抗氧化剂在猪精液冷冻保存技术中的应用

利用冷冻精液进行人工授精的研究由来已久,但与鲜精和液态保存的精液相比,猪冷冻精液的受胎率、分娩率和窝仔数均较低,难以实现利用冷冻精液实现大规模商业化育种的目标。目前国外猪冷冻精液商业化应用比例不到人工授精的1％,并且各国的具体情况也不尽相同,而国内尚未有商业化推广的成功范例。即使是利用现有最好的冷冻技术,解冻后的活率也低于50％。     

不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂（SL）冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5% SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异（P<0.05）;添加18%蛋黄和1%～2% SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异（P>0.05）;添加18%蛋黄和1.0%～1.5% SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异（P>0.05）。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1～2%（g／L）。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

精浆对猪精子冷冻效果影响的研究

为优化猪精子冷冻技术,提高解冻后精子的活力和受精能力,本试验分别以含精浆浓度为10%、20%和30%的冷冻保护剂处理精子,以冷冻前、解冻后精子活力和质膜完整性,解冻后精子进行体外受精(IVF)的卵裂率和囊胚率等作为检测指标,同时以含有卵黄的Tris-柠檬酸－葡萄糖(Tris-citric acid-glucose,TCG)冷冻基础液作为对照研究精浆对猪冷冻精子的保护作用。结果显示,在含有10%精浆浓度的稀释液中,冷冻前质膜完整性,解冻后精子活率、质膜完整性、IVF囊胚率相对于对照组均显著提高(P<0.05);当含有10%精浆的冷冻精液解冻后用于人工授精时,与配母猪妊娠率、窝产仔数、窝产活仔数等仍显著低于鲜精授精组(P<0.05)。上述结果表明,含10%精浆的冷冻保护剂能提高精子的冷冻后活力和IVF胚胎发育率,但用于人工授精配种与鲜精相比还有一定差距。     

猪冷冻精液的生产和使用方法

正人工授精在猪的繁殖培育中应用已比较普遍。如何在生猪产业中像养牛生产一样方便快捷地使用冷冻精液,一直困扰着一线的技术和生产人员。在借鉴牛冻精生产与应用经验基础上,利用猪冷冻精液进行人工授精并成功产下仔猪后,众多科研工作者对猪冷冻精液技术进行了一系列深入的研究。目前,英国、美国、加拿大等一些国家的育种公司已经有猪冷冻精液的产品进行出售,但解冻后的精子活率以及配种后的受胎率、产仔数与常温保存猪     

近交五指山小型猪精液冷冻保存技术的研究

用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。     

添加低剂量大豆卵磷脂稀释液低温保存绵羊精液的优化研究

本实验旨在探讨添加低剂量大豆卵磷脂稀释液对绵羊精液低温保存效果。实验一采用6个浓度(0%、0.25%、0.5%、0.75%、1.0%、1.25%)大豆卵磷脂替代TRIS专利稀释液中卵黄低温保存绵羊精液,在第0、1、4、7、10、12、18天检测精子活率、顶体完整率;实验二选用实验一中最优添加组(0.5%组)和TRIS专利稀释液制成粉剂低温保存绵羊精液,在保存第0、1、4、7、10、12天对精子活率和顶体完整率进行测定,并在保存第10天对绵羊进行人工授精。结果表明:实验一中,0%组从第1天精子活率低于其他组(P<0.05),0.25%组精子活率观测值从第10天开始低于0.25%以上浓度组(P<0.05),0.5%、0.75%、1.0%、1.25%组保存第10天精子活率均大于50%,0.5%组保存第18天精子活率高于1.0%、1.25%组(P<0.05);各组顶体完整率缓慢下降,各时间点均无显著性差异;实验二中,0.5%组与TRIS组在各时间点的精子活率、顶体完整率与受胎率均无显著性差异,保存第10天精子活率均高于50%;0.5%组受胎率为65.49%,略低于TRIS组67.65%(P>0.05)。本实验条件下,绵羊精液低温保存稀释液中添加0.5%大豆卵磷脂替代卵黄效果最佳。     

黑猩猩精液冷冻和优选研究

对精液进行有效的冷冻保存和解冻优选是人工授精顺利开展的重要步骤。本研究在黑猩猩上做了尝试,分别用人工按摩采精、电刺激采精、附睾采精进行6次精液采集,所测精子活率为0.65～0.90,密度为1.69×10~（10）～6.64×10~（11）（个/L）。用自配精液冷冻液,采用CL-8800程序降温仪成功对所采集的精液进行冷冻保存。在冷冻后的10～400 d,分别对6次冻精解冻,并用人用精液优选试剂盒对其后3次进行解冻后优选。结果显示,解冻后精液活率为0.35～0.7;优选后精液活率为0.85～0.9,密度为4.5×10~（11）～5.0×10~（11）（个/L）,基本可以满足人工授精的需要。     

我国猪精液冷冻技术研究现状

我国于1974年开始研究猪精液冷冻保存技术,内容主要有:冷冻精液稀释液、平衡时间、冷冻时间、冻后精子活率及输入有效精子数等项目。结果解冻后活率在30～60％之间。1975～1983年共输精21859头母猪,情期受胎率达56.25％(33.30～74.78),窝产仔为8.18头。试验证明我国猪冷冻精液的保存技术有所进展。     

生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻效果的影响

为了研究冷冻稀释液中添加不同浓度的抗氧化剂生物类黄酮和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响,试验分别在冷冻稀释液中添加0,0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL的生物类黄酮和0,2,4,6,8 mg/mL的维生素C以及二者最佳配伍浓度的混合物,分别检测各试验组精液冷冻解冻后的活率、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活率等指标。结果表明:除了添加4,6 mg/mL维生素C顶体完整率与对照组相比差异不显著(P>0.05)外,添加0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL生物类黄酮或2,4,6,8 mg/mL维生素C精子活率、质膜完整率与对照组相比差异均显著(P<0.05),其中添加0.8 mg/mL生物类黄酮和6 mg/mL维生素C效果最好,但随着添加浓度的增加冷冻效果逐渐降低。说明在猪精液冷冻稀释液中联合添加生物类黄酮和维生素C,解冻后精液质量显著高于对照组(P<0.05)。     

冷冻家猫附睾精液效果初探

为了筛选出适宜冷冻家猫精液的稀释液、冷冻保护剂和解冻温度,本试验采用家猫附睾精液,分别用2种不同的稀释液,3种不同的冷冻保护剂进行稀释、冷冻和解冻。结果显示,Ⅱ号稀释液冷冻效果优于Ⅰ号稀释液。用乙二醇作为冷冻保护剂,解冻后家猫精子活率达到52.7%±4.9%,畸形率为37.3%±4.2%,顶体完整率为52.4%±4.1%,各项指标均显著高于甘油组和二甲基亚砜组（P<0.05）;其中甘油组解冻后活率为35.5%±7.6%,顶体完整率为39.8%±4.4%,高于二甲基亚砜组的33.6%±7.3%和39.1%±4.1%,但两者之间差异不显著（P>0.05）。37 ℃水浴解冻后顶体完整率为36.4%±8.7%,显著高于30 ℃水浴解冻后的25.3%±6.7%（P<0.05）,但它们之间的活力,畸形率差异不显著,总体上37 ℃的解冻效果优于30 ℃。因此,乙二醇和稀释液Ⅱ配合使用冷冻家猫附睾精液效果较好,37 ℃为较优解冻温度。     

牛血清白蛋白对犬精液冷冻保存效果的影响

为了研究牛血清白蛋白(BSA)对犬精液冷冻保存效果的影响,试验配制含有不同浓度(0、3%、5%、7%)BSA的精液冷冻稀释液用于保存犬精液,测定冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量及线粒体膜电位(MMP)等指标。结果表明：3%和5%BSA组冷冻-解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和T-AOC均显著高于对照组(P<0.05);3%BSA组MDA含量显著低于其他各组(P<0.05),线粒体膜电位值显著高于其他各组(P<0.05);除精子活力外,7%BSA组和对照组之间各项指标均差异不显著(P>0.05)。说明在犬精液冷冻稀释液中添加BSA能有效改善冷冻-解冻后精液品质,对提高精子抗氧化能力及代谢能力都有显著效果,BSA的最适添加浓度为3%。     

波尔山羊冷冻精液稀释液及稀释倍数研究

通过研究波尔山羊冷冻精液稀释液和稀释倍数,以筛选最佳稀释液配方、确定适宜的稀释倍数、提高波尔山羊精液冷冻效果。结果表明,4号稀释液解冻后精子活率高于1号、2号、3号稀释液解冻后精子的活率,差异极显著( P<0 .0 1 ) ;4号稀释液解冻后精子存活时间为61 .2 6h,长于1号、2号稀释液精子存活时间( P<0 .0 1 ) ,短于3号稀释液精子存活时间,但差异不显著( P>0 .0 5 ) ,说明4号稀释液冷冻效果最好。精液稀释3倍、4倍、5倍解冻后精子活率分别为0 .5 0 2、0 .5 0 1、0 .495 ( P>0 .0 5 ) ,均高于稀释6倍、7倍、8倍的精子活率( P<0 .0 1 ) ,表明波尔山羊冷冻精液稀释倍数以3～5倍为宜。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

品种、月龄、季节因素对猪精液冷冻效果的影响

本实验旨在探究品种、月龄、季节等因素对猪精液冷冻效果的影响。采集3个品种（杜洛克、长白、大白）4个月龄阶段（7～12、12～24、24～36月龄、36月龄后）、4个季节（春、夏、秋、冬）的公猪精液,并通过质检、冷冻、解冻等冷冻精液处理,比较解冻前、后精子活力指标。结果表明：(1)解冻后精子活力为长白>大白>杜洛克（68.62%vs. 68.06%vs. 61.66%,P<0.01）,冷冻造成上述品种公猪的精子活力值降幅分别为7.15%、7.94%、8.13%(P<0.01)。(2)长白猪在12～24月龄时精子冷冻效果最佳,解冻后精子活力为70.61%;大白猪在24～36月龄时精子冷冻效果最佳,解冻后精子活力为71.94%;在4个月龄阶段,长白猪解冻后精子活力值相较于冷冻前降幅分别为6%、2.49%、0.57%、14.51%,大白猪降幅分别为7.11%、2.42%、0.43%、-1.58%。(3)不同季节,长白、大白和杜洛克解冻后活力在冬季最佳,夏季最差;长白、大白和杜洛克解冻后精子活力在夏季的降幅分别为9.41%、12.34%、21.9%,冬季降幅分别为3.64...     

抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

目前,猪的人工授精以鲜精和常温保存的液态精液为主,冷冻精液在人工授精中所占的比例不足1%,由于解冻后精子复苏率较低、异常精子多、受胎率低等原因,在生产上猪的精液冷冻与牛的精液冷冻相比尚未得到普遍推广、应用。精子的冷冻处理在畜牧业上是一个重要且具有特殊优势的操作过程。提高精子冷冻技术水平,需要对配子的生理学知识和精子收集、处理过程的生化改变有更深入的了解,这些     

不同厂家猪冷冻精液应用效果的比较

为验证国内猪精液冷冻技术的成熟度,本实验购买国内北京某公司(BJ)和国外某公司(GW)大白猪和长白猪的冷冻精液,进行人工授精及效果对比,按照厂家操作说明进行精液品质检查和配种操作,每种来源冻精各配种70头母猪(每品种各配种35头)。结果表明:2种来源冻精组情期受胎率和配种分娩率差异不显著(P0.05);但BJ组的精子活率、窝产仔数和窝均健仔数均显著优于GW组(P0.05),其中窝产仔数和窝均健仔数比GW组分别提高了15%和18%。以上表明国内猪冷冻精液技术进步显著,优势明显。     

金华猪精液冷冻保存技术研究

本试验用0.5 mL细管作为冷冻载体对金华猪精液进行冷冻保存研究,比较3种冷冻稀释液及不同冷冻方法、解冻程序对金华猪精液冷冻的效果,以解冻后的精子活力、畸形率和质膜完整率为判定指标。结果表明:Ⅱ、Ⅲ号冷冻稀释液处理组解冻后精子的活力、畸形率和质膜完整性都明显地高于Ⅰ号冷冻稀释液(P0.05);Ⅱ号冷冻稀释液和Ⅲ号冷冻稀释液处理组之间没有明显差异(P0.05)。采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液冷冻保存精子,并在60℃,8 s条件下水浴解冻精子后,精子活力和质膜完整率最高分别为42.3%和50.3%,畸形率最低为17.7%。因此,采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液,在60℃,8 s条件下水浴解冻方法较为适合0.5 mL细管金华猪精液冷冻保存及解冻。     

绵羊精子的顶体反应与精液品质相关的研究

<正> 在人工授精的工作中,冷冻精液解冻后精子的活力在0.3以上,就可输精或长期保存,但同一品种不同个体解冻后精子的活力虽相差不大,可情期受胎率有差异,这种差异究竟来自冻精本身还是输精技术,往往在科技人员间看法不一。本文就是为解释这一实践中的疑题而设计进行的。1 材料和方法1.1 精液的采集与冷冻本试验所用的绵羊冷冻精液来自山西省液氮冷冻中心,用假阴道来集精液,活     

不同离心条件对犬精液冷冻保存质量的影响

为评估3种离心条件对犬精液解冻后的影响。将手握法采集的精液分成3等份,分别用3种离心条件离心、稀释冷冻,解冻后保存在37℃水浴中,0-6h测定精子活力、活率、畸形率、顶体完整率。结果表明,3种离心处理组的精子0h活力、活率、畸形率、顶体完整率差异不显著（P〉0.05）,但随保存时间的增加明显下降（P〈0.05）,3组之间变化差异不显著（P〉0.05）。