玻璃化保护液处理下高粱离体花粉的活力解析

为了确立可显著提高高粱花粉体外存活的水性环境条件,设计了离体高粱花粉所处的干燥(CK)、磷酸盐溶液(PBS)、玻璃化保护液1(PVS1)、玻璃化保护液2(PVS2)、玻璃化保护液3(PVS3)等5种环境;采用TTC法,对4种水性溶液体系中浸渍处理15 min后的高粱花粉和干花粉的存活率进行了比较分析。结果显示,各状态下离体高粱花粉存活率大小依次为PBSPVS3PVS2PVS1CK;与PBS中的花粉存活率相比,PVS3对花粉存活率提高不显著,PVS1和PVS2可显著提高花粉存活率。表明水性环境对离体花粉的活力有显著的损伤效果;3种保护液中的甘油、乙二醇、二甲基亚砜、蔗糖等对高粱离体花粉活力有保护作用,其中,含有这4种成分的PVS1对水性环境高粱离体花粉的活力保护效果最好。研究结果有望为水性环境下高粱花粉生殖细胞基因的诱变提供技术支撑。     

不同N-甲基-N-亚硝基脲处理下高粱离体花粉的活力解析

为了确立高粱离体花粉在N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)的常温处理下维持较高活力的适宜条件,通过TTC染色法研究了MNU浓度、处理时间、磷酸盐浓度与p H值对离体花粉活力的影响。结果表明,处理后花粉的存活率与MNU浓度、处理时间呈负相关,随磷酸盐浓度、p H值的增大呈先升高后降低的变化规律;各诱变因素对处理后花粉存活率影响的大小顺序为MNU浓度处理时间磷酸盐浓度pH。当MNU浓度为0.5 mmol/L、处理时间为40 min、磷酸盐浓度为10 mmol/L、p H值为4.8时,受处理花粉的存活率达到约40.0%的最高值。研究结果对于基因水平上高粱种质的创新具有重要意义。     

蜂糖李花粉离体萌发及活力保存研究

【目的】明确蜂糖李花粉活力影响因素和贮藏特性,为蜂糖李花粉的保存提供支持。【方法】以蜂糖李花粉为研究对象,青脆李花粉为对照,采用离体培养萌发法,研究不同质量浓度蔗糖、H_3BO_3、植物生长调节剂(NAA、GA_3和6-BA)以及不同贮藏方式(4℃低温干燥、-20℃冷冻干燥及蔗糖密封保存)对2种李花粉活力的影响。【结果】蜂糖李和青脆李花粉萌发及花粉管生长的最佳培养基组合为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂,在此条件下花粉萌发率分别为53.68%和57.06%,花粉管长度分别为1 554.70和1 353.43μm,均无较大差异。10～30 mg/L NAA能极显著提高蜂糖李的花粉萌发率;但所有NAA处理均极显著抑制其花粉管的生长;不同质量浓度GA_3均可极显著促进蜂糖李花粉的萌发,且20和50 mg/L GA_3可极显著促进其花粉管生长;5～10 mg/L 6-BA能极显著提高蜂糖李花粉萌发率,质量浓度达20 mg/L时会极显著抑制其花粉管伸长。蔗糖密封保存能有效减缓2种李花粉活力的下降速度,延长花粉贮藏时间;贮藏至20 d时,蔗糖密封保存的蜂糖李花粉萌发率(39.54%)分别是4℃低温干燥保存、-20℃冷冻干燥保存的2.11和1.94倍。【结论】蜂糖李最适花粉萌发和花粉管生长培养基组分为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂;GA_3是最适宜的植物生长调节剂,20和50 mg/L GA_3能同时促进蜂糖李花粉萌发和花粉管生长;花粉保存以蔗糖密封保存方式为宜。     

大红火龙果花粉离体萌发条件优化及花粉活力测定方法的筛选

为大红火龙果人工授粉及其丰产栽培、杂交育种及果实品质改良提供参考,采用单因素试验,研究不同培养基组分对花粉萌发的影响,并运用离体萌发法测定花粉萌发率;比较TTC染色法、醋酸洋红染色法、亚历山大红染色法和I2-KI染色法测定大红火龙果的花粉活力,筛选准确测定大红火龙果花粉活力的最佳方法。结果表明：大红火龙果花粉离体萌发最佳培养基组分为Ca(NO3)2﹒4H2O 0.3 g/L + MgSO4﹒7H2O 1.2 g/L + KNO3 0.1 g/L + 15% 蔗糖 + 700 mg/L硼酸 + 1% 琼脂,pH为6.7,此条件下花粉萌发率高,为（43.9 ± 6.27）%,且利于花粉管伸长。醋酸洋红法测定的大红火龙果花粉活力为（37.67 ± 4.18）%,与离体萌发法测定的萌发率无显著差异,为花粉活力的最佳测定方法。     

玉米离体花药培养体系的建立

针对玉米花药培养中长期以来未能解决的诱导频率低、基因型之间差异大的问题，重点探讨了各种因素对玉米花药培养的影响，最终建立一套适合玉米花药培养的诱导频率高的培养体系．     

玉米花粉和花丝活力研究

探讨了在不同温度条件下离体玉米花粉生活力和花丝受粉结实活力保持的时间。结果表明,不同环境下不同基因型材料花粉活力存在显著差异。在低温条件下花粉寿命没有延长;常温条件下花粉寿命在24~48 h。花丝活力能持续到开花期结束后7 d,结实率可达80%以上。     

大红火龙果花粉离体萌发条件的优化及其活力测定方法筛选

为大红火龙果人工授粉及其丰产栽培、杂交育种及果实品质改良提供参考,采用单因素试验,研究不同培养基组分对花粉萌发的影响,并运用离体萌发法测定花粉萌发率;比较TTC染色法、醋酸洋红染色法、亚历山大红染色法和I₂-KI染色法测定大红火龙果的花粉活力,筛选准确测定大红火龙果花粉活力的最佳方法。结果表明:大红火龙果花粉离体萌发最佳培养基组分为Ca(NO₃)₂·4H₂O 0.3g/L+MgSO₄·7H₂O 1.2g/L+KNO₃ 0.1g/L+15%蔗糖+700mg/L硼酸+1%琼脂,pH为6.7,此条件下花粉萌发率高,为(43.9±6.27)%,且利于花粉管伸长。醋酸洋红法测定的大红火龙果花粉活力为(37.67±4.18)%,与离体萌发法测定的萌发率无显著差异,为花粉活力的最佳测定方法。     

胡萝卜花粉离体萌发研究

试验采用离体萌发法对胡萝卜花粉生活力进行检测,结果表明,只有添加PEG配方的胡萝卜花粉才有萌发,而且最佳浓度为100 g/L,硼酸、Ca2+对花粉萌发有促进作用,且过低或过高的浓度会抑制花粉萌发,最佳浓度均为300 mg/L。试验条件下的最佳培养基为100 g/LPEG+0.1 g/LBK。     

高温对玉米花粉活力的影响

采用离体玉米花粉高温处理的方法模拟自然条件下高温对花粉的危害,首先在大田条件下种植郑单958作为材料,在散粉期采粉并对其进行高温处理。共设置3个温度处理(32、35、38℃),5个持续时间处理(5、10、20、30、60min),同时设定常温对照(CK)。研究测定了花粉经高温处理后氯化三苯基四氮唑(Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色率、小花受精率和总结实率,以反映高温对花粉活力的影响。结果表明:温度、处理时间及互作对花粉活力均有极显著影响,32和35℃情况下花粉活力持续时间较长,38℃和处理1h对花粉活力的伤害均较大。随着温度的升高,小花受精率和总结实率总体上呈降低的趋势;3个温度水平下的小花受精率和总结实率均随着处理时间的延长而降低,当温度达到38℃或处理时间为1h时,小花受精率和结实率都很低,反映出极端高温或持续高温对花粉活力伤害很大。     

辣椒花粉的离体萌发试验

以辣椒品种2144的花粉作为实验材料,在研究硼酸和蔗糖浓度对花粉萌发和花粉管伸长影响的基础上,对辣椒花粉的培养基配方进行了优化。选出适合辣椒离体花粉萌发的液体培养基组成成分：Ca（NO3）2 200mg／L＋MgSO4 200mg／L＋KNO3 100mg／L＋H3BO3 100mg／L＋10％蔗糖,得到63．77％的萌发率,花粉管平均长度达到0．361mm。     

茶树花粉的离体萌发研究

选用无性系茶树品种龙井长叶花粉为材料,通过离体条件下花粉的萌发来探讨茶树离体花粉萌发的最适条件及最适保存方法.取蕾白期茶树花苞,干燥15 h后取花粉,以30 mmol/L的MES缓冲液(pH值5.5)为母液配制0.01% H3BO4+0.03% Ca(NO3)2+10% 蔗糖+15% 聚乙二醇4000(PEG-4000)溶液(pH值6.5),作为基本培养基,统计不同组分的浓度、不同pH值和不同碳源对25 ℃处理1 h的花粉萌发率的影响.结果表明,茶树花粉萌发和花粉管生长的最适液体培养基是:0.01% H3BO4+0.05% Ca(NO3)2+5% PEG-4000+5%麦芽糖,pH值在5.0~6.0之间(30 mmol/L MES).在此条件下的萌发率为82.24%,花粉管生长长度为492 μm.     

室内条件下离体玉米花粉生活力保持时间的研究

通过用室内水培法采集花粉并在室内条件下保存一定时间，尔后用于田间授粉的方法，研究了花粉在室内条件下生活力保持时间。结果表明，豫北地区室内条件下，离体花粉生活力可保持全天不明显降低，即上午8点散落的花粉在下午6点30分仍具有正常授粉能力。     

马铃薯花粉离体培养影响因子分析

以马铃薯优良四倍体栽培种‘唐113’、‘陇薯3号’和‘甘农薯1号’为材料,对不同发育时期的花粉进行了离体悬浮培养.结果表明,培养前将材料于4~7℃低温下处理7 d或0.3 mol.L-1甘露醇中饥饿处理3 d均取得了较好的培养效果,花粉分裂频率分别达到13.2%和13.6%.马铃薯单核期花粉具有孢子体发育的巨大潜力,分裂频率高于其他发育时期的花粉,其中‘唐113’脱分化率达4.1%,是马铃薯花粉诱导愈伤组织和再生植株培养的适宜时期;不同品种花粉离体的脱分化频率表明马铃薯花粉培养存在基因性依赖.     

球果堇菜花粉离体萌发的研究

以球果堇菜为试材,研究了不同浓度蔗糖、硼酸及柱头提取物的液体培养基对花粉离体萌发的影响,筛选出适合花粉萌发的最适培养基,并对20℃、4℃、-20℃三种条件下贮藏的花粉生活力进行了研究,结果表明:添加10%蔗糖、15 mg/L硼酸的液体培养基,花粉萌发率最高,达到89.53%。柱头提取物对球果堇菜花粉萌发影响不大。球果堇菜花粉的生活力随贮藏时间的延长逐渐下降,4℃下贮藏的花粉生活力最高。     

玉米离体孤雌生殖研究

针对玉米离体孤雌生殖培养中未能解决的诱导率偏低等问题，以黑龙江省18份玉米杂交种或杂交组合为试验材料，将未授粉雌穗接种在9种诱导培养基上，对影响其离体孤雌生殖诱导率的培养基及不同材料之间子房膨大率与结实率等进行了研究．结果表明，筛选出的玉米离体孤雌生殖最佳培养基为B，成份为：MS＋2，4-D 1mg／L＋NAA 1mg／L＋KT 1mg／L＋LH 200mg／L＋cokchicine 2mg／L＋MET 1mg／L＋sucrose 5％＋agar 0．8％；不同材料之间子房膨大率及结实率均有显著差异，变幅分别为2．4％～16．7％和0％～2．67％．61％的材料能诱导结实．当培养50-60d后，从牡20—618、牡342、牡21—178、牡21—257的未授粉子房直接培养再生出4颗小植株．     

油茶"三华系列"花粉活力测定及花粉保存

【目的】为筛选"三华系列"(‘华硕’、‘华金’、‘华鑫’)花粉活力适宜的检测方法及贮藏条件。【方法】研究采用FDA荧光染色法,I2-KI法以及离体萌发法研究不同贮藏温度(室温,4℃,-30℃,-80℃)条件下"三华系列"(‘华硕’、‘华金’、‘华鑫’)的花粉活力。【结果】(1)3种检测方法所得"新鲜花粉"活力值各不相同,其中I2-KI法检测花粉无活力,采用FDA荧光染色法和离体萌发法测定的花粉生活力值差异显著。‘华鑫’的新鲜花粉活力最高,‘华硕’次之,‘华金’花粉活力最低;(2)低温有利于花粉贮藏,花粉活力随贮藏时间的延长总体呈下降趋势。"三华系列"花粉品种间的适宜贮藏温度基本无显著差异,室温条件下,"三华系列"花粉活力下降速度最快,贮藏时间最短。室温下贮藏至13周后,"三华系列"花粉完全失去活力。4℃贮藏条件下,贮藏至第5周时,"三华系列"花粉活力40%～70%;-80℃适宜于花粉的长期贮藏(26周),其贮藏效果优于-30℃,贮藏至第26周时花粉活力在30%～40%,近似为-30℃贮藏条件下的2倍,花粉活力;(3)在通过对FDA荧光染色法与离体培养基法两种花粉活力检测方法进行相关性分析,发现FDA荧光染色法在4种不同贮藏温度下的测定结果与离体培养法有极显著强相关,相关系数大于0.9。【结论】I2-KI法不适宜作为油茶花粉活力检测方法,而FDA荧光染色法可作为跟踪和测定油茶花粉活力变化的方法来表征油茶花粉潜在活力,是开展授粉工作前快速检测花粉活力的好方法;低温有利于油茶花粉的贮藏,短期内(5周)贮藏"三华系列"花粉最适宜条件是4℃低温贮藏,"三华系列"花粉活力在40%～70%;长期(26周)贮藏"三华系列"花粉的最适宜条件是-80℃低温冷冻贮藏,花粉活力在30%～40%。     

鉴定玉米花粉活力4种方法的比较

玉米是一种重要的粮食作物。玉米花粉活力鉴定是玉米遗传育种研究的一个重要方面,它不仅关系到商用杂交种的生产,而且与玉米种质资源的保护密切相关。主要对现在4种经常应用的玉米花粉活力鉴定方法进行了比较。结果表明,花粉体外萌发的方法要优于化学染色的方法。在2种花粉管液体培养基的比较中,含有较多蔗糖但是没有氨基酸的培养基（处理Ⅰ）优于虽然含有氨基酸但是蔗糖含量较少的培养基（处理Ⅱ）。尽管蔗糖和氨基酸在花粉萌发的过程中都发挥了重要作用,但是氨基酸的重要性要低于蔗糖。     

火焰无核葡萄花粉离体萌发试验

以欧洲葡萄火焰无核的新鲜干燥花粉为试验材料,在不同浓度蔗糖、硝酸钙和硼酸单因素试验基础上开展正交试验,研究不同培养基对花粉的离体萌发和生长的影响,以筛选适宜火焰无核葡萄花粉离体萌发的培养基。结果表明:蔗糖对火焰无核葡萄的花粉离体萌发和花粉管生长的影响效果最大,硼酸的影响效果略差于蔗糖,最后是硝酸钙,其影响效果最小;花粉萌发的适宜培养基是:蔗糖250g·L-1+硼酸0.08g·L-1+硝酸钙0.05g·L-1,萌发率达到22.22%。     

广西姜花花粉离体萌发培养基的筛选

[目的]为广西姜花花粉离体萌发筛选出最适培养基。[方法]以原位萌发测定为对照,在正交预试验的基础上,通过单因素试验筛选出广西姜花花粉离体萌发的最适培养基。[结果]蔗糖浓度为10.000%时,广西姜花花粉的离体萌发率最高,为22.45%。当硼酸浓度为0.010%和0.050%时,广西姜花花粉的离体萌发率分别为35.58%和37.42%。当氯化钙的浓度为0.010%时,广西姜花花粉的离体萌发率为38.49%。在0.010%～0.200%浓度范围内,广西姜花花粉的离体萌发率随着氯化钙浓度的升高而下降。广西姜花花粉离体萌发的最适培养基为:10.000%蔗糖+0.050%硼酸+0.010%氯化钙+2.000%琼脂,pH=7.0,培养温度为20℃。在筛选出的培养基上,通过花粉离体萌发测定的花粉萌发率为46.00%。采用花粉原位萌发测定法测定的花粉萌发率为50.00%。[结论]利用筛选出的培养基能够快速准确测定出广西姜花的花粉活力。     

唐菖蒲花粉离体萌发的液体培养基研究

以唐菖蒲栽培品种"粉友谊"的新鲜花粉为试验材料,采用花粉离体培养法,研究蔗糖、H3BO3、CaCl2所组成的基本培养基配方不同组分浓度对唐菖蒲花粉萌发率的影响,并在此基本培养基配方的基础上,研究Mg2+、Zn2+、Fe3+、Cu2+和K+离子对花粉萌发的影响.蔗糖、H3BO3、CaCl2单因子和正交试验结果表明,蔗糖和H3BO3对唐菖蒲花粉萌发有显著影响,蔗糖是花粉萌发的必需物质.低浓度的Mg2+、Fe3+和K+对花粉的萌发有促进作用.离子浓度过高对花粉萌发产生抑制作用.而Cu2+、Zn2+在所设定的浓度范围内均表现出抑制作用.唐菖蒲花粉培养液最适配方:蔗糖100 g·L-1+H3BO3100 mg·L-1+CaCl2150 mg·L-1+Fe2(S04)350 mg·L-1+KNO350 mg·L-1+MgSO4·7H2O 100 mg·L-1;最适培养温度为25℃,且光照、黑暗的环境条件对花粉萌发无显著影响.