通过花粉管通道法导入红树总DNA获得耐盐紫花苜蓿T0代植株及其RAPD验证

利用花粉管通道法将盐生植物红树总DNA导入紫花苜蓿,共导入1 391朵花,获得894粒T₀代转化种子。T₀代种子种植在含有225 mmol/L NaCl的MS培养基上,获得12株耐盐性强的植株。以供体和受体为对照,对12株耐盐植株进行RAPD分析,在55条随机引物中有8条扩增出稳定、清晰的条带,条带的差异性表现为新增条带、供体特异条带和受体条带丢失。以上结果初步证实外源DNA已经整合到受体的基因组中,而且T₀代植株耐盐能力提高可能与外源基因的导入有关。     

转红树总DNA紫花苜蓿T1代耐盐株系的生理生化特性分析

以花粉管通道法转红树总DNA紫花苜蓿阿尔冈金T₁代耐盐植株幼苗为材料,经300 mmol/L NaCl处理后,测定叶绿素、脯氨酸、丙二醛含量和抗氧化酶活性等耐盐相关生理生化指标。结果显示,转基因株系叶绿素含量下降0.09~0.29倍,而对照植株下降0.32倍;转基因株系脯氨酸含量升高1.2~4.2倍,对照植株的脯氨酸升高0.9倍;转基因株系丙二醛含量升高0.15~0.29倍,对照植株的丙二醛含量升高0.36倍;转基因株系超氧化物歧化酶活性升高0.20~0.25倍,对照植株的超氧化物歧化酶活性升高0.19倍;转基因株系过氧化物酶和过氧化氢酶活性分别是对照的1.6~5.6倍和1.2~1.3倍。转基因株系表现出耐盐植物的生理生化特性。     

紫花苜蓿花粉管通道法转基因技术初探

以紫花苜蓿品种阿尔冈金为受体材料,以含gus基因的植物双元表达载体pPZP221为外源基因供体进行了花粉管通道法转基因研究.于授粉后6h、9h、12h、20h、24h、28h、32h、48h滴加质粒DNA溶液,荚果成熟后收获转化种子,分别使用2套引物对To代植株进行PCR检测,结果表明:20～48h所得到的To代植株均具有较高的转化频率,其中授粉后32h导入质粒DNA所获得的转化率最高,为16.7%,PCR检测初步证明外源基因已整合到受体植物基因组中.     

紫花苜蓿耐盐种质资源的遗传多样性分析

利用RAPD技术分析了25个紫花苜蓿耐盐品种的遗传结构和遗传多样性。结果表明,30条引物在25个紫花苜蓿耐盐品种单株DNA间的多态性位点比率(P)为81.52%,在各品种混合DNA间的多态性位点比率为61.65%,说明采用单株DNA样品比采用混合DNA样品能更好地揭示紫花苜蓿品种内和品种间的遗传变异水平。基因分化系数(Gst)主要反应品种间变异占总变异的比例,中国18个耐盐紫花苜蓿品种和美国7个耐盐紫花苜蓿品种的基因分化系数分别为0.271和0.152,表明中国耐盐紫花苜蓿种质资源品种间基因交流机会比美国品种间交流机会多。紫花苜蓿作为典型的异交植物,其生物群体的遗传结构与其繁育体系具有直接的联系。依据遗传距离(GD)分析结果,25份材料从遗传结构上可以分为9个组群,其中图牧1号和图牧2号遗传距离最小(GD=0.148),捷达和图牧1号遗传距离最大(GD=0.786)。紫花苜蓿耐盐种质遗传多样性分析为紫花苜蓿耐盐核心种质库构建和耐盐新品种选育提供了理论依据。     

超声波辅助提取苜蓿黄酮工艺的研究

通过超声波提取方法,对不同浓度乙醇、不同料液比及不同提取时间和提取次数进行单因素实验,并在此基础上对各因素进行正交实验,筛选出苜蓿黄酮超声波提取的最佳提取工艺。正交实验结果表明:各因素水平差异极显著,固液体积比和乙醇浓度是影响提取量的主要因素,提取时间和其他影响较小;最佳提取条件为40%的乙醇,苜蓿草粉50倍量,超声波提取3次,每次40 min,对单因素实验的各因素的最佳条件进行了优化。     

尾分析法检测梅花鹿产茸量性状关联的RAPD标记

作者以18只均配有产茸记录的梅花鹿为试验对象，将其按产茸量分为高、低两组，提取每组单个个体血样的DNA后，对该DNA模板进行PCR 扩增。发现混合DNA所扩增出的条带包含了所有单个个体DNA扩增的条带，说明混合DNA可替代单个DNA进行群体遗传结构分析；另外，比较各性状表型值高、低组的混合DNA扩增片段后发现，在高、低产茸量的鹿群里分别发现了1、3个RAPD标记与性状关联。结果表明尾分析法可用于数量性状位点的标记检测。     

Differentiation between high and low virulence Staphylococcus aureus strains from rabbits by randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis

Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD) typing was performed on 53 rabbit Staphylococcus aureus strains. Twenty-three strains isolated in 13 different rabbitries with chronic problems of staphylococcosis, showed the same RAPD banding pattern. Twenty of these strains belonged to the 'mixed CV-C' biotype and to the phage-type 3A/3C/55/71, previously described to be highly virulent in rabbits, and three strains belonged to other biotypes or phage-types. None of the strains isolated from rabbitries without chronic problems of staphylococcosis showed this specific RAPD pattern. RAPD analysis can be used as a rapid and reliable test method to differentiate between the characteristic genotype corresponding to high virulence and other S. aureus strains from rabbits. This is useful for the diagnosis and prevention of the introduction of these highly virulent strains in industrial rabbitries.     

用RAPD技术检测不同来源微孢子虫基因组DNA多态性

家蚕微粒子病是由微粒子原虫（微孢子虫）类寄生于蚕体引起的病害。微粒子病对蚕丝业生产危害极大,一直被列为蚕种制造检疫对象。许多学者对病原的传播途径、侵染机制及分类地位作了大量研究。其中微孢子虫的分类又以血清学关系、发育增殖方式和孢子超微结构作为主要划分依据,这些表型依据仍然具有局限性。随机扩增多态性ＤＮＡ技术（ＲａｎｄｏｍｌｙＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）因能方便、快速提供ＤＮＡ多态性的丰富信息而被广泛用于动植物和微生物的遗传差异、亲缘关系和进化分类等领域,但应用于微…     

苜蓿总黄酮对小鼠脂类代谢及氧自由基的影响

为了明确观察苜蓿总黄酮（TFA）对小鼠脂类代谢和氧自由基的影响,给5周龄的小白鼠灌胃TFA,连续1周后,采用生化方法测定小鼠全血中甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的含量,并且检测小鼠肝脏和肾脏组织中过氧化物歧化酶的活性和丙二醛的含量。结果显示：灌胃TFA的小鼠全血中甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量明显降低（P＜0.05),而高密度脂蛋白胆固醇含量升高。小鼠的肝脏和肾脏组织匀浆中过氧化物歧化酶的活性显著升高（P＜0.05),丙二醛的含量降低。因此得出结论：TFA具有降血脂、降低低密度脂蛋白胆固醇、预防和减轻动脉硬化的作用;同时也具有抑制氧自由基损伤防止脂质过氧化的作用。     

几种小麦族禾草及其杂交后代基因组DNA的RAPD研究

应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术分析蒙古冰草、航道冰草及其种间杂种Ｆ、ＢＣ１代和加拿大披碱草、野大麦及其属间杂种Ｆ１代的基因组ＤＮＡ差异性。筛选出能检测咯亲本及杂交后代间遗传差宜引物;从ＤＮＡ分子水平验证出亲本加拿大坡碱草和野大麦两属间经亲本蒙古冰草、航道冰草二种间的亲缘关系远;杂种Ｆ１代的ＲＡＰＤ图谱有明显偏母本的倾向,随机扩增多态性ＤＮＡ技术可用于牧草远缘杂种鉴定及遗传育种研究。     

Randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis of Mycoplasma gallisepticum isolates from turkeys from the central valley of California.

Randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis was used to investigate the molecular epidemiology of 26 Mycoplasma gallisepticum (MG) isolates obtained from turkeys located in the central valley of California. The MG isolates were recovered from 5 different companies and 13 ranches. Each company had unique MG strains. No evidence of spread of MG between companies was detected. RAPD analysis of MG isolates within a ranch during an outbreak revealed only a single strain involved in each outbreak. RAPD analysis identified an isolate from 1 ranch with a banding pattern identical to that of the 6/85 vaccine strain, which had been used on that particular ranch. Similar RAPD banding patterns of isolates from different ranches within the same company suggested horizontal spread of MG between ranches. The use of 2 primer sets in RAPD analysis was critical to prevent misinterpretation of relationships between different isolates.     

鹌鹑肠道微生物总DNA的最佳提取方法

为了获取高质量、较完整的肠道菌群基因组DNA,试验采用常规的饱和苯酚/氯仿法(方法一)、牛瘤胃DNA的提取法(方法二)和对上述两种方法进行优化后得到的肠道微生物DNA的提取法(方法三)对鹌鹑肠道微生物总DNA进行了提取,并对结果进行了比较。结果表明:应用方法一和方法二提取的DNA浓度比较低,电泳显示样品DNA条带没有方法三明亮;以方法三提取的肠道总DNA为模板,采用细菌通用引物,对其16S rDNA V3可变区进行PCR扩增,得到较清晰的图谱,条带整齐。说明采用方法三提取鹌鹑肠道微生物DNA较完整,可用于后续的分子生物学试验研究。