Occurrence of Fusarium species in maize kernels grown in northwestern Spain

Fusarium poses food and feed safety problems because most species produce mycotoxins. To understand the epidemiology of the Fusarium disease, efforts must focus more precisely on how environmental variables affect disease presence. The objectives of the present study were to monitor the occurrence of Fusarium species in maize kernels in northwestern Spain to determine the risk of mycotoxin contamination and to identify environmental traits affecting the composition of the Fusarium species identified. A combination of 24 environments was evaluated. The percentage of kernels infected by F. verticillioides ranged from 33 to 99%, supporting the idea that fumonisin contamination is the main maize‐based feed and food safety concern in this area. In this region, temperature and humidity primarily affected Fusarium spp. occurrence. Warmer temperatures during the later stages of kernel development and during kernel drying increased the frequency of F. verticillioides in maize kernels, while the presence of F. subglutinans was increased by higher relative humidity during the silking stage and cooler temperatures during kernel drying.     

花生地杂草发生特点与化学除草

采用9点取样法对全县花生地进行杂草调查,调查结果惠安县花生地有杂草30个科76种,以马唐等11种杂草为主要种类.针对花生地杂草的发生特点,采用多种除草剂进行化学除草试验,防效均达87%以上,但除草剂对不同种类杂草的防治效果有差异。     

Occurrence of Groundnut ringspot virus on Brazilian peanut crops

A high incidence of plants with mosaic, chlorotic spots, ringspots, necrosis, smaller leaves, and stunting was observed on peanut crops (Arachis hypogaea L.) in Itápolis, São Paulo State, Brazil. Transmission electron microscope examination of thin sections of infected leaves revealed the presence of spheroidal particles, ca. 80 nm in diameter, suggestive of Tospovirus. A DNA fragment of ~600 bp was amplified by RT-PCR from total RNA extracted from infected tissues using primers specific for the nucleocapsid gene of Groundnut ringspot virus (GRSV). Nucleotide and deduced amino acid sequences of the fragments showed high identities with known GRSV isolates.     

枯草芽胞杆菌SNUB16的抗真菌作用研究

本文测定了枯草芽胞杆菌SNUB16发酵液无菌滤液的抗菌谱及无菌滤液对尖镰孢和棉花枯萎病菌孢子萌发和菌丝生长的影响。结果表明,枯草芽胞杆菌SNUB16发酵液无菌滤液对23株真菌有抗菌作用,尤其对植物病原真菌尖镰孢、棉花枯萎病菌、玉米大斑病菌、辣椒炭疽病菌和小麦根腐病菌有显著抗菌作用。发酵液无菌滤液可使尖镰孢及棉花枯萎病菌孢子萌发率下降,芽管顶端、菌丝末端及菌丝中央发生畸形的球状结构,菌丝干重减少,菌丝细胞损伤,使细胞内物质外泄。     

应用绿僵菜油剂防治内蒙草原蝗虫的效果

１９９９年在内蒙古草原进行了用绿僵菌油剂超低量喷雾防治蝗虫的试验。表明,对５种蝗虫（亚洲小车蝗、红翅皱膝蝗、毛足棒角蝗、白边痂蝗、轮纹异痂蝗）的防效显著。喷药后８天,对主要蝗虫亚洲小车蝗（占混合虫口的９２．２％）的防盗和达４８．０％,１２天后增至８８．１％。蝗虫死亡后２～３天,失水形成僵虫,７～１０天虫尸上出现绿色粉 绿例题菌孢子。孢子的扩散有可能继续起着控制蝗虫虫口的作用。     

Mosquito adulticidal activity of a biosurfactant produced by Bacillus subtilis subsp. subtilis

BACKGROUND: A biosurfactant, surfactin, produced by a strain of Bacillus subtilis subsp. subtilis (VCRC B471), was effective in killing mosquito larval and pupal stages. As it was lethal to the non‐feeding pupal stage, it was presumed that it could kill the adult mosquitoes also. In this study, the adulticidal effect of the biosurfactant was assessed in the laboratory against a malaria vector, Anopheles stephensi. RESULTS: The biosurfactant surfactin, separated from the culture supernatant of the production strain, showed mosquito adulticidal activity when tested as ultralow‐volume (ULV) spray in a Peet‐Grady chamber. Knockdown activity and mortality were found to increase with increasing surfactin dosage. Knockdown dosage (KD) and lethal dosage (LD) were calculated by statistical analysis. The KD₅₀ and KD₉₀ dosages were 10.73 and 26.39 mg m^?3 respectively. The LD₅₀ and LD₉₀ dosages were 16.13 and 39.21 mg m^?3. The average droplet size of B. subtilis surfactin was 17.5 ± 1.07 µm. CONCLUSION: The present study indicates that the biosurfactant surfactin, produced by B. subtilis subsp. subtilis (VCRC B471), is a potential bioadulticide for ULV spray against malaria‐transmitting Anopheles stephensi mosquitoes. This is the first report of a mosquito adulticide from a microbial source. Copyright © 2012 Society of Chemical Industry     

枯草芽孢杆菌NCD-2菌株的高效电击转化

本研究对影响枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisNCD-2菌株遗传转化的因素进行摸索并对其转化条件进行优化,建立了该菌株的高效电击转化体系。通过比较5个不同大小和携带不同来源复制子的质粒对其转化效率的影响,发现质粒大小与NCD-2菌株的电击转化效率之间没有相关性;而携带来源于Bacillus coagu-lans复制子的质粒pNW33N时,NCD-2菌株的电击转化效率最高,达到3.53×104cfu.μg-1DNA,说明复制子来源是影响转化效率的一个重要因素。采用pNW33N质粒在不同电阻、电场强度及培养时间下的电击转化效率的研究结果表明,该菌株转接到生长培养基后,37℃、150r.min-1培养3.5h,在电阻值200Ω、电场强度14.0kV.cm-1的条件下转化效率最高,达到6.07×104cfu.μg-1DNA。优化后的转化体系为顺利开展枯草芽孢杆菌NCD-2菌株的分子操作奠定了基础。     

枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

在摇瓶发酵条件下,采用Plackett-Burman设计法和响应面分析法对枯草芽孢杆菌B908菌株的培养基配方进行优化,确定了影响B908菌株发酵液含菌量的3个重要因子依次为玉米粉、碳酸钙和豆饼粉;对这3个因子进行爬坡路径试验,通过响应面分析法确定了主要影响因子的最佳条件。优化后的培养基配方使摇瓶发酵液每毫升的含菌量从0.6×109个/ml提高到1.18×1010个/ml。     

枯草芽孢杆菌Tpb55抗烟草普通花叶病毒活性研究

利用三生-NN烟测定Tpb55菌悬液对烟草普通花叶病毒(TMV)钝化、预防和治疗作用结果表明,Tpb55菌悬液对TMV具有较好的钝化、预防和治疗效果,枯斑抑制率分别为96.15%、79.72%和65.71%。为进一步揭示Tpb55抗毒机理,选用易感TMV烟草品种K326为实验材料,研究以Tpb55对烟草花叶病毒(TMV)进行预防和治疗处理,测定烟草中与抗病毒性相关的部分生理生化指标的变化。结果表明,先用Tpb55菌液再接种毒液处理的烟株,对TMV的抑制作用优于先接种毒液再接种菌悬液处理,说明Tpb55对TMV的预防具有积极效果;不论在烟株接种毒液前或后,用Tpb55菌液处理烟株的叶片与只接种毒液的相比,叶片内过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均显著提高,以接毒前Tpb55菌液处理的烟株活性水平最高。从本试验结果来看,Tpb55具较强的抗TMV活性,可通过直接接触钝化作用及诱导烟草抗病性提高来抑制TMV侵染。     

生防枯草芽孢杆菌L1特性的初步研究

通过对峙培养,测定出枯草芽孢杆菌L1的抑菌谱较宽,特别是对水稻纹枯病菌、大豆菌核病菌、禾谷镰孢菌、辣椒灰霉病菌、玉米小斑病菌抑菌效果明显;枯草芽孢杆菌L1不同发酵时间经湿热灭菌处理后,5 d发酵液中抑菌活性物质含量最高,对水稻纹枯病菌菌丝生长抑制率达83.23%,发酵液随时间延长抑菌效果不再增加;枯草芽孢杆菌L1抑菌活性物质对温度不敏感;枯草芽孢杆菌L1发酵液用硫酸铵梯度沉淀法提取粗蛋白在硫酸铵饱和度达60%～70%(不含60%)沉淀的活性物质抑菌效果最好,对水稻纹枯病菌平均抑菌半径达1.15;枯草芽孢杆菌L1对玉米、大豆、小麦、番茄、菜豆、黄瓜、水稻无致病性,而且还有保鲜和促生作用。     

枯草芽孢杆菌脂肽类抗生素发酵和提取条件

以枯草芽孢杆菌G1为出发菌株,研究了发酵过程中不同培养条件和培养基对该菌株产生脂肽类抗生素的影响。结果表明:最有利于脂肽类抗生素产生的发酵条件是初始pH7.0,接种量3%,发酵培养温度30℃,发酵时间38h时,而最佳培养基为Landy培养基。在提取脂肽类抗生素粗提物的过程中发现,加酸至pH4.0时脂肽类抗生素能够完全沉淀。在Landy培养基和上述发酵条件下,最多能产生脂肽类抗生素粗提物6.5g/L。利用HPLC技术对产生的脂肽类抗生素进行定量分析,结果表明产生纯的脂肽类抗生素最高达2.4g/L。     

花生新黑地珠蚧发生危害与防治

花生新黑地珠蚧是近年来在沙区严重危害花生的害虫之一。经观察 ,该虫在豫东 1年发生 1代 ,以 2龄幼虫(球体 )在土壤 10～20cm的土层中越冬 ,5月中下旬越冬球形体脱壳羽化为成虫 ,交尾产卵。 6月下旬为 1龄幼虫孵化盛期 ,孵化后的 1龄幼虫钻入土内 ,吸取花生根部汁液 ,是防治的关键时机 ,7月上中旬为 2龄幼虫危害盛期。     

枯草芽胞杆菌B201产芽孢培养基优化

采用单因素试验及正交试验设计对枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis B201产孢培养基进行了碳源、氮源、无机盐筛选及优化,最终确定B201发酵培养基配方为玉米粉3 g/L,糖蜜10 g/L,豆粕粉10 g/L,鱼粉10 g/L,K₂HPO₄ 2 g/L,Na₂HPO₄ 2 g/L,MgSO₄ 0.5 g/L,MnSO₄ 0.5 g/L。优化后的培养基在500 L通气式机械搅拌发酵罐中进行了小试,结果表明B201生长快速,发酵16 h开始形成芽孢,26 h放罐后发酵液活菌量达到1.06×1010 CFU/mL,芽孢量8.8×109 CFU/mL,芽孢形成率为83.0%,活菌含量和芽孢形成率较高,为B201工业化生产奠定了基础。     

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）S9对植物病原真菌的溶菌作用

本研究共分离了976株细菌分离物，发现来自甘蔗根围的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、终极腐霉(Pythium ultimum)和西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)在PDA平板的对峙培养过程中不形成抑菌圈，但4d后可使上述植物病原真菌的菌丝溶解。扫描电镜观察发现S9菌株在待测的立枯丝核菌表面形成了溶菌斑。S9菌株对立枯丝核菌的作用过程是通过吸附在病原真菌的菌丝上，并随菌丝生长而生长，而后产生溶菌物质消解菌丝体。液体共培养测定也证明了S9菌株具有上述作用。本研究还发现，S9菌株对植物病原真菌的拮抗真菌绿色木霉(Trichoderma viride)、鲜红毛壳菌(Chaetomium cupreum)和球毛壳菌（Chaetomium globosum）的生长没有影响。盆栽试验证明了S9菌株可有效地控制立枯丝核菌(R．solani)引起的番茄苗期病害。S9菌株与其它拮抗真菌混合具有促进防治植物病原真菌引起的植物病害的潜力。     

枯草芽胞杆菌YN2014090悬浮剂的研制

为研发出一种对番茄白粉病有稳定防效的微生物农药,以枯草芽胞杆菌YN2014090为有效成分,通过加入分散剂、润湿剂、增稠剂、紫外保护剂、防腐剂等助剂,按照相应比例混合,制得YN2014090悬浮剂,活菌数达到3.2×10^10 cfu/mL。结果表明,其配方为YN2014090菌粉15%、黄原胶2.2%、分散剂EMA 8%、600#12%、D425 2.2%、OP-10 2.2%、吐温20 1.2%、PEG600 1.2%,尿素0.3%,对羟基苯甲酸甲酯0.12%。所制悬浮剂p H在8.20~8.30,细度(<10μm)通过率大于95%,持久泡沫量(1min后)小于38 mL,倾倒后残余物质量分数小于5%,洗涤后残余物质量分数小于0.4%。连续两次药后11 d对番茄白粉病的防效达到94.21%,表明新研制的悬浮剂对番茄白粉病有较好的防治效果。     

枯草芽孢杆菌(Bacilllus subtilis)S9对植物病原真菌的溶菌作用

本研究共分离了976株细菌分离物,发现来自甘蔗根围的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、终极腐霉(Pythium ultimum)和西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)在PDA平板的对峙培养过程中不形成抑菌圈,但4 d后可使上述植物病原真菌的菌丝溶解.扫描电镜观察发现S9菌株在待测的立枯丝核菌表面形成了溶菌斑.S9菌株对立枯丝核菌的作用过程是通过吸附在病原真菌的菌丝上,并随菌丝生长而生长,而后产生溶菌物质消解菌丝体.液体共培养测定也证明了S9菌株具有上述作用.本研究还发现,S9菌株对植物病原真菌的拮抗真菌绿色木霉(Trichoderma viride)、鲜红毛壳菌(Chaetomium cupreum)和球毛壳菌(Chaetomiumglobosum)的生长没有影响.盆栽试验证明了S9菌株可有效地控制立枯丝核菌(R.solani)引起的番茄苗期病害.S9菌株与其它拮抗真菌混合具有促进防治植物病原真菌引起的植物病害的潜力.     

枯草芽胞杆菌XF-1粗蛋白抑菌活性初步研究

枯草芽胞杆菌XF-1是一株对大白菜根肿病有良好防治效果及对多种植物病原真菌有抑菌效果的生防菌株。为了研究其可能的作用机制,本文用硫酸铵沉淀法提取了发酵液中粗蛋白,并在不同处理条件下对其抑菌活性进行了初步研究。该粗蛋白对蛋白酶K和胰蛋白酶及紫外照射均不敏感,对热稳定。经40、60、80 ℃和100 ℃处理20 min后,其抑菌作用基本上无变化;经121 ℃处理20 min后,抑菌活性保持60%。这些结果,为进一步研究XF 1菌株对根肿病的防治机制和进一步应用提供了试验依据。     

枯草芽孢杆菌B2菌株产生的抑菌活性物质分析

枯草芽孢杆菌B2菌株产生的胞外物质经盐酸沉淀，甲醇抽提获得粗制备物。利用HPLC系统将粗制备物过Xterra RPl8层析柱分离，共获得120管收集液。以抑制小麦赤霉病菌分生孢子萌发为指标对各管收集液的抑菌活性进行了测定。通过LC-MS分析，结果表明B2菌株胞外存在3种抑菌物质，即脂肽类抗生素表面活性素、多烯类和一种分子量为564的结构未知的新物质。     

枯草芽孢杆菌菌株Tpb55的安全性毒理学研究

对枯草芽孢杆菌菌株Tpb55的安全性进行了合理的评价,就菌粉Tpb55对试验动物进行了相关的毒理学试验。结果表明,菌株Tpb55对小鼠、大鼠急性经口LD50大于5000mg·kg-1,对大鼠急性经皮LD50大于5000mg·kg-1;对兔皮肤刺激强度为无刺激性,眼刺激平均指数48h后为0,眼刺激强度为无刺激性;对豚鼠致敏率为0,属I级弱致敏物,无致敏性;对小鼠骨髓嗜多染红细孢微核以及性染色体及常染色体单价体等3项致突变试验为阴性,说明菌株Tpb55没有致突变作用。     

培养条件对枯草芽孢杆菌B68芽孢产量的影响

为了提高枯草芽孢杆菌B68芽孢形成率及芽孢数量，研究了营养条件、初始pH值、溶氧水平对其芽孢产量的影响。结果表明：芽孢形成的最适培养基组成为（g／L）：葡萄糖10g，大豆饼粉10g，NaCl5g，MnSO4·H2O 0．6g；最佳初始pH值7．0；最佳装瓶量为250ml三角瓶装100ml培养液。在此条件培养下，于150r／min、28oC恒温培养72h后，芽孢数量最高可达到1．60×10^14cfu／ml，芽孢形成率可达到88．92％。