苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参总碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参总碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h,并采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为每毫升1．0g生药时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9-11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、合理、可行。     

苦参碱与氧化苦参碱的常压与减压提取工艺对比研究

以水作为溶剂,在常压与减压下提取苦参碱与氧化苦参碱,对比其提取效果.以乙腈-无水乙醇-3％磷酸(体积比80:10:10)作为流动相,检测波长220 nm的条件下,采用高效液相色谱法,测定提取液中苦参碱与氧化苦参碱的含量.结果显示,常压法最佳提取条件为水料比8:1,提取次数3次,每次提取时间1h.在该工艺条件下,测得苦参...     

加味平胃口服液提取工艺研究

【目的】 确定加味平胃口服液的提取工艺。【方法】 采用L₉（3⁴）正交试验法对提取工艺进行研究。对含有挥发油的药材进行挥发油提取,药渣再混合其余药材进行水煎煮提取。在挥发油提取工艺中首先进行饮片粒度考察,选择合适的饮片大小,在此基础上选定溶剂倍量（A）、浸泡时间（B）和煎煮时间（C）3个因素,每个因素各取3个水平,进行正交试验;以挥发油的提取量为评价指标,对组方中苍术、厚朴、陈皮、木香和枳壳的挥发油提取工艺进行探索研究,并进行3次工艺验证。在水煎煮提取工艺中选定溶剂倍量（A）、煎煮时间（B）和提取次数（C）3个因素,每个因素各取3个水平,进行正交试验;以柚皮苷含量和苦参总碱含量（苦参碱+氧化苦参碱总含量）作为评价指标,对水煎煮提取工艺进行探索研究,并进行了3次工艺验证。【结果】 饮片粒度筛选结果显示,1~2 cm的饮片更合理。影响挥发油提取因素大小为煎煮时间（C）>浸泡时间（B）>溶剂倍量（A）,挥发油提取工艺为8倍水,煎煮10 h;影响水煎煮提取因素大小为提取次数（C）>煎煮时间（B）>溶剂倍量（A）,水煎煮提取工艺为8倍水,煎煮1.5 h,提取3次。【结论】 本研究通过试验验证得出了加味平胃口服液提取的具体方法、流程等,该工艺提取效率高、制备过程稳定可靠,可达到量产的工艺标准,具有重要的实用价值。     

辣椒素提取工艺的研究

以辣椒为原料,采用醇提水沉法提取了绿原酸,考察了乙醇浓度、料液比、浸提时间和提取温度对辣椒素提取率的影响。采用正交试验对工艺条件进行了优化研究,结果表明最佳工艺条件为：乙醇浓度为60%,料液比为1：15,提取时间为60min,提取温度为70℃。在最佳工艺条件下,提取率为0.745%。     

蜂胶黄酮提取纯化的工艺研究

为确定蜂胶黄酮提取纯化的最佳工艺条件.以蜂胶黄酮的得率和绝对提取率为指标,采用正交法优化乙醇提取蜂胶黄酮的工艺条件,考察乙醇浓度、液固比、水浴温度和水浴时间对蜂胶黄酮得率和绝对提取率的影响,再通过大孔吸附树脂对蜂胶黄酮进行纯化.结果表明,最佳提取纯化工艺条件为:乙醇浓度为60%,液固比为18ml/g,水浴温度为55℃,水浴时间为5h,上述工艺条件下,黄酮纯度为72.2%.最优树脂为D101,吸附速度为1.0ml/min,洗脱剂先采用40%乙醇2BV体积洗脱洗去杂质,再用80%乙醇5BV体积洗脱获得黄酮成分,此条件下层析得到的蜂胶黄酮纯度90.2%.     

金丝桃素的提取纯化工艺研究

用乙醇从贯叶连翘中提取金丝桃素并对其进行纯化,考察了金丝桃素的工艺流程.用乙醚作为除杂剂,用乙醇热浸贯叶连翘,后浓缩浸提液为浸膏;用热水溶解浸膏,乙酸乙酯萃取,浓缩萃取液为浸膏(粗提物).然后再用乙醇溶解,利用树脂柱层析分离纯化金丝桃素,减压浓缩洗脫液,干燥,即得金丝桃素产品.经HPLC测定,结果表明:该产品中金丝桃素的含量高达1.2% ;该工艺不但有效改善了金丝桃素产品易吸湿、易发粘的缺点,而且具有操作简单,经济易行的特点.     

双孢菇多酚的提取工艺研究

本文以双孢菇为原料,采用单因素结合正交试验设计方法,研究乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对多酚提取率的影响。结果表明:双孢菇中多酚的最佳提取工艺条件为乙醇浓度80%,料液比1:40,提取时间3 h,提取温度60°C,相应的最大多酚提取率为13.49 mg/g。本研究为双孢菇中多酚类物质的综合利用提供了理论基础。     

白三叶叶蛋白提取及纯化工艺

以白三叶（Trifolium repens）为材料探讨了叶蛋白的提取工艺和纯化方法。对白三叶叶蛋白提取中加热时间、温度、pH值、料液比、酸的种类等单因素以及纯化试剂甲醇、乙醇、丙酮、四氯化碳、水等进行了研究。结果表明,各单因素最佳参数为加热时间9 min,温度90 ℃,pH值 4.0,料液比1∶2,沉淀的酸为硝酸。对加热时间、加热温度、pH值和料液比进行4因素3水平正交试验,发现影响叶蛋白提取因素为pH值>温度>时间>料液比,最佳提取工艺为加热时间9 min,温度80 ℃,pH值4.0,料液比1∶2。对叶蛋白纯化结果表明,纯化剂对叶蛋白纯度的影响依次为甲醇>乙醇>丙酮>四氯化碳>水,但各种纯化剂之间差异不显著（P>0.05）。     

米糠多糖最佳提取工艺研究

目的:优化出简便、合理,可行的米糠多糖的提取工艺.方法:本试验采用热水浸提法提取米糠多糖,对影响提取米糠多糖的因素如浸提温度、浸提时间、料水比等进行单因素试验,并在此基础上设计正交试验,筛选出提取米糠多糖的最佳工艺条件;并且采用正交试验法对米糠多糖的水提法的影响因素进行了探讨,应用方差分析综合讨论了米糠多糖提取的产率和...     

紫花苜蓿黄酮的提取与纯化工艺初探

为探讨紫花苜蓿(Medicago sativeL.)黄酮的提取与纯化工艺,采用不同乙醇浓度和不同pH进行提取,然后用不同来源和型号的大孔树脂进行纯化,以得出苜蓿黄酮的最佳提取和纯化方法.结果表明:30％乙醇、水浸提(pH为7.5)对紫花苜蓿黄酮的浸出率最高,分别为0.46％和0.49％,pH在9.0时所得提取物黄酮含量最高为1.61％;pH为2.2～2.4时,对紫花苜蓿黄酮有最好的沉淀效果,所得沉淀物中黄酮含量为9.80％;9种型号的大孔树脂中DS-17对乙醇提取物中紫花苜蓿黄酮有较好的分离效果,所得提取物黄酮为5.87％;在大孔树脂对碱溶酸沉提取物中黄酮的分离中,2组试验均以DM130的效果最好,所得分离物黄酮含量最高分别为24.25％和29.35％.     

肠炎沙门菌SEF14菌毛的抽提、纯化及生物学活性检测

试验从肠炎沙门菌国内标准株50336中抽提和纯化SEF14菌毛,并制备SEF14蛋白鼠源高免血清.结果发现,肠炎沙门菌在CFA培养液中,静止培养50 h左右,SEF14菌毛表达量相对较多,在机械高速匀浆后,经进一步的透析纯化,得到较纯的SEF14菌毛蛋白,蛋白大小和相关报道一致,约14 ku左右.Westem-blotting检测发现纯化的重组蛋白rSEFA(体外表达的SEF14菌毛主要亚单位蛋白SEFA)免疫小鼠得到的高免血清能识别标准株肠炎沙门菌SEF14菌毛蛋白以及纯化的重组蛋白rSEFA,说明体外抽提的SEF14菌毛蛋白和体外表达的rSEFA蛋白同样具有较好的免疫原性和反应原性.     

芩黄颗粒提取工艺研究

为了优选芩黄颗粒的最佳提取工艺,处方中麻黄水提工艺以浸膏收率和麻黄碱含量为指标,黄芩、甘草、山豆根、桔梗和板蓝根群药水煎煮工艺以浸膏收率、黄芩苷及甘草酸含量为指标,采用正交试验法对芩黄颗粒进行提取条件的筛选.结果麻黄最佳提取工艺为加8倍量水真空动态(≤70℃)提取6h;黄芩、甘草、山豆根、桔梗和板蓝根群药最佳提取工艺为加10倍量水真空动态(≤70℃)提取4h.优选出的最佳提取工艺合理、稳定,适合工业化大生产.     

天然牛磺酸提取及分离纯化研究

牛磺酸作为营养强化剂已在食品中,尤其是婴幼儿食品、保健品中得到广泛的应用.综述了天然牛磺酸提取及分离纯化方法研究的最新进展,以期为牛磺酸的深入研究提供参考.     

水貂Mustla Vison微量血DNA的提取与纯化

作者通过采取活体水貂少量血液 ( 5 0 μL) ,利用蛋白酶K消化 ,酚、氯仿法抽取DNA ,结果测量获得的数据和曲线表明 :用 5 0～ 5 0 0 μL冻存血可以获得具有一定纯度和数量的DNA ,完全可以满足RAPD分析的PCR反应所需     

猪源大肠杆菌脂多糖的提取、纯化及活性分析

为了从猪源大肠杆菌中获得纯度高、产率高的脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）,并评价其毒力,本试验采集仔猪腹泻粪便作为病料,进行细菌分离鉴定和16S rDNA鉴定,采用热酚水法提取细菌的LPS,通过DNaseⅠ、RNaseA、蛋白酶K和醇沉法对LPS进行纯化,通过苯酚硫酸法、Bradford法和紫外分光光度法测定LPS多糖、蛋白及核酸含量,鲎试剂定量法测定其活性,采用小鼠急性毒性试验方法测定小鼠半数致死量（LD₅₀）。结果显示,分离获得一株具有高致病性的猪源大肠杆菌,纯化的猪源大肠杆菌LPS平均产率为3.74%,其中多糖含量为13.40%,蛋白含量为0.48%,核酸含量为0.06%,主要条带集中在14~160 ku范围内,鲎试剂定量法测定其活性为1.21×10⁷ EU/mg,提取LPS对小鼠的LD₅₀为31.86 mg/kg。该猪场仔猪腹泻是由致病性大肠杆菌引起,获得其毒力因子LPS纯度高、产率高、毒力强,这将为临床防制猪大肠杆菌病及LPS提取纯化提供理论依据。     

Extraction,Purification and Activity Analysis of Lipopolysaccharides from Escherichia coli Isolated from Swine

In order to obtain higher purity and high yield of LPS isolated from Escherichia coli, and evaluate its virulence,excrement of diarrhea piglet was collected as pathological samples, of which, some strains of Escherichia coli were isolated and identified. And furthermore, a strain of Escherichia coli was acquired by 16S rDNA identification. The LPS from this strain of Escherichia coli was isolated with the hot-phenol water method and purified by DNaseⅠ, RNaseA, proteinase K treatment and alcohol precipitation. The polysaccharide, protein and nucleic acid content of purified LPS were detected by phenol-sulfuric acid method, Bradford method and UV points spectrophotometric method. And its bioactivity and acute median lethal dose was determinated by tachypleus amebocyte lysate (TAL) method and acute toxicity experiment method, respectively. The results showed that a strain of highly pathogenic Escherichia coli was successfully isolated. The average yield of purified LPS was 3.74%, the proportion of the polysaccharide was 13.40%, the protein was 0.48%, and the nucleic acid was 0.06%. SDS-PAGE electrophoresis and silver stain showed that the bands were mainly concentrated in the range of 14 to 160 ku. The LAL bioactivity of the prepared LPS was 1.21×10⁷ EU/mg, LD₅₀ of the mouse abdominal cavity was 31.86 mg/kg. The results revealed that the diarrhea piglets in the farm was caused by pathogenic Escherichia coli,purified LPS from this strain of Escherichia coli had the advantages of higher purity, high yield and strong virulence, which would provide theoretical data for clinical prevention and treatment of diarrhea piglets.     

沙冬青种子总黄酮提取纯化与急性毒性及抗氧化活性研究

本研究旨在探讨沙冬青种子总黄酮的提取纯化、急性毒性和抗氧化活性等特性。采用超声辅助提取法提取纯化沙冬青种子总黄酮,用AlCl_3-CH_4O显色法进行沙冬青种子总黄酮含量测定;对纯化后沙冬青种子总黄酮进行急性毒性试验;采用体外Fenton体系产生羟基自由基(·OH)和邻苯三酚自氧化法产生超氧自由基(O^-_2),检测沙冬青种子总黄酮对·OH和O^-_2的清除作用;测定沙冬青种子总黄酮对衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮含量测定方法的精密度(RSD=0.78%)、重复性(RSD=0.52%)、稳定性(RSD=0.65%)、回收率(99.140%)均在误差范围内,提取纯化后沙冬青种子总黄酮含量达86.780%。沙冬青种子总黄酮属于无毒化合物,并对·OH和O^-_2具有良好的清除能力,在总黄酮作用剂量为1 250μg/mL时,对·OH和O^-_2的清除率分别达96.45%和50.39%。与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著提高小鼠血清SOD活力(P<0.01),其中,在150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组,小鼠血清SOD活力高达102.42 U/mL。此外,与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著降低小鼠血清中MDA含量(P<0.01),以150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组降低效果最明显。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮具有良好的自由基清除能力和抗氧化活性,从而有效改善和提高机体免疫力。     

3种兔球虫18S rDNA部分序列测定与系统发育分析

采用单卵囊分离法从河北某兔场分离大型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫及肠艾美耳球虫,接种无球虫兔后获得大量纯种卵囊,CTAB法提取孢子化卵囊基因组DNA。利用艾美耳属球虫18S rDNA保守引物,PCR扩增3种兔球虫18S rDNA片段,产物纯化后测序。将3种球虫18S rDNA测序结果与GenBank中发布的兔球虫18S rDNA序列用DNAStar软件进行比对。使用MEGA4.0软件对兔球虫18S rDNA进行同源性比较,并绘制遗传进化树。结果表明,大型艾美耳球虫扩增出大小为1 521bp的18S rDNA片段;黄艾美耳球虫及肠艾美耳球虫均扩增出大小为1 520bp的18S rDNA片段。序列比对结果显示,3种河北株兔球虫与GenBank中相应的3种兔球虫18S rD-NA(EF694016、EF694011、EF694012)相似性分别为99.6%、99.6%和100%。3种河北株兔球虫序列和GenBank中兔球虫18S rDNA序列(EF694007-EF694017)位于一个单系集群。     

鹿茸多肽提取分离纯化及药理作用研究进展

鹿茸多肽具有抗炎、抗氧化、增强免疫并能促进细胞分化、伤口愈合、抑制肿瘤细胞、促进神经系统、周围神经系统组织的再生等药理作用,是鹿茸中最有效的成分之一。文中对鹿茸多肽的提取,分离纯化及药理作用研究进展进行了综述,希望为鹿茸多肽的研究和开发提供参考。     

复方茵陈保肝口服液的制备与提取工艺研究

确定复方茵陈保肝口服液的制备工艺并建立质量标准。采用紫外分光光度法,以滨蒿内酯为对照品,在340 nm处测定按照不同工艺制备的口服液中香豆素含量,以香豆素含量高低作为优化标准。利用薄层色谱法对口服液中茵陈、党参、淫羊藿进行定性鉴别。用高效液相色谱法对口服液成品香豆素含量进行测定。口服液在料液比为1∶20,醇沉体积分数50%,煎煮时间2 h条件时香豆素含量最高。薄层色谱中斑点清晰,阴性对照无干扰。高效液相色谱法中滨蒿内酯在6.8~136μg范围内具有良好的线性关系,平均加样回收率为98.79%,RSD为1.39%。试验优化的制备工艺方法简单可行,建立的质量标准适用于复方茵陈保肝口服液的质量控制。