量子点在兽医领域应用研究进展

量子点具有独特的光学性质,近年已在材料科学、分析化学、生命科学、医学检验等学科领域得到广泛研究和应用.作为一种新型的荧光标记材料,量子点在兽医领域越来越受到重视.作者就量子点的特性、种类及其在兽医领域的研究做一综述,并提出了未来研究方向,为拓展量子点在动物疫病诊断、兽药研发、致病机制等方面的研究提供参考.     

量子点荧光探针在生物学中的应用

量子点(半导体纳米微晶体)作为一种新型荧光探针应用到生命科学领域已引起了国内外科学工作者的极大关注。文章主要概括了量子点优于传统荧光染料的性质及其在细胞成像、免疫荧光技术、病理组织检测、体内成像和微生物学等方面的应用,并对其在兽医学领域的发展前景进行了展望。     

量子点的应用—一种新型的荧光定量检测技术

半导体量子点，简称量子点（quantum dots，QDS），即材料的尺寸在三维空间进行约束并达到一定的临界尺寸（可抽象为一个点），因此其表现出许多独特的光、电特性，特别是Ⅱ～Ⅵ族荧光量子点（如CdSe、CdTe、CdS等），一直以来都是人们研究的热点。     

量子点的制备及应用进展

本文分别从量子点的概念、特性、制备方法、表面修饰等方面对量子点进行了描述及讨论,在此基础上,对量子点在生物传感器方面的应用进行了,最后分析了量子点生物传感器的存在的问题,对其未来发展趋势进行了展望。     

碳量子点应用于鼠伤寒沙门菌检测的初步研究

旨在制备基于碳量子点(carbon quantum dots,CDs)的免疫荧光探针,初步建立鼠伤寒沙门菌的快速检测方法,以柠檬酸和尿素作为碳源,利用微波法对碳量子点制备的微波时间、透析袋规格等条件进行了优化,再使用化学偶联法将碳量子点与鼠伤寒沙门菌抗体结合制备免疫荧光探针C-IgG,使之借助抗原抗体特异性结合和荧光实...     

量子点技术在生物医学中的应用概况

量子点是一种特殊的纳米微粒,也称纳米量子点、半导体量子点(Quantum Dots,QDs)或半导体纳米微晶体(Semiconductor Nanocrystal),是由     

量子点荧光免疫分析法检测鸡肉药物残留

近期，由中国与澳大利亚科研工作者合作发展出一种快速非竞争性量子点荧光免疫分析方法（cFLISA）可用来检测鸡肉中恩诺沙星残留。这种荧光检测系统终端使用羊抗鼠二抗量子点，可量化检测1-100ng／mL范围内的恩诺沙星，最小检测值为2．5ng／mL。     

量子点在生命科学中的应用及发展趋势

量子点是一种特殊的纳米微粒,又称半导体量子点、半导体纳米粒子或半导体纳米微晶体,是近年来研究越来越多的一类纳米材料.随着纳米科技的飞速发展,量子点以其优良、独特的光谱特性和良好的光化学稳定性,成为了理想的荧光探针材料,并且成为科研工作者备受关注的一种新型纳米生物荧光探针.它在生命科学、分析科学、材料科学、免疫医学、检验检疫科学等传统的及新兴的领域中都得到了广泛的应用,并取得了一定的研究进展,尤其是在生命科学的各个领域中,它的作用更是日益凸显,并直接或间接地推动着生命科学研究的不断发展.     

水溶性CdTe量子点的合成及其对鸡胚成纤维细胞的影响

以巯基丙酸作为稳定剂合成水溶性cdTe量子点,并观测不同浓度的水溶性CdTe量子点对鸡胚成纤维细胞的影响。结果表明,通过紫外一可见光谱、荧光光谱和傅立叶红外变换光谱图均说明已成功制备水溶性CdTe量子点;鸡胚成纤维细胞的存活率与水溶性CdTe量子点的浓度存在明显的剂量一效应关系,即随着暴露浓度的增加,细胞存活率显著性降低。     

印度:杧果叶可用于生物成像探测

<正>印度理工学院(IIT)的研究人员发现了一种用于生物成像的探测仪,即用杧果叶来合成量子点,实现细胞内的温度传感,而且价格也更便宜。从杧果叶中合成的这些量子点具有生物相容性、良好的耐光性,且无细胞毒性。合成的操作步骤如下:将杧果叶切成小块,用液氮冷冻,冷冻的叶片再粉碎成粉末,蘸上酒精。这些量子点可以用来检测细胞内的升温,也可以检测癌     

采用GFP标记筛选抑制多血清型口蹄疫病毒3C基因表达的siRNA

为筛选出可抑制多种血清型口蹄疫病毒(FMDV)的小干扰RNA(siRNA),本试验通过多血清型口蹄疫病毒序列比对与siRNA设计分析，筛选出潜在抗多血清型siRNA位点；通过体外合成A型、O型和Asia I型病毒部分基因序列，制备绿色荧光蛋白(GPF)基因融合表达载体；将化学合成的siRNA与融合表达载体共转染，通过GFP观察、Western blot和实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)方法检验目标siRNA对融合基因的抑制效率。生物信息分析发现，多血清型口蹄疫病毒3C基因高度保守并存在潜在siRNA作用靶位，GFP-3C融合表达载体成功构建，与化学合成的siRNA1-3C共转染293T细胞，GFP观察发现，siRNA1-3C可有效抑制来源于A型、O型和Asia I型3C基因的GFP-3C荧光信号且持续时间达72 h, Western blot检测证实此结果。qRT-PCR检测发现，siRNA1-3C对3个GFP-3C融合基因转录水平抑制效率超85%,且作用可维持72 h。本试验利用GFP作为筛选标记成功筛选出1个作用于FMDV 3C基因的siRNA,为开发多血清型口蹄疫抑制剂...     

PCR扩增的shRNA表达盒快速筛选PRRSV有效siRNA序列

有效siRNA的筛选是RNAi研究的关键点之一。本研究选取猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的核衣壳蛋白(N)作为靶基因,使用http://www.ambion.com的靶位点筛选和设计工具,选取4个siRNA序列(siRNA95、siRNA179、siRNA218和siRNA294),利用一步PCR法产生包含U6启动子的短发夹RNA表达盒技术快速筛选高效siRNA,PCR法制备的shRNA表达盒(PCR-shRNA95、PCR-shRNA179、PCR-shRNA218和PCR-shRNA294)分别与表达N-EGFP融合蛋白的重组质粒pEN-ORF7共转染至293T细胞,48 h后荧光显微镜下检测细胞表达EGFP阳性率,筛选有效siRNA片段,将筛选的PCR-shRNA179的PCR产物转染N-EGFP融合蛋白稳定表达293T细胞系和PRRSV感染的Marc-145细胞,结果表明PCR-shRNA179可明显减少N蛋白的表达、有效减轻PRRSV引起的细胞病变及减少感染PRRSV的Marc-145细胞中的N蛋白阳性细胞。本研究证明一步PCR扩增shRNA表达盒法可用于筛选特异性基因表达抑制的siRNA。     

荧光量子点快速检测禽蛋中致病菌的应用

近年来,纳米技术已经成为人们广泛关注的前沿领域之一,引起国际上的普遍重视.而量子点(quan-tum dots,QDs)又称半导体纳米微晶体,是能够接受激发光产生荧光的半导体纳米颗粒.     

基于量子点免疫层析的布鲁菌抗体诊断卡研制

布鲁菌是一种重要的人兽共患传染病,进行快速、简便、特异性的现场检测产品研发在动物布鲁菌病的预防及养殖场净化程序中具有重要作用。本研究采用免疫层析技术,将标记量子点微球的布鲁菌LPS作为包被抗原喷于样品结合垫和未标记的布鲁菌LPS喷于检测线,制备可用于检测动物布鲁菌抗体的量子点免疫层析检测卡。结果显示,量子点免疫层析检测卡同大肠埃希菌O157:H7、小肠结肠炎耶尔森菌O9等病原菌抗体不发生交叉反应,具有较高敏感性,可进行临床动物布鲁菌病的血清学筛查。     

纳米材料在兽药残留分析中的应用

纳米是度量单位，1纳米为10^9米。国际上公认1～100纳米为纳米尺度空间。100～1000纳米为亚微米体系，小于I纳米为原子团簇。纳米空间是介于宏观和微观之间相对独立的中间领域。纳米粒子具有小尺寸效应、表面与界面效应、量子尺寸效应以及宏观量子隧道效应，使得纳米粒子具有常规粒子所不具备的许多特殊性质。纳米是度量单位，1纳米为10母米。国际上公认1～100纳米为纳米尺度空间。100～1000纳米为亚微米体系，小纳米为于I原子团簇。纳米空间是介于宏观和微观之间相对独立的中间领域。纳米粒子具有小尺寸效应、表面与界面效应、量子尺寸效应以及宏观量子隧道效应，使得纳米粒子具有常规粒子所不具备的许多特殊性质。     

乙醇中CdSe量子点的合成及其核壳化研究

通过两步法在乙醇中合成以巯基乙酸(TGA)为配体的Cd Se量子点,然后通过包覆Zn S壳,对其核壳化进行研究。结果分析表明:乙醇中合成的Cd Se量子点具有优异的荧光性能,所得到的核壳结构Cd Se/Zn S量子点其荧光性能进一步提高。     

肝脏特异性表达载体的构建及Western blotting检测

研究靶向于肝细胞的组织特异性siRNA,实现siRNA基因治疗的组织特异性,可用于特异性治疗乙肝,突破RNA干扰技术在临床应用的一大障碍。用靶向于EGFP的siRNA（以下简称siEGFP）替代靶向于乙肝病毒保守区的siRNA,构建可以在肝细胞中特异性表达的载体,用来表达siRNA。将目标载体分别转染肝癌细胞HepG2、乳腺癌细胞MDB-MB-231、人胚肾细胞293,在蛋白质水平上检验siRNA抑制的组织特异性。Western blotting结果证实,siEGFP在肝组织来源的细胞系HepG2中抑制效率明显高于其他两组细胞。构建的载体可以在肝癌细胞系中特异性的表达siRNA,而在其他组织细胞中不表达,实现了组织特异性。进一步将siEGFP替换为抑制HBV表达的siRNA,同样可以实现肝脏特异性的表达。     

犬细小病毒量子点免疫层析试纸条的研制

为建立一种快速灵敏检测犬细小病毒的免疫层析方法,本研究将羧基化CdSe/ZnS量子点与犬细小病毒单克隆抗体5G7共价偶联作为捕获探针,以犬细小病毒单克隆抗体8H7、羊抗鼠IgG作为检测线、质控线制备量子点免疫层析试纸条.结果显示,该试纸条灵敏度高,最低检测限为103 TCID50/mL;特异性强,与犬瘟热病毒、犬冠状病...     

H5NI型禽流感病毒纳米量子点快速检测方法的建立

本文介绍了一种用CdSe量子点标记技术用于H5NI型禽流感病毒检测的方法。采用CdSe量子点标记鸡抗AIVIgG,并对标记的抗体量子点复合产物进行了纯化。H5N1型禽流感病毒单克隆抗体作为包被抗体,CdSe量子点标记的鸡抗AIVIgG作为检测抗体,建立了纳米量子点应用于禽流感病毒快速检测的方法。此方法的最佳检测组织为气管和肺,整个检测过程只需3小时。实验结果表明,对已知的阳性样品其敏感性比血凝试验要高出4倍以上,与新城疫病毒、鸭瘟病毒和鸭肝炎病毒等无交叉反应。对65份病料进行检测,结果有5份阳性病例,60份阴性病例,与鸡胚分离法作为比对,结果符合率为98.46%,说明此方法具有较好的特异性和灵敏度,该方法操作简单、检测快速快,在进出口检疫方面有良好的应用前景。     

siRNA及其运载系统研究进展

小干扰RNA （small interfering RNA,siRNA）通过基因干扰技术进行有针对性的基因沉默,其控制目标基因表达的能力为基因治疗癌症和遗传性疾病提供了新的希望。但siRNA的药理性能很低,如血清稳定性低、脱靶、先天免疫反应,为临床治疗提供了一个挑战。由于负离子性能和刚性结构致使siRNA难以穿透细胞膜,因此,构建安全、稳定、高效的siRNA运载系统将siRNA运载到靶细胞的细胞质是至关重要的。作者综述了几种可增强体内外细胞摄取和靶基因沉默的广泛、发达的非病毒性siRNA运载系统,并讨论了它们的特点和进行siRNA治疗用于临床应用的机会,以期为今后siRNA的研究与临床应用奠定基础。