稻粒黑粉病菌冬孢子萌发因素的研究

稻粒黑粉病菌冬孢子,在室内干燥条件下贮存3年左右即丧失活力。度过休眠期的冬孢子在适宜条件下,则可萌发。冬孢子萌发的适宜温度为25—30℃,水层厚度小于0.5mm较为适合。荧光、紫外光或散射光处理均可促进萌发,光照强度以60001x为宜。每天光照10—12h,5天后冬孢子大量萌发,先连续黑暗水培3—4天,再间歇光照3天,也可大量萌发。25—200ppm赤霉素对其萌发具有一定的刺激作用。供试的几种营养物对其萌发没有促进作用。     

不同杀菌剂对稻粒黑粉病菌冬孢子萌发的影响

稻粒黑粉病(Rice kernel smut)是一种真菌病害。在离体条件下,采用孢子萌发测定法,测定了嘧菌酯、灭菌唑、拌种灵、多菌灵、咪酰胺和二硫氰基甲烷抑制稻粒黑粉病菌冬孢子萌发的最低抑制浓度(MIC);同时研究了药剂浸种处理对稻种的安全性以及浸种处理效果。结果表明,嘧菌酯和二硫氰基甲烷对稻粒黑粉病菌冬孢子萌发的抑制活性较高,MIC为0.4μg/mL,多菌灵的抑制活性次之,MIC为0.8μg/mL,其他3种药剂的抑制活性不高,MIC均大于1.6μg/mL。种子安全性试验表明,嘧菌酯在2.0、4.0、8.0μg/mL和多菌灵在4.0、8.0、16.0μg/mL处理3d和7d后,稻种的萌芽率与对照相比无显著性差异;而二硫氰基甲烷在4.0和8.0μg/mL处理下,所选稻种的萌芽率显著低于对照,说明该药剂在浸种处理后会影响所选稻种的萌芽,但其在低剂量处理下对稻种的萌芽率影响较小。关于稻粒黑粉病浸种处理的合适农药剂型仍需要进一步研究。     

稻粒黑粉菌接种体芽殖附生阶段研究简报

 稻粒黑粉菌(Neovossia horrida)以次生担孢子经气流传播至水稻花器引起局部侵染,所致病害近年来在水稻不育系上普遍严重发生。据观察,田间冬孢子越冬休眠后3月中下旬即开始萌发,萌发当天即可形成初生担孢子,初生担孢子在1~2天内成熟、脱落,萌发形成次生担孢子。     

玉米丝黑穗病原菌冬孢子萌发条件研究

通过不同条件对玉米丝黑穗病菌冬孢子萌发率影响的试验研究表明,甲醛处理对玉米丝黑穗病菌冬孢子萌发有明显促进作用,萌发率达88.89%,冬孢子在麦芽糖和水琼脂培养基上萌发率最高达84.49%。在不同温度和pH条件下冬孢子萌发率差异较大。冬孢子在28℃时最适合萌发,达89.67%,在pH为7时萌发率最高达89.02%。     

Tilletia冬孢子萌发的生理学

在3％洋菜培养基上研究了普遍腥黑穗菌Tilletia caries冬孢子的萌发。厚而坚韧的细胞壁不能渗透类脂物溶剂,吸收水分也很慢。减少孢子壁渗透性障碍的因素,如水解酶或类脂物溶剂,能刺激孢子比对照早5小时萌发。乳化剂吐温20和二甲亚砜都能增加渗透性,但它们对孢子萌发有不利的影响。已报导的许多激活休眠的真菌和细菌孢子的物质,对减弱冬孢子的休眠一般是无效的。水合的冬孢子在2℃培养24小时或更长时间,不能象在22℃培养的水合冬孢子那样早萌发,但是,一旦萌发开始,萌发速度较快。光照似乎不增加萌发仅需要3—4天的冬孢子的萌发。     

应用聚合酶链反应技术鉴定印度腥黑穗病菌

用一对专化于印度腥黑穗病菌的引物Ｔ１１７Ｍ１（５＇－ＴＣＣＣＣＴＴＧ－ＧＡＴＣＡＧＡＡＣＧＴＡ－３＇）和Ｔ１１７Ｍ２（５＇－ＡＧＡＡＧＴＣＴＡＡＣＴＣＣＣＣＣＣＴＣＴ－３＇）可特异地扩增印度腥黑穗病菌产生一段８２５ｂｐ的产物，而稻粒黑粉病菌则不能被扩增。实验还表明，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测灵敏度可达到１００个未萌发的冬孢子，这为进口粮印度腥黑穗病菌的检疫提供了有力工具。     

影响稻曲病菌厚垣孢子萌发因素的研究

成熟过程中的稻曲病菌孢子球表面桔黄色的厚垣孢子萌发率很高,后随孢子球老熟其萌发率急剧下降而进入休眠期。在26℃和高湿条件下处理老熟孢子球20天以上就能打破厚垣孢子的休眠,促其顺利地萌发并产生小孢子,萌发率可达30％。这两类厚垣孢子萌发方式差异较大。适温高湿处理10天后的厚垣孢子其呼吸强度明显增强。打破休眠后的厚垣孢子萌发时仍需足够的水分和氧气,其萌发盛期长达35天以上,处理约60天后孢子球开始解体,萌发率急剧下降。日光、荧光灯、紫外线灯等光照对厚垣孢子萌发无明显的抑制或促进作用,但抑制小孢子的形成。偏酸至中性有利于萌发和产孢,过酸或过碱(pH3.0和10.0)则明显地抑制孢子的萌发和产孢。1％的葡萄糖、果糖、蔗糖和甘露糖有利于萌发和产孢。     

杂交稻区粒黑粉病的主要侵染源分析

本文根据6个方面的调查和试验结果分析，认为杂交水稻推广后稻粒黑粉病的发生格局出现的变化已引起了主要侵染源的变更，在杂交水稻种子（包括不育系种子）内的病粒中越冬的厚垣孢子已成为来年稻粒黑粉病的主要侵染源，在土壤表面越冬的厚垣孢子则退居其次。     

小麦秆锈病菌(Puccinia graminis var.Tritici)冬孢子萌发的研究

小麦稈锈病菌冬孢子的萌发受許多因素的影响。試驗証明:在田間直立过冬的麦稈上的冬孢子比在麦垜上的冬孢子萌发好,尤以晚播小麦在秋季低温下形成的冬孢子萌发更好;萌发方法以水滴正放为最优;用化学药剂处理方法对克服冬孢子的休眠期没有明显作用;冬孢子萌发温度范围为9°—20℃,最适温度为12°—16℃。     

杂交稻制种粒黑粉病的侵染源及发生规律

１９８９－１９９３年对稻粒黑粉病（Ｎｅｏｖｏｓｓｉａ ｈｏｒｒｉｄａ）的侵染源和发生流行规律进行了系统研究。结果表明，由冬孢子萌发直接产生的次生担孢子不是田间发病的主要接种体。发现并证实稻粒尾孢墨 粉菌具有在植物体表芽殖附生特性，其病害特占存在一个相当长的田间芽殖附生阶段，芽殖附笺次生担孢子才是田间发病的有效接种体。不育系柱头外率主、开发时间持续长而分散及恢复系花粉量是导致发病严重的主要寄生因素。     

稻粒黑穗病菌孢子萌发中的感光作用

 自从高桥良直在1896年发现稻粒黑穗病菌[Neovossia horrida(Tak.) P.et K.]以来,长时期内学者们只能偶然地观察到该菌厚垣孢子的萌发。邓叔群教授(1931)首先对于这个问题进行了多方面的研究,并且提出了与该菌孢子萌发可能有关的各种因素。     

稻曲病菌的病原学

 稻曲病菌产生的黄色和黑色厚垣孢子表面都有疣状突起,但黑色厚垣孢子的疣状突起明显。常规萌发试验,黄色厚垣孢子萌发,黑色不萌发。黄色厚垣孢子在4℃和25℃下贮存分别保持萌发能力1年和80d左右,萌发的最适pH值和最适温度分别为pH5~pH8和25℃~30℃。光照可诱导产生厚垣孢子。病菌在PD和PS培养液中可产生大量分生孢子。田间采集的稻曲病菌菌核在砂培条件下可以萌发并可产生成熟的子囊孢子。该菌可产生毒素,在一定的浓度下,对稻种萌发和胚芽生长有明显抑制作用。     

水稻粒黑穗病侵染的研究

 稻粒黑穗病在川东焉蔓延已久的病害。解放前万孙熊家乡长民曾企图用温汤浸梗法以防治此病,结果无效。     

Effect of calcined lime (CaO) on chlamydospores of the rice false smut pathogen,Villosiclava virens,and their root attachment and infection

Rice false smut caused by Villosiclava virens is a devastating disease. The smut balls contain chlamydospores, which fall onto paddy soils to become the primary inoculum. After transplanting, the chlamydospores subsequently germinate and infect rice roots. The application of a CaO-containing fertilizer to paddy soils can inhibit the development of rice false smut disease; however, the underlying mechanism is unknown. In this study, we evaluated the suppression of chlamydospore behaviour due to CaO. Specifically, we clarified the effects of the following on chlamydospore morphology and germination: (a) pH, (b) calcium (Ca) concentration, (c) Ca concentration (pH adjusted to 6.5), and (d) CaO-added soil solution. Germination was suppressed at pH 4 and 10, in contrast with the normal germination at pH 6, 7, and 8. Treatments with more than 10 mg/L Ca melted the outer layer of chlamydospores and suppressed germination regardless of whether the pH was adjusted to 6.5. A saturated CaO solution induced bursting of chlamydospores. Suppressed germination and a melted outer chlamydospore layer were also observed, even though the soil buffering effect initially prevented the CaO-mediated pH increase. Furthermore, the chlamydospores within 15 mm from the CaO small lump exhibited suppressed germination in soil. In addition, there was no effect of CaO treatment on chlamydospore attachment to rice roots and hyphal invasion of rice roots in in vitro inoculation tests. These results suggest that Ca concentration is an important factor for inhibiting the occurrence of rice false smut disease.     

稻曲病的接种技术研究

 探索在田间条件下进行稻曲病的人工接种技术。通过比较3种接种体发现,上年保存于-20℃的厚垣孢子不能引起发病;用PS液体培养获得的薄壁分生孢子可引起发病,孢子浓度越高引起病穗率越高;菌丝片段-分生孢子混合液接种发病最严重。病原菌的培养菌龄对接种效果有影响。在水稻的3个时期接种,以抽穗破口前6~9d的效果最好。在一天的3个时段接种,以下午4~6时的病情最重。在接种液里添加马铃薯煮汁可显著提高接种发病率。本文的接种技术能高效引发稻曲病,最高穗发病率100%,最大病情指数93.96,最多穗病粒数110粒。该接种技术可鉴别出品种抗病性的差异。     

稻曲病菌厚垣孢子侵染时期和侵染途径的研究

用田间自然发病病粒上新形成的稻曲病菌厚垣孢子,喷雾或注射接种不同生育期的稻穗获得成功。水稻孕穗末期至破口期是稻曲病菌厚垣孢子侵染的主要时期。在孕穗末期喷雾接种2次萌发孢子的发病率高达50.8%。解剖736个病粒内部都含有花药,镜检119条花药和35个柱头发现,病粒内大多数花粉粒的内容物已基本充实,柱头大多处于分枝状突起阶段。解剖刚发病的病粒柱头上有多根菌丝,并向花药等处扩展。萌发的厚垣孢子可以侵染处于乳头状突起期的柱头,并形成菌丝及产生小孢子。稻曲病菌厚垣孢子主要在水稻破口前1—4天至破口时从水稻的柱头侵入引起发病。     

稻粒黑粉病主要发病因素及防治指标

稻粒黑粉病已成为杂交稻制种田的重要病害,病粒率一般达１０％左右。因此各地对其研究逐渐增多,但对其主要发病因素特别是防治指标报道甚少。本文通过田间试验,大田调查,室内考种并结合气象资料分析,在这方面对其进行了探讨。     

Epiphytic colonization of Ustilaginoidea virens on biotic and abiotic surfaces implies the widespread presence of primary inoculum for rice false smut disease

Ustilaginoidea virens (Uv), the causative agent of rice false smut disease, infects developing rice spikelets at the booting stage, and transforms individual grains of the panicle into smut balls. Epidemics of the disease occur when the rice booting and heading stages coincide with rainy days. Using a green fluorescent protein (GFP)‐labelled Uv isolate that can form false smut balls on rice panicles, it was found that under high humidity and free water conditions the Uv isolate could colonize leaves of plants belonging to various families including the Poaceae (Oryza sativa, Echinochloa crusgalli, Digitaria sanguinalis and Leptochloa chinensis), the Brassicaceae (Arabidopsis thaliana) and the Solanaceae (Nicotiana benthamiana) without symptoms. Over several days, some conidia could germinate on the leaves of these plants and in water on the surface of Parafilm and cellophane, form hyphae and differentiate conidiophores to generate a large number of secondary conidia, while other conidia were able to directly produce secondary conidia. Conversely, in the absence of water some conidia could either bud to form new conidia or were converted into chlamydospores. These data indicate that Uv is one of a few fungal pathogens reported to have epiphytic characteristics. The rapid generation of a large number of spores on biotic and abiotic surfaces greatly increases the inoculum that can infect rice spikelets, resulting in the occurrence of rice false smut disease epidemics. These findings are important in the development of disease control strategies.     

水稻粒黑粉病的发生规律和防治的研究

自七十年代后期以来,稻粒黑粉病的发生日渐普遍,特别是杂交稻三系制种田的不育系受害尤为严重。本病可由种子和土壤传染。经测定,在水稻收获后田间每克表土有冬孢子1666.5—12499.8个,制种田可高达48121.2—109367.3个。菌源可在土壤中积累,致使病害逐年加重。试验表明,病菌可以从花器侵染,因而品种发病差异与品种颖壳开放时间长短有密切关系,开放时间长的品种受病菌侵入的机会多,发病重。防治试验的结果表明,采用10％盐水或泥水选种,防病的效果分别可达93.24％和80.42％;在水稻开花初盛期和盛期喷布多菌灵各1次,可以得到较为明显的防病效果。     

78个水稻不育系对稻粒黑粉病的抗性评价

 水稻稻粒黑粉病主要为害水稻不育系,是限制我国南方杂交水稻制繁种产量和质量的主要病害因素。为挖掘抗稻粒黑粉病的水稻不育系品种,提供具有抗稻粒黑粉病育种价值的水稻不育系材料,本研究于2014-2016年,采用田间接种稻粒黑粉病菌的方法,对四川、湖北、福建的78个水稻不育系品种进行了稻粒黑粉病菌抽穗期抗性评价。连续3年接种稻粒黑粉病菌试验表明,共有4个水稻不育系品种对稻粒黑粉病表现中抗及以上抗性,大部分为感病品种,其中4766A接种稻粒黑粉病菌后未发病,对稻粒黑粉病表现稳定高抗,为我国首次报道的高抗稻粒黑粉病水稻品种。