一株降解DON芽孢菌的筛选鉴定及其发酵饲料应用

研究旨在筛选高效降解呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)的菌株并将其应用在饲料发酵中。以苯基环氧乙烷为唯一碳源,筛选DON降解菌株,获得高效降解菌BL-14,结合形态学和分子生物学方法对该菌株进行鉴定,其16S rDNA与贝莱斯芽孢杆菌(Bacilus velezensis)相似度达99.43%。该菌在1μg/mL的DON浓度下摇瓶发酵16 h对DON降解率达82.63%,其在生长阶段可耐受DON。与筛选出的另外两株DON脱除率为28.50%和30.29%的乳酸菌(NJ8、RS1)协同发酵饲料原料,将饲料原料中污染的DON从3.81 mg/kg降到1.39 mg/kg,DON降解率达63.52%,并产生乳酸35 g/L。在饲料中添加贝莱斯芽孢杆菌BL-14和乳酸菌NJ8、RS1可以有效地去除其中的呕吐毒素,同时将其发酵成适口性好、营养丰富的发酵饲料。     

玉米赤霉烯酮降解菌株的筛选及鉴定

本试验旨在从土壤中筛选出能降解玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的菌株。将土壤中分离的菌株接种至含2μg/m L ZEN的LB液体培养基中,37℃,180 r/min,培养24 h。采用间接竞争ELISA法检测ZEN的残留量,计算菌株的ZEN降解能力。并将降解ZEN能力较强的菌株进行形态学、生化特性和16S r DNA基因序列分析鉴定。结果显示:筛选出的菌株JM-1降解ZEN的能力可达26.27%,显著高于其他菌株(P0.05)。经形态学、生化特性和16S r DNA基因序列分析,菌株JM-1鉴定为蜡样芽孢杆菌。     

玉米赤霉烯酮降解酶在枯草芽孢杆菌中的表达及其对母猪繁殖性能的影响

本试验旨在建立玉米赤霉烯酮(ZEN)降解酶基因ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达体系,确定其产物的生物降解活性及对母猪繁殖性能的作用。克隆ZEN-jjm基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后连接至p HT01表达载体中,构建重组质粒;转化枯草芽孢杆菌,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析ZEN-jjm蛋白表达水平。高效液相色谱法(HPLC)检测表达的ZEN-jjm蛋白降解ZEN的活性。通过对母猪的繁殖性能的评价,确定ZEN降解酶降解ZEN对母猪繁殖性能的影响。双酶切和测序结果表明:ZEN-jjm成功插入p HT01中,SDSPAGE表明获得1株高效表达目的蛋白的重组枯草芽孢杆菌,其大小约为29 ku。HPLC结果表明表达的ZEN-jjm蛋白能有效地降解ZEN;表达的ZEN-jjm蛋白能显著缓解ZEN对繁殖母猪的毒害作用(P0.05)。综上:1)本研究成功构建了表达ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达载体,并在枯草芽孢杆菌中得到了表达。2)表达的ZEN-jjm蛋白具有降解ZEN的生物活性。3)在饲粮中添加ZEN-jjm蛋白能显著降低ZEN对母猪能繁殖性能的危害。     

玉米赤霉烯酮降解菌株的筛选及降解特性研究

本试验旨在筛选能够有效降解玉米赤霉烯酮(ZEN)的微生物菌株.试验以ZEN为唯一碳源对发霉饲料、动物粪便等样品中的菌株进行分离筛选,选取其中降解率较高的菌株进行鉴定.研究菌株不同活性成分的ZEN降解效率以及不同培养条件下菌株的ZEN降解效率,初步探明菌株降解机制,优化菌株降解条件,并通过小鼠试验评价菌株的体内ZEN降解...     

一株同时降解玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B_1的谷氨酸棒状杆菌及其降解特性研究

试验旨在筛选同时降解玉米赤霉烯酮(ZEN)和黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的菌株,并研究其对两种毒素的降解特征。从土壤及鸡、驴的食糜中筛选出9株可同时降解ZEN和AFB_1的菌株;编号为406的菌株经形态学观察和16S rDNA鉴定为谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamate)。谷氨酸棒状杆菌406降解ZEN和AFB_1活性成分存在于发酵上清液中,其对ZEN和AFB_1的降解率分别为50%和58%。通过热、胰蛋白酶、十二烷基硫酸钠(SDS)处理,初步确定降解活性物质为一种胞外酶。上清液对ZEN和AFB_1的最适降解温度为67℃,最适pH值为8。本研究筛选到的同时降解ZEN和AFB_1的谷氨酸棒状杆菌菌株406为食品和饲料中ZEN和AFB_1的生物降解提供菌种资源。     

饲料及原料中霉菌毒素检测结果的分析与探讨

霉菌毒素污染问题日趋严重,几乎存在于所有的饲料、原料中,给畜禽养殖业带来极为不良的影响,也给全球经济带来损失。江苏奥迈生物科技有限公司实验分析中心对2014年霉菌毒素检测结果进行统计分析,结果表明,饲料中黄曲霉毒素的污染相对而言并不突出,玉米赤霉烯酮、呕吐毒素污染仍然严重,需要加强检测力度。     

枯草芽孢杆菌在发酵饲料中的应用研究进展

枯草芽孢杆菌是一种益生菌,在粗饲料中添加枯草芽孢杆菌进行发酵处理得到的饲料为发酵饲料.本文对枯草芽孢杆菌发酵饲料,几种发酵饲料原料和发酵饲料工艺,以及固态发酵、液体发酵和枯草芽孢杆菌发酵饲料在不同领域内的应用进行综述,并对枯草芽孢杆菌发酵饲料的应用前景进行展望.     

2014年饲料霉菌毒素分析与探讨

为了让更多的养殖户了解饲料及原料霉菌毒素污染情况,减少霉菌毒素造成的损失,江苏奥迈生物科技实验分析中心收集各地的饲料、原料共612份,用酶联免疫法测定样品中霉菌毒素的含量,并进行统计分析。结果表明:饲料中黄曲霉毒素的污染相对而言并不突出,玉米赤霉烯酮、呕吐毒素污染严重;玉米副产物霉菌毒素污染最严重;玉米和全价料的玉米赤霉烯酮和呕吐毒素污染严重;小麦、麸皮的主要污染物为呕吐毒素;饼粕类特别是花生粕的黄曲霉毒素污染较严重。     

2014年饲料霉菌毒素分析报告

近年来全球气候反常,霉菌毒素污染问题日趋严重,给畜禽养殖业带来极为不良的影响。江苏奥迈生物科技有限公司实验分析中心对2014年霉菌毒素检测结果进行统计分析,结果表明:饲料中黄曲霉毒素的污染相对而言并不突出,玉米赤霉烯酮、呕吐毒素污染仍然严重,尤其是玉米和全价料,需要加强检测力度。     

亚硝酸盐降解芽孢杆菌的筛选鉴定及其降解效果研究

在贵州省都匀市雨花湖公园附近5～15厘米深土层的土壤和水域区泥底中采样,通过分离、筛选后得到了1株具有降亚硝酸盐(NO2-)优势的菌株且命名为Y2;经过测序及形态学等分析,判断Y2为Bacillus aryabhattai,即阿氏芽孢杆菌.实验分析显示该菌在养殖水样和模拟水样中7天后NO2-的降低率分别为24.3％、6...     

降解AFB1的枯草芽孢杆菌S1分离与鉴定

【目的】筛选出能够高效降解黄曲霉毒素（aflatoxin,AF）的菌株,并对其降解活性及残留毒性进行检测,以期为黄曲霉毒素B₁（alflatoxin B₁,AFB₁）污染防治提供参考。【方法】采集耗牛、绵羊等草食性动物粪便和养殖场霉变饲料,以AFB₁的结构类似物香豆素为唯一碳源筛选降解AFB₁效率最高的菌株,并对其进行形态学、生理生化和16S rDNA鉴定。取AFB₁与适量筛选菌株的发酵液混合,使AFB₁的浓度为1 μg/mL,37℃、150 r/min培养,测定培养不同时间AFB₁降解率;应用差速离心法分别制取上清液、菌悬液和菌体,将菌体超声裂解后制得胞内液,测定不同组分对AFB₁的降解率;对上清液分别进行蛋白酶K、蛋白酶K+SDS和热处理,检测处理后上清液AFB₁降解率;分别用不同浓度的饱和硫酸铵沉淀处理上清液,检测AFB₁降解率;应用7 ku透析袋对上清液进行浓缩,检测AFB₁降解率,从而判断菌株活性成分的性质和分布。将鸡肝细胞分为AFB₁组、AFB₁-菌株组、菌株组和空白对照组,用实时荧光定量PCR检测各组鸡肝细胞中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosisi factor alpha,TNF-α）和Bcl-2-associated X蛋白（Bax）基因的相对表达量。【结果】经初筛和复筛,从编号为S₁的绵羊粪便样品中分离出1株菌株,其降解AFB₁的活性最高,降解率可达60.36%。菌株S₁在LB固体培养基上培养12 h,可观察到淡黄色不透明菌落,表面光滑,有隆起,镜检革兰氏染色呈阳性,杆状。16S rDNA基因进行PCR扩增并进一步测序分析,其序列与LC55966.1的同源性为100%。综合16 S rDNA序列分析和生理生化结果鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌发酵液与AFB₁（1 μg/mL）反应4、12、24、48和72 h,降解率分别达到10.98%、25.36%、46.24%和52.65%和80.84%。上清液AFB₁降解率显著高于菌悬液和胞内液（P<0.05）。热处理后,上清液的AFB₁降解活性降低,而经蛋白酶K和SDS处理后降解活性基本丧失。用不同浓度饱和硫酸铵处理的上清液AFB₁降解率差异不显著（P>0.05）,而经透析浓缩后的上清液AFB₁降解率显著高于硫酸铵处理的上清液沉淀蛋白（P<0.05）。在鸡胚胎肝脏原代细胞上,与AFB₁组相比,AFB₁经枯草芽孢杆菌S₁降解后诱导IL-6、TNF-α以及Bax的表达量均显著降低（P<0.05）。【结论】筛选到1株枯草芽孢杆菌S₁,其具有较高的降解AFB₁的活性,其降解活性主要来自于培养液上清中的蛋白质;AFB₁经降解后其毒素显著降低。     

2012年新季玉米霉菌毒素污染调查分析

对2012年玉米主产区新季玉米的89个样品进行霉菌毒素检测分析,结果表明,2012年新季玉米呕吐毒素和黄曲霉毒素B1的感染率较高,分别达到了53.75％和50‰,阳性平均值分别为889μg/kg和6.905μg/kg,玉米赤霉烯酮感染率与含量都比较低;从产地来看,陕西、安徽的玉米霉菌毒素污染较低,辽宁、黑龙江、山西的玉米不仅霉菌毒素感染率高,其含量也高.     

比较几种吸附剂对3种霉菌毒素体外吸附脱毒效果的研究

霉菌毒素吸附剂是一种能有效去除饲料中霉菌毒素的物质.本文研究了13种不同市售吸附剂对黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)体外吸附的效果,发现不同处理时间,吸附率有所不同.某些硅铝酸盐吸附剂对黄曲霉毒素B1有非常好的吸附效果,吸附率达到95％以上;某些吸附剂对玉米赤霉烯酮也有较好的吸附脱毒能力,但与处理时间关系密切;某些吸附剂对呕吐毒素的吸附率比较低,且处理时间变长,脱毒效果更差.     

2020年国内玉米青贮霉菌毒素普查报告

2020年1—12月,博瑞科技检测中心共采集黑龙江、辽宁、内蒙古、北京、天津、河北、山东、山西、陕西、甘肃、宁夏等地区的玉米青贮样本1184份,旨在了解2020年国内玉米青贮霉菌毒素污染情况.采用酶联免疫吸附法测定样品中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素三大霉菌毒素含量,分析总体污染情况以及不同月份、不同采集区域的...     

2013年上半年南京奥迈霉菌毒素分析报告

饲料及原料中不可避免地存在霉菌毒素污染,给畜禽养殖业及饲料工业带来极为不良的影响。南京奥迈科技有限公司霉菌毒素分析中心对2013年上半年霉菌毒素检测结果进行分析,结果表明:饲料及原料总体上黄曲霉毒素污染较轻,玉米赤霉烯酮和呕吐毒素污染严重;玉米副产物霉菌毒素污染最严重;玉米和配合饲料主要污染玉米赤霉烯酮和呕吐毒素;小麦、麸皮的主要污染物为呕吐毒素;饼粕类特别是花生粕黄曲霉毒素污染较严重。     

2018年中国饲料原料及配合饲料中霉菌毒素污染调查报告

为了解国内饲料原料及配合饲料中霉菌毒素污染情况,随机抽取了国内一些省市区域的玉米、玉米副产物、小麦及麸皮、杂粕和全价饲料等986个饲料原料及配合饲料样品,采用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定了样品中黄曲霉毒素(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的含量。结果表明,玉米、玉米副产物、小麦及麸皮、杂粕和全价料中AFB1检出率分别为91.20%、92.49%、96.41%、100.00%和100.00%,超标率分别为5.56%、12.14%、4.19%、16.56%和7.88%;ZEN的检出率分别为91.20%、100%、91.62%、75.50%和100.00%,超标率分别达到7.03%、16.18%、5.39%、0.00%和6.45%;DON的检出率分别为100.00%、100.00%、100.00%、96.03%和100.00%,超标率分别达到0.00%、4.05%、24.55%、1.99%和16.13%。其中玉米副产物、小麦及麸皮及全价料中霉菌毒素污染较为严重,应是霉菌毒素污染防控的主要关注对象。     

2016年中国饲料和原料中霉菌毒素污染调查报告

本研究采用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定了国内各省(市区)域的玉米、 玉米副产物、 小麦及麸皮、 粕类和全价饲料等1304个饲料及饲料原料样品中黄曲霉毒素(AFB1)、 玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的含量,以了解中国饲料和原料中霉菌毒素污染情况.结果表明:玉米、 玉米副产物、 小麦及麸皮、 粕类和全价料中AFB1检出率分别为92.14%、91.48%、66.23%、97.53%和83.06%,超标率分别为31.94%、25.00%、7.79%、81.48%和11.29%;ZEN的检出率分别为79.93%、95.45%、76.62%、72.84%和88.98%,超标率分别达到4.35%、58.52%、10.39%、18.52%和7.26%;DON的检出率分别为96.49%、96.59%、100.00%、74.07%和90.32%,超标率分别达到51.17%、82.39%、83.12%、3.70%和42.20%.其中玉米副产物和小麦及麸皮是霉菌毒素污染最为严重的饲料原料,是霉菌毒素风险控制的主要关注对象.     

2013年1—6月12省市饲料及原料中霉菌毒素分析报告

对2013年1—6月12省市饲料及原料中霉菌毒素进行检测分析,结果表明：1）饲料及原料总体上黄曲霉毒素B1污染较轻,玉米赤霉烯酮和呕吐毒素污染严重,玉米副产物霉菌毒素污染最严重;2）玉米和配合饲料的主要污染物是玉米赤霉烯酮和呕吐毒素,小麦及其副产物的主要污染物为呕吐毒素,饼粕类特别是花生粕黄曲霉毒素B1污染较严重。