不同品种母猪和不同哺乳期乳汁的甘油三酯指纹图谱

母猪乳脂不仅为仔猪提供能量，而且还提供必需的营养物质。因此，饲养配方需与脂肪组成相一致，特别是甘油三酯（TAGs）及其异构体。本文系统研究了5个典型品种（长白猪×大白猪、长白猪、大白猪、杜洛克猪、皮特兰猪）和两个泌乳阶段（初乳和乳汁）母猪乳脂的TAGs图谱。本研究采用超高效液相色谱和四极杆飞行时间质谱联用方法，共鉴定了45种主要TAG。1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸甘油酯（O-P-L）是含量最丰富的TAG，其在初乳和乳汁中含量分别为13.92%和12.03%，在各品种初乳中并无显著性差异。母猪乳中TAG的组成主要受泌乳期的影响，而非母猪品种影响。此外，母猪乳脂的TAG组成与人类乳脂相似，但与商业仔猪配方奶粉有显著性差异。因此，本研究结果将有助于优化仔猪奶粉配方，以改善仔猪生长和健康，并潜在地为人类婴儿未来新的营养来源食品的使用提供基础。     

液相色谱-串联质谱法检测乳及乳制品中双氰胺的研究进展

2013年1月,新西兰牛乳及乳制品中双氰胺的检出,引起了全世界广泛的关注.因此,乳制品中双氰胺的检测方法成为了关注的热点问题.本文主要综述了乳及乳制品中双氰胺的高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)、超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)及超快速液相色谱-串联质谱(ultra fast liquid chromatography tandem mass spectrometry,UFLC-MS/MS)的检测方法,包括样品的提取和净化、色谱柱的选择、液相条件的优化、质谱检测方式以及基质效应.     

过滤器辅助样品前处理法测定乳脂肪球膜蛋白质的研究

牛乳是世界上消费最广泛的乳类,并为消费者提供必需的营养物质。牛乳包括蛋白质,脂肪,糖类,维生素和矿物质。蛋白质是牛乳的重要组成部分,包括酪蛋白、乳清蛋白及乳脂肪球膜蛋白质。牛乳乳脂肪球被乳脂肪球膜覆盖,乳脂肪球膜是一个含有3层膜的膜结构,其上附着或者包含蛋白质。近些年来,对于乳中蛋白质的鉴定成为新的研究热点。随着蛋白质组学技术的发展,鉴定出的蛋白质的种类和数量都在增加。但是由于乳脂肪球膜的特殊性质,在牛乳乳脂肪球膜蛋白质的鉴定中,缺乏方便快捷及效果好的方法。作者运用过滤器辅助样品前处理法（FASP）结合纳升液相质谱（NanoLC-MS/MS）测定牛乳乳脂肪球膜蛋白质的种类和数量,共鉴别出169种蛋白质,是目前鉴别数量最大的一种方法。此方法的建立为今后乳脂肪球膜蛋白质研究领域提供一种方便快捷准确的试验工具。     

超高效液相色谱技术在食品安全检测中的应用研究进展

超高效液相色谱(ultra high performance liquid chromatography,UPLC)是一种具有稳定性、易用性、可变灵敏度和选择性等特点,并且在许多方面优于高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)的技术,它显示出更好的色谱分离度,分析更灵敏、分析时间更短,能够减少溶剂消耗。本文对UPLC在乳制品添加剂、食品添加剂、污染物、真菌毒素和化学非法添加物等的快速检测方面的应用进行综述。     

高效液相色谱-质谱法检测乳及乳制品中青霉素类残留及其代谢产物的研究进展

综述了近年来高效液相色谱-串联质谱、超高效液相色谱-串联质谱法、超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱法、基质辅助激光解吸电离-傅里叶变换离子回旋共振质谱,在乳及乳制品中青霉素类残留及其主要酶解代谢产物、体内代谢产物等方面检测中的应用.从样品的提取、净化、色谱分离方式和质谱检测方式四方面进行了分析.     

高效液相色谱仪使用过程中常见问题及其解决方法

高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）技术是近30年发展起来的一种具有高灵敏度，高选择性的高效快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定又能用于大量的制备丹离手段灵活多样，其应用范围巳超过其它各种分离方法，尤其在生化医药样品的分析分离食品卫生安全检验等方面更能充分发挥它的特长为推动这些领域的进步和发展作出了巨大贡献。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定液态乳中的壬基酚

利用超高效液相色谱-串联质谱（ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLCMS/MS）技术建立液态乳中壬基酚（nonylphenol,NP）的检测方法。使用乙腈作为提取溶剂,加饱和氯化钠溶液使乙腈和水分层,采用ProElut PAEs Glass玻璃固相萃取小柱净化,Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）分离,以0.1%氨水-甲醇流动相体系进行梯度洗     

牛奶中四环素类药物残留检测技术研究进展

四环素类药物(tetracyclines, TCs)是一种广谱抗生素,常用于治疗奶牛疾病,但使用不当易导致药物残留,影响牛奶品质与食用安全。目前,快捷、高效、一次可检测多种药物是兽药残留分析技术的发展方向。笔者综述了牛奶TCs残留分析技术中常见的样品前处理、纯化和药物测定方法,包括液-液萃取(liquid-liquid extraction, LLE)和液-液微萃取(liquid-liquid micro extraction, LLME)等前处理方法,液-液分配(liquid-liquid partition, LLP)、固相萃取(solid-phase extraction, SPE)、QuEChERS等纯化方法,以及薄层色谱(thin-layer chromatography, TLC)法、化学发光(chemiluminescence, CL)法、毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)法、高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)法、液相色谱串联质谱(liquid chromatogr...     

超高效液相色谱—串联质谱法检测鸡血液样品中喹诺酮类药物残留

旨在建立鸡血液样品中多种喹诺酮类药物残留的超高效液相色谱—串联质谱方法。样品经乙腈提取,经Waters Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子（ESI⁺）模式电离,MRM扫描模式检测。经方法学验证,该方法的线性关系、回收率、精密度均符合要求。应用超高效液相色谱—串联质谱法建立了鸡血液样品中多种喹诺酮类药物同时检测的方法,实现了动物血液样品中12种喹诺酮类药物同时定性、定量分析。     

三聚氰胺检测方法的研究进展

全面分析和比较了目前三聚氰胺的检测方法,主要包括色谱检测法（高效液相色谱法、液相色谱—质谱/质谱法、气相色谱—质谱联用法和超高效液相色谱—质谱联用法）、离子色谱法、光谱检测法（拉曼光谱法、红外光谱法、近红外线吸收检测法和核磁共振法）、容量分析法（苦味酸法、升华法、电位滴定法、毛细管电泳检测法和试剂盒检测法）及其他检测方法（比色法、纳米粒子颜色法、化学发光法和浊度法）。     

奶牛乳脂合成及其关键基因的调控作用

牛奶是提高身体抵抗力、抵抗疾病的最佳营养品.我国奶牛养殖业蓬勃发展的同时,牛奶品质的提高已成为奶业发展的重大课题与挑战.乳脂,作为牛奶主要营养成分之一,不仅为人们提供高质量的天然脂肪,还成为衡量奶牛产奶性能的重要指标,消费者所追求的优质牛奶(营养品)就是乳脂≥3.2％的牛奶.大量的研究报道证明,除了饲养管理与营养因素外...     

奶及奶制品中兽药残留高通量检测方法研究进展

在生产中兽药的滥用可能导致牛奶中的兽药残留并对消费者健康造成风险。由于兽药种类较多,单一检测效率较低,而高通量检测技术可以一次性检测多种兽药残留,省时省力,因此成为当前研究的热点。在样品前处理方面,分散固相萃取技术（如QuEChERS方法）由于其简单、快速、成本低等特点,广泛应用于样品净化过程;另一方面,超高效液相色谱串联质谱由于其分离快、灵敏度与准确度高等特点,展示出比高效液相色谱法更好的分析能力和应用前景。随着新技术的应用和新仪器的使用,兽药残留检测在前处理效率、仪器灵敏度和高通量检测方面发展迅速。作者结合近些年发表的文献,综述了奶及奶制品中兽药残留前处理技术（液液萃取法、固相萃取法、QuEChERS和盐析支持液液萃取）和高通量检测技术（高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用、超高效液相色谱串联质谱和液相色谱-飞行时间质谱法）,为今后相关检测研究提供参考。     

Advances in High-throughput Detection of Veterinary Drug Residues in Milk and Dairy Products

The abuse of veterinary drugs in production may lead to veterinary drug residues in milk and pose a risk to consumer health.As the kinds of veterinary drugs are too many,the detection method for single target presents low efficiency.Whereas the high-throughput detection technology can detect various veterinary drug residues simultaneously,with time and labor saving,and become a research hot spot.In the aspect of sample pretreatment,dispersed solid phase extraction techniques,such as QuEChERS method,are widely used in sample purification due to its features of simplicity,rapidity and low cost.On the other hand,because of its characteristics of fast separation,high sensitivity and accuracy,ultra-high performance liquid chromatography (UPLC) tandem mass spectrometry (MS) has shown better analytical performance and application prospect than high performance liquid chromatography (HPLC).With the application of new technologies and instruments,veterinary drug residue detection has developed rapidly in terms of pretreatment efficiency,instrument sensitivity and high-throughput detection.In this paper,based on recent literatures and publications,the pretreatment techniques and high-throughput detection technology of veterinary drug residues in milk and dairy products were reviewed,to provide a reference for future research.The pretreatment techniques introduced liquid-liquid extraction (LLE),solid phase extraction (SPE),QuEChERS and salting out support liquid extraction,while the high-throughput detection technology included high-performance liquid chromatography (HPLC),liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS),ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (UHPLC-MS) and liquid chromatography-time of flight mass spectrometry (LC-TOF-MS).     

禽蛋和禽肉中兽药残留检测技术研究进展

随着我国家禽产业的规模不断扩大,兽药残留问题也更加严峻。兽药残留对人体与环境危害重大。现对目前禽蛋和禽肉中常见的兽药残留种类及最大残留限量进行综述,探讨了(超)高效液相色谱法、(超)高效液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法和免疫学检测法、分子印迹技术、生物芯片技术、生物传感器检测法在禽蛋和禽肉中的应用价值,以期为兽药残留检测和监管提供依据。     

牛奶中不同酪蛋白遗传变异体及其分型鉴定研究

牛奶中存在不同种类的蛋白质,且不同基因型遗传变异体牛奶蛋白质的构型和功效存在差异。酪蛋白分型鉴定方法有基因鉴定、毛细管电泳分离鉴定、高效液相色谱分离鉴定等。本文对比介绍了不同构型κ-酪蛋白和β-酪蛋白的分型鉴定方法,重点验证了高效液相色分离谱鉴定方法的精密度、回收率,同时将该方法应用于生乳和乳制品酪蛋白分型检测鉴定,区分不同牧场牛群的遗传变异体类型和比例。通过该方法可指导牧场快速分群饲养奶牛,生产不同酪蛋白类型的生乳,并加工不同类型的高品质乳制品。     

动物源性食品中磺胺类药物残留检测方法进展

磺胺类药物广泛应用于兽医临床治疗疾病和作为饲料添加剂促进动物的生长。磺胺类药物残留对人体存在潜在的威胁,目前常用的磺胺类药物残留检测方法有很多,包括各种微生物法、免疫法以及理化分析法。本文对这些方法加以综述。     

The proteomic advantage: label-free quantification of proteins expressed in bovine milk during experimentally induced coliform mastitis

Coliform mastitis remains a primary focus of dairy cattle disease research due in part to the lack of efficacious treatment options for the deleterious side effects of exposure to LPS, including profound intra-mammary inflammation. To facilitate new veterinary drug approvals, reliable biomarkers are needed to evaluate the efficacy of adjunctive therapies for the treatment of inflammation associated with coliform mastitis. Most attempts to characterize the host response to LPS, however, have been accomplished using ELISAs. Because a relatively limited number of bovine-specific antibodies are commercially available, reliance on antibodies can be very limiting for biomarker discovery. Conversely, proteomic approaches boast the capability to analyze an unlimited number of protein targets in a single experiment, independent of antibody availability. Liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (LC-MS/MS), a widely used proteomic strategy for the identification of proteins in complex mixtures, has gained popularity as a means to characterize proteins in various bovine milk fractions, both under normal physiological conditions as well as during clinical mastitis. The biological complexity of bovine milk has, however, precluded the complete annotation of the bovine milk proteome. Conventional approaches to reducing sample complexity, including fractionation and the removal of high abundance proteins, has improved proteome coverage, but the dynamic range of proteins present, and abundance of a relatively small number of proteins, continues to hinder comparative proteomic analyses of bovine milk. Nonetheless, advances in both liquid chromatography and mass spectrometry instrumentation, including nano-flow liquid chromatography (nano-LC), nano-spray ionization, and faster scanning speeds and ionization efficiency of mass spectrometers, have improved analyses of complex samples. In the current paper, we review the proteomic approaches used to conduct comparative analyses of milk from healthy cows and cows with clinical mastitis, as well as proteins related to the host response that have been identified in mastitic milk. Additionally, we present data that suggests the potential utility of LC-MS/MS label-free quantification as an alternative to costly labeling strategies for the relative quantification of individual proteins in complex mixtures. Temporal expression patterns generated using spectral counts, an LC-MS/MS label-free quantification strategy, corresponded well with ELISA data for acute phase proteins with commercially available antibodies. Combined, the capability to identify low abundance proteins, and the potential to generate temporal expression profiles, indicate the advantages of using proteomics as a screening tool in biomarker discovery analyses to assess biologically relevant proteins modulated during disease, including previously uncharacterized targets.     

乳制品中糠氨酸和乳铁蛋白常用检测方法综述

为了推动奶业振兴,2016年国家奶业科技创新联盟发起实施了推动奶业可持续发展的专项研究项目——优质乳工程,它涵盖了创建优质乳标识制度、推动奶牛养殖技术升级,全面实施乳制品加工工艺标准化监管3个方面。其中优质乳标识制度提出了以活性酶类、活性蛋白和糠氨酸为核心的优质乳制品品质的评价方法。目前,在糠氨酸和乳铁蛋白检测中常用的检测方法有高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法、毛细管电泳质谱联用法等。高效液相色谱法是最常用的检测方法,但前处理时间长且过程复杂,对样品纯度要求较高;液相色谱质谱联用法灵敏度高,但设备昂贵,对操作人员要求较高;毛细管电泳质谱法对生物大分子具有较好分离检测效果,但是毛细管电泳和质谱接口还存在一定缺陷,维护成本较高,检测重复性差。本文阐述了优质乳中糠氨酸和乳铁蛋白的检测方法,比较了方法的优缺点,旨在为进一步开发优质乳中糠氨酸和乳铁蛋白检测新方法提供参考。     

人初乳与牛初乳中乳脂肪球膜蛋白质组成的对比研究

通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)将人初乳与牛初乳中乳脂肪球膜蛋白进行分离并结合液-质联用技术鉴定,在人初乳乳脂肪球膜蛋白中鉴定出l 076种蛋白质,牛初乳乳脂肪球膜蛋白中鉴定出682种蛋白质,其中人初乳中有757种特异性表达蛋白质,牛初乳中有363种特异性表达蛋白质,两者有319种相同表达蛋白质.通过基因本体(gene ontolpgy,GO)功能注释分析发现,人初乳乳脂肪球膜蛋白在生物过程中发挥的作用高于牛初乳,尤其表现在细胞组成组织功能上;在分子功能上,人初乳乳脂肪球膜蛋白主要体现在结合作用方面:在细胞组成上,与牛初乳乳脂肪球膜蛋白相比人初乳乳脂肪球膜参与的细胞组成均较多,其中在细胞胞内区的组成上参与最多.通过京都基因与基因组百科全书系统(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)代谢通路分析可知,人初乳乳脂肪球膜蛋白中有15种蛋白参与了与消化吸收相关的KEGG通路-酶酵解.