抗褐化剂对荻外植体褐化和愈伤组织生长的影响

以荻(Miscanthus sacchariflorus)幼穗和诱导出的愈伤组织为材料探讨抗褐化剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、抗坏血酸(Vc)、柠檬酸(CA)对外植体和愈伤组织抗褐化作用,以及愈伤诱导率及愈伤生长速度的影响。结果表明,3种抗褐化剂都能抑制外植体和愈伤组织褐化,并提高愈伤组织诱导率。添加0.2g/L PVP时荻外植体的褐变程度最低,0.2g/L CA时愈伤组织诱导率最高,为91.1%,向愈伤组织继代培养基中添加0.2g/L的Vc愈伤组织重量增加倍数最高,为21.38倍,且愈伤组织褐化率低为25.8%。     

仙客来愈伤组织的诱导及其抗褐变的研究

该试验以仙客来的叶片、叶柄、花梗为外植体,分别以MS为基本培养基,并添加了不同种类和浓度的植物生长激素,对其进行愈伤组织的诱导.另外,还初步研究了活性炭(AC)、VC、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和黑暗培养对仙客来外植体抗褐变的作用.结果表明,以叶片为外植体诱导效率最高,叶柄、花梗次之.叶片愈伤组织诱导的最适培养基为1/2MS 6-BA 2.0 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L KT 0.25 mg/L;叶柄愈伤组织诱导的最适培养基是MS 6-BA 0.2mg/L NAA 2.5 mg/L;花梗愈伤组织诱导的最适培养基是MS 6-BA 0.2 mg/L 2,4-D0.5 mg/L.5种抗褐化处理方法中黑暗培养抗褐化效果最好.     

不同消毒方式对假俭草种子愈伤诱导的影响

为确定假俭草(Eremochloa ophiuroides)再生体系中种子外植体的消毒方式,经过预备试验后共设计A,B,C,D 共4组2系列8种消毒方式。A1:3.5%次氯酸钠消毒25 min,A2:浓硫酸灼烧30 s+3.5%次氯酸钠消毒20 min,B1:7%次氯酸钠消毒20 min,B2:浓硫酸灼烧30 s+7%次氯酸钠消毒20 min,C1:0.05%升汞消毒20 min,C2:浓硫酸灼烧30 s+ 0.05%升汞消毒15 min,D1:0.1%升汞消毒15 min,D2:浓硫酸灼烧30 s+ 0.1%升汞消毒10 min。结果表明:A2的愈伤诱导效果最好,达到52%;D1的愈伤诱导率最低,仅17.33%,其他处理的愈伤诱导率介于二者之间。发现浓硫酸灼烧假俭草种子30 s,可显著提高出愈率;试验证实消毒剂次氯酸钠比升汞有利于假俭草种子的愈伤诱导。     

几种因素对日本结缕草愈伤组织诱导与生长影响的研究

研究了基本培养基、碳源、营养添加物、pH值、固化剂等几种因素对日本结缕草‘Qingdao'和‘Zenith'两个品种成熟种子为外植体诱导愈伤组织的影响.结果表明蔗糖作为碳源、pH值5.4～6.0、以植物凝胶或脱乙酰吉兰糖作为固化剂有利于日本结缕草愈伤的诱导与生长,NMB培养基、NB培养基分别有利于Zenith及Qingdao胚性愈伤的形成;而营养添加物的加入虽可提高愈伤诱导率,却导致胚性愈伤率的下降.同时,根据愈伤组织生长曲线得出,愈伤组织最适继代周期为24～33天.     

几种因素对日本结缕草愈伤组织诱导与生长影响的研究

研究了基本培养基、碳源、营养添加物、pH值、固化剂等几种因素对日本结缕草‘Qingdao’和‘Zenith’两个品种成熟种子为外植体诱导愈伤组织的影响。结果表明:蔗糖作为碳源、pH值5.4～6.0、以植物凝胶或脱乙酰吉兰糖作为固化剂有利于日本结缕草愈伤的诱导与生长,NMB培养基、NB培养基分别有利于Zenith及Qingdao胚性愈伤的形成;而营养添加物的加入虽可提高愈伤诱导率,却导致胚性愈伤率的下降。同时,根据愈伤组织生长曲线得出,愈伤组织最适继代周期为24～33天。     

日本结缕草愈伤组织的诱导和植株再生

以日本结缕草Zoysia japonica Steud的成熟种子为外植体进行了胚性愈伤的诱导与植株再生,结果表明:种子经去皮预处理后,含2.0 mg/L 2,4-D的MS基本培养基能成功诱导去皮种子产生愈伤组织,愈伤组织诱导率高达87.1%。愈伤组织在继代过程中共产生4种不同的类型。1/2 MS中添加0.4 mg/L KT或添加1.0 mg/L KT和1.0 mg/L NAA均能有效促进胚性愈伤的分化,分化率分别为63.8%、66.0%。     

扁穗牛鞭草组织培养中褐化控制技术初探

以雅安’扁穗牛鞭草（Hemarthria compressa cv.Ya’an）幼茎诱导的愈伤组织为试验材料,探讨了3种抗褐化剂[活性炭(AC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、抗坏血酸(Vc)],以及不同继代培养周期和培养温度对扁穗牛鞭草愈伤组织褐化控制及愈伤组织生长状况的影响。结果表明,向培养基中添加AC和低浓度的PVP能有效降低褐化率并促进愈伤组织的生长,其中以2.0 g·L-1AC的效果最好,1.0 g·L-1 AC和1.0 g·L-1 PVP的效果次之,Vc抗褐化性能较差;以10 d为一个继代培养周期,愈伤组织的褐化率最低;培养室温度控制在（23±2）℃左右,既可有效降低愈伤组织的褐化率,又不影响愈伤组织的生长。     

蒙农红豆草愈伤组织诱导及植株再生的研究

采用MS为基本培养基,对内蒙古地区特有的红豆草品种蒙农红豆草(Onobrychis viciifolia Scop.cv.mengnong)的种子进行不同预处理,统计在不同培养基培养下供试材料种子的萌发率,并在出苗后对红豆草幼苗各外植体(下胚轴、子叶、幼茎、叶片)在不同激素配比培养基中进行组织诱导培养,最终确定理想的培养基激素配方并获得红豆草再生植株。研究结果表明,在1/2MS培养基中种子的萌发率高于MS培养基,并在4℃冷藏预处理下其萌发效果最佳,萌发率达94%。不同激素配比对不同外植体的愈伤诱导和芽分化的效果有所差异。附加MS+2,4-D 2mg/L+6-BA 1mg/L+KT 1mg/L培养基下胚轴整体出愈效果最好,愈伤组织诱导率为86%;附加MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 2.0mg/L培养基有利于芽的分化,分化率为24%。外植体出愈顺序为:下胚轴>子叶>叶片>幼茎。     

假俭草侧芽愈伤诱导和植株再生

以中国优良品系Ｅ １２６假俭草的侧芽为外植体建立高效的再生体系。试验结果显示,１）适宜于侧芽生长的培养基为ＭＳ＋ＢＡＰ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．８ ｍｇ／Ｌ;２）在最佳诱导培养基ＭＳ＋２,４ Ｄ１．０ ｍｇ／Ｌ＋ＢＡＰ０．１ ｍｇ／Ｌ上,侧芽愈伤诱导率达９３％。较强的光照能提高愈伤组织的诱导率;３）在最佳分化培养基ＭＳ＋ＫＴ２．０ｍｇ／Ｌ 上,绿苗分化率为１２．６％;４）试管苗最佳生长培养基为ＭＳ＋ＢＡＰ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．８ ｍｇ／Ｌ;５）在最佳生根培养基ＭＳ＋ＮＡＡ０．６ｍｇ／Ｌ 上,试管苗的生根率达９８％,植株移栽成活率为９４％。本试验为假俭草体细胞筛选和遗传转化提供依据。     

紫花苜蓿花药愈伤组织和幼苗诱导技术的研究

在不同时期、不同花药低温预处理时间及热激处理、不同培养基、不同激素浓度组合、不同培养条件下对苜蓿花药进行了培养,结果表明：9月份较7月、8月份选取的花药愈伤组织诱导率高;花药低温预处理24～48h较72h处理对愈伤组织诱导的效果好,低温预处理与热激处理相结合比单用低温预处理其花药愈伤组织诱导率高;NB培养基对愈伤组织的诱导效果比B5培养基好,2,4-D浓度0.5～2.0mg/L、NAA浓度0.1～1.0mg/L、6-BA浓度0.5～1.0mg/L、KT浓度1.0～3.0mg/L都能诱导出愈伤组织,其最佳的浓度组合为NB＋2,4-D 0.5mg/L＋NAA 0.2mg/L＋ 6-BA 0.5 mg/L＋KT 3mg/L;暗培养结合光照培养较直接光照培养愈伤组织诱导率低,但绿苗率较高.     

外植体及氮源对甘草愈伤组织诱导的影响

研究了不同外植体及氮源浓度对甘草(Glycurrihiza uralensis)愈伤组织诱导的影响。在相同激素配比条件下,采用组织培养方法比较根、茎、子叶、下胚轴对愈伤组织诱导和生长的影响。结果表明,在不同外植体中,下胚轴愈伤组织平均诱导率最高,且出愈时间最早,褐化率最低,是形成愈伤组织的最佳材料。在特定的激素浓度条件下,不同浓度的氮源对下胚轴愈伤组织的诱导和生长有显著的影响,较低和较高浓度的氮源均不利于愈伤组织的生长,适宜于愈伤组织诱导和生长的最佳氮源浓度为60 mmol·L-1。不同外植体和氮源浓度是影响甘草愈伤组织诱导和生长的重要因素。     

应用正交设计优化紫花苜蓿愈伤组织诱导的激素配比

以MS＋2,4-D（2．0mg／L）为基本培养基,附加NAA、6-BA和KT3种植物激素,采用正交试验设计法研究不同浓度激素配比对和田苜蓿,秘鲁苜蓿和甘农3号苜蓿下胚轴愈伤组织诱导的影响。结果表明：对于秘鲁苜蓿和甘农3号苜蓿,最适愈伤组织诱导的培养基均为MS＋2,4-D（2．0mg／L）＋6-BA（0．5mg／L）＋NAA（1．0mg／L）,各因素影响程度为6-BA〉NAA〉KT。对于和田苜蓿,最适愈伤组织诱导的培养基为MS＋2,4-D（2．0mg／L）＋6-BA（1．0mg／L）＋KT（1．0mg／L）＋NAA（1．0mg／L）,各因素影响程度为6-BA〉KT〉NAA。     

外源激素对掌叶大黄愈伤组织诱导及种苗生根的影响

以掌叶大黄无菌苗为材料,研究不同外源激素浓度及配比对试管苗生根、愈伤组织诱导及增殖的影响。结果表明:掌叶大黄的根、茎、叶均可作为诱导愈伤组织的材料。2,4-D诱导愈伤组织的能力明显高于NAA,以2～3mg/L 2,4-D的诱导频率较高为87.93%～93.11%,诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+2mg/L NAA+2mg/L 2,4-D+2mg/L 6-BA;6-BA对愈伤组织诱导频率无直接影响,但明显影响愈伤组织的增长量及生长状态。愈伤组织继代增殖以MS+0.5mg/L 2,4-D+1mg/L NAA+1mg/L 6-BA最好;MS+0.5mg/L IBA适宜于试管苗生根。     

影响草地早熟禾愈伤组织诱导和分化的相关因子研究

以草地早熟禾品种午夜2号,新格莱德和橄榄球2号种子为外植体,采用不同温度及浸种时间处理后进行愈伤组织的诱导和分化培养。结果表明:4℃浸种16～24h可以促进愈伤组织形成,不同品种间差异不明显;午夜2号和橄榄球2号继代1次的愈伤组织分化能力最强,新格莱德继代2次的胚性愈伤组织分化率最高。     

外源激素对紫穗狼尾草愈伤组织诱导及分化的影响

以紫穗狼尾草(Pennisetum alopecuroides)幼芽基部为外植体,研究了外源激素对其愈伤组织诱导及分化的影响,筛选适宜的激素种类及浓度配比,为狼尾草无性系抗性育种奠定基础。结果表明,2,4 D对愈伤组织诱导的作用最显著,生长素NAA和KT的作用相近,均以0.5~1.0 mg·L-1为宜;NAA对愈伤组织分化的作用较明显,以0.5~1.0 mg·L-1与3.0 mg·L-16 BA配合效果最佳,KT的作用不明显。最佳诱导培养基为MS+2,4 D 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1 +KT 1.0 mg·L-1;最佳分化培养基为MS+NAA 0.5 mg·L-1 +6 BA 3.0 mg·L-1。     

苏丹草干物质积累及养分吸收规律的研究

在田间试验的条件下研究了苏丹草Sorghum sudanense干物质积累及养分吸收规律.结果表明,苏丹草干物质积累量随着生长进程不断增加,出苗后39～62 d,干物质量增加最快,占干物质总量的35.4%,日积累量也最大,为335.59 kg/(hm2·d).试验条件下,苏丹草鲜草产量为190.00 t/hm2,需吸收N 489.9、P2O5 122.4、K2O 585.3、Ca 106.6、Mg 38.3 kg,N:P2O5:K2O:Ca:Mg为1:0.25:1.19:0.22:0.08;需吸收Fe 6 364.6、Mn 1 383.9、Cu 236.2、Zn 1 498.0 g,N:Fe:Mn:Cu:Zn为1 000:13.0:2.8:0.5:3.1.养分吸收量和比例可作为苏丹草合理施肥依据.     

高粱EST-SSR标记的建立及其在苏丹草中的应用初探

从NCBI中下载了202 325条高粱Sorghumbicolor EST序列。去除低质量和冗余的序列后,在5 661条高粱EST中共发掘出了6 663个SSR位点,出现频率是20.19%,平均分布频率是1/3.93 kb。在5 197条EST序列中,共有3 446条序列能够设计引物,占总数的66.3%。在高粱EST-SSR中,三核苷酸重复是主要的重复类型,出现最多的重复基元是GGC/GCC。在3 446对高粱EST-SSR引物中,随机选择了20对引物进行了合成。以苏丹草Sorghumsudanense722和高粱Sorghumbicolor TX623A为模板,用这20对引物进行PCR扩增,结果全部可以扩增出条带,可用率为100%,有差异的有4对,多态性比率为20%。研究结果证明了根据高粱EST建立SSR标记是有效、可行的。     

AgNO3对刺梨愈伤组织酚类物质含量及酶活性的影响

【目的】抑制刺梨愈伤组织的褐化是刺梨再生体系成功建立的前提。【方法】以‘贵农1号’、‘贵农2号’、‘贵农5号’、‘贵农7号’刺梨叶片愈伤组织为试材,研究不同AgNO3浓度对愈伤组织褐化的影响,比较不同基因型的褐化程度,并对愈伤组织总酚含量、过氧化物酶及多酚氧化酶活性进行动态分析。【结果】结果表明：AgNO3浓度为0.4g/L时,4个基因型叶片愈伤组织褐化率均最低,其中对‘贵农5号’抑制褐化效果最佳,褐化率仅为1.29%。培养10、20、30天,叶片愈伤组织总酚含量及多酚氧化酶活性均随AgNO3浓度的增加先降低后升高;过氧化物酶活性则先升高后降低。以培养20天、0.4g/L处理时褐化程度最轻,总酚含量、多酚氧化酶活性最低;过氧化物酶活性最高,分别为139.32mg/L、17.76U/g、49.00U/g。刺梨叶片愈伤组织总酚含量、多酚氧化酶活性与褐化率呈极显著正相关;过氧化物酶活性与褐化率呈极显著负相关。【结论】该试验确定了AgNO3抑制刺梨叶片愈伤组织褐化的最佳浓度,并通过相关指标进行了验证,为刺梨离体再生体系的建立奠定了基础。