伪狂犬病病毒分子生物学研究新进展

近年来，随着分子生物学研究的深入，对伪狂犬病病毒的研究取得很显著的进展。本文对伪狂犬病病毒的特性，基因结构特点，病毒糖蛋白种类和作用以及伪狂犬病病的毒力因子，基因工程疫苗研究现状进行了较详细综述，对同道者研究伪狂犬病病毒有重要的指导作用。     

抗伪狂犬病病毒单克隆抗体的应用

近年来，国内外许多学者应用抗伪狂犬病病毒单克隆抗体，在伪狂犬病病毒的研究方面取得了显著的进展。本文对抗伪狂犬病病毒单克隆抗体在伪狂犬病病毒抗原分析，在保护免疫中的作用及其在诊断伪狂犬病中的应用进行了较详细的综述，对抗伪狂犬病病毒单克隆抗体的深入研究有指导意义。     

伪狂犬病病毒潜伏感染的研究

论述了近折来在伪犬病病毒潜伏感染方面研究的主要进展，其中包括三个部分，即伪狂犬病病毒感染的分子机理，伪狂犬病病毒潜优感染的诊及伪狂犬病病毒基因工程缺失疫苗的潜伏感染。     

重组伪狂犬病病毒疫苗的研究进展

随着分子生物学技术的发展,人们对伪狂犬病病毒的分子学特征研究也逐步深入,根据基因工程原理对伪狂犬病病毒的基因组进行改造,从而构建了多种含有不同外源基因的重组伪狂犬病病毒疫苗.这种疫苗不仅可以为猪的伪狂犬病提供保护,同时还可以产生针对外源保护性抗原的特异性免疫反应,具有广阔的应用前景.笔者在本文中系统地对近些年所报告的多种重组伪狂犬病病毒疫苗的安全性和免疫原性就行了综述,以期为伪狂犬病病毒新的基因工程疫苗的研制提供一定的参考.     

伪狂犬病病毒YN株与闽A株、苏联林交叉对流免疫电泳试验

应用豚鼠制备伪狂犬病病毒高免血清,运用醋酸透析法制备伪狂犬病病毒沉淀抗原,通过交叉对流免疫电泳试验,证明伪狂犬病病毒YN株与闽A株、苏联株之间有共同抗原。本试验建立的对流免疫电泳方法,可供我国开展伪狂犬病的诊断研究参考。     

伪狂犬病病毒野毒荧光定量PCR检测方法的建立

根据伪狂犬病病毒gE基因的序列,设计和合成了一对特异的可用于检测伪狂犬病病毒野毒的PCR引物和一条Taqman荧光探针,采用Li ght Cycl e 480荧光定量PCR仪,建立了一种可实时定量检测伪狂犬病病毒野毒的荧光定量PCR技术。该方法的线性范围为1.0×102～1.0×1010拷贝,灵敏度可达4拷贝。检测速度快,仪器的运行时间仅为1 h。对13株猪伪狂犬病病毒野毒进行了检测,结果均为阳性;与伪狂犬病gE基因缺失疫苗、猪细小病毒和鸭瘟病毒无非特异性反应。与病毒分离培养比较,该方法具有快速、灵敏、特异、定量、重复性好等优点,可望用于临床上伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒的区分,伪狂犬病病毒野毒的检测和病毒分布的研究等。     

猪伪狂犬病病毒鲁A株的分离鉴定

从山东省某些猪场疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑及内脏中分离到多株病毒，对其中一代表毒株进行了全面鉴定。该分离毒株在兔肾原代细胞(RK)上和鸡胚成纤维细胞(CEF)上连传5代．均出现典型细胞病变．再接种于RK-13细胞、BHK-21细胞、Vero细胞、PK15细胞和143TK细胞，均出现典型细胞病变；在RK-13细胞上的TCID50为10^-0.52/0．1mL；在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子；对氯仿、乙醚敏感，56℃30min灭活；能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和；病毒接种于家兔和小鼠，均出现典型伪狂犬病症状与病变；提取所分离病毒的DNA作为模板。应用特异性引物，以PCR方法可扩增出伪狂犬病病毒gD基因中272～534nt之间262bp长的特异性片段。上述结果证明，所分离病毒为猪伪狂犬病病毒，并将其命名为猪伪狂犬病病毒鲁A株。     

重组伪狂犬病病毒疫苗的研究进展

随着分子生物学技术的发展及对伪狂犬病病毒(PRV)研究的不断深入, 伪狂犬病病毒载体的研究已成为病毒载体研究领域的热点之一.通过基因工程技术使伪狂犬病病毒的毒力基因失活构建表达外源基因的重组质粒,再通过同源重组获得毒力减弱但仍具有良好免疫原性的重组病毒,重组病毒疫苗在动物体内的表达不仅十分安全,而且还可以一针多防,提高生产效率.文章对以伪狂犬病病毒为载体研制重组疫苗的研究进展进行了综述.     

规模化猪场伪狂犬病的检测与净化

伪狂犬病是危害养猪业健康发展的主要疫病之一,是由伪狂犬病病毒（PRV）引起的猪的一种病毒性传染病。伪狂犬病病毒属于疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科的猪疱疹病毒Ⅰ型。伪狂犬病病毒对脂溶剂如乙醚、丙酮、氯仿、酒精等高度敏感,对消毒剂无抵抗力。     

伪狂犬病毒作为疫苗载体的研究进展

随着生物技术的快速发展,对伪狂犬病病毒的研究也不断深入,特别是伪狂犬病病毒作为疫苗病毒载体成为人们研究的一个热点。利用基因工程技术使伪狂犬病病毒中的毒力基因失活,从而致使病毒毒力减弱,但其病毒粒子仍然保持着良好的抗原性,并能有效地刺激机体产生免疫反应,将重组的病毒粒子同插入的外源基因一起在动物体内表达,既安全又能起到预防多种病原的作用。笔者就伪狂犬病病毒的主要研究进展及其在寄生虫上的应用前景进行了综述。     

加强免疫与监测净化猪场伪狂犬病——2006年中国9省市规模化猪场伪狂犬病野毒流行病学调查与分析

伪狂犬病（Pseudorabies）给养猪业造成非常严重的直接和间接经济与商业损失，种猪感染伪狂犬病病毒后，引起母猪发情障碍、流产、产死胎、木乃伊胎和弱仔，伪狂犬病病毒先天感染或早期感染引起哺乳仔猪的神经症状和高死亡率，而对于生长育吧猪，伪狂犬病是呼吸系统疫病综合征（PRDC）的重要病原，引起呼吸系统病变和生长迟缓。对种猪场来说，伪狂犬野毒阳性对种猪的销售和品睥效应造成不利影响，而对于出口企业，猪场伪狂犬病呈阳性面临着经济和贸易的双重损失。随着高效的基因缺失疫苗和免疫监测技术的广泛应用，目前已经有很多国家消灭了伪狂犬病。     

猪伪狂犬病病毒LA株的分离鉴定

从辽宁省某猪场大批死亡的新生仔猪脑及内脏中分离到多株病毒，通过初步验证后选择其中一代表毒株进行了鉴定。该病毒株在PK-15细胞上连续传12代均出现典型的细胞病变，用适应PK-15细胞的病毒接种Veto细胞、猪肾传代细胞IBRS-2及SPF鸡胚成纤维细胞均出现典型的细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。该病毒对氯仿、乙醚敏感，在pH5．0-9．0下稳定，56℃30分钟即可灭活该病毒。该病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性．血清中和。取处理后的病料上清液和传代病毒接种家兔均出现典型的伪狂犬病症状。用所分离病毒提取的DNA及培养病毒液经简单的预处理后作为模板，应用特异性引物进行PCR能扩增出伪狂犬病病毒1240bp的gD基因的特异性片段。结果表明，所分离病毒为伪狂犬病病毒，并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒IA株。     

猪瘟、伪狂犬混合感染的诊断

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性高度接触性和致死性的传染病，不同年龄、性别和品种的猪均能感染，其病原是一种RNA病毒。 伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的一种高接触性急性传染病，以发热，脑脊髓炎为主要症状，伪狂犬病病毒是疱疹病毒科的DNA病素毒。母猪感染猪瘟病毒或者伪狂犬病毒后都会引起流产，产下弱胎、死胎，并且成为病毒传播的重要来源，     

猪伪狂犬病病毒NP株的分离鉴定

2013年下半年,福建某免疫接种过猪伪狂犬病疫苗(Bartha)的规模化猪场大批妊娠母猪发生流产、新生仔猪发生共济失调的神经症状,疑似为猪伪狂犬病病毒感染发病症状,为确定发病原因,从该猪场疑似伪狂犬病病毒感染的仔猪脑、肝脏和肺脏中分离到一株未知病毒,PCR检测及测序比对鉴定为猪伪狂犬病病毒,并将分离的病毒命名为NP株。用Reed-Muench法测定分离株病毒的组织细胞半数感染量(TCID50)为10-9.13/0.1mL,动物攻毒试验出现猪伪狂犬病病毒感染的典型症状。试验结果表明,成功分离到一株猪伪狂犬病病毒毒株,为研究福建省猪群伪狂犬病病毒分子流行病学奠定基础。     

伪狂犬病病毒的分子生物学研究进展

伪狂犬病病毒的分子生物学研究进展黄银君，周育彪（中国农业科学院兰州兽医研究所，兰州７３００４６）伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）是伪狂犬病（又叫Ａｕ－ｊｅｓｚｋｙ′ｓ病）的病原，为ａ疱疹病毒，分类名叫猪疱疹病毒—１型。伪狂犬病最早是在牛上发现的，现在则成为猪的...     

猪伪狂犬病病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用

本研究针对猪伪狂犬病病毒的gE基因序列进行分析比较,设计了一条TaqMan-MGB探针,建立了区别野毒株及基因缺失疫苗株的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法检测猪伪狂犬病病毒特异性强,能很好的区分猪伪狂犬病病毒与其它病毒。用该方法对83份疑似样本进行检测,与常规PCR检测法符合率达到100%,表明该方法用于检测猪伪狂犬病病毒具有良好的实用性。     

猪伪狂犬病病毒高免血清的制备及应用

用伪狂犬病病毒及抗体阴性羊,以不同免疫剂量,间隔一定时间,多次免疫不同类型的猪伪狂犬病病毒(Bartha-K61株),制备猪伪狂犬病病毒高免血清,特异性强,效价可达1:2 048以上。本研究为伪狂犬病活疫苗或毒种的鉴定及外源病毒检验提供了具有良好特异性和高效价的中和用血清。     

孵蕴春荡——访北京市海江孵化设备制造有限公司董事长王复生

伪狂犬病(Pseudorabies PR)是由疱疹病毒科的伪狂犬病病毒引起的一种家畜及野生动物的急性传染病，在世界各地广泛流行。在我国，该病对猪的危害很严重，引起仔猪的高发病率，成年猪症状微轻，常呈现隐性带毒，成为新的传染源。用血清学方法检测猪血清中伪狂犬病病毒抗体，在猪伪狂犬病的诊断、流行病学调查及疫苗免疫效果的检测上有一定的意义。     

猪伪狂犬病流行状况和疫苗应用的研究进展

近年来,猪伪狂犬病在国内许多Bartha-K61疫苗免疫的猪场暴发,传播迅速,严重危害我国养猪业的发展,引起了广泛关注和研究。相关研究表明,引起该病大规模暴发的病原为发生变异的猪伪狂犬病病毒(PRV),多数猪场的PRV野毒株感染普遍存在,因此,有必要对新型伪狂犬病病毒变异株的抗原性、致病性和分子特征及其疫苗的研制等方面进行研究。针对我国猪伪狂犬病的流行和疫苗应用的研究进展进行阐述,以便为研制新型疫苗及猪伪狂犬病的防控提供参考。     

表达乙脑病毒PrM基因重组伪狂犬病病毒的构建

本研究以乙型脑炎病毒SA14—14—2疫苗株基因组RNA为模板，采用RT—PCR一步法扩增了PrM基因的全长cDNA（558 bp），用BamHI和EcoRI双酶切PrM基因的扩增产物，回收目的基因后将其克隆至经同样酶切的伪狂犬病病毒通用转移载体pPgG-uni中，获得了转移载体pPgG-PrM，并对其外源片段进行了测序。序列分析结果表明：与已报道的乙型脑炎病毒SA14强毒株和SA14-14-2疫苗株的核苷酸序列比较，PrM基因的同源性为100％。以伪狂犬病病毒Ea株TK^-／gG^-／LacZ^＋突变株为载体构建了一株表达乙型脑炎病毒PrM基因的重组伪狂犬病病毒TK^-／gG^-／PrM^＋，为进一步开展猪乙型脑炎与伪狂犬病二价基因工程疫苗的研究奠定了基础。