HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁

采用phenomenex C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-冰醋酸(pH=3.10)(45:55)为流动相洗脱,体积流量为0.8 mL/min,紫外检测波长为327 nm,采用外标法测定不同产地杜仲中绿原酸和芦丁的含量.建立了HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁含量,并对不同产地杜仲中绿原酸和芦丁舍量进行测定.结果表明,绿原酸和芦丁分别在0.127 5～24.000 0μg(r=0.999 6),0.125 0～25.000 0 μg(r=0.999 6)线性关系良好,平均回收率分别为98.73%和97.26%,相对标准偏差为1.85%和1.32%.

Abstract：

Objective To establish an HPLC method for the determination of chlorogenic acid and rutin and use it to determine chlorogenic acid and rutin in Eucommia ulmoides Oliv produced in different places.Methods A phenomenex C_(18) column(150 mm×4.6 mm,5μm)was used,with a mobile phase of methanol-acetic acid(pH=3.10)(45:55)for elution;the flow rate was 0.8 mL/min;the detection wavelength was at 327 nm;and the contents of chlorogenic acid and rutin were determined by the external standard method.Results The calibration curves for chlorogenic acid and rutin were linear between 0.127 5 and24.000 0μg and between 0.125 0 and 25.000 0 μg(r=0.999 6 and 0.999 6),respectively.Their average recoveries were 98.73%and 97.26%and RSD were 1.85%and 1.32%,respectively.Conclusion The method is simple,rapid,sensitive and reproducible,and thus provides a scientific means for establishing the quality standard for Eucommia ulmoides Oliv collected from different places.     

HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁

采用phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-冰醋酸(pH=3.10)(45∶55)为流动相洗脱,体积流量为0.8 mL/min,紫外检测波长为327 nm,采用外标法测定不同产地杜仲中绿原酸和芦丁的含量.建立了HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁含量,并对不同产地杜仲中绿原酸和芦丁含量进行测定.结果表明,绿原酸和芦丁分别在0.127 5～24.000 0μg(r=0.999 6),0.125 0～25.000 0μg(r=0.999 6)线性关系良好,平均回收率分别为98.73%和97.26%,相对标准偏差为1.85%和1.32%.     

傅里叶近红外漫反射光谱法测定杜仲叶中绿原酸含量方法的建立

采用傅里叶近红外漫反射光谱法，对测定杜仲叶中绿原酸含量的方法进行了研究。用HPLC法与紫外双波长法测定绿原酸含量，确定绿原酸化学值分析结果可作为建模值。建立了绿原酸含量的线性方程，Y=0．8729x＋0．1764，其中x为红外光谱测定值，相关系数R=0．9549。研究表明，利用近红外漫反射光谱法进行杜仲叶有效成分绿原酸的快速测定是可行的。     

HPLC测定不同树龄杜仲叶中黄酮类成分的含量

[目的]建立高效液相色谱同时测定不同树龄杜仲叶中绿原酸、芦丁、槲皮素和山萘酚含量的方法。[方法]采用Shim—packVP—ODS（4．6×150mm,5μm）色谱柱,以甲醇-0．4％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流量1．0ml/min,用二极管阵列检测器扫描检测,以保留时间结合待测物质的紫外吸收光谱进行定性分析。采用外标法进行定量分析,检测波长为360nm,柱箱温度为40℃。[结果]绿原酸的线性范围为4．63～92．65μg,r=0．9998,回收率为98％～101．5％;芦丁的线性范围为0．714～14．285μg／ml,r=0．9999,回收率为96％-98．4％;槲皮素的线性范围为0．101～2．066μg／ml,r=0．9970,回收率为94％～101％;山萘酚的线性范围为0．043～0．886μg／ml,r=0．9980,回收率92％～96％。[结论]对不同树龄杜仲叶中4种有效成分含量用方差分析进行多重比较,从绿原酸含量方面考虑．三年树龄杜仲叶采收最佳。     

RP-HPLC法同时测定金银花中绿原酸·芦丁·木犀草素的含量

[目的]同时测定金银花中绿原酸、芦丁、木犀草素的含量。[方法]利用反相高效液相色谱法测定,采用Zorbax SB—C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇：0．02％磷酸=50：50为流动相,流速1．0ml／min,检测波长350nm,柱温30℃。[结果]不同品种的金银花中绿原酸、芦丁、木犀草素的含量差别较大。[结论]该方法简单、可行,为金银花的质量控制提供了一定的参考。     

杜仲叶中绿原酸的提取分离研究进展

综述了绿原酸的分布、生物合成途经、理化性质以及近年来杜仲中绿原酸提取分离方面的研究进展，为绿原酸提取分离的深入研究提供参考。     

黄皮和杨梅果肉中绿原酸、表儿茶素及芦丁含量的HPLC测定

应用高效液相色谱(HPLC)法测定了黄皮、杨梅果肉中的绿原酸、表儿茶素和芦丁的含量.色谱柱为Nucleosil C18反相柱(250mm×4mm),流动相为20%的甲醇(A),30%乙腈(B),pH3.2,梯度洗脱,流速0.8mL/min,检测波长280nm,柱温35℃.结果表明:3种标准品的线性范围为0.3906～50.0000μg/mL,相关系数r=0.9999.标准品在0～48h内经多次测定,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.78%～0.91%和0.67%～0.95%;回收率和回收率相对标准偏差分别为93.21%～103.50%和2.77%～3.94%;仪器最低检出限分别为0.0901、0.0955、0.0980μg/mL.测定结果还表明:黄皮和杨梅果肉中均含有一定量的绿原酸、表儿茶素和芦丁.黄皮的4个品种中,3种物质的含量(鲜重)分别为4.0468～38.6690、4.3164～84.6148、52.3924～130.6097、μg/g;杨梅的4个品种含量(鲜重)分别为17.5644～93.5463、113.0908～236.401 5、46.3667～168.3700μg/g.     

杜仲叶·皮内绿原酸含量的测定与比较

在杜仲(Eucommia ulmoidesOliv.)叶和皮的次生代谢物中,绿原酸(chlorogenic acid)是一种重要的生物活性物质和化学试剂。通过对15年树龄的光皮杜仲树皮和叶片中绿原酸含量的分析,发现绿原酸含量在叶和皮中的差异较大,同一棵树在同一时期,叶中绿原酸的含量较皮中高。4~11月绿原酸含量叶中平均为2.656%,皮中平均为0.301%。     

杜仲叶中绿原酸稳定性研究及沉降试验

研究了绿原酸的稳定性并进行了沉降试验,结果表明,绿原酸在温度小于60℃保持4 h以下及酸性、室内闭光的条件下比较稳定,而在碱性、强光照射下不稳定;同时,沉降剂(cjh∶cjj=1∶3)使用不利于杜仲叶中有效成分绿原酸的提取,造成绿原酸1%的损失。     

雪莲中绿原酸、芦丁、木犀草素含量的HPLC法测定

建立测定雪莲(Saussurea involucrata)中绿原酸、芦丁和木犀草素含量的方法,采用HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.8%磷酸水溶液进行梯度洗脱,流速1.0m L/min,检测波长360 nm,柱温30℃。绿原酸、芦丁、木犀草素的线性范围分别为0.081~0.408μg/m L、0.090~0.449μg/m L、0.045~0.224μg/m L;平均加样回收率分别为99.78%、99.89%、100.70%,其中绿原酸、芦丁在天山雪莲中含量最高,木犀草素在苞叶雪莲中含量最高。     

高效液相色谱法同时测定杜仲叶中芦丁和槲皮素含量的研究

建立反相高效液相色谱法同时测定了杜仲叶中2种黄酮类成分——芦丁和槲皮素的含量。色谱柱为Nova-Pak C18(3.9 mm×300 mm,4μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸溶液(505∶0),流速0.6 ml/min,检测波长为356 nm。芦丁和槲皮素的线性范围分别为0.246～4.92μg(r=0.999 93)和0.0846～1.692μg(r=0.999 89),平均回收率(n=5)分别99.8%和102.1%。方法准确、快速、重现性好,适用于同时测定杜仲叶中黄酮类成分的含量。     

干旱胁迫对杜仲截干苗生长和光合特性的影响

树木对干旱胁迫的响应方式和机制是树种生态适应性对策的重要特征,对掌握树种生态习性采取合理的栽培技术措施具有重要意义。为阐明土壤干旱对杜仲苗期生长和光合特性的影响,以3年生杜仲截干苗为研究对象,采用盆栽称重法控制土壤含水量,研究充分供水、中度干旱和重度干旱3种不同土壤供水条件对杜仲枝条和根系生长、叶片光合特性的影响。结果表明:1）随着干旱程度的增加杜仲新枝和新根的生物量显著降低,新枝生长量与对照相比减少了30%和50%,新根生长量减少了14.1%和22.6%。2）干旱胁迫对叶片气孔密度和叶脉密度影响显著,气孔密度与对照相比分别增加19.4%和38.2%,叶脉密度增加8.5%和16%。3）叶片的光合能力随着胁迫程度的增加而降低,净光合速率下降了17.9%和33.1%,蒸腾速率下降了24.8%和45.7%,最大净光合速率下降了24.4%和43.1%。4）非光化学淬灭系数增加了77.8%和142%。因此,干旱胁迫抑制了杜仲的生长,新枝和新根生长量显著降低,使其适应干旱环境的自我调节能力显著增强;同时叶通过降低气孔传导性减少蒸腾耗水,增加光能热耗散避免光系统受到损伤,以适应干旱缺水的环境。     

未来气候变化下贵州杜仲气候适宜性区划研究

为实现气候变化下杜仲的科学种植布局,基于CMIP6发布的2021-2040年的4种气候情景,利用最大熵模型研究了未来气候变化情景下贵州省杜仲种植的气候适宜性区划。结果表明,高气候适宜区主要分布在黔中、黔西南地区,低适宜和不适宜区主要分布于西北高海拔区和北部、东南部高温地区。4种未来气候情景下的杜仲生长气候适宜度体现出不同的空间分布。低排放情景下与现状接近,高排放表现为适宜度的降低和不适宜区的扩大。不适宜区的扩大主要分布于贵州省西北、北部和东南地区。综合4种气候情景绘制了杜仲气候适宜性区划图,高气候适宜区面积占全省面积的10.62%;高气候适宜区和中气候适宜区面积占全省面积的42.85%,开发潜力较大。研究同时统计了各县区杜仲适宜性种植潜力,分析了贵州杜仲适宜生长的气候条件。温度类变量对杜仲适宜度影响较大,贵州杜仲生长最适宜气候条件为年均温度在15~17.5 ℃、最暖季平均温度在23~26 ℃、最湿季节平均温在22.4~24.7 ℃,最热月极高温度在27.5~32 ℃、年均降水量在1 000 mm以上。海拔亦是影响杜仲适宜性区划的重要因素,贵州杜仲更适合海拔在700~1 400 m的区域生长。研究结果可作为未来杜仲种植布局的参考,以实现优质杜仲资源的高品质和高产。     

RP-HPLC法测定杜仲叶中京尼平苷酸与绿原酸的累积含量

为确定提取杜仲叶中京尼平苷酸和绿原酸有效成分的最佳采收期,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定杜仲叶中京尼平苷酸和绿原酸的累积含量.结果表明,在色谱柱,SymmetryShield RP18 (250 mm×6 mm,5μm);流动相,甲醇-水-冰醋酸(体积比29∶70∶1);检测波长,238 nm;流速,1.0 mL/min;柱温,30℃的条件下,京尼平苷酸在0.412～2.472 μg(r=0.999 6)、绿原酸在1.416～8.496μg(r=0.999 5)线性关系良好,回收率分别为98.58％和99.08％,RSD分别为1.52％和0.96％.结论:采用的方法准确、快速、重现性好,通过对5～11月份杜仲叶中京尼平苷酸与绿原酸含量的测定,并对其进行积累动态分析,确定了同时提取杜仲叶中该2种成分的最佳采收期为7月.     

杜仲饮料总黄酮检测方法研究

对含糖型和无糖型杜仲饮料中总黄酮含量的检验方法进行了比较研究。结果表明,采用《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中保健食品中总黄酮的测定方法检测杜仲饮料中的总黄酮,存在重复性提取、操作繁琐和浪费时间等缺点;进行样品水浴上挥干的前处理,对含糖型杜仲饮料中总黄酮含量的检测误差大、重现性差,检测值偏小。故不宜作为杜仲饮料总黄酮的检验方法:对检测方法进行了优化。优化后的方法精密度、重复性和加标回收率均较高,符合分析要求。优化后的杜仲饮料总黄酮的检测方法为:吸取供试样品1.0 mL于蒸发皿中,加1 g聚酰胺粉吸附,于水浴上挥去溶剂,然后转入层析柱。先用20 mL甲苯洗脱,甲苯液弃去,然后用甲醇洗脱黄酮,定容至25 mL。于波长360 nm测定吸光度,按标准曲线计算样品中总黄酮含量。用该方法检测的含糖型杜仲饮料的总黄酮含量为63.943 3 mg·100 g^-1,无糖型杜仲饮料的总黄酮含量为60.322 1 mg·100 g^-1。本方法可为其他液体饮料的总黄酮含量检测提供借鉴。     

杜仲叶多糖研究

从杜仲叶提取的多糖,用分光光度法经苯酚－硫酸显色,在波长４８０ｎｍ处测定的含量为１１．４２％;红外光谱证实多糖糖苷键为β－构型,不含羟基;紫外光谱显示不含核酸、多肽和蛋白质。     

不同月份杜仲叶中绿原酸含量的研究

[目的]测定与比较不同月份杜仲叶中绿原酸的含量。[方法]用浓度30%甲醇回流40 min,采用反相液相色谱法测定杜仲叶中绿原酸含量。色谱柱为Kromasil C18柱,流动相为甲醇-0.02%磷酸溶液(体积比22∶78),波长327 nm,流速1.0 ml/min。绿原酸在9.78~238.00μg/L时呈良好线性关系,r为0.999 8,回收率为97.9%。[结果]通过对10年树龄的光皮杜仲树叶4~12月绿原酸含量的分析,叶中含量平均为2.55%,6月达到最高。[结论]该法快速、简单、准确。     

从杜仲叶中提取绿原酸纯品的研究

用化学萃取、无机盐沉淀等方法首次从杜仲叶中提取、分离出绿原酸纯品,其纸色谱和紫外光谱特征与文献相符;讨论了绿原酸的药用价值及其开发应用前景