还是与牦牛发生基因交流.     

晋中绵羊耳成纤维细胞系建立

以晋中绵羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法,通过原代培养和传代培养对细胞进行了细胞形态学观察、细胞计数和生长曲线的绘制,探讨了细胞体外培养模式.结果:细胞生长总体趋势呈“S”型;建立了晋中绵羊耳成纤维细胞系,细胞系的建立,使晋中绵羊的重要种质资源在细胞水平上保存下来.     

Myostatin基因沉默绵羊成纤维细胞系的建立

旨在获得肌肉生长抑制素( Myostatin,MSTN)基因沉默的成纤维细胞系,为进一步探索Myostatin的调控机理,获得Myostatin的基因沉默的转基因羊奠定基础.针对小尾寒羊Myostatin的基因序列,设计4条siRNA干扰序列,构建pSilencer干扰载体,转染成纤维细胞,采用RT-PCR进行筛选;构建慢病毒干扰载体,包装病毒,感染成纤维细胞,采用流式细胞技术分选阳性细胞,阳性细胞予以测序鉴定并检测沉默效果.结果,获得Myostatin基因沉默效率约90％的RNA干扰片段PSL1,包装病毒获得滴度为1×108的病毒颗粒,流式细胞技术分选得到纯度达99％的Myostatin基因沉默成纤维细胞系.采用慢病毒感染接合流式细胞术分选,能较快获得无抗性标记的转基因阳性细胞系,为培育Myostatin基因沉默的转基因羊及探索Myostatin的调控机理奠定基础.     

家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)染色体DNA的分离纯化

为了获取可供家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)单染色体测序的基础材料,通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术分离家蚕微孢子虫CQ1株系的染色体DNA,随后切取含有目的染色体DNA条带的琼脂糖胶块,分别利用电洗脱法、柱式胶回收试剂盒法及玻璃奶胶回收试剂盒法进行染色体DNA的分离纯化实验。结果显示3种方法均能回收到目的染色体DNA,但分离纯化的效率和样品质量存在差异:电洗脱法对胶块中的DNA损失较大,回收的染色体DNA含量低,而柱式胶回收试剂盒回收的染色体DNA断裂严重,因此这2种方法获得的样品质量均达不到染色体建库测序的要求;通过优化后的玻璃奶胶回收试剂盒法获得的染色体DNA相对完整且污染较少,质量检验分析133μL样品中的DNA质量浓度为8.495 ng/μL(DNA总量1.13μg),达到后续构建染色体测序文库的要求。玻璃奶胶回收试剂盒法不仅适用于家蚕微孢子虫染色体DNA的分离纯化,也可供基因组较小的物种制备单染色体建库测序材料参考。     

甘南藏羊与滩羊等肌肉脂肪酸含量对比分析

甘南藏羊与滩羊脂肪酸含量分析,不饱和脂肪酸含量甘南藏羊高于滩羊（P〈0．05）,饱和脂肪酸低,为评价甘南藏羊肉用品质提供了理论依据。     

滩羊成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

试验以滩羊耳缘组织为材料,采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻保存技术构建了35个滩羊成纤维细胞系,并对其进行了形态学、生长动力学、细胞活力测定、核型分析、微生物检测和荧光蛋白报告质粒(PEGFP-N3)基因转染等生物学特性的研究。结果表明,细胞群体倍增时间(PDT)约为36h,细胞冻存后活力为95.8%,细胞染色体中二倍体(2n=54)占主体,镜检细胞的百分比约为97.5%。细菌、真菌、病毒和支原体检测结果为阴性,该细胞库的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准。     

东佛里生羊、湖羊及东湖杂交羊的泌乳性能比较分析

【目的】本研究旨在探索东佛里生羊、湖羊及东湖杂交羊的泌乳性能。【方法】选取同一养殖场健康东佛里生羊(DF)、湖羊(H)、东湖杂交一代(F1)、级杂二代(F2)各197、313、346、364只。收集其在2020—2021年间的日泌乳量数据,使用六次多项式拟合泌乳曲线,估计泌乳曲线参数;采集奶样,用乳品分析仪测定乳脂、乳蛋白、乳糖、总固形物和尿素氮;对奶绵羊乳房拍照进行形态学描述,测量乳头形态数据,包括乳头长度、乳头间距和乳头直径;麻醉后采集空怀期乳腺组织,制作组织切片,苏木精-伊红(HE)染色后镜检。【结果】东佛里生羊泌乳量显著高于杂交一代(P<0.05),东佛里生羊与级杂二代泌乳量差异不显著(P>0.05),杂交一代与级杂二代泌乳量均显著高于湖羊(P<0.05)。使用六次多项式模型拟合不同杂交代奶绵羊泌乳曲线,拟合度均高于0.90。东佛里生羊、湖羊、杂交一代、级杂二代泌乳高峰日分别为58、18、45与47 d,泌乳高峰日泌乳量分别为2.31、1.27、2.24和1.97 kg。湖羊乳脂含量显著高于其他杂交代奶绵羊(P<0.05),东佛里生羊与杂交一代乳蛋白含量...     

TSA对滩羊成纤维细胞作为供体细胞的作用

为探索成纤维细胞作为供体细胞的潜能和TrichostatinA(TSA)处理供体细胞的适合浓度,提高克隆胚胎的发育水平。本研究分别利用100、50、25、10ng·mL-1TSA处理滩羊成纤维细胞,观察细胞形态,统计细胞活率,利用流式分选技术分析处理前后细胞的周期时相,同时通过间接免疫荧光法检测细胞乙酰化水平,并以经过10～50ng·mL-1TSA处理的成纤维细胞作为供体细胞,检测其重构胚发育水平。结果发现,当TSA的浓度达100ng·mL-1时,细胞大量死亡,不同浓度TSA处理细胞24h后,细胞周期被明显抑制在G0/G1期,乙酰化水平明显高于对照组,其中供体细胞经10ng·mL-1TSA处理的克隆胚胎卵裂率和囊胚率明显升高(P0.05,(85.2±3.4)%vs(68.6±6.7)%,(35.6±5.7)%vs(10.4±8.3)%)。结果表明,经10ng·mL-1TSA处理的滩羊成纤维细胞周期同步化明显,乙酰化维持较高水平,重构胚胎发育水平明显提高,适合作为成纤维细胞的处理方法和浓度。