腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从１９９７年在辽宁省大连市某鸡场发生的一种以腺胃肿大为特征的鸡的传染病病例中收集腺胃组织（Ｄ９７１）接种ＳＰＦ鸡胚,传至１３代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,ＥＩＤ５０为１０－６．４８／０．２ｍｌ。Ｄ９７１毒株感染ＳＰＦ鸡胚尿囊液经负染电镜观察,可见直径为８０～１２０ｎｍ,有囊膜和纤突的冠状病毒粒子。Ｄ９７１毒株经卵磷脂酶Ｃ处理后能凝集鸡红细胞,并能特异的被Ｄ９７１多抗所抑制。用反转录聚合酶链反应获得了Ｄ９７１毒株免原（Ｓ１）基因ｃＤＮＡ,经１％琼脂糖凝胶电泳可见１．７ｋｂ的特征性条带。用Ｄ９７１毒株接种ＳＰＦ鸡,能引起与自然病例相似的病理变化,并分离到病毒。用Ｄ９７１毒株可直接感染ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞。结果证实从腺胃病变型ＩＢ鸡群中分离的Ｄ９７１毒株是冠状病毒科ＩＢＶ成员。     

传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株(ZJ971毒株)结构蛋白和S1基因的结构分析

对来自浙江地区的传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株（ＺＪ９７１株）的结构蛋白进行了ＳＤＳ电泳分析，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增其Ｓ１基因ｃＤＮＡ，并作了测序分析。结果显示，ＺＪ９７１株结构蛋白由２１２０００、１４６０００、９７４００等８条蛋白带组 其他传染性支气管炎病毒株相比缺损１１６０００蛋白条带；Ｓ１基因全长为１７２０ｎｔ，编码１条５５１个氨基酸组成的多肽，其核心苷酸与其他传染性支气管炎病毒株的同源性为９９．     

内蒙古地区鸡传染性法氏囊病病毒生物学特性的研究

从内蒙古地区分离到３株ＩＢＤＶ（分别命名为Ｊ、Ｗ、Ｈ株）并对其进行细胞培养特性、理化特性、形态特性、动物回归试验和血清学鉴定，研究结果表明：适应鸡胚的Ｊ、Ｗ、Ｈ株可迅速适应ＣＥＦ，继而适应于Ｖｅｒｏ和ＲＫ＿（－１３）细胞，在ＲＫ＿（－１３）细胞上的感染滴度最高；３个毒株能抵抗氯仿、耐热（６０℃１小时）、耐酸（ｐＨ２）、对碱（ｐＨ１２）敏感；负染样品在电镜下看到正六边形，直径约５５～６５ｎｍ，有实心和空心的病毒颗粒；回归鸡后表现典型的临诊症状和特征性病理变化，发病率为８０～１００％，病死率为２６．６～４６．６％；法氏囊超薄切片在电镜下观察到法氏囊淋巴细胞浆内呈晶格状排列或包涵体形式存在的病毒颗粒。微量交叉中和试验结果表明：Ｊ、Ｗ、Ｈ株为血清Ⅰ型ＩＢＤＶ的３个不同亚型毒株。     

传染性腺胃炎病毒ZJ_(971)株的一些生物学特性

传染性腺胃炎病毒 (暂定名 )ZJ971毒株经鸡胚传代 ,可致鸡胚矮小并干扰新城疫在鸡胚中的复制。感染胚尿囊液经 1%的胰酶处理后可凝集鸡和鼠的红细胞。电镜观察可见 80～ 190nm大小的冠状病毒粒子。ZJ971毒株对热 (56℃ )、酸 (pH3)、碱 (pH12 )、乙醚和氯仿敏感 ,对反复冻融、胰酶不敏感。ZJ971毒株与传染性支气管炎病毒M4 1、T、Gray、Holte毒株病毒血清交叉中和的抗原相关R值分别为 :0 0 0 13、0 0 0 0 6、0 0 0 0 5、0 0 0 0 3。人工感染鸡生长发育障碍、胸腺萎缩 ,腺胃指数、腺肌胃指数增加 ,囊体指数下降。上述结果初步显示ZJ971毒株是不同于鸡传染性支气管炎病毒的冠状病毒 ,并首次在实验动物感染成功。     

传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的培育

传染性法氏囊病病毒３个变异野毒株ＪＤ１、ＪＤ２、ＨＢ）和２个经验血清型１毒株、ＳＣ）直接在鸡胚成纤维细胞上传代,均能不同程度地产生细胞病毒效应（ＣＰＥ）。将５个毒株２１代细胞毒连续回归鸡体５代,除ＪＤ１外,其余毒株均能不同程度导致法氏囊病谱。ＨＺ１４１、ＪＤ１３６、ＳＣ３８、ＪＤ２３７、ＮＢ３８代细胞毒在鸡体内回归５代,均未见法氏囊的眼观病变和组织学变化,囊指数保持稳定,说明ＨＺ１、ＳＣ、ＪＤ１、     

鸡腺胃型传染性支气管炎病毒HN毒株理化特性鉴定

ＨＮ毒标为从我省某鸡场患有呼吸道症状和腺胃病变的病鸡只以一的株病毒,在鸡胚中能稳定传代并且有规律性死亡和典型胚胎病变特征。ＨＮ毒株对热、乙醚和氯仿敏感,耐酸（ＰＨ３．０）、耐碱（ＰＨ１１．０）,能低抗１％胰蛋白酶,能在鸡胚中干扰鸡新城疫病毒Ｌａ Ｓｏｔａ株的增殖。试验结果表明,ＨＮ毒株的理化生支气管炎病毒相会。     

鸡痘病毒282E_4株TK基因重组载体质粒的构建

应用已克隆的鸡痘病毒（ＦＰＶ）２８２Ｅ＿４株基因组ＴＫ基因，在ＮｃｏⅠ部位引入痘苗病毒Ｐ７．５启动子和Ｐ１１启动子控制下的大肠杆菌ＬａｃＺ基因，经酶切鉴定，成功地构建了用于ＦＰＶ重组的载体质粒。与亲本毒株在鸡胚成纤维细胞内共转染，产生了表达ＬａｃＺ基因的重组鸡痘病毒。经传代筛选、纯化，重组病毒较稳定。实验结果表明，以ＴＫ基因构建的重组载体质粒可用于外源基因的重组表达研究。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒JH9801株的分离鉴定

从天津市某肉用鸡场疑似肾型传染性支气管炎（NIB）病鸡中取肾组织，按常规处理后接种9－10日龄鸡胚，连续传代培养至第7代，并对4－7代分离毒株的致病性、血凝性、EID50及对DNV的干扰性和乙醚敏感性进行测试，同时进行了动物回归试验。结果表明，4－7代分离毒株可使85％－90％鸡胚于接种后8－9d死亡，多数死胚和残存活胚胚体出血、蜷缩、矮化等具有IBV感染特征；该分离毒株无直接血凝性，但经10g/L胰酶处理后可集鸡红细胞；分离毒株对乙醚敏感；动物回归试验中有65％的感染鸡在15d内发病或死亡。剖检病死鸡可肾苍白、肿胀，肾小管内充塞大量尿酸盐，外观呈菜花样。经鉴定，分离的病毒株JH9801为鸡肾型传染性支气管炎病毒（NIBV）。     

用单克隆抗体检测禽脑脊髓炎病毒抗原

建立了抗禽脊髓炎病毒（ＡＥＶ）的单克隆抗体（ＭＡｂ）ＶＲ９－１。接种ＡＥ鸡胚适应毒Ｖａｎ Ｒｏｃｋｃｌ株、２种疫苗株和２种野毒株的雏鸡脑冰冻切片、鸡胚成纤维细胞和鸡胚脑细胞，用间接免疫荧光和免疫过氧化物酶染色检查，结果，均可与ＭＡｂ ＶＲ９－１起反应。该ＭＡｂ也可用于石蜡包埋切片的抗生物素蛋白－生物素－过氧化物酶染色。试验结果表明，该ＭＡｂ可认别ＡＥＶ毒株的一个共同抗原决定簇，可用于ＡＥＶ检测和定     

新疆鸡传染性法氏囊病病毒生物学特性的研究

应用鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）从新疆地区分离到３株细胞适应株,对其进行了理化特性和血清学特性的鉴定。结果表明３个毒株能抵抗氯仿,耐热（５６℃１小时）、（７０℃１小时或８０℃１小时）、耐酸（ｐＨ２）、对碱（ｐＨ１２）敏感。但与国内已报道的毒株相比,对热（７０℃）和碱（ｐＨ１２,３７℃１小时）的抵抗力则更强些,在这些条件下均不能完全灭活。血清中和试验表明均为ＩＢＤＶ血清Ｉ型。交叉中和试验表明,分离的３株毒株有１株和另外２株是不同的血清亚型,确证了新疆也存在ＩＢＤＶ血清亚型。３株病毒在ＣＥＦ上连续传代已基本致弱,其细胞培养液接种鸡能产生相应的免疫抗体。